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文檔簡介
2025屆江蘇省南京市溧水區(qū)第二高級(jí)中學(xué)、第三高級(jí)中學(xué)等三校聯(lián)考高三生物第一學(xué)期期末監(jiān)測試題注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)、考場號(hào)和座位號(hào)填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時(shí),選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目選項(xiàng)的答案信息點(diǎn)涂黑;如需改動(dòng),用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上;如需改動(dòng),先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.將紫花、長花粉粒(PPLL)與紅花、圓花粉粒(ppll)的香豌豆雜交得到F1。F1自交所得F2的表現(xiàn)型及比例為:紫長(4831)、紫圓(390)、紅長(393)、紅圓(4783)。下列對(duì)F1產(chǎn)生配子過程的分析,不正確的是()A.P與p、L與l可以隨同源染色體的分開而分離B.P與L、p與l可隨同一條染色體傳遞到配子中C.P與l、p與L因非同源染色體自由組合而重組D.P與l、p與L因同源染色體間交叉互換而重組2.某生物基因型為AaBb,各基因位置如圖。關(guān)于細(xì)胞增殖中染色體及遺傳物質(zhì)的變化,下列敘述正確的是()A.有絲分裂后期和減數(shù)第一次分裂后期,移向細(xì)胞兩極的基因均是AaBbB.有絲分裂中期和減數(shù)第二次分裂后期,細(xì)胞中的染色體組數(shù)目相同C.減數(shù)第一次分裂的細(xì)胞有同源染色體,有絲分裂的細(xì)胞沒有同源染色體D.有絲分裂和減數(shù)分裂染色體復(fù)制后,細(xì)胞中DNA和染色體數(shù)目均加倍3.如圖表示雄果蠅體內(nèi)某細(xì)胞分裂過程中,細(xì)胞內(nèi)每條染色體上DNA含量的變化(甲曲線)及與之對(duì)應(yīng)的細(xì)胞中染色體數(shù)目變化(乙曲線)。下列說法錯(cuò)誤的是()A.CD與FG對(duì)應(yīng)的時(shí)間段,細(xì)胞中均含有兩個(gè)染色體組B.D點(diǎn)所對(duì)應(yīng)時(shí)刻之后,單個(gè)細(xì)胞中可能不含Y染色體C.EF過程中,DNA含量的變化是由于同源染色體的分離D.CD段有可能發(fā)生同源染色體上非等位基因之間的重組4.植物葉片衰老時(shí),在葉柄基部先形成離層(圖甲),而后從植物體上脫落。細(xì)胞內(nèi)的乙烯濃度升高可激活控制酶X的基因表達(dá),合成的酶X分泌到細(xì)胞膜外分解細(xì)胞壁,從而形成離層??茖W(xué)研究發(fā)現(xiàn),葉柄離層細(xì)胞兩側(cè)的生長素濃度與葉片脫落的關(guān)系如圖乙所示。下列相關(guān)說法,錯(cuò)誤的是()A.葉柄基部離層的形成與乙烯濃度密切相關(guān)B.酶X最可能是纖維素酶或果膠酶C.近基端生長素濃度大于遠(yuǎn)基端時(shí),葉片加速脫落D.葉面噴施生長素一定不影響其葉片脫落5.下列生理活動(dòng)能在人體細(xì)胞中發(fā)生的是()A.H2O分解產(chǎn)生O2和NADPHB.胰島素促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)橹竞?0種氨基酸C.蔗糖在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中水解成葡萄糖和果糖D.膽固醇經(jīng)紫外線照射轉(zhuǎn)化成維生素D6.下圖是采用CRISPR技術(shù)對(duì)某生物基因進(jìn)行編輯的過程,該過程中用sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的位點(diǎn)進(jìn)行切割,下列敘述正確的是()A.基因定點(diǎn)編輯前需要設(shè)計(jì)與靶基因全部序列完全配對(duì)的sgRNAB.圖中sgRNA1的堿基序列和sgRNA2堿基序列相同或互補(bǔ)C.根據(jù)破壞B基因后生物體的功能變化,可推測B基因的功能D.被編輯后的B基因不能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)基因定點(diǎn)整合可替換特定基因,該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的,將正常PKU基因定點(diǎn)整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上,替換突變基因,可用來研究該病的基因治療過程。定點(diǎn)整合的過程是:從染色體DNA上突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2,根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2,再將兩者分別與基因、連接,中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因,構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換,導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換,如圖所示。(1)構(gòu)建重組載體時(shí),常用的工具酶有________。該實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞以培育出轉(zhuǎn)基因小鼠,除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外,還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞_________。(2)為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞,可將小鼠囊胚中的_________取出,并用_________處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)過程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長,這種現(xiàn)象稱為___________。(3)用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細(xì)胞時(shí),會(huì)出現(xiàn)PKU基因錯(cuò)誤整合。錯(cuò)誤整合時(shí),載體的兩個(gè)中至少會(huì)有一個(gè)與一起整合到染色體DNA上。已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性,、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng),在雙重選擇下存活下來的是__________的胚胎干細(xì)胞,理由是_________。(4)將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠,從個(gè)體生物學(xué)水平檢測,若小鼠__________,說明PKU基因成功表達(dá)。8.(10分)番茄紅素具有一定的藥用價(jià)值,但普通番茄合成的番茄紅素易發(fā)生轉(zhuǎn)化(如圖甲),科學(xué)家設(shè)計(jì)了一種重組DNA(質(zhì)粒三),該DNA能表達(dá)出雙鏈RNA(發(fā)卡),番茄細(xì)胞能識(shí)別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及具有相同序列的單鏈RNA一起降解,從而提高果實(shí)中番茄紅素的含量(如圖乙)。請(qǐng)分析回答下列問題:(1)在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用___________技術(shù),該技術(shù)的原理是________________________。
(2)根據(jù)圖甲推知,轉(zhuǎn)錄出“發(fā)卡”的DNA片段實(shí)際上是兩個(gè)反向連接的________________基因,上述過程通過阻止該基因在細(xì)胞內(nèi)的_______________(填“轉(zhuǎn)錄”或“翻譯”),提高了果實(shí)中番茄紅素的含量。(3)為保證圖中的片段A反向連接,處理已開環(huán)質(zhì)粒所用的兩種限制酶是______________________。(4)去磷酸化是去掉黏性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)。對(duì)已開環(huán)的質(zhì)粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其_____________,該DNA分子仍可以和目的基因連接,形成缺少___________個(gè)磷酸二酯鍵的重組質(zhì)粒,隨后在細(xì)胞中被修復(fù)。(5)可利用___________________法將質(zhì)粒三導(dǎo)入植物細(xì)胞。9.(10分)科研人員利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖1所示,圖2、圖3分別表示了干擾素基因及質(zhì)粒的相關(guān)信息。(1)在圖1治療過程中是否體現(xiàn)細(xì)胞的全能性____(是/否),為什么?________________________。(2)圖1步驟③將基因?qū)隕S細(xì)胞而不是導(dǎo)入到上皮細(xì)胞是因?yàn)镋S細(xì)胞具有__________________。(3)據(jù)圖2、圖3,對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí),可選用的限制酶組合為________________。(4)為了得到實(shí)驗(yàn)所需的大量干擾素基因,研究人員利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。由于DNA復(fù)制時(shí),子鏈只能由5′向3′方向延伸,因此可以從下圖A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取_____________作為引物。若要將1個(gè)干擾素基因復(fù)制4次,則需要在緩沖液中至少加入_______個(gè)引物。(5)將步驟③獲得的ES細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察,選擇發(fā)_____________色熒光的細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)。為檢測干擾素基因是否表達(dá),可以采用_____________方法進(jìn)行檢測。10.(10分)貓的體色黑色和橙色受一對(duì)等位基因(B、b)控制,黑色和橙色同時(shí)表現(xiàn)體色為玳瑁色;其體色還受到另一對(duì)等位基因(A、a)的淡化影響、使黑色變成藍(lán)色,橙色變成奶油色,玳瑁色變成藍(lán)乳玳瑁色,兩對(duì)等位基因分別位于兩對(duì)同源染色體上。某黑貓和多只玳瑁貓雜交,F(xiàn)1的表現(xiàn)型及此例如表所示:黑色橙色玳瑁色藍(lán)色奶油色藍(lán)乳玳瑁色雌性3/1603/161/1601/16雄性3/163/1601/161/160據(jù)表分析,回答下列問題:(1)B、b基因位于__________(“常染色體”或“X染色體”)上;淡化色為___________性性狀,親本貓的基因型為__________。(2)F1中玳瑁貓的基因型為___________、___________。(3)F1中黑色貓和藍(lán)色貓隨機(jī)交配,后代中黑色∶藍(lán)色比例為___________________。(4)為了檢測F1中某只玳瑁貓的基因型,簡要寫出測交實(shí)驗(yàn)過程:___________________。11.(15分)果蠅的紅眼基因(R)、白眼基因(r)、直剛毛基因(S)、焦剛毛基因(s)均位于X染色體上。甲同學(xué)用一只紅眼焦剛毛的雌果蠅與一只紅眼直剛毛的雄果蠅雜交,得到162只子代,其中紅眼果蠅92只,白眼果蠅29只,無眼果蠅41只。回答下列問題:(1)甲同學(xué)認(rèn)為無眼果蠅的出現(xiàn)不可能是基因突變?cè)斐傻?,原因是_______________________。(2)甲同學(xué)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的假設(shè)是“有眼/無眼受到一對(duì)基因的控制,且位于常染色體上”,為了驗(yàn)證這一假設(shè),測交組合是_________________________________________________。(3)若上述假設(shè)成立,無眼基因用D或d表示,則親本雌雄果蠅的基因型分別是_____________、___________,子代出現(xiàn)有眼/無眼、直剛毛/焦剛毛這兩對(duì)性狀的表現(xiàn)型和比例為_________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、C【解析】
由題意知:子一代的基因型為PpLl,F(xiàn)1自交所得F2的表現(xiàn)型及比例為:紫長(4831)、紫圓(390)、紅長(393)、紅圓(4783),即紫∶紅=1∶1,長∶圓=1∶1,且表現(xiàn)為兩多兩少,由此可判定P與L、p與l連鎖?!驹斀狻緼、由于P與p、L與l是等位基因,故可以隨同源染色體的分開而分離,A正確;B、子一代的基因型為PpLl,若滿足自由組合定律則F1自交正常情況下,子代紫∶紅=3∶1,長∶圓=3∶1,但與題意不符,說明存在連鎖情況,根據(jù)比例可知P與L、p與l連鎖,可隨同一條染色體傳遞到配子中,B正確;C、由于P與L、p與l連鎖,位于一對(duì)同源染色體上,C錯(cuò)誤;D、P與L、p與l連鎖,位于一對(duì)同源染色體上,所以F2中的紫圓、紅長屬于重組類型即四分體時(shí)期非同源染色體上的非姐妹染色單體發(fā)生了交叉互換,D正確。故選C?!军c(diǎn)睛】本題解決的關(guān)鍵,利用題目中的信息,明確基因的連鎖關(guān)系,把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系。2、B【解析】
A/a、B/b屬于等位基因,但Ab位于一條同源染色體上,aB位于另一條同源染色體上,連鎖遺傳,不符合基因自由組合定律。【詳解】A、有絲分裂后期移向細(xì)胞兩極的基因是AaBb,但減數(shù)第一次分裂后期由于同源染色體分離,移向細(xì)胞兩極的基因AAbb、aaBB,A錯(cuò)誤;B、有絲分裂中期染色體條數(shù)為2n,含兩個(gè)染色體組,減數(shù)第二次分裂后期由于著絲點(diǎn)分裂,染色體數(shù)暫時(shí)增加為2n,也含兩個(gè)染色體組,B正確;C、減數(shù)第一次分裂的細(xì)胞有同源染色體,有絲分裂過程中,由于未發(fā)生同源染色體分離,細(xì)胞中始終有同源染色體,C錯(cuò)誤;D、有絲分裂和減數(shù)分裂染色體復(fù)制后,由于復(fù)制后的姐妹染色單體共用著絲點(diǎn),故細(xì)胞中DNA加倍,但染色體數(shù)目均未加倍,D錯(cuò)誤。故選B。3、C【解析】
根據(jù)題意和圖示分析可知:圖中實(shí)線甲表示減數(shù)分裂過程中DNA含量變化,虛線乙表示減數(shù)分裂過程中染色體含量變化;其中CD段表示減數(shù)第一次分裂,DG表示減數(shù)第二次分裂,EF表示著絲粒分裂?!驹斀狻緼.CD段表示減數(shù)第一次分裂,F(xiàn)G表示減數(shù)第二次分裂后期,所以CD與FG對(duì)應(yīng)的時(shí)間段,細(xì)胞中均含有2個(gè)染色體組,A正確;B.由于減數(shù)第一次分裂后期同源染色體分離,因此D點(diǎn)所對(duì)應(yīng)時(shí)刻之后,單個(gè)細(xì)胞中可能不含Y染色體,B正確;C.DE對(duì)應(yīng)的時(shí)間段為減數(shù)第二次分裂,細(xì)胞中不含同源染色體,因此EF過程中DNA含量的變化與同源染色體的分離無關(guān),C錯(cuò)誤;D.CD段表示減數(shù)第一次分裂,在前期有可能發(fā)生同源染色體上非姐妹染色單體之間的交叉互換,從而導(dǎo)致同源染色體上的非等位基因之間發(fā)生重組,D正確。故選C。4、D【解析】
題意分析:乙烯濃度升高激活控制酶X合成的基因的表達(dá),即乙烯促進(jìn)了酶X的合成,酶X分泌到細(xì)胞外分解細(xì)胞壁,從而形成離層;圖乙分析可知,當(dāng)近基端生長素濃度大于遠(yuǎn)基端生長素濃度時(shí),葉片加速脫落,當(dāng)近基端生長素濃度小于遠(yuǎn)基端生長素濃度時(shí),葉片不脫落?!驹斀狻緼、分析題意可知,葉柄基部離層的形成與乙烯濃度密切相關(guān),A正確;B、根據(jù)酶X能分解細(xì)胞壁,而細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠,可推測酶X最可能是纖維素酶或果膠酶,B正確;C、由圖乙結(jié)果可知,當(dāng)近基端生長素濃度大于遠(yuǎn)基端時(shí),葉片加速脫落,C正確;D、由乙圖可知,生長素與離層的形成有關(guān),故此可知葉面噴施生長素應(yīng)該會(huì)影響其葉片脫落,D錯(cuò)誤。故選D。5、D【解析】
組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸約有20種,其中有8種(嬰兒是9種,多出來的一種是組氨酸)必須從食物中獲得,稱為必需氨基酸?!驹斀狻緼、水光解產(chǎn)生O2和NADPH屬于光合作用的光反應(yīng)過程,人體細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用,A錯(cuò)誤;B、胰島素可促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)橹竞头潜匦璋被?,非必需氨基酸的種類是12種,B錯(cuò)誤;C、蔗糖是植物中的二糖,人體中不含蔗糖,食物中的蔗糖在蔗糖酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟呛凸前l(fā)生在人體的消化道內(nèi),C錯(cuò)誤;D、膽固醇經(jīng)紫外線照射可轉(zhuǎn)化成維生素D,D正確。故選D。6、C【解析】
分析題圖可知,sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定位點(diǎn)進(jìn)行切割,使B基因中的基因Ⅱ被切除,連接基因Ⅰ和基因Ⅲ,形成新的基因B?!驹斀狻緼、sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定位點(diǎn)進(jìn)行切割,因此基因定點(diǎn)編輯前需要設(shè)計(jì)與被切割基因的兩端堿基序列配對(duì)的sgRNA,A錯(cuò)誤;B、圖中sgRNA1的堿基序列和sgRNA2堿基序列分別與基因Ⅱ兩端的堿基序列配對(duì),B錯(cuò)誤;C、根據(jù)破壞B基因后生物體的功能變化,可推測B基因的功能,C正確;D、被編輯后的B基因仍能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,D錯(cuò)誤;故選C。二、綜合題:本大題共4小題7、限制酶和DNA連接酶具有全能性內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞胰蛋白酶或膠原蛋白酶貼壁生長正確互換整合正確互換整合后的染色體上只有只有,無、,具有G418抗性,故能在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中生長,錯(cuò)誤互換整合后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個(gè),而、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì),故在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中錯(cuò)誤整合的細(xì)胞死亡尿液中霉臭味顯著降低【解析】
DNA重組技術(shù)至少需要三種工具:限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)、DNA連接酶、運(yùn)載體。構(gòu)建重組載體時(shí),首先需用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和運(yùn)載體,再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組載體。胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞,來源于早期胚胎或原始性腺(即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)),因此獲取的胚胎干細(xì)胞應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。結(jié)合題圖可知,正?;Q后的染色體DNA上只有,而無、;錯(cuò)誤整合時(shí),載體的兩個(gè)中至少會(huì)有一個(gè)與一起整合到染色體DNA上,故由于正確互換后的細(xì)胞染色體上有,無、,故對(duì)G418有抗性,可在含G418的培養(yǎng)液中正常生活,而錯(cuò)誤互換后的染色體DNA上由于含有至少1個(gè),而、的產(chǎn)物都能使細(xì)胞死亡,故錯(cuò)誤互換的細(xì)胞不能生存,據(jù)此分析?!驹斀狻浚?)構(gòu)建重組載體時(shí),常用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)、DNA連接酶。實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞,除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外,還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞具有全能性。(2)為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞,可將小鼠囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞取出,并用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)過程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長,這種現(xiàn)象稱為貼壁生長。(3)已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性,、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡,據(jù)分析可知,正確互換后的染色體上只有只有,無、,錯(cuò)誤互換后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個(gè),因此,轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng),在雙重選擇下存活下來的是正?;Q整合的胚胎干細(xì)胞,原因是:正確互換后的染色體上只有只有,無、,具有G418抗性,故能在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中生長,錯(cuò)誤互換后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個(gè),而、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì),因此在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中死亡。(4)苯丙酮尿癥是由于苯丙氨酸代謝途徑中的酶缺陷,使得苯丙氨酸不能轉(zhuǎn)變成為酪氨酸,導(dǎo)致苯丙氨酸及其酮酸蓄積,并從尿中大量排出,主要表現(xiàn)為智力低下,尿液中有霉臭味,將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠,若PKU基因成功表達(dá),則從個(gè)體生物學(xué)水平檢測,小鼠尿液中霉臭味顯著降低?!军c(diǎn)睛】本題考查了基因工程和胚胎工程等相關(guān)知識(shí),要求學(xué)生能夠識(shí)記胚胎干細(xì)胞的來源,明確基因表達(dá)載體構(gòu)建過程及目的基因的表達(dá)和檢測,本題難點(diǎn)在于序列交換后細(xì)胞的篩選。8、PCRDNA雙鏈復(fù)制番茄紅素環(huán)化酶翻譯Ecl和BamH1自身成環(huán)2農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍、花粉管通道)【解析】
分析圖一:番茄紅素可以轉(zhuǎn)化為胡蘿卜素。分析圖二:圖二位重組DNA(質(zhì)粒三)的構(gòu)建過程,該質(zhì)粒能表達(dá)出雙鏈RNA(發(fā)卡),番茄細(xì)胞可以識(shí)別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及具有相同序列的單鏈RNA一起降解,提高了果實(shí)中番茄紅素的含量?!驹斀狻浚?)在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用PCR技術(shù),該技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制。(2)根據(jù)圖二可知,目的基因是番茄紅素環(huán)化酶基因,因此表達(dá)出“發(fā)卡”的DNA片段實(shí)際上是兩個(gè)反向連接的番茄紅素環(huán)化酶基因;“發(fā)卡”能導(dǎo)致雙鏈RNA、mRNA被降解,而mRNA為翻譯的模板,因此“發(fā)卡”阻止了其在細(xì)胞內(nèi)的翻譯過程,所以提高了果實(shí)中番茄紅素的含量。(3)為保證第二個(gè)目的基因片段反向連接,應(yīng)該用兩種限制酶切割。由圖可知,第二個(gè)目的基因片段兩側(cè)的限制酶識(shí)別序列為Ecl和BamHⅠ,因此處理已開環(huán)質(zhì)粒所用的兩種限制酶是Ecl和BamHⅠ。(4)去磷酸化是去掉黏性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)。對(duì)已開環(huán)的質(zhì)粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其自身成環(huán)(自身環(huán)化);構(gòu)建重組質(zhì)粒三時(shí),要用限制酶Ecl和BamHⅠ切割,這樣會(huì)去除黏性末端最外側(cè)缺少磷酸基團(tuán)的脫氧核苷酸,因此形成的重組質(zhì)粒缺少2個(gè)磷酸二酯鍵。(5)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,因此可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將質(zhì)粒三導(dǎo)入植物細(xì)胞?!军c(diǎn)睛】解答第(5)題,關(guān)鍵能理清將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法,總結(jié)如下:1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。2、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞,最常用的方法是顯微注射技術(shù)。3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌,其轉(zhuǎn)化方法是:先用Ca2+處理細(xì)胞,使其成為
感受態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。9、否并沒有發(fā)育成完整個(gè)體發(fā)育的全能性HindIII和PstI或EcoRI和PstIB和C30綠色抗原-抗體雜交【解析】
1.細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞,仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。目前已經(jīng)證明了植物細(xì)胞具有全能性,動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。通常情況下分化程度越高的細(xì)胞全能性越低,生殖細(xì)胞的全能性高于體細(xì)胞,植物細(xì)胞的全能性高于植物細(xì)胞。2.哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性,在形態(tài)上,表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯;在功能上,具有發(fā)育的全能性,即可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。3.目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原--抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)在圖1治療過程中并未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,因?yàn)檎麄€(gè)過程中并未發(fā)育成完整個(gè)體。(2)因?yàn)镋S細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,所以在進(jìn)行基因治療時(shí),選擇ES細(xì)胞進(jìn)行改造,即圖1中的步驟③。(3)據(jù)圖2、圖3中的酶切位點(diǎn)分析可知,SamI不能選用,因?yàn)樵撁傅淖R(shí)別位點(diǎn)位于目的基因內(nèi)部,目的基因兩端的酶切位點(diǎn)在質(zhì)粒當(dāng)中都包含,而且使用這些酶切割后依然能保留一種標(biāo)記基因的存在,所以構(gòu)建基因表達(dá)載體是可以選擇目的基因兩端的酶切位點(diǎn)進(jìn)行組合,據(jù)此可知,在對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí),可選用的限制酶組合為HindIII和PstI或EcoRI和PstI。(4)用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增目的基因時(shí)。由于DNA復(fù)制過程中子鏈只能由5′向3′方向延伸,又因DNA分子中的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,因此可以選為引物的單鏈DNA片段為B和C。由于每個(gè)新合成的DNA單鏈中都需要有引物才能合成,因此,若要將1個(gè)干擾素基因復(fù)制4次,則需要加入的引物數(shù)量為24×2-2=30個(gè)。(5)由于在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),綠色熒光蛋白基因沒有被破壞,因此,在進(jìn)行篩選時(shí),可用該基因作為標(biāo)記基因進(jìn)行檢測,據(jù)此可知,將步驟③獲得的ES細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察時(shí)應(yīng)選擇發(fā)綠色熒光的細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo),因?yàn)榘l(fā)綠光的ES細(xì)胞意味著含有干擾素基因?;虮磉_(dá)是指基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的過程,所以檢測基因是否表達(dá)就是檢測是否合成了相關(guān)的蛋白質(zhì),這里的蛋白質(zhì)是指干擾素,應(yīng)采用抗原-抗體雜交方法進(jìn)行檢測?!军c(diǎn)睛】熟知基因工程原理和操作步驟是解答本題的關(guān)鍵,辨圖能力以及對(duì)相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)的掌握是解答本題的另一關(guān)鍵!10、X染色體隱AaXBXbAaXBYAAXBXbAaXBXb3∶1用該只玳瑁貓與多只奶油色雄貓進(jìn)行雜交,統(tǒng)計(jì)后代貓的毛色【解析】
從表格中看出玳瑁貓含有Bb基因,而只出現(xiàn)在雌性個(gè)體中,雄性沒有玳瑁貓,說明雄性只有1個(gè)B或b基因,因此Bb基因位于X染色體上,而從子代中看出雌性和雄性中各種表現(xiàn)型的比例之和為16,說明親代的個(gè)體含有2對(duì)雜合基因,并且這兩對(duì)基因自由組合,因此親代的基因型是AaXBXb和AaXBY。【詳解】(1)根據(jù)分析,B、b基因位于X染色體上,將親代的基因型雜交結(jié)
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