新教材2024高中生物第1章發(fā)酵工程第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第2課時微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)同步測試新人教版選擇性必修3

第2節(jié)微生物的培育技術(shù)及應(yīng)用第2課時微生物的選擇培育和計數(shù)[基礎(chǔ)檢查]1.含氨芐西林的LB培育基在基因工程中有很重要的應(yīng)用。該培育基能殺死一切不抗氨芐西林的細(xì)菌,只有對氨芐西林具有抗性的細(xì)菌才能正常生長繁殖。由其作用可知該培育基是一種()A.固體培育基 B.合成培育基C.自然培育基 D.選擇培育基解析:該培育基由于含有氨芐西林,能殺死一切不抗氨芐西林的細(xì)菌,只有對氨芐西林具有抗性的細(xì)菌才能正常生長繁殖,即氨芐西林起到了選擇作用。因此,該培育基是一種選擇培育基。答案:D2.若要通過稀釋涂布平板法分別純化土壤中的微生物,其正確操作步驟是 ()①土壤取樣②稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中,制備1×10倍稀釋的土壤稀釋液③吸取0.1mL土壤稀釋液進(jìn)行平板涂布④依次將土壤稀釋液稀釋為1×102、1×103、1×104、1×105、1×106、1×107倍稀釋的溶液A.①②③④ B.①③②④C.①②④③ D.①④②③解析:稀釋涂布平板法分別純化土壤中微生物的正確操作步驟為:土壤取樣;稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中,制備1×10倍稀釋的土壤稀釋液;依次將土壤稀釋液稀釋為1×102、1×103、1×104、1×105、1×106、1×107倍稀釋的溶液;吸取0.1mL土壤稀釋液進(jìn)行平板涂布。答案:C3.下列關(guān)于分別培育某種微生物的試驗的敘述,正確的是 ()A.倒平板時為防止培育基濺到皿蓋上,應(yīng)打開培育皿將皿蓋放到一邊B.接種時為防止雜菌污染,接種前將涂布器在酒精中浸泡滅菌C.若菌液濃度過高無法得到單菌落,則須要稀釋后再進(jìn)行涂布D.接種后,將涂布器灼燒滅菌后,馬上放入盛有酒精的燒杯中解析:倒平板時,不能打開培育皿并把皿蓋放到一邊,以免被微生物污染;接種時為防止雜菌污染,接種前應(yīng)將涂布器灼燒滅菌;若菌液濃度過高無法得到單菌落,則須要稀釋后再進(jìn)行涂布;接種后,將涂布器灼燒滅菌,待冷卻后再放入盛有酒精的燒杯中。答案:C4.用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時 ()①可以用相同的培育基②都須要運用接種環(huán)進(jìn)行接種③都須要在火焰旁進(jìn)行接種④都可以用來計數(shù)活菌A.①② B.③④ C.①③ D.②④解析:平板劃線法或稀釋涂布平板法都運用固體培育基,可以運用相同的培育基,①正確;平板劃線法采納接種環(huán)進(jìn)行操作,而稀釋涂布平板法采納涂布器進(jìn)行操作,②錯誤;純化時,要進(jìn)行無菌操作,須要在火焰旁接種,避開空氣中的微生物混入培育基,③正確;平板劃線法一般用于分別而不是計數(shù),④錯誤。答案:C5.下列關(guān)于微生物分別和培育的敘述,錯誤的是()A.微生物培育基中加入牛肉膏和蛋白胨可以同時供應(yīng)碳源和氮源B.測定土壤樣品中的活菌數(shù)目,常用平板劃線法C.培育基不肯定都運用高壓蒸汽滅菌D.以尿素作為唯一氮源的培育基可以分別得到能分解尿素的細(xì)菌解析:牛肉膏和蛋白胨的主要成分是蛋白質(zhì),含有碳、氮元素,可以為微生物同時供應(yīng)碳源和氮源;測定土壤樣品中的活菌數(shù)目,常用稀釋涂布平板法;培育基一般運用高壓蒸汽滅菌,也可以采納微孔濾膜過濾除菌;以尿素作為唯一氮源的培育基為選擇培育基,只有能分解尿素的細(xì)菌才能在該培育基上生長繁殖。答案:B6.用稀釋涂布平板法測定微生物數(shù)量時,統(tǒng)計到的菌落數(shù)與實際活菌數(shù)的關(guān)系是 ()A.菌落數(shù)等于或大于實際活菌數(shù)B.菌落數(shù)等于或小于實際活菌數(shù)C.菌落數(shù)大于或小于實際活菌數(shù)D.菌落數(shù)等于實際活菌數(shù)解析:采納稀釋涂布平板法獲得的菌落有可能是由一個或多個細(xì)胞形成的,所以統(tǒng)計到的菌落數(shù)往往等于或小于實際的活菌數(shù)。答案:B7.用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目時,在某稀釋度下某同學(xué)做了若干個平板并統(tǒng)計每個平板的菌落數(shù),最接近樣品中菌體數(shù)真實值的是 ()A.菌落數(shù)最多的平板 B.菌落數(shù)最少的平板C.菌落數(shù)適中的平板 D.若干個平板菌落數(shù)的平均值解析:用稀釋涂布平板法對樣品中活菌數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計,只是一種估測,依據(jù)此方法的過程可知,在某一稀釋度下涂布的平板活菌數(shù)具有肯定的偶然性,并不是肯定勻稱的,所以若干個平板菌落數(shù)的平均值比較接近樣品中活菌數(shù)的真實值。答案:D8.下列培育基中,能選擇出分解尿素的細(xì)菌的是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、瓊脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水解析:在以尿素為唯一氮源的培育基中,只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培育基中生長,而且欲將分解尿素的細(xì)菌分別出來,培育基的配方中應(yīng)加有凝固劑和碳源。答案:A9.某同學(xué)利用稀釋涂布平板法進(jìn)行土壤微生物的數(shù)量測定,該同學(xué)首先將得到的1mL土壤樣液稀釋100倍,然后取0.1mL稀釋液勻稱地涂布在培育基表面,重復(fù)3個平板,在相宜條件下培育一段時間后,3個平板上的菌落數(shù)分別為71、73和75。下列敘述錯誤的是 ()A.可得出該土壤樣液中活菌數(shù)大約為7.3×107個/LB.此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際的活菌數(shù)目低C.一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計數(shù)D.顯微鏡干脆計數(shù)法統(tǒng)計的都是稀釋液中活菌數(shù)解析:稀釋涂布平板法一般選用菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計數(shù),故稀釋100倍的菌落數(shù)分別為71、73和75的每升土壤溶液中的活菌數(shù)為(71+73+75)÷3÷0.1×100×1000=7.3×107(個);由于兩個或多個細(xì)胞可能形成一個菌落,因此統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際的活菌數(shù)目低;顯微鏡干脆計數(shù)法統(tǒng)計的都是稀釋液中全部微生物個體的數(shù)目,包括死菌。答案:D10.圖甲是稀釋涂布平板法中的部分操作,圖乙是平板劃線法的操作結(jié)果。下列敘述中錯誤的是 ()甲乙A.圖甲中,涂布前要將涂布器灼燒,冷卻后才能涂布菌液B.對于濃度較高的菌液,假如稀釋倍數(shù)僅為1×102,那么,所得的菌落不肯定是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成C.圖乙的培育皿中所得的菌落都是目的菌落,無須進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定篩選D.圖乙中連續(xù)劃線的起點是上一次劃線的末端解析:圖甲中,涂布前要將涂布器灼燒,冷卻后才能進(jìn)行涂布操作,否則會殺死菌種;對于濃度較高的菌液,稀釋倍數(shù)僅為1×102,由于稀釋倍數(shù)不夠,所得菌落也可能是多個細(xì)胞連在一起,會導(dǎo)致所得的菌落不肯定由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成;圖乙中所得菌落不肯定都是目的菌落,須要進(jìn)一步的鑒定篩選;在劃線時,每次劃線應(yīng)當(dāng)從上一次劃線的末端起先。答案:C11.某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用。請分析回答下列問題。(1)有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌則不能,緣由是前者能產(chǎn)生。分解尿素的細(xì)菌不能以CO2作為碳源,但可用葡萄糖作為碳源,進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是

(答出兩點即可)。

(2)為了篩選出能分解尿素的細(xì)菌,在配制培育基時,應(yīng)選擇(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的緣由是

。

(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培育基中含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用是

(答出兩點即可)。

解析:(1)有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌則不能,緣由是前者能產(chǎn)生分解尿素的脲酶。分解尿素的細(xì)菌不能以CO2作為碳源,但可用葡萄糖作為碳源,進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是為細(xì)胞生命活動供應(yīng)能量,為其他有機(jī)物的合成供應(yīng)原料。(2)為了篩選出能分解尿素的細(xì)菌,在配制培育基時,應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源,不選擇其他兩組的緣由是能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用。(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培育基中含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用是為細(xì)菌生長供應(yīng)無機(jī)鹽,還可以作為緩沖劑使細(xì)胞生長過程中pH保持穩(wěn)定。答案:(1)脲酶為細(xì)胞生命活動供應(yīng)能量,為其他有機(jī)物的合成供應(yīng)原料(2)尿素能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長供應(yīng)無機(jī)鹽,作為緩沖劑使細(xì)胞生長過程中pH保持穩(wěn)定[拓展應(yīng)用]12.用來推斷選擇培育基是否起到了選擇作用的比照是 ()A.未接種的選擇培育基B.未接種的牛肉膏蛋白胨培育基C.接種了的牛肉膏蛋白胨培育基D.接種了的選擇培育基解析:將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培育基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培育基上的數(shù)目,因此牛肉膏蛋白胨培育基是比照組。比照試驗遵循的原則是單一變量,所以牛肉膏蛋白胨培育基須要與選擇培育基一樣接種、培育。答案:C13.為驗證“手機(jī)屏幕比馬桶按鈕單位面積上的細(xì)菌多”的真假,某科學(xué)小組利用微生物培育技術(shù)進(jìn)行試驗,過程及結(jié)果如下。下列敘述錯誤的是 ()A.該試驗采納稀釋涂布平板法接種B.該試驗不須要設(shè)置比照組C.該試驗運用的培育基應(yīng)含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽D.兩個結(jié)果不同,可能是因為取樣環(huán)境不同解析:該試驗的接種方法為稀釋涂布平板法;該試驗須要設(shè)置空白比照,以體現(xiàn)培育基是否被污染和被污染的程度,以確保試驗過程的牢靠性;微生物培育基的成分一般包括水、碳源、氮源和無機(jī)鹽;不同環(huán)境中的細(xì)菌數(shù)目不同,題圖所示結(jié)果不同的緣由可能是取樣環(huán)境不同。答案:B14.右上圖表示從土壤中分別能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的試驗過程。下列與該試驗相關(guān)的敘述錯誤的是 ()A.試驗中所用的培育基①②③④均屬于選擇培育基B.圖中過程Ⅰ、過程Ⅱ?qū)崿F(xiàn)了對目標(biāo)微生物的稀釋C.統(tǒng)計培育基⑤中的菌落數(shù)并不肯定代表接種到④上的活菌數(shù)D.在⑤處培育基上形成菌落的微生物同化作用類型為異養(yǎng)型解析:選擇培育基可用于篩選具有特定代謝特點的微生物,從土壤中篩選出能降解對羥基苯甲酸的微生物,須要以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培育基。依據(jù)所學(xué)學(xué)問,結(jié)合題圖可知,該試驗過程包括篩選→擴(kuò)大培育→純化→鑒定。從混合物中分別某種微生物要用選擇培育基,須要在培育基中加入特定的物質(zhì),如對羥基苯甲酸,在該培育基中所須要的微生物能大量繁殖。試驗中所用的培育基①②③④均屬于選擇培育基,目的是篩選能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物。圖中Ⅰ、Ⅱ過程的目的是增大降解對羥基苯甲酸微生物的含量。稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理是:當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培育基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推想出樣品中大約含有多少活菌,當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起生長時,培育基上統(tǒng)計到的是一個菌落,所以統(tǒng)計培育基⑤中的菌落數(shù)并不肯定代表接種到④上的活菌數(shù);在培育基⑤上形成菌落的微生物同化作用類型為異養(yǎng)型,因為微生物所利用的唯一碳源對羥基苯甲酸是有機(jī)物。答案:B15.(2024·高州)用紙片擴(kuò)散法測定某細(xì)菌對各種抗生素敏感性的試驗,是在某細(xì)菌勻稱分布的平板上鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培育。圖示為培育的結(jié)果,其中抑菌圈是在紙片四周出現(xiàn)的透亮區(qū)域。下列分析正確的是 ()A.在圖示固體培育基上可用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種該細(xì)菌B.未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異C.形成的抑菌圈較小的緣由可能是微生物對藥物較敏感D.不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速率不同會對試驗結(jié)果造成影響解析:紙片擴(kuò)散法是藥敏試驗的一種常用方法,它將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上,紙片所含的藥物汲取平板中的水分溶解后便不斷向紙片四周區(qū)域擴(kuò)散,形成遞減的濃度梯度,在紙片四周抑菌濃度范圍內(nèi)的細(xì)菌生長被抑制,形成透亮的抑菌圈。在固體培育基上可用稀釋涂布平板法接種測試菌;測試菌在接觸抗生素之前已發(fā)生抗性變異;微生物對藥物較敏感,形成的抑菌圈應(yīng)較大;紙片所含的藥物汲取平板中的水分溶解后便不斷向紙片四周區(qū)域擴(kuò)散,不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速率不同會對試驗結(jié)果造成影響。答案:D16.混凝土開裂造成的滲漏問題困擾著工程界。近年來,科研人員開發(fā)出利用巴氏芽孢桿菌產(chǎn)生的脲酶將尿素分解出碳酸根離子,與環(huán)境中的鈣離子結(jié)合生成碳酸鈣晶體沉積于開裂部位,從而實現(xiàn)對混凝土裂縫的修復(fù)。巴氏芽孢桿菌廣泛分布在土壤、堆肥以及污水中,它在強(qiáng)堿性培育液中生長良好?？蒲腥藛T分別高效產(chǎn)脲酶的巴氏芽孢桿菌的培育基成分如下表所示,據(jù)此分析回答下列問題。成分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g瓊脂15g水定容至1000mL(1)該培育基中含有的四類養(yǎng)分成分是。配制培育基的過程中須要將pH調(diào)成強(qiáng)堿性,調(diào)整pH的操作應(yīng)當(dāng)在滅菌(選填“之前”或“之后”),緣由是

。

(2)巴氏芽孢桿菌能夠產(chǎn)生脲酶的根本緣由是

,

該培育基能夠分別出巴氏芽孢桿菌的緣由是

。

(3)若對初步分別的巴氏芽孢桿菌進(jìn)一步分別、純化并計數(shù),應(yīng)選用的接種工具是。

(4)欲進(jìn)一步探究所分別出的巴氏芽孢桿菌的最適pH,請寫出試驗思路:

。

解析:(1)依據(jù)題表分析,該培育基中含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽四類養(yǎng)分成分;調(diào)整pH所用的溶液也須要進(jìn)行滅菌處理(避開調(diào)整pH的溶液污染滅菌后的培育基),所以調(diào)整pH應(yīng)當(dāng)在滅菌之前進(jìn)行。(2)巴氏芽孢桿菌能夠產(chǎn)生脲酶的根本緣由是巴氏芽孢桿菌含有限制脲酶合成的基因;由于該培育基以尿素為唯一氮源,而巴氏芽孢桿菌具有較強(qiáng)的分解尿素的實力,所以該培育基能夠分別出巴氏芽孢桿菌。(3)若對初步分別的巴氏芽孢桿菌進(jìn)一步分別、純化并計數(shù),應(yīng)選用稀釋涂布平板法,接種工具是涂布器。(4)欲進(jìn)一步探究所分別出的巴氏芽孢桿菌的最適pH,應(yīng)當(dāng)配制具有相同梯度的不同pH的上述培育基培育等量巴氏芽孢桿菌,一段時間后,視察菌落數(shù)目,長出菌落最多的一組的pH即為最適pH。答案:(1)碳源、氮源、水、無機(jī)鹽之前避開調(diào)整pH的溶液污染滅菌后的培育基(2)含有限制脲酶合成的基因尿素為唯一氮源,巴氏芽孢桿菌具有較強(qiáng)的分解尿素的實力(3)涂布器(4)配制具有相同梯度的不同pH的上述培育基,培育等量巴氏芽孢桿菌,一段時間后,視察菌落數(shù)目,長出菌落最多的一組的pH即為最適pH探究實踐課:土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)一、試驗?zāi)康膶ν寥乐蟹纸饽蛩氐募?xì)菌進(jìn)行分別和計數(shù)。探討培育基對微生物的選擇作用,進(jìn)行微生物數(shù)量的測定。二、試驗原理1.分別原理。絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作為唯一氮源的選擇培育基,可以從土壤中分別出分解尿素的細(xì)菌。2.計數(shù)原理。稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培育基表面生長的一個單菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推想出樣品中大約含有多少活菌。三、試驗材料尿素、瓊脂、葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、酒精(體積分?jǐn)?shù)為70%)、酒精燈、取樣紙袋、鐵鏟、錐形瓶、試管、記號筆、微量移液器等。四、探究過程序號步驟試驗操作1土壤取樣選擇酸堿度接近中性的潮濕土壤,先鏟去表層土,然后從距地表3~8cm的土壤層取樣,將樣品裝入打算好的紙袋中2制備培育基依據(jù)配方配制選擇培育基,同時配制牛肉膏蛋白胨培育基3接種樣品稀釋將10g土樣加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中,充分搖勻,取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中,依次等比稀釋至1×107倍涂布平板將1×103~1×107倍稀釋的稀釋液分別涂布到平板上4培育與視察將涂布好的培育皿放在30~37℃的溫度下培育1~2d,每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目5細(xì)菌的計數(shù)當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時,選取菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計數(shù)。在同一稀釋度下,至少對3個平板進(jìn)行重復(fù)計數(shù),然后求出平均值6計算依據(jù)平板所對應(yīng)的稀釋度計算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目五、試驗操作1.操作提示。(1)嚴(yán)格依據(jù)無菌操作的方法,進(jìn)行規(guī)范操作。取土樣時用的鐵鏟和取樣紙袋在運用前都須要滅菌。操作完成后,肯定要洗手。(2)稀釋土樣時,每次從試管中吸取稀釋液前都要充分搖勻,以獲得較為精確的計數(shù)結(jié)果。(3)將涂布器從酒精中取出時,要讓多余的酒精在燒杯中滴盡,然后放在火焰上灼燒。不要將過熱的涂布器放在盛有酒精的燒杯中,以免引燃酒精。(4)本試驗運用的平板和試管較多,為了避開混淆,最好在運用前做好標(biāo)記。2.試驗報告。試驗時間某年某月某日。試驗地點試驗室。試驗環(huán)境常溫、常壓、無菌等。試驗結(jié)果試驗記錄稀釋倍數(shù)牛肉膏蛋白胨培育基菌落數(shù)/個選擇培育基菌落數(shù)/個選擇培育基平均菌落數(shù)/個試驗結(jié)論在××(稀釋倍數(shù))的稀釋液中分別出××個能分解尿素的細(xì)菌,由此可以推想每克土樣中分解尿素的細(xì)菌數(shù)。試驗反思勝利之處該試驗設(shè)置了比照與重復(fù)試驗,使試驗結(jié)果更加精確。不足之處個別細(xì)菌菌落生長時連在一起,計數(shù)時不易區(qū)分,導(dǎo)致試驗結(jié)果偏小。3.試驗拓展。為什么分別不同的微生物要采納不同的稀釋度?測定土壤中細(xì)菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎?提示:土壤中各類微生物的數(shù)量不同。土壤中細(xì)菌的總量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,因此選用的稀釋范圍不同。試驗評價1.尿素是尿素分解菌的氮源,因此在配制培育基時 ()A.葡萄糖在培育基中越多越好B.尿素分解菌有固氮實力,故培育基中只需無機(jī)氮C.尿素在培育基中越少越好D.尿素分解菌無固氮實力,故培育基中應(yīng)加入尿素作為氮源解析:尿素既可以作為尿素分解菌的氮源,也可以作為其碳源,所以葡萄糖在培育基中并不是越多越好;尿素分解菌沒有固氮實力,故培育基中須要添加尿素作為氮源;添加尿素的目的是篩選尿素分解菌,其他微生物不能很好地生活在該培育基上,但尿素在培育基中不是越少越好,過少就失去選擇作用,過多又會使細(xì)胞失水死亡。答案:D2.下列有關(guān)“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)”試驗的敘述,錯誤的是 ()A.用尿素為唯一氮源、加有酚紅指示劑的培育基培育尿素分解菌,指示劑不變紅B.分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶,將尿素分解產(chǎn)生NH3和CO2C.統(tǒng)計尿素分解菌的數(shù)目時,以菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計數(shù)D.將試驗組和比照組平板倒置,30~37℃恒溫培育1~2天解析:用尿素為唯一氮源、加有酚紅指示劑的培育基培育尿素分解菌,尿素分解菌將尿素分解為NH3和CO2,會使培育基堿性增加,指示劑變紅。統(tǒng)計尿素分解菌的數(shù)目時,以菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計數(shù)。為解除培育基制備過程中可能造成的污染,應(yīng)設(shè)置不接種菌液的比照組平板,而后將試驗組和比照組的平板倒置,防止皿蓋上的冷凝水珠滴落在培育基上,造成污染;細(xì)菌一般須要30~37℃恒溫培育1~2天。答案:A3.下列是關(guān)于“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)”試驗操作的敘述,其中錯誤的是 ()A.利用稀釋涂布平板法精確估計細(xì)菌數(shù)目的關(guān)鍵是適當(dāng)?shù)南♂尪菳.若要推斷選擇培育基是否起到了選擇作用,須要設(shè)置未接種的牛肉膏蛋白胨培育基作為比照C.在土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計數(shù)試驗中,應(yīng)采納稀釋涂布平板法D.計數(shù)時應(yīng)選擇菌落數(shù)為30~300的平板,求平均值進(jìn)行計數(shù)解析:利用稀釋涂布平板法精確估計細(xì)菌數(shù)目的關(guān)鍵是適當(dāng)?shù)南♂尪?稀釋倍數(shù)太低,菌落太多會長在一起,稀釋倍數(shù)太高,平板上菌落數(shù)目過少,不宜進(jìn)行計數(shù);若要推斷選擇培育基是否起到了選擇作用,需設(shè)置接種沒有選擇作用的牛肉膏蛋白胨培育基作為比照;在土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計數(shù)試驗中,應(yīng)采納稀釋涂布平板法;計數(shù)時通常選擇菌落數(shù)在30~300的試驗組平板進(jìn)行計數(shù)。答案:B4.下圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程,下列敘述錯誤的是 ()A.能產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌可以分解利用尿素B.圖中逐級稀釋的程度會干脆影響細(xì)菌培育基上的菌落數(shù)量C.培育基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以供應(yīng)無機(jī)鹽和作為緩沖劑D.培育基①應(yīng)以尿素為唯一氮源,培育基②的作用是純化培育產(chǎn)脲酶細(xì)菌解析:酶具有專一性,能產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌可以分解利用尿素;稀釋度越低,細(xì)菌培育基上菌落數(shù)越多,稀釋度越高,細(xì)菌培育基上菌落數(shù)越少,所以逐級稀釋的程度會干脆影響細(xì)菌培育基上的菌落數(shù)量;細(xì)菌的生長繁殖須要無機(jī)鹽,培育基中添加KH2PO4、Na2HPO4可以供應(yīng)無機(jī)鹽,同時也可以作為緩沖劑;培育基①為選擇培育基,以尿素作為唯一氮源,培育基②為鑒別培育基,培育基中可加入酚紅指示劑,依據(jù)菌落四周指示劑是否變紅來鑒別細(xì)菌。答案:D5.測定土壤中的細(xì)菌數(shù)量一般選用1×104、1×105和1×106倍稀釋的稀釋液進(jìn)行平板培育,而測定真菌的數(shù)量一般選用1×102、1×103和1×104倍稀釋的稀釋液進(jìn)行平板培育,其緣由是 ()A.細(xì)菌個體小,真菌個體大B.細(xì)菌易稀釋,真菌不易稀釋C.細(xì)菌在土壤中數(shù)量比真菌多D.隨機(jī)的,沒有緣由解析:土壤中的微生物70%~90%是細(xì)菌,真菌的數(shù)量要比細(xì)菌少。樣品的稀釋度越高,在平板上生成的菌落數(shù)量就越少。在實際操作中,通常選用肯定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培育,以保證獲得的菌落數(shù)為30~300,適于平板計數(shù),所以細(xì)菌的稀釋倍數(shù)要高于真菌的稀釋倍數(shù)。答案:C6.某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用。下列關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計數(shù)的相關(guān)敘述,正確的是 ()A.分解尿素的細(xì)菌是以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源的B.倒平板時應(yīng)將打開的培育皿蓋放到一邊,以免培育基濺到皿蓋上C.培育基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定D.若試驗組菌落平均數(shù)為37個/平板,空白比照平板上有3個菌落,則本組菌落數(shù)的平均值為34個/平板解析:分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型,不能以CO2作為碳源;倒平板時,正確的做法是用拇指和食指將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,將培育基倒入培育皿,馬上蓋上皿蓋;無機(jī)鹽可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長環(huán)境的pH穩(wěn)定,所以培育基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定;在完全正確的操作狀況下,空白比照組中不應(yīng)出現(xiàn)菌落,若空白比照組出現(xiàn)菌落,說明操作過程中存在微生物污染,屬于試驗失誤,全部試驗數(shù)據(jù)均不應(yīng)采納。答案:C7.在做分別分解尿素的細(xì)菌試驗時,甲同學(xué)從對應(yīng)1×106倍稀釋的培育基上篩選出大約120個菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約20個菌落。下列有關(guān)敘述錯誤的是 ()A.可以將甲同學(xué)配制的培育基在不加土樣的狀況下進(jìn)行培育作為空白比照,以證明培育基是否受到污染B.讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行試驗,假如結(jié)果與甲同學(xué)一樣,則可以證明甲同學(xué)無誤C.甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的緣由可能是土樣不同,也可能是操作過程出了問題D.A、B選項的試驗思路都遵循了試驗的比照原則和平行重復(fù)原則解析:污染可能是培育基滅菌不徹底或操作過程沒有保證無菌操作,可以將甲同學(xué)配制的培育基在不加土樣的狀況下進(jìn)行培育作為空白比照,以證明培育基是否受到污染;讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行試驗,假如結(jié)果與甲同學(xué)一樣,則可以證明甲同學(xué)操作正確;甲同學(xué)獲得的菌落數(shù)遠(yuǎn)大于其他同學(xué),可能是由于所取的土樣不同,也可能是操作過程被污染;A選項的試驗思路遵循了試驗的比照原則,B選項的試驗思路遵循了試驗的重復(fù)性原則。答案:D8.尿素是一種重要的氮肥,但是不能被農(nóng)作物干脆汲取,只有被土壤中的細(xì)菌分解成氨后才能被植物利用。某試驗小組要完成課題“從土壤中分別出能分解尿素的細(xì)菌”,問答下列問題。(1)在該試驗中,配制培育基須要以作為唯一氮源。該培育基中(填“須要”或“不須要”)添加葡萄糖,緣由是。若要驗證該培育基具有選擇作用,須要設(shè)置

作為比照,當(dāng)時,即可說明該培育基具有選擇作用。

(2)在接種前須要對樣品進(jìn)行稀釋處理,以保證獲得菌落數(shù)在范圍適于計數(shù)的平板。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)目,一般選用1×104、1×105、1×106倍的稀釋液進(jìn)行平板培育,若測定放線菌數(shù)量,則須要采納與此不一樣的稀釋倍數(shù),緣由是。

(3)在進(jìn)行試驗時,甲同學(xué)從對應(yīng)1×106倍稀釋的培育基中篩選出大約200個菌落,但是其他同學(xué)在同樣稀釋度下只篩選出大約90個菌落,若甲同學(xué)的結(jié)果有問題,則可能的緣由是。

解析:(1)在該試驗中,配制培育基須要以尿素作為唯一氮源,該培育基中須要添加葡萄糖,緣由是尿素分解菌為異養(yǎng)微生物,不能利用無機(jī)碳源,只能利用現(xiàn)成的有機(jī)碳源;若要驗證該培育基具有選擇作用,須要設(shè)置基礎(chǔ)培育基作為比照,即接種相同菌液的牛肉膏蛋白胨培育基,在相同條件下培育,當(dāng)牛肉膏蛋白胨培育基上的菌落數(shù)明顯多于該培育基上的菌落數(shù)時,即可說明該培育基具有選擇作用。(2)在接種前須要對樣品進(jìn)行稀釋處理,以保證獲得菌落數(shù)在30~300范圍適于計數(shù)的平板;土壤中各類微生物的數(shù)量是不同的,所