第3章 抗體課件

第三章抗體與免疫球蛋白抗體（antibody,Ab）:

是B細(xì)胞識(shí)別抗原后增殖分化為槳細(xì)胞（PC）所合成和分泌產(chǎn)生的能與Ag進(jìn)行特異性結(jié)合的糖蛋白，主要存在于血清等體液中，具有免疫功能。免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）:

具有抗體活性，或者在結(jié)構(gòu)上與Ab

相似的球蛋白。第3章抗體抗體和免疫球蛋白的關(guān)系:

抗體都是免疫球蛋白，并非所有免疫球蛋白都具有抗體活性。存在形式：

膜型(membraneimmunoglobulin,mIg)—B細(xì)胞膜上的抗原受體；

分泌型(secretedimmunoglobulin,sIg)

—分泌進(jìn)入體液,

介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。第3章抗體免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)與功能免疫球蛋白基因免疫球蛋白的合成與分泌第3章抗體第一節(jié)免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)與功能（一）免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu)第3章抗體第3章抗體抗體的理化性質(zhì)四肽鏈結(jié)構(gòu)，鏈間二硫鍵連接兩條重鏈（H）和兩條輕鏈（L）氨基端和羧基端。第3章抗體1.重鏈與輕鏈(1)根據(jù)重鏈分類：

根據(jù)重鏈靠近羧基末端氨基酸組成及排列順序不同，將重鏈分為種：γ、α、μ、δ、ε根據(jù)重鏈組成不同，將Ig分為五類：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE(2)根據(jù)輕鏈分型：κ、λ型

天然Ig分子中，重鏈同類，輕鏈同型第3章抗體2.可變區(qū)與恒定區(qū)根據(jù)氨基酸排列順序的不同分為：

可變區(qū)（V）和恒定區(qū)（C）可變區(qū)（V區(qū)）：氨基酸組成、排列順序變化較大恒定區(qū)（C區(qū)）：氨基酸數(shù)量、種類、排列順序及含糖量都比較穩(wěn)定第3章抗體第3章抗體第3章抗體第3章抗體超變區(qū)（HVR）輕鏈：24-34、50-56、89-97重鏈：31-35、50-65、95-102框架區(qū)（FR）第3章抗體第3章抗體超變區(qū)決定簇互補(bǔ)區(qū)（CDR）

Ig的抗原結(jié)合部位，該部位也稱為CDRIg的獨(dú)特型決定簇第3章抗體3.鉸鏈區(qū)位于CH1與CH2之間，含有豐富的脯氨酸，因此易伸展彎曲，而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。第3章抗體第3章抗體4.J鏈和分泌片J鏈?zhǔn)且粭l多肽鏈，富含半胱氨酸，由漿細(xì)胞合成，以二硫鍵的形式共價(jià)結(jié)合到Ig的重鏈上。分泌片：由黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌，以非共價(jià)形式結(jié)合到二聚體上，保護(hù)IgA，使之不受環(huán)境中酶的破壞，并介導(dǎo)IgA的轉(zhuǎn)運(yùn)第3章抗體（二）免疫球蛋白的水解片段木瓜蛋白酶(papain)水解IgG：得到兩個(gè)相同的Fab段和一個(gè)Fc段。第3章抗體胃蛋白酶(pepsin)裂解IgG：

得到一個(gè)具有雙價(jià)活性的F（ab’）2段和若干個(gè)小分子多肽碎片（pFc’）第3章抗體第3章抗體第3章抗體免疫球蛋白的功能區(qū)Ig的H鏈、L鏈每隔110個(gè)氨基酸即由鏈內(nèi)二硫鍵連接形成一個(gè)能行使特定功能的球性單位，稱為Ig的結(jié)構(gòu)域或功能區(qū)（domain）。第3章抗體各功能區(qū)的作用VH和VL:識(shí)別和結(jié)合抗原CH和CL:同種異型的遺傳標(biāo)志CH2:補(bǔ)體C1q結(jié)合位點(diǎn)，IgG可通過(guò)胎盤CH3/CH4:與多種細(xì)胞表面的FcR結(jié)合(免疫調(diào)理,I型超敏反應(yīng))第3章抗體抗體的功能一、V區(qū)的功能—

識(shí)別并特異性結(jié)合抗原

單體(IgG,IgE)

—2價(jià)

二聚體(分泌型IgA)—4價(jià)

五聚體(IgM)

—10價(jià)（5價(jià)）

中和效應(yīng)—

中和毒素和病毒與Ag結(jié)合—

促吞噬細(xì)胞吞噬1.抗體的結(jié)合價(jià)2.實(shí)際意義第3章抗體C區(qū)的功能

1.激活補(bǔ)體系統(tǒng)

Ab(IgM、IgG)+Ag→C1q

→

補(bǔ)體經(jīng)典途徑

IgG4、IgA的凝聚物→

補(bǔ)體旁路途徑

2.介導(dǎo)免疫細(xì)胞活性

(1)調(diào)理作用(opsonization)：IgG+抗原(顆粒性)→FcγR（單核、巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞）→促吞噬細(xì)胞吞噬；

(2)ADCC：IgG+抗原(靶細(xì)胞)→FcγR（NK

細(xì)胞）→

殺傷靶細(xì)胞；；（抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用）

(3)介導(dǎo)超敏反應(yīng)：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型超敏反應(yīng)。

3.穿越胎盤和粘膜第3章抗體第3章抗體第3章抗體第3章抗體第3章抗體第3章抗體免疫球蛋白的類別特性與功能IgG

IgG多為單體，是唯一能通過(guò)胎盤的抗體據(jù)重鏈（鏈）免疫原性，IgG分4個(gè)亞型第3章抗體IgG的特點(diǎn)IgG1、IgG2和IgG3能通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體血清含量最高(75%～85%),也是丙種球蛋白的主要成分，

3～5歲達(dá)成人水平(8.0～17mg/ml)半衰期較長(zhǎng)（16～24d）主要的抗感染抗體(具有抗菌、抗病毒、中和毒素和免疫調(diào)理作用)參與II、III型超敏反應(yīng)第3章抗體2.生物學(xué)活性(1)通過(guò)胎盤（新生兒抗感染）；(2)激活補(bǔ)體（裂解細(xì)胞）；(3)調(diào)理作用（促進(jìn)吞噬）；(4)介導(dǎo)ADCC（細(xì)胞毒作用）。3.實(shí)際意義(1)抗感染；(2)自身抗體→自身免疫??；(3)介導(dǎo)變態(tài)反應(yīng)(Ⅱ、Ⅲ型)；(4)封閉抗體→腫瘤細(xì)胞逃逸；(5)親合層析法—

IgG純化；(6)免疫學(xué)檢測(cè)。第3章抗體IgM為五聚體，是分子量最大的Ig，稱巨球蛋白。IgM激活補(bǔ)體、結(jié)合抗原、免疫調(diào)理作用比IgG強(qiáng)天然血型抗體是IgM第3章抗體IgM的特點(diǎn)IgM是個(gè)體發(fā)育中最早產(chǎn)生的抗體，胚胎晚期已能合成，

IgM不能通過(guò)胎盤，新生兒臍帶血中若IgM水平升高，提示胎兒曾有宮內(nèi)感染IgM是抗原刺激后出現(xiàn)最早的抗體，半衰期短，故檢測(cè)IgM水平可用于傳染病的早期診斷。mIgM是B細(xì)胞抗原受體（BCR）的主要成分也可參與II、III型超敏反應(yīng)半衰期5天--血清中特異性IgM水平增高提示有近期感染；激活補(bǔ)體第3章抗體IgA分為血清型和分泌型兩種。血清型IgA主要由腸系膜淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生，為單體。而分泌型IgA（sIgA）是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等處的固有層中漿細(xì)胞產(chǎn)生，為雙體、三體或多體。sIgA主要存在于唾液、淚液、以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。分泌片由粘膜上皮細(xì)胞合成。第3章抗體IgA的特點(diǎn)參與皮膚粘膜的局部抗感染作用初乳中含有高濃度的sIgA----母乳喂養(yǎng)聚合IgA激活通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體參與Ⅲ型超敏反應(yīng)半衰期6天；占血清Ig含量的5～15%第3章抗體

sIgA的合成和主要作用部位在黏膜第3章抗體IgD單體分子存在形式分泌型—

血清中，功能不清；膜結(jié)合型—

B細(xì)胞表面IgD是B細(xì)胞的重要表面標(biāo)志B細(xì)胞的分化過(guò)程中首先出現(xiàn)mIgM，mIgD的出現(xiàn)標(biāo)志著B細(xì)胞成熟對(duì)防止免疫耐受有一定作用第3章抗體占血清Ig含量的1%；半衰期3天第3章抗體IgE單體分子血清中含量最低占Ig的0.002%可與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞上的高親和力Fcε受體（FcεRⅠ）結(jié)合，引起Ⅰ型超敏反應(yīng)FcεRⅡ分布于巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞半衰期3天呼吸道和胃腸道漿細(xì)胞產(chǎn)生介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)過(guò)敏性疾病和某些寄生蟲感染患者血清中特異性IgE水平增高第3章抗體第3章抗體第3章抗體人工制備的抗體多克隆抗體指由不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的針對(duì)抗原物質(zhì)中多種抗原決定簇的多種抗體混合物。如:免疫血清（含多種特異性抗體）。多個(gè)抗原決定基——機(jī)體——多種抗體的混合物單克隆抗體（monoclonalantibody,mAb）由一個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的、針對(duì)某一特定抗原決定簇的高度特異性抗體。基因工程抗體在DNA水平對(duì)Ig基因進(jìn)行切割、拼接或修飾，導(dǎo)入受體細(xì)胞表達(dá)的抗體。第3章抗體漿細(xì)胞骨髓瘤c雜交瘤c第3章抗體單克隆和多克隆抗體的比較和用途用于免疫學(xué)檢測(cè)，輔助臨床診斷McAb用于親和層析，分離微量可溶性抗原標(biāo)記的McAb用于基礎(chǔ)研究，了解細(xì)胞分化等制備生物導(dǎo)彈用于腫瘤、移植等的臨床治療。特異性敏感性均一性McAbPcAb低差無(wú)高強(qiáng)有第3章抗體應(yīng)用：臨床檢測(cè)、抑制器官移植排斥、治療自身免疫疾病、生物導(dǎo)彈等第3章抗體基因工程抗體種類嵌合體移植嫁接體毒素異型結(jié)合第3章抗體第3章抗體第3章抗體第二節(jié)免疫球蛋白的基因免疫球蛋白的基因庫(kù)

H基因庫(kù)（重鏈基因連鎖群）：

---第14號(hào)染色體

κ基因庫(kù)（κ鏈基因連鎖群）：

---第2號(hào)染色體

λ基因庫(kù)（λ鏈基因連鎖群）：

---第22號(hào)染色體第3章抗體Ig的基因結(jié)構(gòu)及其重排和表達(dá)κ鏈：

Vκ(100個(gè))Jκ(5個(gè))Cκ(1個(gè))C區(qū)λ鏈：

Vλ(30個(gè))Jλ-Cλ(4個(gè))第3章抗體H鏈：

V基因(約95個(gè))D基因(27個(gè))J基因(6個(gè))C基因(9個(gè))C區(qū)

V區(qū)第3章抗體第三節(jié)免疫球蛋白合成與分泌體液免疫應(yīng)答與抗體的產(chǎn)生

1、初次應(yīng)答和與再次應(yīng)答

2、Td和Ti抗原的免疫應(yīng)答

3、抗體形成中抗體種類的轉(zhuǎn)換機(jī)制

4、影響體液免疫應(yīng)答的因素第3章抗體免疫球蛋白的表達(dá)、裝配與分泌免疫球蛋白mRNA膜結(jié)合型和分泌型免疫球蛋白的表達(dá)B細(xì)胞發(fā)育與抗體形成抗體在細(xì)胞內(nèi)的裝配、轉(zhuǎn)運(yùn)和分泌個(gè)體發(fā)育的過(guò)程中抗體的形成。第3章抗體造血干細(xì)胞B細(xì)胞發(fā)育過(guò)程:前B細(xì)胞淋巴細(xì)胞前體定向干細(xì)胞幼B細(xì)胞B細(xì)胞AgPCAb第3章抗體第3章抗體第3章抗體第3章抗體免疫球蛋白的免疫原性免疫球蛋白的不同結(jié)構(gòu)區(qū)其免疫原性不同：同種型（isotype）：種屬特異性標(biāo)志同種異型（allotype）