免疫缺陷病和其免疫檢驗專家講座

第二十六章

免疫缺點性疾病及其免疫檢驗免疫缺陷病和其免疫檢驗第1頁第一節(jié)免疫缺點病分類和特點一、免疫缺點病分類二、免疫缺點病特點第二節(jié)原發(fā)性免疫缺點病一、原發(fā)性B細胞缺點二、原發(fā)性T細胞缺點三、重癥聯(lián)合免疫缺點四、原發(fā)性吞噬細胞缺點五、原發(fā)性補體系統(tǒng)缺點免疫缺陷病和其免疫檢驗第2頁第四節(jié)免疫缺點病檢驗一、B細胞缺點檢測二、T細胞缺點檢測三、吞噬細胞缺點檢測四、補體系統(tǒng)缺點檢測五、取得性免疫缺點病檢測第三節(jié)繼發(fā)性免疫缺點病一、繼發(fā)性免疫缺點常見原因二、取得性免疫缺點綜合征思索題小結(jié)免疫缺陷病和其免疫檢驗第3頁由遺傳原因或其它原因造成免疫系統(tǒng)發(fā)育或免疫應(yīng)答障礙而造成一個或各種免疫功效不全稱為免疫缺點(immunodeficiency),由此所致各種臨床綜合征稱為免疫缺點病(immunodeficiencydisease,ID)。免疫缺陷病和其免疫檢驗第4頁第一節(jié)免疫缺點病分類和特點免疫缺陷病和其免疫檢驗第5頁原發(fā)性免疫缺點性疾?。╬rimaryimmunodeficiencydisease,PIDD）繼發(fā)性免疫缺點?。╯econdaryimmunodeficiencydisease,SIDDorAIDD）一、免疫缺點病分類免疫缺陷病和其免疫檢驗第6頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第7頁重復(fù)感染易發(fā)腫瘤高度伴發(fā)本身免疫病傾向,以類風濕關(guān)節(jié)炎和惡性貧血等多見。遺傳傾向臨床表現(xiàn)和病理損傷復(fù)雜多樣二、免疫缺點病特點免疫缺陷病和其免疫檢驗第8頁免疫缺點病類型病原體類別感染類型體液免疫、吞噬細胞和補體缺點以化膿性球菌感染為主，補體缺點時也常見腦膜炎鏈球菌和淋球菌感染敗血癥、化膿性腦膜炎、肺炎、氣管炎、中耳炎、全身性肉芽腫等細胞免疫缺點細胞內(nèi)寄生病原體感染為主重癥病毒感染、真菌感染、布氏菌病、結(jié)核病聯(lián)合免疫缺點以化膿菌為主，有時合并胞內(nèi)寄生病原體感染全身重癥細菌及病毒感染、頑固性腹瀉或膿皮病免疫缺點病感染特點免疫缺陷病和其免疫檢驗第9頁第二節(jié)原發(fā)性免疫缺點病原發(fā)性免疫缺點性疾?。╬rimaryimmunodeficiencydisease,PIDD）又稱先天性免疫缺點?。╟ongenitalimmunodeficiencydisease,CIDD）,是因為免疫系統(tǒng)遺傳基因異常或先天性免疫系統(tǒng)發(fā)育障礙而致免疫功效不全引發(fā)疾病。免疫缺陷病和其免疫檢驗第10頁

一、原發(fā)性B細胞缺點病二、原發(fā)性T細胞缺點病三、原發(fā)性聯(lián)合免疫缺點病四、原發(fā)性吞噬細胞缺點病五、原發(fā)性補體系統(tǒng)缺點病原發(fā)性免疫缺點性疾病免疫缺陷病和其免疫檢驗第11頁因為B細胞先天性發(fā)育不全,或因為B細胞不能接收T細胞傳遞信號,而造成抗體產(chǎn)生降低一類疾病。一、原發(fā)性B細胞缺點primaryBlymphocytesdeficiency免疫缺陷病和其免疫檢驗第12頁試驗室指標特征主要臨床表現(xiàn)體內(nèi)Ig水平降低或缺點外周血B細胞可降低或缺點T細胞數(shù)量正常。重復(fù)化膿性感染免疫缺陷病和其免疫檢驗第13頁發(fā)病機制:B細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子酪氨酸激酶（Bruton’styrosinekinase,Btk）基因缺點,使得B細胞發(fā)育過程中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙,造成B細胞發(fā)育停滯于前B細胞階段,成熟B細胞數(shù)量降低或缺失。（一）X性連鎖無丙種球蛋白血癥（X-linkedagamaglobulinemia,XLA）為X連鎖隱性遺傳,多見于男性嬰幼兒。故又稱Bruton病。臨床表現(xiàn):患兒多在出生6月后重復(fù)發(fā)生化膿性細菌感染,血清中各類Ig含量顯著降低，外周血成熟B細胞和漿細胞數(shù)量幾乎為零。免疫缺陷病和其免疫檢驗第14頁臨床表現(xiàn):患兒易重復(fù)感染，尤其是呼吸道感染，比低水平免疫球蛋白缺點病表現(xiàn)更為嚴重。（二）X性聯(lián)高IgM綜合征

（X-linkedhighIgMsyndrome,XLHM）發(fā)病機制:X-染色體上CD40L基因突變，使T細胞表示CD40L缺點，其與B細胞CD40相互作用受阻，造成B細胞活化增殖和Ig類別轉(zhuǎn)換障礙，不能產(chǎn)生除IgM以外其它類型免疫球蛋白。試驗室指標：血清IgM升高而IgG、IgA.IgE水平低下，外周血和淋巴組織中有大量分泌IgM漿細胞。免疫缺陷病和其免疫檢驗第15頁試驗室指標:血清IgA水平異常低下（<50mg/L），sIgA缺乏，其它各類Ig水平正常。（三）選擇性IgA缺點

（selectiveIgAdeficiency）最常見選擇性Ig缺點,為常染色體顯性或隱性遺傳發(fā)病機制:含有IgA受體B細胞發(fā)育停滯，不能分化成為分泌IgA漿細胞。臨床表現(xiàn):患者多無顯著癥狀，或僅表現(xiàn)為呼吸道、消化道和泌尿道重復(fù)感染，少數(shù)患者可出現(xiàn)嚴重感染，常伴有本身免疫病和超敏反應(yīng)性疾病。免疫缺陷病和其免疫檢驗第16頁T細胞發(fā)生、分化和功效障礙遺傳性缺點,其中包含T細胞及其前體。T細胞缺點不但影響T效應(yīng)細胞（如TCL）,也會間接影響單核-吞噬細胞和B細胞。所以,多數(shù)T細胞功效缺點者常伴體液免疫功效缺點。二、原發(fā)性T細胞缺點（primaryTlymphocytesdeficiency）免疫缺陷病和其免疫檢驗第17頁患兒T細胞功效缺點、外周血T細胞數(shù)降低或正常,B細胞和抗體功效正?；蚱?。（一）先天性胸腺發(fā)育不全綜合癥又稱DiGeorge綜合征,為經(jīng)典T細胞缺點性疾病,并伴甲狀腺功效低下。發(fā)病機制:因為妊娠早期胚胎第三、四咽囊分化發(fā)育障礙，造成起源于該部位器官如胸腺、甲狀旁腺、主動脈弓、唇和耳等發(fā)育不全。臨床特征:有心臟和大血管畸形，重復(fù)感染和新生兒24小時內(nèi)出現(xiàn)手足抽搐免疫缺陷病和其免疫檢驗第18頁比如:CD3復(fù)合分子（-、-、-、-鏈）基因變異引發(fā)TCR-CD3復(fù)合物表示或功效受損ZAP-70（一個酪氨酸激酶）基因變異，不能產(chǎn)生ZAP-70蛋白（二）TCR活化和功效缺點T細胞膜分子表示異?；蛉笔Э稍斐蒚細胞活化和功效缺點免疫缺陷病和其免疫檢驗第19頁一組胸腺、淋巴組織發(fā)育不全及Ig缺乏遺傳性疾病,機體不能產(chǎn)生細胞免疫和體液免疫應(yīng)答?；颊叱錾?個月即出現(xiàn)發(fā)育障礙,易發(fā)嚴重感染而死亡。三、重癥聯(lián)合免疫缺點

（severecombinedimmunodeficiencydisease,SCID）免疫缺陷病和其免疫檢驗第20頁患者病理表現(xiàn):T細胞缺乏或顯著降低B細胞數(shù)量正常但功效異常，造成Ig生成降低和類型轉(zhuǎn)換障礙主要發(fā)病機制:IL-2受體鏈基因突變。（一）性聯(lián)重癥聯(lián)合免疫缺點（X-linkedSCID,X-SCID）

免疫缺陷病和其免疫檢驗第21頁發(fā)病機制：定位于第20對染色體ADA基因突變造成ADA缺乏，使腺苷和脫氧腺苷分解障礙，造成核苷酸代謝產(chǎn)物dATP和dGTP在細胞內(nèi)大量蓄積，對早期T、B細胞有毒性作用，影響RNA.DNA.蛋白質(zhì)和磷脂合成，使之發(fā)育成熟受阻，造成T細胞和B細胞缺點。（二）腺苷脫氨酶缺乏癥（adenosinedeaminase,ADA）

免疫缺陷病和其免疫檢驗第22頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第23頁主要表現(xiàn):吞噬細胞數(shù)量、移動和（或）黏附功效、殺菌活性等異常四、原發(fā)性吞噬細胞缺點

primaryphagocytesdeficiency臨床表現(xiàn):化膿性細菌或真菌重復(fù)感染免疫缺陷病和其免疫檢驗第24頁臨床表現(xiàn):患兒多在出生后1個月內(nèi)即開始發(fā)生各種細菌重復(fù)感染。（一）中性粒細胞數(shù)量降低分類:粒細胞降低癥（granulocytopenia）和粒細胞缺乏癥（agranulocytosis。發(fā)病機制:G-CSF（粒細胞集落刺激因子）基因突變造成粒細胞分化受阻。免疫缺陷病和其免疫檢驗第25頁LAD-1發(fā)病機制:是因為CD-18基因突變，使中性粒細胞、巨噬細胞、T細胞、NK細胞表面整合素家族組員表示缺點，造成中性粒細胞不能與內(nèi)皮細胞黏附、移行并穿過血管壁抵達感染部位。（二）白細胞黏附缺點

（leukocyteadhesiondeficiency,LAD）分類:分為LAD-1和LAD-2兩種LAD-2發(fā)病機制:是一個巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因突變，使得白細胞和內(nèi)皮細胞表面缺乏能與選擇素家族組員結(jié)合寡糖配體Sialyl-Lewisx（Slex），造成白細胞與內(nèi)皮細胞間黏附障礙。臨床表現(xiàn):均表現(xiàn)為重復(fù)化膿性細菌感染免疫缺陷病和其免疫檢驗第26頁發(fā)病機制:編碼還原型輔酶Ⅱ（NADPH）氧化酶系統(tǒng)基因缺點。（三）慢性肉芽腫病

（chronicgranulomatousdisease,CGD）臨床表現(xiàn):為重復(fù)化膿性感染，淋巴結(jié)、皮膚、肝、肺、骨髓等器官有慢性化膿性肉芽腫或伴有瘺管形成。免疫缺陷病和其免疫檢驗第27頁多數(shù)為常染色體隱性遺傳,少數(shù)為常染色體顯性遺傳,屬最少見原發(fā)性免疫缺點病。五、原發(fā)性補體系統(tǒng)缺點

（primarycomplementsystemdeficiency）在補體系統(tǒng)中,幾乎全部補體固有成份、補體調(diào)控蛋白及補體受體都可發(fā)生缺點。臨床表現(xiàn)為重復(fù)化膿性細菌感染。免疫缺陷病和其免疫檢驗第28頁發(fā)病機制:C1抑制分子（C1inhibitor,C1INH）基因缺點所致。（一）遺傳性血管神經(jīng)性水腫為常見補體缺點,屬于常染色體顯性遺傳病臨床表現(xiàn):重復(fù)發(fā)作皮膚黏膜水腫，若水腫發(fā)生于喉頭可造成窒息死亡。免疫缺陷病和其免疫檢驗第29頁發(fā)病機制:編碼糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol,GPI）pig-α基因翻譯后修飾缺點，造成GPI合成障礙。（二）陳發(fā)性夜間血紅蛋白尿臨床表現(xiàn):慢性溶血性貧血、全血細胞降低和靜脈血栓形成，晨尿中出現(xiàn)血紅蛋白。免疫缺陷病和其免疫檢驗第30頁第三節(jié)繼發(fā)性免疫缺點病繼發(fā)性免疫缺點?。╯econdaryimmunodeficiencydisease,SIDD）是后天原因造成,繼發(fā)于一些疾病或使用藥品后所致免疫系統(tǒng)暫時或持久損害一類免疫缺點性疾病。分為繼發(fā)性T細胞功效缺點、繼發(fā)性低丙種球蛋白血癥、繼發(fā)性吞噬細胞功效缺點和補體缺點。免疫缺陷病和其免疫檢驗第31頁1．腫瘤:惡性腫瘤，加之放療、化療、營養(yǎng)不良、消耗等原因可造成免疫缺點。2．感染性疾病:以HIV感染所致艾滋病最為嚴重。3．遺傳性疾病:染色體異常、酶缺乏、血紅蛋白病等。4．營養(yǎng)不良5．免疫抑制療法6．其它:如電離輻射、手術(shù)、創(chuàng)傷、脾切除等均可引發(fā)免疫功效低下。一、繼發(fā)性免疫缺點常見原因免疫缺陷病和其免疫檢驗第32頁又稱艾滋病,是由人類免疫缺點病毒（humanimmunodeficiencyvirus,HIV）感染引發(fā)一組綜合征。病人以CD4+T細胞降低為主要特征,同時伴重復(fù)機會感染、惡性腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變。二、取得性免疫缺點綜合征

（acquiredimmunodeficiencysyndrome,AIDS）免疫缺陷病和其免疫檢驗第33頁艾滋病全球分布情況免疫缺陷病和其免疫檢驗第34頁AIDS病因:人類免疫缺點病毒（humanimmunodifiencyvirus，HIV）HIV-1和HIV-2兩型。（一）病原學(xué)免疫缺陷病和其免疫檢驗第35頁HIVHIV-1HIV-2OMA,B,C,D,E,F,G,H,I,JTypesCladesANT70,MVP5180,VAURODNIH2GroupsNHIV型和亞型免疫缺陷病和其免疫檢驗第36頁結(jié)構(gòu)基因HIV-1(HIV-2)包膜(env)Gp160/gp120,gp41(gp140/gp105,gp36)多聚酶(pol)P66,p55(P68,P56)關(guān)鍵(gag)P24,p17(P26,p16)HIV主要結(jié)構(gòu)基因和對應(yīng)抗原免疫缺陷病和其免疫檢驗第37頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第38頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第39頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第40頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第41頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第42頁（二）HIV致病機制HIV經(jīng)過gp120與靶細胞表面CD4分子高親和性結(jié)合,同時也與表示在靶細胞表面趨化因子受體（CXCR4和CXCR5）結(jié)合,再由gp41介導(dǎo)病毒包膜與細胞膜融合,使病毒得以進入細胞。1.HIV侵入CD4+靶細胞機制CD4分子是HIV糖蛋白特異性受體,故HIV主要侵犯CD4﹢T細胞。表示CD4分子單核-吞噬細胞、樹突狀細胞、B細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞等也是其主要靶細胞免疫缺陷病和其免疫檢驗第43頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第44頁2．HIV損傷感染CD4+細胞:HIV在靶細胞中復(fù)制，可經(jīng)過直接或間接路徑損傷CD4+細胞3．HIV逃防止疫攻擊機制:HIV感染機體后，可經(jīng)過不一樣機制逃防止疫系統(tǒng)識別和攻擊，以利于病毒在體內(nèi)長久存活并不停復(fù)制。免疫缺陷病和其免疫檢驗第45頁（三）HIV誘導(dǎo)免疫應(yīng)答

HIV感染機體后,HIV會進行性破壞機體免疫系統(tǒng)(尤其是細胞免疫),但在病程不一樣階段,機體免疫系統(tǒng)可經(jīng)過不一樣應(yīng)答機制以阻止病毒復(fù)制。體液免疫應(yīng)答

中和抗體抗P24殼蛋白抗體抗gpl20和抗gp41抗體細胞免疫應(yīng)答

CD8+T細胞應(yīng)答CD4+T細胞應(yīng)答

免疫缺陷病和其免疫檢驗第46頁1.CD4﹢T細胞數(shù)量顯著降低。2.Th1細胞與Th2細胞平衡失調(diào)。3.抗原呈遞細胞功效降低。4.B細胞功效異常，表現(xiàn)為多克隆激活、高Ig血癥和產(chǎn)生各種本身抗體。（四）HIV感染免疫學(xué)特征免疫缺陷病和其免疫檢驗第47頁

HIV感染宿主其特征為潛伏期長、病程發(fā)展遲緩。（五）HIV感染臨床特點HIV急性感染多表現(xiàn)為單核細胞增多樣綜合征,血清可檢出抗HIV抗體。臨床癥狀多發(fā)生于感染后2-6周,表現(xiàn)為發(fā)燒、肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、頭痛、腹瀉、咽痛和淋巴結(jié)腫大等。HIV在胞內(nèi)主要呈潛伏感染,當宿主細胞被細菌、病毒、絲裂原激活后,病毒即進行復(fù)制。免疫缺陷病和其免疫檢驗第48頁③神經(jīng)系統(tǒng)損害:約60%AIDS病人出現(xiàn)AIDS癡呆癥。（五）AIDS經(jīng)典臨床表現(xiàn)①機會性感染:是AIDS病人死亡主要原因。常見引發(fā)機會感染病原體是卡氏肺囊蟲和白色念珠菌，其它有巨細胞病毒、帶狀皰疹病毒、隱球菌和鼠弓型蟲等；②惡性腫瘤:AIDS患者易伴發(fā)Kaposi肉瘤和惡性淋巴瘤，也是AIDS病人常見死亡原因；免疫缺陷病和其免疫檢驗第49頁常

見綜合征免疫缺陷病和其免疫檢驗第50頁愛滋?。úㄊ先饬觯┟庖呷毕莶『推涿庖邫z驗第51頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第52頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第53頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第54頁免疫缺陷病和其免疫檢驗第55頁第四節(jié)免疫缺點病檢驗免疫缺點病檢測是多方面、綜合性,主要包括體液免疫、細胞免疫、補體和吞噬細胞等方面檢測,除了采取免疫學(xué)方法、分子生物學(xué)方法外,一些常規(guī)和特殊檢測伎倆也極為主要。免疫缺陷病和其免疫檢驗第56頁

一、B細胞缺點病試驗室檢測二、T細胞缺點病試驗室檢測三、吞噬細胞缺點病試驗室檢測四、補體系統(tǒng)缺點病試驗室檢測五、取得性免疫缺點病試驗室檢測免疫缺點病試驗室檢測免疫缺陷病和其免疫檢驗第57頁血清Ig測定同種血型凝集素測定特異性抗體產(chǎn)生能力測定噬菌體試驗B細胞表面膜免疫球蛋白（SmIg）檢測CD抗原檢測一、B細胞缺點檢測免疫缺陷病和其免疫檢驗第58頁二、T細胞缺點檢測T細胞功效檢測T細胞數(shù)量及其亞群檢測皮膚試驗T細胞功效體外試驗免疫缺陷病和其免疫檢驗第59頁白細胞計數(shù)趨化功效檢測吞噬和殺傷試驗NBT還原試驗黏附分子檢測三、吞噬細胞免疫缺點檢測免疫缺陷病和其免疫檢驗第60頁四、補體系統(tǒng)缺點檢測總補體活性單個組分測定普通認為CH50、C1q、C4.C3和B因子等幾項檢測可大致反應(yīng)補體缺點情況，對遺傳性血管神經(jīng)性水腫患者必須檢測C1抑制劑才能最終確診。免疫缺陷病和其免疫檢驗第61頁五、取得性免疫缺點病檢測HIV感染免疫學(xué)診療方法主要包含病毒抗原抗病毒抗體免疫細胞數(shù)目和功效免疫缺陷病和其免疫檢驗第62頁抗體檢測:血液（清）、尿液、唾液抗原檢測:血清（漿）核酸檢測:血清（漿）病毒分離:血液，腦脊液，性分泌液CD4細胞檢測:血液病毒載量測定:血清（漿）檢測標本種類免疫缺陷病和其免疫檢驗第63頁（一）HIV抗原檢測慣用ELISA法檢測HIV關(guān)鍵抗原P24。P24出現(xiàn)于急性感染期和AIDS晚期,其定量檢測可作為早期或晚期病毒量間接指標。在潛伏期,P24檢測常為陰性。免疫缺陷病和其免疫檢驗第64頁（二）HIV抗體檢測HIV感染后2～3月可出現(xiàn)抗體,并可連續(xù)終生,此為艾滋病常規(guī)檢測指標。初篩試驗: ELISA法膠乳凝集法免疫金層析法確認試驗: 免疫印跡法免疫缺陷病和其免疫檢驗第65頁初篩查最基本,最可靠伎倆ELISA試劑敏感性和特異性越來越高與抗原檢測同時進行ELISA法檢測HIV抗體免疫缺陷病和其免疫檢驗第66頁慣用方法有免疫斑點法、免疫層析法、硒標識法、金標識法和凝集試驗等。HIV抗體快速檢測OraQuicktest免疫缺陷病和其免疫檢驗第67頁（1）便于操作,大部分快速檢測試劑均為一步法,只需在樣品孔中按要求滴上樣品后在要求時間內(nèi)觀察結(jié)果即可。（2）反應(yīng)時間短,普通為15～60分鐘,大部分試劑反應(yīng)時間為30分鐘。（3）能夠目測,不需要特殊儀器設(shè)備。HIV快速檢測法優(yōu)點免疫缺陷病和其免疫檢驗第68頁（5）試劑可在室溫條件下保留,如雅培HIV-1/2抗體診療試劑在30℃儲存12個月后試劑敏感性與儲存與2~8℃試劑敏感性相同。（4）技術(shù)要求不高。方法簡單,受訓(xùn)技術(shù)員都可操作。免疫缺陷病和其免疫檢驗第69頁確認試劑必須經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊同意。HIV抗體確認試驗確認試驗可使用免疫印跡法、條帶免疫法及免疫熒光法。當前以免疫印跡法（WB試驗）最為慣用。免疫缺陷病和其免疫檢驗第70頁HIV抗體確認試驗判斷標準①HIV抗體陽性:最少有兩條膜帶（gp41/gp120/gp160）或最少一條膜帶與p24帶同時出現(xiàn)；②HIV抗體陰性:無HIV抗體特異性條帶出現(xiàn)；③HIV抗體可疑:出現(xiàn)HIV特異性條帶，但帶型不足以確認陽性者。免疫缺陷病和其免疫檢驗第71頁（三）CD4+T細胞計數(shù)CD4+T細胞計數(shù)是反應(yīng)HIV感染患者免疫系統(tǒng)損害狀態(tài)最明確指標。美國疾病控制中心將CD4+T細胞計數(shù)作為艾滋病臨床分