miR-27a及其靶基因PLK-2在喉癌中作用和功能研究的任務書

miR--27a及其靶基因PLK--2在喉癌中作用和功能研究的任務書任務書任務名稱：miR-27a及其靶基因PLK-2在喉癌中作用和功能研究研究背景：喉癌是一種常見的頭頸腫瘤，由于病因復雜，目前尚無針對喉癌的有效治療方法。因此，研究miRNAs及其靶基因在喉癌中的作用和功能，有望為喉癌的治療提供新的思路和策略。miRNAs（microRNAs）是一類非編碼RNA分子，通過與mRNA的3'非編碼區(qū)域結合，調節(jié)mRNA的翻譯和降解。越來越多的研究表明，miRNAs在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用。PLK-2（Polo-likekinase2）是一個靶基因，與細胞周期的調節(jié)緊密相關。近些年來的研究表明，PLK-2在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中也起著重要的作用。因此，研究miR-27a及其靶基因PLK-2在喉癌中的作用和功能，將有助于深入理解喉癌的發(fā)病機制，為喉癌的早期篩查和治療提供新的思路和方法。研究內容：1.檢測miR-27a在喉癌組織和正常組織中的表達水平，并通過生物信息學方法，預測其靶基因。2.構建miR-27a的上調和下調模型。分別對miR-27a上調和下調的細胞株進行檢測，比較其與對照組細胞株的生長、轉移、凋亡等指標。3.篩選miR-27a中的靶基因，并通過qRT-PCR等方法確定其表達水平。進一步研究miR-27a和靶基因PLK-2在喉癌中的相互作用和調節(jié)機制。4.利用CRISPR/Cas9技術，對PLK-2基因進行敲除或過表達，檢測其對喉癌細胞的增殖、轉移、凋亡等生物學行為的影響。5.通過免疫熒光、免疫印跡等方法，研究miR-27a和PLK-2對喉癌細胞的信號通路和蛋白質水平的調控作用。研究意義：1.深入理解miR-27a在喉癌中的作用和功能，有助于發(fā)現(xiàn)新的早期診斷標志物和治療靶點。2.通過研究miR-27a調節(jié)PLK-2的機制，可以更好地理解PLK-2在喉癌發(fā)生和發(fā)展中的作用。3.研究結果有望為開發(fā)新的治療喉癌的策略和新藥物提供理論依據。4.拓展miRNAs在腫瘤領域中的應用，為腫瘤治療的精準化提供新的方法和思路。預期成果：1.成功構建miR-27a上調和下調的細胞模型。2.篩選出miR-27a的靶基因，并證明靶基因PLK-2在喉癌中發(fā)揮了重要作用。3.深入研究miR-27a和PLK-2的相互作用和調節(jié)機制，為喉癌的治療和預防提供理論指導。4.發(fā)表相關研究論文，提高課題組的學術水平和影響力。研究成員及分工：1.主要研究人員：負責課題的整體設計、實驗操作和數(shù)據分析，及論文撰寫。2.實驗技術人員：負責實驗的具體操作和數(shù)據采集、整理、分析。3.相關專家：提供咨詢和指導，以確保實驗的規(guī)范性和有效性。經費預算：本研究的經費主要用于實驗室耗材采購、設備維護、專業(yè)人員的薪資、出版費用等方面?？傤A算為100萬元，根據實際需要進行調整。時間計劃：本研究的時間計劃為兩年。第一年主要完成miR-27a和PLK-2的表達水平檢測及靶基因篩選，并構建上調和下調的細胞模型；第二年主要開展細胞模型的實驗驗證和機制探究，以及論文撰寫和發(fā)表。如實驗進度情況出現(xiàn)延誤，時間計劃可做適當調整。參考文獻：1.ChenW,ZhengR,BaadePD,etal.CancerstatisticsinChina,2015[J].CA:acancerjournalforclinicians,2016,66(2):115-132.2.CalinGA,DumitruCD,ShimizuM,etal.Frequentdeletionsanddown-regulationofmicro-RNAgenesmiR15andmiR16at13q14inchroniclymphocyticleukemia[J].ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica,2002,99(24):15524-15529.3.LioCJ,Laird-OffringaIA.MinimizingRNAprecipitationformicroRNAmicroarrayanalysesinbiofluids[J].Methods,2013,59(1):S22-S27.4.GanslmayerM,EderT,PapadopoulosT,etal.Polo-likekinase2isamediatorofhedgehogsurvivalsignalinginchondrosarcoma[J].Journalofpathology,2016,238(4):543-554.5.WangY,ChenT,HuangH,etal.miR-27a-3pandmiR-27a-5pinhibitcoloncancer