MSC“名實(shí)之辯”：精準(zhǔn)鑒定只為精準(zhǔn)治療

MSC“名實(shí)之辯”：精準(zhǔn)鑒定只為精準(zhǔn)治療前言MSC是一群來源廣泛、能夠體外增殖分化的異質(zhì)性細(xì)胞。MSC具有免疫調(diào)節(jié)、促進(jìn)組織修復(fù)等作用，應(yīng)用于多種疾病的治療。由于科學(xué)進(jìn)程、習(xí)慣等原因，MSC具有多種名稱。自先秦以來，就有“名實(shí)之辯”，今日我們就講一講MSC的名稱與其鑒定標(biāo)準(zhǔn)。01MSC：名，可名，非常名上世紀(jì)八九十年代，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)從人骨髓分離組織，通過沖洗細(xì)胞、裂解紅細(xì)胞等簡(jiǎn)單操作后就有一小部分細(xì)胞進(jìn)行貼壁生長(zhǎng)，更為重要的是這一小群異質(zhì)性細(xì)胞還能夠在體外進(jìn)行大量增殖，甚至可分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞，因此被命名為間充質(zhì)干細(xì)胞（MesenchymalStemCells，MSC）。隨著研究的深入，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)MSC的來源并不局限于骨髓，還來源于脂肪、牙齦、臍帶血、臍帶等多種組織。并且有實(shí)驗(yàn)表明MSC的外泌體也能產(chǎn)生與MSC相似的療效。這對(duì)MSC是否是干細(xì)胞、MSC的治療效果是否與干細(xì)胞的增殖分化能力相關(guān)提出了質(zhì)疑。2018年DouglasSipp等三位科學(xué)家在Nature發(fā)表評(píng)述文章“Clearupthisstem-cellmess”，對(duì)MSC的概念提出進(jìn)一步質(zhì)疑。這一切以MSC干細(xì)胞（Stem）身份為核心的問題即是MSC名學(xué)之爭(zhēng)的由來。事實(shí)上，早在2006年，國(guó)際細(xì)胞治療協(xié)會(huì)（ISCT）就提出MSC應(yīng)命名為“MultipotentMesenchymalStromalCells”，以避免干細(xì)胞之名的爭(zhēng)議，只有在充分證據(jù)的情況下才應(yīng)命名為“MesenchymalStemCells”。此外，MSC的療效主要來源于其旁分泌產(chǎn)生的多種細(xì)胞因子、miRNA等。因此MSC研究的先驅(qū)ArnoldCaplan提出MSC應(yīng)命名為“MedicinalSignalingCells”。盡管ISCT多次發(fā)文倡導(dǎo)科研界和媒體規(guī)范MSC的命名，但由于歷史、習(xí)慣等原因，在文章發(fā)表及日常討論中，MSC還是以“MesenchymalStemCells”為主?？傊?，目前MSC有多種名稱，包括：MarrowStromalCellsMultipotentStromalCellsMesodermalStemCellsMedicinalSignalingCellMultipotentMesenchymalStromalCellsMesenchymalStemCells02MSC治療研究進(jìn)展MSC低表達(dá)MHC，免疫原性低，可進(jìn)行同種異體接種。目前，MSC被用于免疫失調(diào)相關(guān)疾病、骨關(guān)節(jié)相關(guān)疾病、損傷修復(fù)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等的治療探索，全球范圍臨床實(shí)驗(yàn)數(shù)量超過上千次。MSC療法一般流程如圖，自體或異體來源的MSC在體外分離擴(kuò)增，然后對(duì)患者進(jìn)行注射。MSC療法流程（源自參考文獻(xiàn)，doi：10.1126/sciadv.aba6884）雖然MSC之名頗有爭(zhēng)議，其具體療效機(jī)制仍需探索，但MSC具有治療效果已被多個(gè)國(guó)家承認(rèn)。目前全球已有10款MSC療法上市，用于急性移植物抗宿主病（GvHD）、克羅恩病等疾病的治療。今年三月FDA受理了MesoblastLtd公司remestemcel-L（同種異體骨髓來源的MSC）應(yīng)用于GvHd的BLA。03MSC鑒定標(biāo)準(zhǔn)MSC治療的困難之一是對(duì)于分離培養(yǎng)的MSC的判定。ISCT在2006年提出了MSC的鑒定標(biāo)準(zhǔn)[2]，主要包括三部分：MSC鑒定標(biāo)準(zhǔn)1.能貼壁培養(yǎng)2.表面標(biāo)志物達(dá)標(biāo)（共8個(gè)指標(biāo)，包含3個(gè)陽性指標(biāo)和5個(gè)陰性指標(biāo)）陽性指標(biāo)（≥95%）陰性指標(biāo)（≤2%）CD105CD73CD90CD45CD34CD14orCD11bCD79αorCD19HLA-DR3.體外能夠分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟成骨細(xì)胞該文獻(xiàn)自發(fā)表以來已經(jīng)獲得超過12000次引用，堪稱行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。義翹神州推出MSC鑒定試劑盒（Cat:HMSC03），能夠用于MSC的所有8個(gè)表面標(biāo)志物的鑒定。利用HMSC03鑒定試劑盒檢測(cè)臍帶來源的MSC。MSC的CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR表達(dá)陰性（圖A）；CD73（圖B）、CD90（圖C）、CD105（圖D）表達(dá)陽性。藍(lán)色線為MSC與同型對(duì)照結(jié)果，紅色線為MSC與對(duì)應(yīng)抗體結(jié)果。（源自義翹神州）隨著研究深入，更多的表面標(biāo)志物也被建議納入MSC的鑒定中。例如《臨床研究用人間充質(zhì)干細(xì)胞質(zhì)量檢驗(yàn)規(guī)范（征求意見稿）》中推薦應(yīng)將CD44、CD166兩個(gè)陽性指標(biāo)納入MSC的鑒定。義翹神州也緊跟步伐，推出了MSC鑒定試劑盒（Cat:HMSC07），能夠覆蓋所有10個(gè)指標(biāo)的檢測(cè)。利用HMSC07鑒定試劑盒檢測(cè)臍帶來源的MSC。MSC的CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR表達(dá)陰性（圖A）；CD73（圖B）、CD90（圖C）、CD105（圖D）、CD44（圖E）、CD166（圖F）表達(dá)陽性。藍(lán)色線為MSC與同型對(duì)照結(jié)果，紅色線為MSC與對(duì)應(yīng)抗體結(jié)果。（源自義翹神州）?義翹神MSC鑒定服務(wù)及特色產(chǎn)品義翹神州可進(jìn)行細(xì)胞鑒別、無菌檢測(cè)、支原體檢測(cè)、細(xì)胞內(nèi)/外病毒因子檢測(cè)等在內(nèi)的細(xì)胞庫檢測(cè)服務(wù)。義翹神州擁有經(jīng)驗(yàn)豐富的檢測(cè)團(tuán)隊(duì)，依據(jù)藥典方法及ICH、FDA及其它監(jiān)管法規(guī)，根據(jù)客戶不同申報(bào)需求，提供合適的細(xì)胞庫檢定方案以及全程技術(shù)指導(dǎo)。還可在項(xiàng)目開展之前提供相關(guān)咨詢，更好地幫助客戶完成中外申報(bào)，滿足出海需求。出具的檢測(cè)報(bào)告已獲得監(jiān)管部門認(rèn)可，助力多家公司完成IND和BLA申報(bào)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1.Caplan,A.I.MesenchymalStemCells:TimetoChangetheName!StemCellsTranslMed,2017./10.1002/sctm.17-0051.2.Dominici,M.etal.Minimalcriteriafordefiningmultipotentmesenchymalstromalcells.TheInternationalSocietyforCellularTherapypositionstatement.Cytotherapy,2006./10.1080/14653240600855905.3.Galderisi,U.,Peluso,G.,&DiBernardo,G.ClinicalTrialsBasedonMesenchymalStromalCellsareExponentiallyIncreasing:WhereareWeinRecentYears?StemCellRevRep,2022./10.1007/s12015-021-10231-w.4.Gomzikova,,James&Rizvanov.TherapeuticApplicationofMesenchymalStemCellsDerivedExtracellularVesiclesforImmunomodulation.FrontImmunol,2019./10.3389/fimmu.2019.02663.5.Haynesworth,S.E.etal.Characterizationofcellswithosteogenicpotentialfromhumanmarrow.Bone,1992./10.1016/8756-3282(92)90364-3.6.Levy,O.etal.ShatteringbarrierstowardclinicallymeaningfulMSCtherapies.SciAdv,2020,eaba6884./10.1126/sciadv.aba6884.7.Wright,A.etal..TherapeuticUseofMesen