江蘇省淮安市淮陰中學(xué)2025屆生物高三上期末考試模擬試題含解析

江蘇省淮安市淮陰中學(xué)2025屆生物高三上期末考試模擬試題注意事項1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．某生物興趣小組的同學(xué)從資料上獲知：二氯二乙胺能夠阻止參與DNA復(fù)制的酶與DNA相互作用。他們推測二氯二乙胺能抑制癌細胞的增殖，能作為癌癥的一種化療藥物。他們對二氯二乙胺作用于癌細胞的適應(yīng)濃度進行了探究。下列是興趣小組同學(xué)們的實驗設(shè)計思路，其中正確的是（）A．取小鼠肝臟的腫瘤細胞為實驗組，正常肝臟細胞為對照組B．將實驗組細胞放在含有不同濃度二氯二乙胺的生理鹽水中進行培養(yǎng)C．在進行細胞培養(yǎng)時應(yīng)放在25℃恒溫箱中培養(yǎng)，并保證氧氣濃度正常D．實驗開始時和實驗結(jié)束后都要用抽樣調(diào)查的方法對每組細胞進行計數(shù)并記錄2．將相同的紫色洋蔥外表皮細胞分別放置在清水、1．3g/mL蔗糖溶液中進行滲透實驗，一段時間后得到圖所示的結(jié)果。下列敘述正確的是（）A．乙細胞液泡中的色素含量不斷增大B．甲細胞在膨脹過程中細胞內(nèi)外濃度差逐漸減小C．外界溶液與細胞液只要存在濃度差，細胞就會發(fā)生滲透作用D．甲細胞在膨脹過程中水分子從其分子數(shù)相對較多向相對較少處運動3．蝗蟲的性別決定屬于XO型，雄蝗蟲（22+X），雌蝗蟲（22+XX），控制體色褐色（A）和黑色（a）的基因位于常染色體上，控制復(fù)眼正常（B）和異常（b）的基因位于X染色體上，且基因b使精子致死。下列敘述錯誤的是（）A．蝗蟲基因組測序，應(yīng)測定12條染色體的DNA序列B．蝗蟲的群體中，與體色、眼型相關(guān)的基因型最多有15種C．褐色復(fù)眼正常雌蝗蟲和黑色復(fù)眼異常雄蝗蟲雜交，后代可能有4種表現(xiàn)型D．黑色復(fù)眼異常雄蝗蟲減數(shù)分裂時，產(chǎn)生的次級精母細胞基因組成是aa和aaXbXb4．如圖為某家族中一種單基因遺傳病的系譜圖，下列說法正確的是（）A．對患者家系進行調(diào)查可得出人群中該病的發(fā)病率B．I-2、Ⅱ-6均為雜合子，且Ⅱ-4和Ⅲ-8基因型相同的概率是2/3C．由Ⅱ-5和Ⅱ-6及Ⅲ-9個體，可推知理論上，該病男女患病概率相等D．禁止近親結(jié)婚是預(yù)防該遺傳病的最有效途徑5．生長素能促進細胞伸長生長，其作用機理為：生長素通過細胞壁，與細胞膜上的受體結(jié)合，通過進一步信號傳遞促進質(zhì)子泵基因的表達，質(zhì)子泵是細胞膜上轉(zhuǎn)運H+的載體，可將H+從膜內(nèi)運到膜外，使細胞壁酸化，酸化后的細胞壁變得松弛從而有利于伸展。下列說法正確的是（）A．據(jù)題意分析，生長素通過細胞壁的方式是協(xié)助擴散B．生長素和雙縮脲試劑反應(yīng)呈紫色C．質(zhì)子泵的合成和運輸與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)D．生長素與細胞膜上的受體結(jié)合的過程體現(xiàn)了細胞膜具有控制物質(zhì)進出的功能6．下列有關(guān)性別決定與伴性遺傳的敘述（不考慮突變），正確的是A．性染色體上的基因都與性別決定有關(guān)B．性染色體上基因的遺傳遵循自由組合定律C．伴X染色體隱性遺傳病，人群中女患者遠遠多于男患者D．伴X染色體顯性遺傳病，男患者的女兒均患病，男患者的兒子可能患病二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）如圖所示：甲圖是細胞呼吸示意圖，乙圖是某細胞器結(jié)構(gòu)示意圖，丙圖為光照強度與水稻光合作用強度的關(guān)系。請回答：（1）圖甲中A是_________，其產(chǎn)生部位為____________。（2）水參與圖甲中第④階段的反應(yīng)，該過程發(fā)生在乙圖中的_________（填圖中字母）處。（3）蘋果貯藏久了，會有酒味產(chǎn)生，其原因是發(fā)生了圖甲中_________過程；糧食貯藏過程中有時會發(fā)生糧堆濕度增大現(xiàn)象，這是因為__________________________________。（4）光合作用光反應(yīng)階段的場所為_________，其上的光合色素主要吸收_________光。（5）圖丙B點時，該植物光合作用速率等于細胞呼吸速率。BC段限制該植物光合速率的環(huán)境因素主要是_________。8．（10分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學(xué)家欲獲得高效表達蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________。9．（10分）某研究小組利用“濾膜法”對受污染的河流水體進行了大腸桿菌活菌數(shù)目的測定?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究人員向葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液中加入適量的溴麝香草酚藍水溶液后，裝人圖甲所示的試管中，再將污水樣滴加進去振蕩搖勻，一段時間后，若觀察到溶液顏色變化情況為_________，，說明微生物在培養(yǎng)過程中產(chǎn)生了CO2。若要用重鉻酸鉀檢測微生物在培養(yǎng)過程中是否產(chǎn)生了酒精，具體做法是_________。(2)利用圖乙所示的“濾膜法”測定大腸桿菌的數(shù)目時，應(yīng)先制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的滅菌方法是_________，滅菌后待培養(yǎng)基冷卻至_________℃左右時，在_________附近倒平板。(3)圖乙中濾膜的孔徑應(yīng)_________(填“大于”“小于”或“等于”)大腸桿菌。若將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間，然后統(tǒng)計_________色的菌落數(shù)目，就可估算出單位體積樣品中大腸桿菌的數(shù)目，但這樣得到的統(tǒng)計值往往要比實際值低，原因是_________。10．（10分）胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產(chǎn)生胡蘿卜素的微生物體中提取獲得。利用紅酵母發(fā)酵，是提取天然β-胡蘿卜素的方法之一。二者流程如下：（l）篩選產(chǎn)胡蘿卜素的紅酵母時，可選用____法進行接種（答出一種即可），通過對其菌落的____進行觀察，初步確定某一菌株是否為紅酵母菌株。（2）碳源的種類對β-胡蘿卜素的產(chǎn)量有著一定的影響，有關(guān)研究結(jié)果如下表：碳源麥芽糖蔗糖淀粉β-胡蘿卜素含量（mg·L-3）3．252．833．68據(jù)表分析，最佳碳源是_____。若要進一步探究最佳氮源，可以用蔗糖為碳源，分別用_____進行實驗，檢測并比較β-胡蘿卜素含量。（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，干燥過程應(yīng)控制好溫度和____，以防止胡蘿卜素分解；萃取過程中在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置，為了防止________（2）圖中X過程表示____，其目的是____。11．（15分）小鼠為XY型性別決定生物，其彎曲尾/正常尾由一對等位基因B、b控制。同學(xué)甲用一只彎曲尾雌鼠與一只正常尾雄鼠交配，子代的表現(xiàn)型及其比例如下：性別尾型1/2雌鼠1/2彎曲尾、1/2正常尾1/2雄鼠1/2彎曲尾、1/2正常尾回答下列問題：（1）若控制彎曲尾/正常尾性狀的基因位于常染色體上，根據(jù)雜交結(jié)果，___________（填“能”或“不能”）確定彎曲尾性狀的顯隱性。（2）若控制彎曲尾/正常尾性狀的基因位于X染色體上，根據(jù)上述雜交結(jié)果判斷，顯性性狀是________，請寫出此種情況下甲同學(xué)用的兩只小鼠的基因型：________________。（3）同學(xué)乙取一只彎曲尾雌鼠與多只正常尾雄鼠交配，發(fā)現(xiàn)子代雌雄鼠均為彎曲尾。同學(xué)丙欲從同學(xué)甲、乙獲的子代小鼠中選擇材料，設(shè)計一個雜交實驗來探究控制彎曲尾/正常尾性狀的這對等位基因位于常染色體還是X色體上，請完善其實驗方案。①雜交組合：_______________。②預(yù)期結(jié)果及結(jié)論：若子代_______________，則這對等位基因位于X染色體上；若子代_______________，這對等位基因位于常染色體上。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

分析題目可知，本題是通過實驗研究癌癥治療的方法，實驗設(shè)計應(yīng)遵循對照原則和單一變量原則，由實驗?zāi)康目芍?，自變量是不同濃度的二氯二乙胺，因變量是癌細胞增殖的?shù)量?！驹斀狻緼、應(yīng)該是含有腫瘤細胞的培養(yǎng)液中添加不同濃度的二氯二乙胺溶液作為實驗組，對照組中加入等量的生理鹽水，A錯誤；B、應(yīng)該是將細胞放在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，B錯誤；C、動物細胞的培養(yǎng)應(yīng)該在37℃恒溫箱中培養(yǎng)，C錯誤；D、對于細胞的計數(shù)可以采用抽樣檢測法利用血球計數(shù)板計數(shù)，實驗前后實驗后都計數(shù)并記錄，D正確。故選D。2、B【解析】

根據(jù)題干信息分析，將紫色洋蔥外表皮細胞放置在清水中會吸水，由于細胞壁的保護作用，細胞的體積略有增大，如細胞甲所示；將紫色洋蔥外表皮細胞放置在1.3g/mL蔗糖溶液中，由于細胞液濃度小于蔗糖溶液濃度，細胞失水而發(fā)生質(zhì)壁分離，如乙細胞所示?！驹斀狻緼、乙細胞液泡中的色素含量不變，濃度增加，A錯誤；B、甲細胞在膨脹過程中不斷吸水，因此細胞內(nèi)外濃度差逐漸減小，B正確；C、甲細胞的細胞液與外界溶液存在濃度差，但是其并不能繼續(xù)通過滲透作用吸水，C錯誤；D、甲細胞在膨脹過程中，水分子從其分子數(shù)相對較多處向相對較少處擴散，該過程中水分子進入細胞的數(shù)量多于出細胞的數(shù)量，D錯誤。故選B。3、B【解析】

分析題文：已知果蠅的復(fù)眼正常B和異?；騜僅位于X染色體上，且基因b使精子致死，正常情況下不會出現(xiàn)復(fù)眼異常雌果蠅?！驹斀狻緼、本題基因組測序應(yīng)測一組常染色體（11條）和Ⅹ染色體，A正確；B、不考慮精子致死情況，最多有3×5=15種（體色相關(guān)基因型：AA、AA、aa；眼型相關(guān)基因型：XB、Xb、XBXB、XBXb、XbXb），但是由于基因b使精子致死，所以不存在XbXb基因型，所以最多有3×4=12種，B錯誤；C、雜交組合為：A_XBX-×aaXb，所以后代基因型為AaXB、aXB、AaX-、aX-，當(dāng)兩個不確定的基因均為隱性基因時，后代就有4種表現(xiàn)型，C正確；D、黑色復(fù)眼異常雄體（aaXb），在減數(shù)第一次分裂前的間期染色體復(fù)制，減數(shù)第一次分裂后期同源染色體分離，產(chǎn)生的次級精母細胞基因組成是aa和aaXbXb，D正確。故選B。4、C【解析】

據(jù)圖分析，5號和6號患病，而9號正常，即“有中生無為顯性，顯性遺傳看男病，男病女正非伴性”，因此可判斷該病為常染色體顯性遺傳病?！驹斀狻緼、要調(diào)查該病的發(fā)病率應(yīng)在人群中隨機抽樣調(diào)查，A錯誤；B、據(jù)上分析可知，該病是常染色體顯性遺傳病，故I-2可能是純合子也可能是雜合子，Ⅱ-4、Ⅱ-5、Ⅱ-6均為雜合子，Ⅲ-8是雜合子的概率是2/3，B錯誤；C、由Ⅱ-5和Ⅱ-6及Ⅲ-9個體，可推知該病為常染色體顯性遺傳病，理論上該病男女患病概率相等，C正確；D、禁止近親結(jié)婚是預(yù)防隱性遺傳病的最有效途徑，該病是顯性遺傳病，D錯誤。故選C。5、C【解析】

生長素是第一個被發(fā)現(xiàn)的植物激素。生長素中最重要的化學(xué)物質(zhì)為3-吲哚乙酸。生長素有調(diào)節(jié)莖的生長速率、抑制側(cè)芽、促進生根等作用，在農(nóng)業(yè)上用以促進插枝生根，效果顯著。質(zhì)子泵是細胞膜上轉(zhuǎn)運H+的載體，屬于膜蛋白，其合成與核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等有關(guān)，還需要線粒體提供能量。【詳解】A、生長素通過細胞壁的方式不是跨膜運輸，協(xié)助擴散是物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞街?，A錯誤；B、生長素是由色氨酸合成的，本質(zhì)為吲哚乙酸（小分子有機物），不是蛋白質(zhì)，不能和雙縮脲試劑反應(yīng)呈紫色，B錯誤；C、質(zhì)子泵是細胞膜上轉(zhuǎn)運H+的載體，其合成和運輸與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)，需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的加工，C正確；D、生長素與細胞膜上的受體結(jié)合的過程體現(xiàn)了細胞膜具有細胞間信息交流的功能，D錯誤。故選C。6、D【解析】

常染色體遺傳病，由于致病基因位于常染色體上，遺傳與性別無關(guān)；X染色體上的隱性遺傳病的特點是：男患者多于女患者，表現(xiàn)為交叉遺傳，女患者的父親和兒子都是患者；X染色體上的顯性遺傳病的特點是女患者多于男患者，男患者的母親和女兒都是患者；Y染色體上的遺傳表現(xiàn)為全男遺傳?！驹斀狻颗c決定性別的基因位于性染色體上，但是性染色上的基因不都與性別決定有關(guān)，如色盲基因，A錯誤；性染色體上基因的遺傳不一定遵循基因自由組合定律，只有非同源染色體上的非等位基因的遺傳才遵循基因自由組合定律，B錯誤；X染色體的隱性遺傳病，男患者多于女患者，C錯誤；伴X染色體顯性遺傳病，男性患者的母親和女兒都患病，男患者的兒子可能患病，D正確。故選：D。二、綜合題：本大題共4小題7、丙酮酸（和[H]）細胞質(zhì)基質(zhì)b①③糧食在貯藏過程中進行有氧呼吸生成了水葉綠體的類囊體薄膜紅光和藍紫光照強度【解析】

據(jù)圖分析：圖甲中，A是丙酮酸，①是呼吸作用第一階段，②是產(chǎn)乳酸的無氧呼吸，③是產(chǎn)酒精的無氧呼吸，④⑤是有氧呼吸的第二、三階段。圖乙中，abc分別是外膜、基質(zhì)和嵴。圖丙中，B表示光補償點，C表示光飽和點?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析可知，圖甲中A表示丙酮酸，產(chǎn)生的部位是細胞質(zhì)基質(zhì)。（2）水參與圖甲中有氧呼吸第二階段④的反應(yīng)，該過程發(fā)生在乙圖中的線粒體基質(zhì)b中。（3）蘋果貯藏久了，會有酒味產(chǎn)生，這是因為發(fā)生了無氧呼吸產(chǎn)生了酒精，即圖甲中①③過程。糧食貯藏過程中有時會發(fā)生糧堆濕度增大現(xiàn)象，這是因為有氧呼吸第三階段氧氣和前兩階段的[H]結(jié)合生成了大量的水的緣故。（4）光反應(yīng)的場所發(fā)生在葉綠體的類囊體薄膜，光合色素主要吸收紅光和藍紫光。（5）圖丙中當(dāng)光照強度為B時，即光補償點，植物光合作用速率等于細胞呼吸速率。圖中C點為光飽和點，在BC段隨著光照強度的增加，葉肉細胞的光合作用不斷增強，因此該段限制植物光合速率的環(huán)境因素主要是光照強度?！军c睛】本題考查光合作用和呼吸作用的知識點，要求學(xué)生掌握有氧呼吸和無氧呼吸的過程以及發(fā)生的場所，特別是掌握線粒體的結(jié)構(gòu)組成，把握有氧呼吸的三個階段發(fā)生是物質(zhì)變化，識記不同生物無氧呼吸的產(chǎn)物，理解細胞呼吸在生產(chǎn)和生活中的應(yīng)用；掌握光合作用的過程以及影響因素，能夠掌握識圖分析判斷圖中發(fā)生的生理過程和結(jié)構(gòu)名稱，能夠正確分析曲線的變化和關(guān)鍵點的含義，判斷影響光合作用的環(huán)境因素，這是該題考查的重點。8、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)．此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細胞導(dǎo)入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?！驹斀狻浚?）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術(shù)。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實驗中的對照原則，若要比較新蛋白A的表達效率是否提高，則需設(shè)置三組實驗實驗變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒，僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對照（僅含空質(zhì)粒，以排除空質(zhì)?？赡墚a(chǎn)生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用抗原——抗體雜交方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較抑菌圈的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，是因為蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高?！军c睛】本題主要考查基因工程、PCR技術(shù)等相關(guān)知識，考生需要理解和記憶相關(guān)知識，并學(xué)會應(yīng)用所學(xué)知識正確答題。9、由藍變綠再變黃取2mL培養(yǎng)液的濾液注入干凈的試管中，再向試管中滴加0.5mL溶有重鉻酸鉀的濃硫酸溶液，振蕩搖勻后規(guī)察溶液顔色的變化高壓蒸汽滅菌50酒精燈火焰小于黑兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落【解析】

二氧化碳可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃，酒精可以使得重鉻酸鉀溶液由橙色變?yōu)榛揖G色；伊紅為酸性染料，美藍為堿性染料，大腸桿菌在含有伊紅美藍培養(yǎng)基上形成的菌落呈深紫色（黑色），并有金屬光澤，伊紅-美藍是專一鑒別大腸桿菌的指示劑；常用的純化微生物時的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法?！驹斀狻浚?）微生物細胞呼吸產(chǎn)生的CO2可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃；微生物無氧呼吸產(chǎn)生的酒精可以用重鉻酸鉀進行檢測，即取2mL培養(yǎng)液的濾液注入干凈的試管中，再向試管中滴加0.5mL溶有重鉻酸鉀的濃硫酸溶液，振蕩搖勻后規(guī)察溶液顔色的變化。（2）微生物培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近進行倒平板。（3）分析圖解可知，實驗將待測水樣進行過濾，得到的濾膜進行微生物培養(yǎng)，因此水中的大腸桿菌應(yīng)留在濾膜上，即圖乙中濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌；在伊紅美藍培養(yǎng)基上，可以鑒定出菌落為黑色的具有金屬光澤的大腸桿菌菌落，因此該小組通過統(tǒng)計黑色菌落的數(shù)目，計算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目。由于培養(yǎng)基中兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落，因此理論上他們的統(tǒng)計值比實際值偏低。【點睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握二氧化碳、酒精以及大腸桿菌鑒定的原理，能夠分析利用稀釋涂布平板法計數(shù)會導(dǎo)致結(jié)果偏小的原因。10、稀釋涂布平板法（或平板劃線法）顏色蔗糖不同氮源時間加熱時有機溶劑揮發(fā)過濾濾去不溶物【解析】

接種微生物常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無機鹽等。胡蘿卜素的提取流程為胡蘿卜-粉碎-干燥-萃取-過濾-濃縮-胡蘿卜素-鑒定?！驹斀狻浚?）微生物常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法?？梢詫t酵母菌株的菌落顏色進行初步鑒定。（2）根據(jù)表格分析，蔗糖作為碳源產(chǎn)生的β-胡蘿卜素含量最多，可知表中的最佳碳源是蔗糖。要研究最佳氮源，用蔗糖做碳源，比較不同氮源進行實驗。（3）新鮮的胡蘿卜含有大量水分，在干燥時要注意控制溫度，溫度太高、干燥時間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解。萃取過程中在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置，為了防止加熱時有機溶劑揮發(fā)。（2）提取胡蘿卜素的實驗流程為：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素，其中過濾的目的是除去不溶物?！军c睛】本題主要考查微生物的接種和培養(yǎng)基及胡蘿卜素的提取與鑒定，意在強化學(xué)生對相關(guān)知識的識記、理解與運用。11、不能彎曲尾XBXb和X