阜新市重點中學(xué)2025屆生物高三上期末教學(xué)質(zhì)量檢測模擬試題含解析

阜新市重點中學(xué)2025屆生物高三上期末教學(xué)質(zhì)量檢測模擬試題注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．如圖曲線沒有標注橫縱坐標具體含義，下列關(guān)于此曲線的描述正確的是（）A．橫坐標表示時間，縱坐標表示洋蔥細胞在一定濃度蔗糖溶液中的質(zhì)壁分離和復(fù)原過程中失水量B．橫坐標表示溫度，縱坐標表示酶促反應(yīng)的速率，曲線可表示酶促反應(yīng)的速率隨著溫度的升高而變化的趨勢C．橫坐標表示生長素濃度，縱坐標表示生長素促進或者抑制，曲線可表示生長素的兩重性D．橫坐標表示pH，縱坐標表示酶的活性，曲線可表示pH由12逐漸降低到2過程中酶的活性變化的趨勢2．TATA框是多數(shù)真核生物基因的一段DNA序列，位于基因轉(zhuǎn)錄起始點上游，其堿基序列為TATAATAAT，RNA聚合酶與TATA框牢固結(jié)合之后才能開始轉(zhuǎn)錄。相關(guān)敘述正確的是A．含TATA框的DNA局部片段的穩(wěn)定性相對較低，容易解旋B．TATA框?qū)儆诨騿幼拥囊徊糠?，包含DNA復(fù)制起點信息C．TATA框經(jīng)RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄形成的片段中含有起始密碼D．某基因的TATA框經(jīng)誘變?nèi)笔Ш螅⒉挥绊戅D(zhuǎn)錄的正常進行3．圖為蛙坐骨神經(jīng)腓腸肌標本，靈敏電流計的兩個電極均置于坐骨神經(jīng)的神經(jīng)纖維外側(cè)且距離較近，下列說法正確的是（）A．蛙坐骨神經(jīng)由多個運動神經(jīng)元被結(jié)締組織包圍而成B．電刺激①處，電流計先檢測到電位變化，后腓腸肌收縮C．電刺激①處，電流計兩次偏轉(zhuǎn)方向不同但幅度肯定相同D．電刺激②處，腓腸肌先發(fā)生反射，后電流計檢測到電位變化4．下列對相關(guān)實驗的敘述，正確的是（）A．向馬鈴薯勻漿中滴加碘液可以檢測淀粉是否轉(zhuǎn)化成了葡萄糖B．8%的鹽酸可加速染色劑進入細胞，有利于RNA與甲基綠結(jié)合C．探究溫度影響酶活性的實驗中，應(yīng)在改變反應(yīng)物溫度后再加入酶D．重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精反應(yīng)先變成綠色再變成黃色5．細胞要經(jīng)歷產(chǎn)生、生長、成熟、增殖、衰老直至死亡的生命歷程。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．細胞分化不改變細胞的遺傳物質(zhì)，能提高生理功能的效率B．衰老細胞中多種酶的活性顯著降低，呼吸速率減慢C．細胞凋亡對于維持人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)有重要意義D．大腸桿菌分裂過程沒有出現(xiàn)紡錘絲和染色體，屬于無絲分裂6．在細胞的生命歷程中，會出現(xiàn)增殖、分化、衰老、凋亡等現(xiàn)象。下列敘述正確的是（）A．端粒是位于染色體兩端的特殊DNA序列，隨著細胞的衰老端粒逐漸延長B．胰島B細胞中只有與胰島素合成有關(guān)的基因處于活動狀態(tài)C．細胞的增殖過程既受細胞核的控制，也受溫度等條件的影響D．被病原體感染細胞的清除要依靠細胞免疫，與細胞凋亡無關(guān)7．新型冠狀病毒感染的肺炎是一種急性感染性肺炎，其病原體為2019新型冠狀病毒（SARS-CoV-2注：國際病毒分類委員會命名），屬于單股正鏈RNA病毒。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．人體的細胞能為SARS-CoV-2的繁殖提供模板、原料和能量等B．SARS-CoV-2病毒侵入人體后，在內(nèi)環(huán)境中不會發(fā)生增殖C．該病毒在人體細胞的核糖體上合成多肽鏈需要RNA聚合酶的催化D．患者在感染初期須要用抗生素進行治療以阻止SARS-CoV-2病毒的擴散8．（10分）如圖為研究某一種群遷入兩個新環(huán)境（理想環(huán)境和適宜生存但條件有限環(huán)境）后圍繞種群數(shù)量變化而建立的相關(guān)數(shù)學(xué)模型，其中對Y的含義表述錯誤的一項是（）A．若①為理想條件下種群的某模型，則Y代表種群數(shù)量B．若②為有限條件下種群的某模型，則Y代表種群數(shù)量C．若③為理想條件下種群的某模型，則Y可代表λ或λ-1D．若④為有限條件下種群的某模型，則Y可代表增長速率二、非選擇題9．（10分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細胞死亡。（1）將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細胞，這樣打靶載體和與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行__________保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細胞”或“生殖細胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。10．（14分）在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光。熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的應(yīng)用。請回答下列問題：（1）熒光素酶基因可以從基因文庫中獲取，也可以通過________方法得到，再利用PCR技術(shù)擴增即可，擴增熒光素酶基因利用的原理是__________________。（2）在基因工程操作過程中，需要用________酶和________酶構(gòu)建基因表達載體，基因表達載體要有________，以便篩選出含有目的基因的受體細胞。（3）熒光素酶基因也可以作為目的基因轉(zhuǎn)入某些動植物細胞中表達產(chǎn)生熒光素酶。將目的基因?qū)胫参锛毎?，目前常用的目的基因載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的________上，然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)雱游锛毎募夹g(shù)中，應(yīng)用最多的是_______。11．（14分）2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）是由SARS-CoV-2病毒引起的，能否快速、準確地檢測出病原體成為疾病防控的關(guān)鍵。請回答：（1）下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測的部分流程?？茖W(xué)家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA，再對cDNA進行PCR擴增，這項技術(shù)稱為RT-PCR。（2）進行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系。（3）RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產(chǎn)物濃度，原理如下：Taqman熒光探針為一段與_____________互補的核苷酸單鏈，兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結(jié)構(gòu)完整時，R發(fā)射的熒光被Q吸收；而PCR擴增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷，使R和Q分離，R基團發(fā)射的熒光不被淬滅，這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。熒光信號達到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明含有病毒的概率越____________。（4）一次核酸檢測歷時需16小時，為快速檢測可采用抗原-抗體雜交技術(shù)，這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體.請寫出生產(chǎn)這種抗體的思路：__________________。12．“渥堆”是普洱茶生產(chǎn)過程中的一道特殊工序，是形成普洱茶品質(zhì)特征最關(guān)鍵的一步。在“渥堆”過程中，曲霉、青霉、酵母菌、細菌等微生物的活動使茶葉所含茶多酚等成分發(fā)生了一系列復(fù)雜的物理、化學(xué)變化，促使了普洱茶甘滑、醇厚和陳香等良好品質(zhì)特征的形成。請回答下列問題：（1）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可用于“渥堆”茶樣中細菌的分離，其中的牛肉膏、蛋白胨可為細菌生長主要提供______________。配好的培養(yǎng)基常用______________法滅菌。接種培養(yǎng)后可根據(jù)______________顏色、形態(tài)、大小等特征及菌體革蘭染色情況細胞形態(tài)特征等進行初步鑒定。（2）下圖為“渥堆”茶樣分離出的某種微生物亞顯微結(jié)構(gòu)意圖，可根據(jù)圖中______________（填序號）結(jié)構(gòu)判斷其肯定不是細菌。（3）茶多酚中的兒茶素（C）有一定的抗菌作用，但作用較弱。研究人員用稀土離子Yb3+對兒茶素（C）進行化學(xué)修飾，形成配合物Yb3+一C，并探究其抗菌效果。將金黃色葡萄球菌制成菌懸液，分別加入等量的C、Yb3+和一定濃度的Yb3+-C，測定24h內(nèi)金黃色葡萄球菌存活數(shù)量變化（用A600值表示，數(shù)值越大，表示細菌數(shù)量越多），結(jié)果如下圖。由圖可以看出，______________能最有效縮短滅菌時間。研究人員利用透射電鏡觀察了各組金黃色葡萄球菌細胞的超微結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示：（a）未加抗菌劑：細菌菌體較小，其細胞質(zhì)分布均勻；（b）C處理：細胞壁和細胞膜等結(jié)構(gòu)不光滑，略顯粗糙；（c）Yb3+處理：細胞質(zhì)出現(xiàn)較明顯的固縮及空泡化現(xiàn)象；（d）Yb3+-C處理：細胞壁及細胞膜等結(jié)構(gòu)發(fā)生破裂，細胞質(zhì)出現(xiàn)了嚴重的固縮及空泡化現(xiàn)象。由此可見，兒茶素（C）作用的主要位點是______________，推測Yb3+-C具有更強抗菌作用的機理是______________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

1、影響酶促反應(yīng)速率的因素主要有：溫度、pH、底物濃度和酶濃度。(1)溫度(pH)能影響酶促反應(yīng)速率，在最適溫度(pH)前，隨著溫度(pH)的升高，酶活性增強，酶促反應(yīng)速率加快；到達最適溫度(pH)時，酶活性最強，酶促反應(yīng)速率最快；超過最適溫度(pH)后，隨著溫度(pH)的升高，酶活性降低，酶促反應(yīng)速率減慢。另外低溫酶不會變性失活，但高溫、pH過高或過低都會使酶變性失活。(2)底物濃度能影響酶促反應(yīng)速率，在一定范圍內(nèi)，隨著底物濃度的升高，酶促反應(yīng)速率逐漸加快，但由于酶濃度的限制，酶促反應(yīng)速率達到最大值后保持相對穩(wěn)定。(3)酶濃度能影響酶促反應(yīng)速率，在底物充足時，隨著酶濃度的升高，酶促反應(yīng)速率逐漸加快。2、生長素的兩重性：生長素既能促進生長也能抑制生長；既能促進發(fā)芽也能抑制發(fā)芽；百既能防止落花落果也能疏花疏果。【詳解】A、若橫坐標表示時間，則洋蔥細胞在一定濃度蔗糖溶液中不會表現(xiàn)出質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象，A錯誤；B、橫坐標表示溫度，縱坐標表示酶促反應(yīng)的速率，曲線可表示酶促反應(yīng)的速率隨著溫度的升高先增加后減少，B正確；C、橫坐標表示生長素濃度，縱坐標只能表示生長素促進的程度先增加后減少，不能表現(xiàn)生長素的抑制作用，C錯誤；D、橫坐標表示pH，縱坐標表示酶的活性，pH12時可能導(dǎo)致酶失活，逐漸降低到2過程中酶的活性將不再變化，D錯誤；故選B。【點睛】結(jié)合酶促反應(yīng)的影響因素、生長素的兩重性及植物細胞的失水和吸水的過程分析題圖是解題的關(guān)鍵。2、A【解析】

分析題意：TATA框是基因的非編碼區(qū)的基因啟動子的一部分，雖然不參與轉(zhuǎn)錄，但決定基因轉(zhuǎn)錄的開始，為RNA聚合酶的結(jié)合處之一，RNA聚合酶與TATA框牢固結(jié)合之后才能開始轉(zhuǎn)錄。【詳解】A、含TATA框的DNA局部片段的穩(wěn)定性相對較低，容易解旋，A正確；B、TATA框?qū)儆诨騿幼拥囊徊糠?，但屬于真核生物的非編碼區(qū)，不包含DNA復(fù)制起點信息，B錯誤；C、TATA框位于真核基因的非編碼區(qū)，經(jīng)RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄形成的片段中沒有起始密碼，起始密碼位于對應(yīng)的基因的編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄形成的mRNA片段中，C錯誤；D、TATA框是基因的非編碼區(qū)的基因啟動子的一部分，雖然不參與轉(zhuǎn)錄，但決定基因轉(zhuǎn)錄的開始，為RNA聚合酶的結(jié)合處之一，RNA聚合酶與TATA框牢固結(jié)合之后才能開始轉(zhuǎn)錄，因此某基因的TATA框經(jīng)誘變?nèi)笔Ш?，會影響轉(zhuǎn)錄的正常進行，D錯誤。故選A。3、B【解析】

興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)形式是電信號，而在神經(jīng)元之間的傳遞是化學(xué)信號；由于神經(jīng)纖維與肌細胞的接觸部位類似于突觸，又神經(jīng)遞質(zhì)只存在于突觸小體的突觸小泡中，只能由突觸前膜釋放作用于突觸后膜，使下一個神經(jīng)元產(chǎn)生興奮或抑制，因此興奮在神經(jīng)元之間的傳遞只能是單向的?！驹斀狻緼、蛙坐骨神經(jīng)是由多根傳出神經(jīng)元的神經(jīng)纖維組成的，A錯誤；B、由于興奮在神經(jīng)纖維上傳導(dǎo)的速度大于在突觸處的傳遞速度，因此電刺激①處，電流計先檢測到電位變化，后腓腸肌收縮，B正確；C、電刺激①處，電流先后經(jīng)過靈敏電流計的兩側(cè)，電流計指針會發(fā)生反向的兩次偏轉(zhuǎn)，幅度可能相同，C錯誤；D、電刺激②處，腓腸肌先發(fā)生反應(yīng)，但是沒有經(jīng)過完整的反射弧，不屬于反射；由于興奮不能由突觸傳到神經(jīng)纖維，所以電流計檢測不到電位變化，D錯誤。故選B。4、C【解析】

淀粉遇碘液變藍，斐林試劑可檢測還原性糖。探究溫度對酶活性的影響時，操作順序一般是先將各組酶保溫在不同溫度下，再與底物混合?！驹斀狻緼、碘液遇淀粉變藍，向馬鈴薯勻漿中滴加碘液可以檢測是否含有淀粉，但不能檢測淀粉是否轉(zhuǎn)化成了葡萄糖，A錯誤；B、8%的鹽酸處理可改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，并使染色體中的DNA和蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與甲基綠結(jié)合，B錯誤；C、探究溫度影響酶活性的實驗中，溫度為自變量，為了保證酶的催化是在預(yù)設(shè)溫度下進行的，應(yīng)先將反應(yīng)物和酶在相應(yīng)的溫度下分別保溫，然后再將酶加入對應(yīng)溫度的反應(yīng)物中，C正確；D、重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與酒精反應(yīng)變成灰綠色，D錯誤。故選C。5、D【解析】

1、衰老細胞的特征：（1）細胞內(nèi)水分減少，細胞萎縮，體積變小，但細胞核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深；（2）細胞膜通透性功能改變，物質(zhì)運輸功能降低；（3）細胞色素隨著細胞衰老逐漸累積；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速率減慢，新陳代謝減慢。2、真核細胞的分裂方式有：有絲分裂、減數(shù)分裂和無絲分裂。原核細胞的分裂方式為二分裂。【詳解】A、細胞分化的實質(zhì)是基因選擇性表達，分化過程中遺傳物質(zhì)不變，細胞分化使多細胞生物體中的細胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高生理功能的效率，A正確；B、衰老細胞中多種酶的活性顯著降低，呼吸速率減慢，B正確；C、細胞凋亡是基因控制的細胞程序性死亡，有利于維持人體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，C正確；D、大腸桿菌為原核生物，沒有細胞核，分裂方式為二分裂，D錯誤。故選D。6、C【解析】

1、細胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細胞分化的實質(zhì)：基因的選擇性表達。2、細胞凋亡是由基因決定的細胞編程序死亡的過程。細胞凋亡是生物體正常的生命歷程，對生物體是有利的，而且細胞凋亡貫穿于整個生命歷程。細胞凋亡是生物體正常發(fā)育的基礎(chǔ)、能維持組織細胞數(shù)目的相對穩(wěn)定、是機體的一種自我保護機制。在成熟的生物體內(nèi)，細胞的自然更新、被病原體感染的細胞的清除，是通過細胞凋亡完成的?！驹斀狻慷肆Ｊ俏挥谌旧w兩端的特殊DNA序列，隨著細胞的衰老端粒逐漸縮短，A錯誤；胰島B細胞中除了與胰島素合成有關(guān)的基因處于活動狀態(tài)外，還有多種基因也處于活動狀態(tài)，如細胞呼吸酶基因、ATP合成酶基因等，B錯誤；細胞的增殖過程既受細胞核的控制，也受溫度等條件的影響，C正確；被病原體感染細胞的清除要依靠細胞免疫，屬于細胞凋亡，D錯誤。故選C?！军c睛】注意：由于基因的選擇性表達，只有胰島B細胞可以表達胰島素基因，但該細胞還可以表達其他基因，如呼吸酶基因等。7、B【解析】

抗生素，是指由微生物（包括細菌、真菌、放線菌屬）或高等動植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其他活性的一類次級代謝產(chǎn)物，能干擾其他生活細胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。臨床常用的抗生素有微生物培養(yǎng)液中的提取物以及用化學(xué)方法合成或半合成的化合物。抗生素等抗菌劑的抑菌或殺菌作用，主要是針對“細菌有而人（或其他動植物）沒有”的機制進行殺傷，包含四大作用機理，即：抑制細菌細胞壁合成，增強細菌細胞膜通透性，干擾細菌蛋白質(zhì)合成以及抑制細菌核酸復(fù)制轉(zhuǎn)錄?！驹斀狻緼、人體的細胞能為SARS-CoV-2的繁殖提供原料和能量等，模板來自病毒本身，A錯誤；B、病毒需寄生在宿主細胞內(nèi)才能繁殖，SARS-CoV-2病毒侵入人體后，在內(nèi)環(huán)境中不會發(fā)生增殖，B正確；C、RNA聚合酶催化的是RNA的形成，是轉(zhuǎn)錄的過程，而該病毒在人體細胞的核糖體上合成多肽鏈是翻譯，需要合成多肽鏈的相關(guān)酶來催化，C錯誤；D、抗生素對病毒無效，D錯誤。故選B。8、A【解析】

“J”型曲線是指數(shù)增長函數(shù)，描述在食物充足，無限空間，無天敵的理想條件下生物無限增長的情況。種群的增長率為恒定的數(shù)值?！癝”型曲線是受限制的指數(shù)增長函數(shù)，描述食物、空間都有限，有天敵捕食的真實生物數(shù)量增長情況，存在環(huán)境容納的最大值K，種群增長速率先增加后減少，在k/2處種群增長速率最大?！驹斀狻緼、曲線①是理想條件下種群的增長速率曲線而非種群數(shù)量變化曲線，因為種群數(shù)量的起點不能為0，A錯誤；B、曲線②為有限條件下的種群數(shù)量變化的S型曲線，B正確；C、曲線③代表理想條件下種群數(shù)量變化的J型曲線的相鄰世代種群數(shù)量的倍數(shù)關(guān)系（即λ）或增長率（即λ-1），它們都穩(wěn)定不變（且必須λ>1），C正確；D、曲線④為種群數(shù)量變化的S型曲線的增長速率曲線，D正確。故選A。【點睛】本題考查種群數(shù)量變化曲線，意在考查學(xué)生識圖和判斷能力。要注意曲線的起點，表示種群數(shù)量的曲線一般不是從0開始。二、非選擇題9、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細胞，這樣打靶載體與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細胞恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。【點睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識，重點考查基因工程的操作步驟，要求考生識記基因表達載體的構(gòu)建過程，識記胚胎工程的操作過程，屬于考綱識記層次的考查。10、人工合成DNA（雙鏈）復(fù)制限制DNA連接標記基因T-DNA顯微注射技術(shù)【解析】

1、基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）熒光素酶基因?qū)儆谀康幕?。目的基因可以從基因文庫中獲取，也可以通過人工合成方法得到，再利用PCR技術(shù)擴增即可。利用PCR技術(shù)擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復(fù)制。（2）構(gòu)建基因表達載體時，需要用限制酶分別切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶進行連接，基因表達載體要有標記基因，以便篩選出含有目的基因的受體細胞。（3）將目的基因?qū)胫参锛毎?，目前常用的目的基因載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，目的基因需插入到該基因載體的T-DNA上，然后再轉(zhuǎn)移至受體細胞中。將目的基因?qū)雱游锛毎募夹g(shù)中，應(yīng)用最多的是顯微注射技術(shù)。【點睛】本題結(jié)合基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理、操作工具、操作步驟及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。11、逆轉(zhuǎn)錄（或：反轉(zhuǎn)錄）逆轉(zhuǎn)錄酶Taq酶（ORF1ab和核殼蛋自基因N）的特異性引物目的基因大①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒）：②提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞；③將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【解析】

1.將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性、低溫復(fù)性、適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈式反應(yīng)規(guī)律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實時檢測與之對應(yīng)的隨擴增而變化熒光信號強度，求得Ct值，同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。2.單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術(shù)來制備，單克隆抗體技術(shù)是在細胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞，雜交瘤細胞既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群，可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體?！驹斀狻浚?）以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄或反轉(zhuǎn)錄，故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉(zhuǎn)錄，再對cDNA進行PCR擴增，這項技術(shù)稱為RT-PCR。（2）RT-PCR是擴增DNA的過程，因為加入的模板是RNA，故需要加入的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入（ORF1ab和核殼蛋自基因N）的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系，從而實現(xiàn)了相關(guān)基因的擴增。（3）RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產(chǎn)物濃度，原理如下：Taqman熒光探針為一段與目的基因互補的核苷酸單鏈，兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結(jié)構(gòu)完整時，R發(fā)射的熒光被Q吸收；而PCR擴增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷，使R和Q分離，R基團發(fā)射的熒光不被淬滅，這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。若熒光信號達到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴增次數(shù)少，說明更多的熒光探針與目的基因進行了堿基互補配對，可推測獲得的核酸產(chǎn)物中含有病毒的概率越大。（4）若采用抗原-抗體雜交技術(shù)進行病毒檢測，需要制備能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體，單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢，故設(shè)計的思路是設(shè)法獲得能產(chǎn)生該特異性抗體的雜交瘤細胞，步驟如下：①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒），目的是要獲得能能產(chǎn)