DB34T 4268-2022 發(fā)酵茶中B族和G族黃曲霉毒素的測(cè)定

34DeterminationofaflatoxinBandGgroupsinfermentedI本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件主要起草人：周育、管道健、張海柱、唐蜀昆、張梁1發(fā)酵茶中B族和G族黃曲霉毒素的測(cè)定本文件第二法為雙柱凈化-液相色譜柱串聯(lián)質(zhì)譜法，適用于發(fā)酵茶中AFB1、AFB2、AFGGB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和GB5009.22食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中黃曲霉毒素B族和G族的4第一法雙柱凈化-高效液相色譜柱后光化學(xué)衍生法除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為4.2.1試劑）：）：24.2.1.11N-丙基乙二胺（PSA，CAS：111-39-7）。4.2.2材料4.2.2.3玻璃纖維濾紙：快速、高載量、液體中顆粒保留1.6μm。4.2.2.4真菌毒素多功能凈化柱（以下簡(jiǎn)稱多功能凈化柱）。4.2.3試劑配制）：）：4.2.3.3磷酸鹽緩沖溶液（以下簡(jiǎn)稱PBS）：稱取8.00g氯化鈉、14.2.4標(biāo)準(zhǔn)品4.2.5標(biāo)準(zhǔn)溶液配制4.2.5.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液移液管準(zhǔn)確移取AFB1和AFG1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液各1mL，4.2.5.3標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液稀釋34.3.1高速粉碎機(jī)。4.3.4渦旋混合器。4.3.7空氣壓力泵。4.3.8氮吹儀。4.3.10液相色譜柱。4.4.1取樣4.4.1.1茶湯法縮分至100g，儲(chǔ)存于樣品瓶中，密封保存，供4.4.2提取4.4.2.1茶湯），），），），），），），醇-水溶液（4.2.3.2），渦旋混勻，置于渦旋振蕩器或搖床中振蕩20min，將茶葉及取提液全部轉(zhuǎn)移4.4.3凈化44.4.3.1多功能凈化柱凈化移取適量上清液，按多功能凈化柱的操作說(shuō)明進(jìn)行凈化，收集全部?jī)艋?，并確保凈化液多于44.4.3.2免疫親和柱凈化4.4.3.2.1上樣液的準(zhǔn)備用刻度移液管準(zhǔn)確吸取上步的凈化液4mL（茶湯樣品20mL或依據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整加入46），4.4.3.2.2免疫親和柱準(zhǔn)備將2℃~6℃條件下保存的免疫親和柱從冷藏條件下取出，恢復(fù)至室溫連接于固相萃取裝置。4.4.3.2.3親和層析凈化待免疫親和柱內(nèi)原有液體流盡后，將上述樣液（4.4.3.2.1）移至50mL注射器筒中（或按照批次分批次移入10mL-20mL注射器筒），調(diào)節(jié)下滴速度，控制樣液以每秒一滴的速度穩(wěn)定流過(guò)免疫親1.0mL甲醇-水溶液（45:55，V/V4.4.4液相色譜參考條件h)激發(fā)波長(zhǎng)：360nm；發(fā)射波長(zhǎng)：440nm；4.4.5定性檢測(cè)試樣中目標(biāo)化合物色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的保留時(shí)間相比較，變化范圍4.4.6標(biāo)準(zhǔn)曲線制作54.4.7空白試驗(yàn)65.2.3試劑配制5.2.4標(biāo)準(zhǔn)品5.3.1高速粉碎機(jī)。5.3.4渦旋混合器。5.3.5空氣壓力泵。5.3.8氮吹儀。5.4.2提取5.4.4液相色譜參考條件b)梯度洗脫：95%A相（0min～5min），95%－35%A相（5min～7.5min），95%A相（5.4.5質(zhì)譜參考條件7a)檢測(cè)方式：多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；離子源溫度，120℃;錐孔反吹氣流量，50L/h；脫溶劑氣溫度，500℃;脫溶劑氣流量，9005.4.6.1試樣中各目標(biāo)化合物色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時(shí)間相比較，變化范圍應(yīng)在±2.5%之內(nèi)。不超過(guò)規(guī)定的范圍（相對(duì)離子豐度＞50%，在5.4.4和5.4.5的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀分析條件下，將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液由低到高濃度進(jìn)樣檢測(cè)，以0.99。5.4.8試樣溶液的測(cè)定及濃度范圍調(diào)整應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，若超過(guò)線性范圍則應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)稀釋提取液或減少取樣量重新測(cè)定。的峰面積，按照公式（2）計(jì)算出毒素濃度，計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字，單位為(μg/kg或μg/L）。C——試樣中AFB1、AFB2、AFG1或AFG2的含量，單位為微克每千克或微克每升(μg/kg或μg/Lρ——標(biāo)準(zhǔn)工作液中黃曲霉毒素的濃度，單位為納克每毫升(ng/mL)；A——樣液中黃曲霉毒素的峰面積；A0——空白樣液中黃曲霉毒素的峰面積；8V——樣液最終定容體積，單位為毫升（mLm——最終樣液所代表的試樣量，單位為克或毫升（g或mLAS——標(biāo)準(zhǔn)工作液中黃曲霉毒素的峰面積。在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的20%。），），924.028.03DB34/T4268—2022