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...生物安全試題一、填空題(每空0.5分,共40分)1、我國一直以來高度重視實驗室生物安全工作,國家陸續(xù)頒布了一系列法律、法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn),包括______________________________________________、___________________________________________等。各種菌(毒)株所需實驗室的生物安全級別參見衛(wèi)生部__________________________________有關(guān)規(guī)定.2、盡管生物安全實驗室內(nèi)存在各種潛在感染的風(fēng)險,但是隨著人們認(rèn)識的深入及實驗室設(shè)備設(shè)施條件的改善,防范感染事件發(fā)生的能力不斷得到提高.通過開展______________________________、確定________________________和______________________、制定____________________和__________________等措施,將會減少或避免實驗室感染事件的發(fā)生.3、二級實驗室適用于進行我國危害程度分類為_____________和_____________________的病原微生物檢測實驗活動。4、二級實驗室在一級實驗室的基礎(chǔ)上,增加了_______________、_____________________等安全設(shè)備.5、依據(jù)現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn),三級實驗室由_____________、_____________和_____________三部分組成。整個平面布局為_____________→_____________→_____________→_____________→_____________.6、液體進行壓力蒸汽滅菌時,液體體積不得超過__________________________。應(yīng)該__________________________,保證蒸汽能夠進入。7、BSL—2實驗室操作規(guī)范:(1)人員進入二級實驗室,需經(jīng)過__________________________,并經(jīng)_____________________同意,方可進入;(2)進入實驗室后,應(yīng)做好_____________、___________等記錄;(3)實驗室工作人員根據(jù)工作內(nèi)容,在實驗室生物風(fēng)險評估的基礎(chǔ)上,選擇并穿戴好___________________;通常情況下,應(yīng)穿上鞋套,穿防護服或反穿式隔離服,戴好帽子、口罩、手套,必要時根據(jù)操作內(nèi)容可戴上防護眼鏡;戴帽子時,不應(yīng)___________________;(4)二級實驗室內(nèi),各種可能產(chǎn)生___________的操作,應(yīng)在生物安全柜內(nèi)或其他物理保護裝置中進行;(5)將實驗所需物品放入生物安全柜,按照實驗步驟進行操作;如果是兩個人進行操作,相互應(yīng)配合,但不能影響_____________________________;(6)實驗產(chǎn)生的廢物,應(yīng)該放在生物安全柜內(nèi)的廢物盒里;(7)實驗結(jié)束后,首先撤出主要實驗材料,隨后再撤出剩余實驗用品,實驗廢物應(yīng)放在廢物處理桶中并在二級實驗室內(nèi)進行滅菌;(8)撤離結(jié)束后,對安全柜內(nèi)所用的物品進行消毒處理,實驗廢物放在廢物桶中,還要對生物安全柜進行消毒處理;(9)實驗產(chǎn)生的廢物放在____________________中進行滅菌;(10)整個實驗結(jié)束后,在實驗室出口處脫去個人防護裝備,脫去手套,脫去防護服,脫下防護眼鏡、口罩,摘掉帽子,最后脫去鞋套;并仔細(xì)_______________;(11)在離開二級實驗室之前,需要做好________________________________。8、感染性物質(zhì)的公路運輸,需要申請單位____________________直接送往目的地。注意應(yīng)__________________________,防止運輸過程中感染性物質(zhì)泄漏,以便緊急處理。9、消毒和滅菌方法分為物理和化學(xué)兩種方法.常用的物理滅菌方法有________________、__________________、______________________________等;化學(xué)法主要以化學(xué)消毒劑為主,根據(jù)消毒劑對微生物的殺滅種類和效果,可分為高效、中效和低效消毒劑,高效消毒劑包括含氯消毒劑(如次氯酸鈉)、__________、____________________、戊二醛,中效消毒劑包括________、________,低效消毒劑有氯己定.使用消毒劑時,注意__________________________,注意配制的期限;必要時需要定期更換、交替使用,避免微生物出現(xiàn)________________.10、國家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度,將病原微生物分為四類:第一類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物_______________,比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。第三類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成_______________,傳播風(fēng)險_________,實驗室感染后很少引起_______________,并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類病原微生物,是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。_______________、_______________病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。11、請?zhí)顚懸韵挛⑸锏奈:Τ潭确诸惣案鞣N實驗活動所需生物安全實驗室級別。種類中文名危害程度分類實驗活動所需生物安全實驗室級別病毒培養(yǎng)或大量活菌操作未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作或樣本檢測滅活材料的操作無感染性材料的操作病毒埃博拉病毒第一類BSL—4BSL—3BSL—2BSL-1SARS冠狀病毒BSL—3BSL—3BSL—2艾滋病毒(I型和II型)口蹄疫病毒高致病性禽流感病毒新城疫病毒人乳頭瘤病毒BSL-2甲型肝炎病毒乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒丁型肝炎病毒戊型肝炎病毒細(xì)菌結(jié)核分枝桿菌BSL-3鮑曼不動桿菌BSL-2嗜水氣單胞菌空腸彎曲菌肺炎衣原體流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌嗜肺軍團菌單核細(xì)胞增生李斯特菌鳥分枝桿菌龜分枝桿菌肺炎支原體銅綠假單胞菌鼠傷寒沙門菌金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌創(chuàng)傷弧菌小腸結(jié)腸炎耶爾森菌12、試劑技術(shù)部樣品制備實驗室最高只能進行可能含有___________________________________________微生物的________________________________(此操作需要BSL—3實驗室的SARS冠狀病毒除外).13、出現(xiàn)下列情況之一,實驗人員進入實驗室工作區(qū)需經(jīng)項目負(fù)責(zé)人、部門負(fù)責(zé)人審批:(1)_______________________________;(2)________________________;(3)____________________________________________________;(4)正在使用免疫抑制劑或免疫耐受;(5)妊娠期。14、外部門或外單位人員進入試劑技術(shù)部樣品制備實驗室學(xué)習(xí)、工作等,該人員需接受相關(guān)的________________________,應(yīng)經(jīng)過__________________(附件1)(其中規(guī)定申請進入的人員須已閱讀試劑技術(shù)部樣品制備實驗室______________________________和試劑技術(shù)部樣品制備實驗室__________________),并遵守試劑技術(shù)部樣品制備實驗室管理制度。15、實驗人員在第一更衣室進行個人防護,進入實驗室前和實驗操作完畢后需填寫________________________________________(附件2)(具體包括:________、________、________________、________________及________________),其中________________一項需詳細(xì)記錄。二、問答題(共60分)1、二級實驗室的基本結(jié)構(gòu)?(8分)2、BSL—1、2、3三類實驗室的區(qū)別?(6分)3、生物安全柜的作用和防護原理?(5分)答:4、實驗室意外事件處理原則?實驗室地面被污染如何處理?(6分)5、生物安全柜的操作流程和注意事項?(11分)6、進入試劑技術(shù)部樣品制備實驗室,需要穿戴哪些個人防護裝備?穿戴和解除裝備的流程分別是怎樣的?(10分)7、皮膚被刺傷如何處理?(5分)8、實驗完畢后的清場和操作?(4分)9、離心管破裂應(yīng)如何處理?(5分)答案:一、填空題(每空0。5分,共40分)1、我國一直以來高度重視實驗室生物安全工作,國家陸續(xù)頒布了一系列法律、法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn),包括《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、國家標(biāo)準(zhǔn)GB19489《實驗室生物安全通用要求》等。各種菌(毒)株所需實驗室的生物安全級別參見衛(wèi)生部《人間傳染的病原微生物名錄》有關(guān)規(guī)定。2、盡管生物安全實驗室內(nèi)存在各種潛在感染的風(fēng)險,但是隨著人們認(rèn)識的深入及實驗室設(shè)備設(shè)施條件的改善,防范感染事件發(fā)生的能力不斷得到提高.通過開展實驗室生物安全風(fēng)險評估、確定實驗室生物安全級別和個人防護裝備、制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和應(yīng)急預(yù)案等措施,將會減少或避免實驗室感染事件的發(fā)生。3、二級實驗室適用于進行我國危害程度分類為第三類和少量第二類的病原微生物檢測實驗活動。4、二級實驗室在一級實驗室的基礎(chǔ)上,增加了生物安全柜、壓力蒸汽滅菌器等安全設(shè)備.5、依據(jù)現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn),三級實驗室由清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)三部分組成.整個平面布局為清潔區(qū)→緩沖區(qū)I→半污染區(qū)→緩沖區(qū)II→污染區(qū)。6、液體進行壓力蒸汽滅菌時,液體體積不得超過容器體積的2/3。應(yīng)該把蓋子旋松,保證蒸汽能夠進入。7、BSL-2實驗室操作規(guī)范:(1)人員進入二級實驗室,需經(jīng)過相關(guān)生物安全培訓(xùn),并經(jīng)實驗室負(fù)責(zé)人同意,方可進入;(2)進入實驗室后,應(yīng)做好進入時間、姓名等記錄;(3)實驗室工作人員根據(jù)工作內(nèi)容,在實驗室生物風(fēng)險評估的基礎(chǔ)上,選擇并穿戴好個人防護裝備;通常情況下,應(yīng)穿上鞋套,穿防護服或反穿式隔離服,戴好帽子、口罩、手套,必要時根據(jù)操作內(nèi)容可戴上防護眼鏡;戴帽子時,不應(yīng)把頭發(fā)漏在外面;(4)二級實驗室內(nèi),各種可能產(chǎn)生氣溶膠的操作,應(yīng)在生物安全柜內(nèi)或其他物理保護裝置中進行;(5)將實驗所需物品放入生物安全柜,按照實驗步驟進行操作;如果是兩個人進行操作,相互應(yīng)配合,但不能影響生物安全柜內(nèi)氣流;(6)實驗產(chǎn)生的廢物,應(yīng)該放在生物安全柜內(nèi)的廢物盒里;(7)實驗結(jié)束后,首先撤出主要實驗材料,隨后再撤出剩余實驗用品,實驗廢物應(yīng)放在廢物處理桶中并在二級實驗室內(nèi)進行滅菌;(8)撤離結(jié)束后,對安全柜內(nèi)所用的物品進行消毒處理,實驗廢物放在廢物桶中,還要對生物安全柜進行消毒處理;(9)實驗產(chǎn)生的廢物放在滅菌器中進行滅菌;(10)整個實驗結(jié)束后,在實驗室出口處脫去個人防護裝備,脫去手套,脫去防護服,脫下防護眼鏡、口罩,摘掉帽子,最后脫去鞋套;并仔細(xì)清洗手部;(11)在離開二級實驗室之前,需要做好相關(guān)實驗室使用的記錄。8、感染性物質(zhì)的公路運輸,需要申請單位兩人專人專車直接送往目的地。注意應(yīng)帶上個人防護用品,防止運輸過程中感染性物質(zhì)泄漏,以便緊急處理.9、消毒和滅菌方法分為物理和化學(xué)兩種方法。常用的物理滅菌方法有紫外線消毒、壓力蒸汽滅菌、高效過濾器(HEPA)過濾除菌等;化學(xué)法主要以化學(xué)消毒劑為主,根據(jù)消毒劑對微生物的殺滅種類和效果,可分為高效、中效和低效消毒劑,高效消毒劑包括含氯消毒劑(如次氯酸鈉)、甲醛、過氧乙酸、戊二醛,中效消毒劑包括乙醇、碘氟,低效消毒劑有氯己定.使用消毒劑時,注意在有效期內(nèi)使用,注意配制的期限;必要時需要定期更換、交替使用,避免微生物出現(xiàn)抗藥性.10、國家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度,將病原微生物分為四類:第一類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物嚴(yán)重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。第三類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害,傳播風(fēng)險有限,實驗室感染后很少引起嚴(yán)重疾病,并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物.第四類病原微生物,是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物.11、請?zhí)顚懸韵挛⑸锏奈:Τ潭确诸惣案鞣N實驗活動所需生物安全實驗室級別.種類中文名危害程度分類實驗活動所需生物安全實驗室級別病毒培養(yǎng)或大量活菌操作未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作或樣本檢測滅活材料的操作無感染性材料的操作病毒埃博拉病毒第一類BSL-4BSL-3BSL—2BSL-1SARS冠狀病毒第二類BSL-3BSL-3BSL—2BSL-1艾滋病毒(I型和II型)BSL—2BSL-1口蹄疫病毒高致病性禽流感病毒新城疫病毒人乳頭瘤病毒第三類BSL—2BSL-2BSL—1BSL—1甲型肝炎病毒乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒丁型肝炎病毒戊型肝炎病毒細(xì)菌結(jié)核分枝桿菌第二類BSL—3BSL-2BSL—1鮑曼不動桿菌第三類BSL—2BSL—2BSL—1嗜水氣單胞菌空腸彎曲菌肺炎衣原體流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌嗜肺軍團菌單核細(xì)胞增生李斯特菌鳥分枝桿菌龜分枝桿菌肺炎支原體銅綠假單胞菌鼠傷寒沙門菌金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌創(chuàng)傷弧菌小腸結(jié)腸炎耶爾森菌12、試劑技術(shù)部樣品制備實驗室最高只能進行可能含有我國微生物危害程度第二類的微生物的未經(jīng)培養(yǎng)的樣本的檢測(此操作需要BSL—3實驗室的SARS冠狀病毒除外)。13、出現(xiàn)下列情況之一,實驗人員進入實驗室工作區(qū)需經(jīng)項目負(fù)責(zé)人、部門負(fù)責(zé)人審批:(1)身體出現(xiàn)開放性損傷;(2)患發(fā)熱性疾??;(3)呼吸道感染或其它導(dǎo)致抵抗力下降的情況;(4)正在使用免疫抑制劑或免疫耐受;(5)妊娠期。14、外部門或外單位人員進入試劑技術(shù)部樣品制備實驗室學(xué)習(xí)、工作等,該人員需接受相關(guān)的生物安全培訓(xùn),應(yīng)經(jīng)過審批流程(附件1)(其中規(guī)定申請進入的人員須已閱讀試劑技術(shù)部樣品制備實驗室實驗人員個人防護和試劑技術(shù)部樣品制備實驗室操作規(guī)范),并遵守試劑技術(shù)部樣品制備實驗室管理制度。15、實驗人員在第一更衣室進行個人防護,進入實驗室前和實驗操作完畢后需填寫《樣品制備實驗室出入記錄》(附件2)(具體包括:日期、姓名、進入時間、離開時間及工作內(nèi)容),其中“工作內(nèi)容”一項需詳細(xì)記錄。二、問答題(共60分)1、二級實驗室的基本結(jié)構(gòu)?(4分,第一句0。5分,后面每條0。5分)答:二級實驗室除滿足一級實驗室的設(shè)計要求以外,增加以下內(nèi)容:(1)實驗室的門上標(biāo)有國際通用的生物危害警告標(biāo)志;(2)實驗室的門帶鎖,能自動關(guān)閉,有可視窗;(3)一般不需要特殊的通風(fēng)設(shè)備,但可以設(shè)置有通風(fēng)系統(tǒng);若無,窗戶應(yīng)該能夠打開,并安裝有紗窗;(4)實驗室內(nèi)配備有II級生物安全柜,安裝在離門和空調(diào)送風(fēng)口較遠(yuǎn)的地方;(5)實驗室配備有壓力蒸汽滅菌器;(6)實驗室有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明,可設(shè)有紫外燈;(7)在靠近實驗室出口的地方設(shè)有洗手池。2、BSL—1、2、3三類實驗室的區(qū)別?(3分,每條1分)答:由于三類實驗室操作的微生物危害程度不同,因此三類實驗室在布局和防護屏障、設(shè)施、設(shè)備要求上不同。一級實驗室不需要特殊的防護屏障;二級實驗室在一級實驗室的基礎(chǔ)上增加了生物安全柜和壓力蒸汽滅菌器兩個重要的設(shè)備;三級實驗室自成隔離區(qū)或獨立建筑物,有明確的功能分區(qū),具有獨立的送、排風(fēng)系統(tǒng),氣流由清潔區(qū)向污染區(qū)定向流動等。3、生物安全柜的作用和防護原理?(5分)答:作用:(2分)生物安全柜是一個負(fù)壓過濾排風(fēng)柜,能迅速把產(chǎn)生的氣溶膠過濾除掉,因此在其中操作原代培養(yǎng)物、菌株、毒株、診斷性標(biāo)本等感染性物質(zhì)時,可以保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料,避免暴露于操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物。防護原理:(3分)(1)從安全柜排出的空氣經(jīng)過HEPA空氣過濾器過濾釋放,保護外部環(huán)境;(2)在安全柜內(nèi)形成的負(fù)壓和氣幕,可以防止氣溶膠外泄,保護操作者;(3)進入安全柜工作區(qū)的空氣經(jīng)過HEPA空氣過濾器過濾,在安全柜內(nèi)形成百級潔凈度的環(huán)境,保護操作對象。4、實驗室意外事件處理原則?實驗室地面被污染如何處理?(6分,原則2分,處理4分)答:實驗室如果發(fā)生意外事故,原則是:立即停止工作;在加強個人防護條件下進行消毒處理,并對當(dāng)事人進行醫(yī)學(xué)觀察;按照程序向負(fù)責(zé)人報告發(fā)生的事件。如果感染性材料灑溢到實驗室地面上,應(yīng)立即用布或紙巾覆蓋所有可能污染處,然后在上面倒上消毒劑,并立即覆蓋周圍區(qū)域,同時,及時脫掉防護裝備、離開被污染的實驗室,并在實驗室門口注明警告標(biāo)志。消毒有效時間后,防護人員換上新的防護裝備進入實驗室,將消毒后的感染性材料放在廢物桶中,必要時需要對地面進行多次消毒.5、生物安全柜的操作流程和注意事項?(10分,每少1條扣1分)(1)使用前,檢查生物安全柜的正常指標(biāo),確保風(fēng)速、氣流量和負(fù)壓等指標(biāo)在正常范圍內(nèi);(2)工作時,一定要保證生物安全柜玻璃窗的位置移到安全范圍內(nèi);(3)每次使用前,都應(yīng)該準(zhǔn)備好本次實驗工作所需的物品,操作前先將物品放入;生物安全柜內(nèi)只擺放本次工作所需要的物品,盡量少放儀器和物品;(4)所有物品應(yīng)盡量放在工作區(qū)兩側(cè)或后部靠近工作臺后緣的位置,并給進風(fēng)隔柵留下距離;物品擺放時根據(jù)操作習(xí)慣,盡量把物品按照潔凈區(qū)、操作區(qū)和污染區(qū)做好分區(qū)擺放;注意物品應(yīng)分類擺放,不要遮蓋安全柜進風(fēng)隔柵,以免干擾氣流的正常流動;(5)工作記錄紙不應(yīng)放在生物安全柜內(nèi);(6)生物安全柜內(nèi)不應(yīng)使用明火裝置;(7)使用生物安全柜前應(yīng)先打開風(fēng)機5-10分鐘,待安全柜內(nèi)空氣得到凈化并且氣流穩(wěn)定后,再開始操作;(8)工作時調(diào)整好坐椅的高度,以確保操作者的臉部在工作窗口之上;(9)將雙臂伸入安全柜內(nèi)短暫停止,待安全柜內(nèi)氣流穩(wěn)定后再開始操作;在柜內(nèi)的所有工作都要在工作臺中央或后部進行,操作者在移動雙臂進出安全柜時需要小心維持前面窗口處氣流的完整性,雙臂應(yīng)該緩慢地進出安全柜;操作時,手或物品不可擋住進風(fēng)隔柵;(10)操作時產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)該放置于生物安全柜內(nèi)的廢物處理容器中;(11)操作結(jié)束后,應(yīng)對在生物安全柜內(nèi)使用過的物品表面進行消毒,然后對生物安全柜內(nèi)表面進行消毒;繼續(xù)開啟10—20分鐘后,關(guān)閉生物安全柜;帶有紫外燈的安全柜,可用紫外燈消毒半個小時后關(guān)閉生物安全柜.6、進入試劑技術(shù)部樣品制備實驗室,穿戴和解除個人防護裝備的流程分別是怎樣的?(8分=3分+5分,每條0.5分)穿戴個人防護裝備的流程:在第一更衣室內(nèi):(1)換上工作用鞋,套上一次性普通鞋套;—→(2)穿上第一層連體隔離衣,佩戴N95口罩;-→(3)穿上第二層連體隔離衣,佩戴乳膠手套(雙層),注意用醫(yī)用膠帶固定手套;—→(4)套上高幫鞋套(可在外面套上一次性普通鞋套防止踩臟);—→(5)由同伴或?qū)︾R檢查上述衣物是否穿戴整齊,佩戴合格;—→

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