第3章第2節(jié)第1課時目的基因的篩選與獲取基因表達載體的構(gòu)建

第2節(jié)基因工程的基本操作程序第1課時目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構(gòu)建題組一目的基因的篩選與獲取1．(2023·陜西西安高二調(diào)研)基因工程操作“四步曲”的正確順序是()①目的基因的篩選與獲?、趯⒛康幕?qū)胧荏w細胞③基因表達載體的構(gòu)建④目的基因的檢測與鑒定A．①②③④ B．④①③②C．①③②④ D．③①②④2．下列關于PCR技術(shù)的敘述，正確的是()A．PCR技術(shù)建立在對擴增的目的基因序列完全已知的基礎上B．該技術(shù)需要解旋酶和耐高溫的DNA聚合酶C．該技術(shù)需要一對特異性的引物，要求一對引物的序列是互補的D．該技術(shù)應用DNA半保留復制原理，也需要模板、原料、能量、酶等條件3．用PCR擴增下面的DNA片段：5′GACCTGTGGAAGC……CATACGGGATTG3′3′CTGGACACCTTCG……GTATGCCCTAAC5′供選擇的引物有：①5′GACCTGTGGAAGC3′②5′CATACGGGATTG3′③5′GTATGCCCTAAC3′④5′CAATCCCGTATG3′共四種，應選擇()A．①②B．②③C．③④D．①④4．(2023·河北邢臺高二月考)用PCR技術(shù)特異性地拷貝“X基因”，經(jīng)四輪循環(huán)后產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子。下列有關敘述錯誤的是()A．第一輪循環(huán)得到2個DNA分子，即①②各一個B．第二輪循環(huán)得到4個DNA分子，即①②③④各一個C．第三輪循環(huán)得到8個DNA分子，其中有2個是等長的，也就是有2個⑤D．第四輪循環(huán)得到16個DNA分子，其中有4個⑤題組二基因表達載體的構(gòu)建5．基因工程的核心是構(gòu)建基因表達載體，下列不屬于載體作用的是()A．載體能防止目的基因被受體細胞限制酶“切割”B．載體能協(xié)助目的基因在受體細胞中復制C．載體含有啟動子和終止子協(xié)助目的基因表達D．載體具有標記基因，便于篩選含目的基因的受體細胞6．下列關于基因表達載體的說法，不正確的是()A．基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟B．基因表達載體包含啟動子、目的基因、終止子、標記基因等C．終止子位于目的基因的下游，能夠終止翻譯過程D．不同的目的基因所需的啟動子不一定相同7．(2023·銀川高二階段考)科學家利用質(zhì)粒(如圖)成功構(gòu)建了蛛絲蛋白基因的重組質(zhì)粒，并在家蠶絲腺細胞中獲得大量蛛絲蛋白。下列有關說法錯誤的是()A．為防止目的基因自身環(huán)化，可以用限制酶XbaⅠ和SacⅠ來切割目的基因B．構(gòu)建基因表達載體時選用蠶絲蛋白基因的啟動子利于基因在家蠶絲腺細胞中表達C．啟動子是DNA聚合酶的識別和結(jié)合部位，可以驅(qū)動遺傳信息的轉(zhuǎn)錄D．基因表達載體中的標記基因可以用來鑒別與選擇含有蛛絲蛋白基因的受體細胞8．(2023·江蘇南通高二期中)如圖表示pBR322質(zhì)粒和人生長激素基因所在片段的結(jié)構(gòu)信息，將二者構(gòu)建的重組質(zhì)粒導入受體菌并進行篩選。下列有關敘述正確的是()注：AmpR為氨芐青霉素抗性基因，TetR為四環(huán)素抗性基因。A．可選擇的限制酶組合是酶E和酶GB．所選用的受體菌不能含有AmpR和TetR基因C．用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基就能篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌D．同時用三種限制酶處理圖中質(zhì)粒，電泳后可得到3個條帶9．RT－PCR是以提取的RNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得與之互補的DNA(cDNA)序列，再以cDNA序列為模板進行目的片段的擴增，具體過程如圖所示。下列有關RT－PCR的敘述，正確的是()A．過程1需要使用耐高溫的DNA聚合酶B．過程2中的引物B可與mRNA互補配對C．游離的脫氧核苷酸只能加到引物的5′端D．RT－PCR可用于對RNA病毒的檢測與鑒定10．研究人員用如圖1中質(zhì)粒和圖2中含目的基因的片段構(gòu)建重組質(zhì)粒(圖中標注了相A．構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程應選用BclⅠ和HindⅢ兩種限制酶B．使用DNA連接酶將酶切后的質(zhì)粒和目的基因片段進行重組C．能在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的一定是含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌D．利用PCR鑒定含目的基因的大腸桿菌時應選用引物甲和引物丙11．(2023·哈爾濱高二期末)下列有關PCR的敘述，錯誤的是()A．PCR的原理是DNA半保留復制，解旋和復制不是同時進行的B．PCR的過程主要包括變性→延伸→復性，溫度逐漸降低C．PCR技術(shù)擴增時，一個DNA分子經(jīng)過n輪復制共需引物2n－1對D．常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物12．聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于擴增特定DNA片段的分子生物學技術(shù)。下列關于PCR引物的敘述，不正確的是()A．為保證模板鏈與引物結(jié)合的效率，兩種引物之間盡量避免存在互補序列B．為了便于將擴增的DNA片段與載體連接，可在引物的3′端加上限制酶識別序列C．在兩種引物上設計加入不同的限制酶識別序列，主要目的是使目的基因定向插入載體并可避免目的基因自身環(huán)化D．復性所需的溫度、時長和延伸所需的溫度、時長均與引物有關13．基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴增目的基因?；卮鹣铝袉栴}：(1)生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是______________。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是_______________。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的______________________________。(2)目前在PCR反應中不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是______________________________________________________________________________________________________。(3)含有限制酶的細胞中通常還具有相應的甲基化酶，這兩種酶對DNA分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以對DNA序列進行修飾，使限制酶不能對這一序列進行識別和切割。含有某種限制酶的細胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破壞細胞自身的DNA，其原因可能有：①___________________________________________________________________________________________________________________________________；②_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)利用PCR擴增目的基因的過程由高溫變性(90℃以上)、低溫復性(50℃左右)、適溫延伸(72℃左右)三個步驟構(gòu)成一個循環(huán)，為使得DNA聚合酶能夠重復利用，選用的酶應在_______處理后仍然具備催化活性。14．(2023·江蘇鎮(zhèn)江高二聯(lián)考)某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖1所示，請回答下列問題：(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁毎麅?nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來源屬于____________。(2)如果將抗鹽基因直接導入煙草細胞，一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能________，也不能______________________________________________。(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應選用______________________兩種酶對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。