JJF(滬蘇浙皖) 4009-2023 熒光法葉綠素a測(cè)定儀校準(zhǔn)規(guī)范

滬蘇浙皖地方計(jì)量校準(zhǔn)規(guī)范JJF（滬蘇浙皖）4009－2023熒光法葉綠素a測(cè)定儀校準(zhǔn)規(guī)范CalibrationSpecificationforFluorescenceInstrumentsofChlorophylla2023-08-31發(fā)布2024-02-29實(shí)施上海市市場(chǎng)監(jiān)督管理局江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布浙江省市場(chǎng)監(jiān)督管理局安徽省市場(chǎng)監(jiān)督管理局CalibrationSpecificationforFluorescenceInstrumentsofChlorophylla歸口單位：上海市市場(chǎng)監(jiān)督管理局江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局浙江省市場(chǎng)監(jiān)督管理局安徽省市場(chǎng)監(jiān)督管理局主要起草單位：安徽省計(jì)量科學(xué)研究院參加起草單位：安徽省合肥生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心安徽省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心廈門(mén)斯坦道科學(xué)儀器股份有限公司本規(guī)范委托安徽省計(jì)量科學(xué)研究院負(fù)責(zé)解釋本規(guī)范主要起草人：郝瑋（安徽省計(jì)量科學(xué)研究院）徐?。ò不帐∮?jì)量科學(xué)研究院）李連（安徽省計(jì)量科學(xué)研究院）何淑蓮（安徽省計(jì)量科學(xué)研究院）何前鋒（安徽省合肥生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心）張勁松（安徽省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心）柯慧賢（廈門(mén)斯坦道科學(xué)儀器股份有限公司）I 2 2 4 4 6 7 1凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本規(guī)范；凡是不注日期的引用±10%2±20%環(huán)境溫度：5℃~40℃。x——羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值，μg/L。3算線(xiàn)性誤差（不包含最低濃度點(diǎn)），取結(jié)果絕對(duì)值最大值為儀器的線(xiàn)性誤差校準(zhǔn)結(jié)（2） xi——第i點(diǎn)線(xiàn)性方程計(jì)算的羅丹明B濃度值，μg/L；（5）ci——儀器第i次測(cè)得值，μg/L； c——7次測(cè)量值的平均值，μg/L；sr——儀器重復(fù)性，%。4ΔS——儀器穩(wěn)定性，%； c——儀器3次測(cè)量值的平均值，μg/L；由于復(fù)校時(shí)間間隔是由儀器的使用者、使用情況以及儀器本身質(zhì)量等諸因素所56標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法并依據(jù)所用羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度，配制校準(zhǔn)用羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液。例如，根據(jù)的羅丹明B儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液。再用分度吸量管移取29mL羅丹明B儲(chǔ)備溶液置于1000mL單標(biāo)線(xiàn)容量瓶中，即可配制成290μg/L羅丹明B稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液。實(shí)驗(yàn)室過(guò)程中產(chǎn)生的廢液，應(yīng)集中收集，并做好相應(yīng)的標(biāo)識(shí)，委托有資質(zhì)的單7葉綠素a參考測(cè)定方法（分光光度法）將一定量樣品用濾膜過(guò)濾截留藻類(lèi)，研磨破碎藻類(lèi)細(xì)胞，用丙酮溶液提取葉綠素，離心分離后分別于750nm、664nm、647nm和630nm波長(zhǎng)處測(cè)定提取液吸光除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭瑢?shí)驗(yàn)用水為新制備8），面下5cm樣品，轉(zhuǎn)移至采樣瓶（5.1）。在每升樣品中加入1mL碳酸鎂懸濁液樣品采集后應(yīng)在0℃~4℃避光保存、運(yùn)輸，24h內(nèi)運(yùn)送至檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室過(guò)濾B.4.3.1過(guò)濾體積，見(jiàn)表1，用量筒量取一定體積的混勻樣品，進(jìn)行過(guò)濾，最后用少量蒸餾水沖注：僅當(dāng)富營(yíng)養(yǎng)化水體的樣品無(wú)法通過(guò)玻璃纖維濾膜時(shí)，可采用離心法濃縮樣營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)富營(yíng)養(yǎng)貧營(yíng)養(yǎng)過(guò)濾體積（mL）100～200500～1000B.4.3.2研磨），），注：葉綠素對(duì)光及酸性物質(zhì)敏感，實(shí)驗(yàn)室光線(xiàn)應(yīng)盡量微弱，能進(jìn)行分析操作即9將離心管中的研磨提取液充分振蕩混勻后，用鋁箔包將試樣移至比色皿中，以丙酮溶液（4.3）為參比溶液，于波長(zhǎng)750nm、664P×(A664-A750)-1.54×(A647-A750)-0.08×(A630-A750)（B.1）式中：P1——試樣中葉綠素a的質(zhì)量濃度，樣品中葉綠素a的質(zhì)量濃度(μg/L按照公式（B.2）進(jìn)行計(jì)算：式中：P——樣品中葉綠素a的質(zhì)量濃度，μg/L；P熒光法葉綠素a測(cè)定儀校準(zhǔn)記錄參考格式 儀器測(cè)量值(μg/L）值(μg/L）誤差123//測(cè)量值(μg/L）1234567標(biāo)準(zhǔn)值(μg/L）0測(cè)量值(μg/L）測(cè)量值(μg/L）儀器測(cè)量值(μg/L）123熒光法葉綠素a測(cè)定儀校準(zhǔn)證書(shū)內(nèi)頁(yè)參考格式分光光度法測(cè)量值(μg/L）儀器測(cè)量值(μg/L）熒光法葉綠素a測(cè)定儀線(xiàn)性誤差測(cè)量不確定度評(píng)定示例E.1.2.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：羅丹明B有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。方程，按照方程計(jì)算出的羅丹明B濃度值與羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度值進(jìn)行比較（不環(huán)境溫度：5℃~40℃。xsi——第i點(diǎn)羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值，μg/L；=c2(xi)u2(xi)+c2(xsi)u2(xsi)E.4.1線(xiàn)性方程計(jì)算的羅丹明B濃度值引入的不確定度分量u(xi) 儀器測(cè)量值(μg/L）誤差12330.220.210.170.20//52.0252.0351.9852.01717.09+0.29103.43103.49103.43103.451427.59-0.17155.65155.73155.63155.672148.860.41206.94206.90207.04206.962857.29-0.09y=a+bx=0.0925+0.0724x 以50μg/L的葉綠素a濃度點(diǎn)為例，線(xiàn)性方程計(jì)算的羅丹明B濃度值為：E.4.2由標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的不確定度分量u(cs)E.4.2.1有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)本身引入的不確定度分量urel(cs)1E.4.2.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稀釋過(guò)程引入的不確定度分量urel(cs)2稀釋過(guò)程引入的不確定度來(lái)源主要考慮吸量管和單標(biāo)線(xiàn)容量瓶體積校準(zhǔn)的不確在移液及定容過(guò)程中由于實(shí)驗(yàn)室溫度在（20±2）℃之間變動(dòng)，引入的不確定度通過(guò)溫度變化范圍與體積膨脹系數(shù)確定，水的體積膨脹系數(shù)為2.1×10-4