生物科技行業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)講義

生物科技行業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)講義實(shí)驗(yàn)周數(shù)：4實(shí)驗(yàn)壹：培養(yǎng)基的配制和滅菌（4實(shí)驗(yàn)三：顯微鏡的使用和簡單染色（3）實(shí)驗(yàn)四：革蘭氏染色和莢膜染色（3）pH碳源物質(zhì)的功能：構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)；為機(jī)體提供整個(gè)生理活動(dòng)所需要的能量（異養(yǎng)微生物（C／N（pH4-5pHpH

合成培養(yǎng)基：設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等。半合成培養(yǎng)基：養(yǎng)基。3.天然培養(yǎng)基：培養(yǎng)基等。液體培養(yǎng)基：不加凝固劑（常用凝固劑為瓊脂）半固體培養(yǎng)基：0.2—0.5%加富培養(yǎng)基：加富培養(yǎng)基是指在普通培養(yǎng)基里加過血、血清、動(dòng)物（或植物）選擇培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基：NaCl96℃時(shí)溶化，實(shí)際應(yīng)用時(shí)，壹40℃時(shí)凝固，通常不被微pH3.0g1000ml1、溶液和試劑牛肉膏，蛋白胨，NaCl，瓊脂，1mol/LnaOH，1mol/LHCl（pH5.5～9.01、稱量：按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取牛肉膏，蛋白胨，NaCl2熱，或在磁力攪拌器上加熱溶解。將藥品完全溶解后，補(bǔ)充水到所需要的總體積，如果配置固體培養(yǎng)基時(shí)，將稱好的瓊脂放入已溶的藥品中，再加熱溶化，最后補(bǔ)足所損失的水分。在制備用三角瓶盛固體培養(yǎng)基時(shí)，壹般也可先將壹定量的液體培養(yǎng)1.5%～2.0%加熱溶化，而是滅菌和加熱溶化同時(shí)進(jìn)行，節(jié)省時(shí)間。在瓊脂溶化過程中，應(yīng)控制配制培養(yǎng)基時(shí)，不可用銅或鐵鍋加熱溶化，以免離子進(jìn)入培養(yǎng)基中。3pH45液體分裝分裝高度以試管高度的1/4左右壹般以不超過三角瓶容積的壹半為宜，如果是用于振蕩培養(yǎng)用，則根據(jù)通氣量的要求酌情減少；有的液體培養(yǎng)基在滅菌后，需要補(bǔ)加壹定量的其他無菌成分，如抗生素等，則裝量壹定要準(zhǔn)確。分裝過程中，注意不要使培養(yǎng)基沾在管（瓶）口0.103Mpa,121℃，20min50℃左右（以防斜面上冷凝水太多，將試37℃24～28h，20g1000ml121℃30牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，阿斯畢無氮培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿，??1．05kg/cm2，121．3℃，2037℃24012N21（Ashby）23（一）（第二次實(shí)驗(yàn)做150℃2（二）（第三次實(shí)驗(yàn)做150℃）A: （1、2、3、4）B：連續(xù)劃線法（1、2（ 、鏡檢，得到純種培養(yǎng)（第四次實(shí)驗(yàn)做1、平板上出現(xiàn)單菌落，按無菌操作移入阿斯畢培養(yǎng)基斜面試管中，28℃42、鏡檢：將斜面菌株進(jìn)行涂片、染色、鏡檢。如是粗短桿狀或球狀的單壹形態(tài)的菌體細(xì)胞較大，常呈單個(gè)或“8需要進(jìn)壹步劃線純化。實(shí)驗(yàn)三顯微鏡的使用（詳見細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)）pH步驟2～3（蒸餾水1～2min，1min。六結(jié)果：

95％乙醇（或丙酮乙則細(xì)菌呈紫色，稱為革蘭氏陽性菌，該反應(yīng)稱為革蘭氏陽性或正反應(yīng)（G+表示；如細(xì)菌（-表示細(xì)胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密,95％乙醇（或丙酮乙醇它不含類脂.故乙醇處理后復(fù)合物不會(huì)溶出縫隙.反之,G-細(xì)胞壁薄,外膜層的類脂含量高,肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)差,以類脂為主的外膜溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋復(fù)合物的溶出.（Gramvariablebacteria1﹑（E.coli（壹）﹑1﹑混合涂片法：取壹潔凈載玻片，滴壹小滴蒸餾水于玻片中央。按無菌操作要求，先用接（二）﹑干燥﹑2～3（三）﹑1﹑12﹑1時(shí)間20～30秒鐘。??即用水緩緩沖洗。注意脫色時(shí)間不可過長，以免呈現(xiàn)假陰性。4﹑3