納米藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)(征求意見(jiàn)稿)

納米藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）（征求意見(jiàn)稿）藥品審評(píng)中心二〇二一年三月

目錄一、概述 3二、整體思路 4三、納米藥物的分類(lèi) 5四、納米藥物的質(zhì)量控制研究 7（一）納米藥物的基本信息 7（二）納米藥物的質(zhì)量控制指標(biāo) 7（三）納米藥物的質(zhì)量評(píng)價(jià) 93.1納米藥物的原輔料質(zhì)量控制 103.2納米藥物的粒徑大小及分布 113.3納米藥物的結(jié)構(gòu)及形態(tài) 133.4納米藥物的表面性質(zhì) 133.5納米藥物的包封率和載藥量 143.6納米藥物的體外溶出或釋放 153.7注射用納米藥物的內(nèi)毒素和無(wú)菌檢測(cè) 16（四）納米藥物全過(guò)程質(zhì)量控制 16（五）納米藥物的穩(wěn)定性研究 18（六）納米藥物的上市后變更 19五、參考文獻(xiàn) 20六、附錄 22納米藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）（征求意見(jiàn)稿）一、概述本指導(dǎo)原則所述納米藥物系指利用納米制備技術(shù)將原料藥等制成的具有納米尺度的顆粒，或以適當(dāng)載體材料與原料藥結(jié)合形成的具有納米尺度的顆粒等，及其最終制成的藥物制劑。納米藥物的最終產(chǎn)品或載體材料的外部尺寸、內(nèi)部結(jié)構(gòu)或表面結(jié)構(gòu)具有納米尺度（約100nm以下），或最終產(chǎn)品或載體材料的粒徑在1000nm以下，且具有明顯的尺度效應(yīng)。納米藥物一般具有明確的物理界面。與普通藥物制劑相比，納米藥物具有基于納米結(jié)構(gòu)的尺度效應(yīng)，有可能具有以下潛力：（1）增加藥物的表觀溶解度，提高難溶性藥物的口服吸收，或顯著降低食物效應(yīng)和個(gè)體間差異；（2）通過(guò)包載或復(fù)合藥物，提高藥物的體內(nèi)外穩(wěn)定性，或控制及修飾藥物的溶出或釋放行為；（3）適應(yīng)組織器官或細(xì)胞的選擇性，提高藥物療效降低藥物的毒副作用；（4）制成特殊制劑后實(shí)現(xiàn)新的給藥通路，優(yōu)化藥物聯(lián)合治療策略，或提高候選藥物的成藥性；（5）改變藥物的最終制劑形態(tài)、貯存條件或給藥方式等，降低貯存和運(yùn)輸成本，提高藥品生產(chǎn)和使用的便利性，或改善患者順應(yīng)性等。藥品的安全、有效、質(zhì)量可控性是藥品研發(fā)和藥品評(píng)價(jià)所遵循的基本原則。納米藥物特殊的納米尺寸、納米結(jié)構(gòu)和表面性質(zhì)等可能導(dǎo)致藥物體內(nèi)外行為的明顯變化，從而實(shí)現(xiàn)臨床獲益。同時(shí)，納米尺度效應(yīng)帶來(lái)的安全性風(fēng)險(xiǎn)可能也會(huì)相應(yīng)增加。因此，對(duì)納米藥物質(zhì)量的深入研究和有效控制，對(duì)保證納米藥物的有效性和安全性非常重要。納米藥物的質(zhì)量控制研究在遵循一般性的相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則的基礎(chǔ)上，由于納米藥物的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、制備工藝、臨床配制和使用方法等與傳統(tǒng)藥物可能具有較大差異，可能重新需要設(shè)計(jì)、優(yōu)化和驗(yàn)證納米藥物適用的分析和表征方法，對(duì)納米藥物相關(guān)的特定質(zhì)量性能進(jìn)行研究。本指導(dǎo)原則是在參考國(guó)內(nèi)外已上市納米藥物的相關(guān)信息、國(guó)外相關(guān)指導(dǎo)原則、國(guó)外監(jiān)管機(jī)構(gòu)/行業(yè)協(xié)會(huì)的研討報(bào)告、科研文獻(xiàn)等的基礎(chǔ)上，結(jié)合我國(guó)納米藥物研發(fā)現(xiàn)狀而起草的，旨在為納米藥物的質(zhì)量控制研究提供技術(shù)指導(dǎo)。本指導(dǎo)原則的起草基于當(dāng)前的科學(xué)認(rèn)知，隨著科學(xué)研究的進(jìn)展，相關(guān)內(nèi)容將進(jìn)行修訂完善。二、整體思路納米藥物質(zhì)量控制的整體思路是基于藥物評(píng)價(jià)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估策略，重點(diǎn)關(guān)注納米藥物的質(zhì)量性質(zhì)對(duì)安全有效性的影響?；陲L(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的質(zhì)量控制研究可包括以下幾方面：1）納米藥物的類(lèi)型、組成和結(jié)構(gòu)；2）納米藥物最終貯存形式、給藥途徑和方式、治療目的等；3）納米藥物表征方法的準(zhǔn)確性和適用性；4）納米藥物制備工藝可控性，包括中間控制、控制策略的耐用性等，對(duì)產(chǎn)品關(guān)鍵質(zhì)量屬性的影響；5）納米藥物的質(zhì)量性能對(duì)藥品貯存和使用過(guò)程中的穩(wěn)定性、藥物的體內(nèi)釋放、藥物及其載體的藥代動(dòng)力學(xué)、體內(nèi)分布、生物學(xué)效應(yīng)、安全性以及作用機(jī)制的影響。對(duì)納米藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性進(jìn)行重點(diǎn)研究和充分表征，不僅有利于納米藥物制備工藝參數(shù)的優(yōu)化和關(guān)鍵質(zhì)量屬性的確定，為全面質(zhì)量控制和藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供依據(jù)，也有利于探究納米藥物的生物學(xué)特性和作用機(jī)理等，提高納米藥物體內(nèi)行為的可預(yù)測(cè)性，為臨床前和臨床研究提供參考。三、納米藥物的分類(lèi)本指導(dǎo)原則將納米藥物基本分為三類(lèi)：藥物納米粒、載體類(lèi)納米藥物和其它類(lèi)納米藥物。藥物納米粒通常采用特定制備方法直接將原料藥等加工成納米尺度的顆粒，然后再制成適用于不同給藥途徑的不同劑型。其中，常以藥物活性物質(zhì)為原料，通過(guò)自上而下、自下而上或其它方法制備相應(yīng)的藥物納米粒。自上而下法常通過(guò)研磨或均質(zhì)等方法，將難溶性藥物的大顆粒分散成小顆粒，無(wú)需有機(jī)溶劑；自下而上法常將難溶性藥物溶解于良溶劑后與其不良溶劑混合，并通過(guò)適當(dāng)方法控制析出顆粒的大小和分布。載體類(lèi)納米藥物是指以天然或合成的高分子聚合物（以下簡(jiǎn)稱聚合物）、脂質(zhì)材料、蛋白類(lèi)大分子、無(wú)機(jī)材料等作為藥物遞送的載體材料，基于特定的制備工藝，將原料藥包載、分散、非共價(jià)或共價(jià)結(jié)合于納米載體形成的具有納米尺度的顆粒。按載體材料的種類(lèi)和結(jié)構(gòu)等，載體類(lèi)納米藥物包括但不限于脂質(zhì)體（Liposomes）、聚合物納米粒（Polymericnanoparticles）、聚合物膠束（Polymericmicelles）、白蛋白結(jié)合納米粒（Protein-boundnanoparticles）、無(wú)機(jī)納米粒（Inorganicnanoparticles）等。載體類(lèi)納米藥物可通過(guò)高壓均質(zhì)法、薄膜分散法、溶劑注入法、乳化溶劑擴(kuò)散法、乳化溶劑蒸發(fā)法等工藝制備。其它類(lèi)納米藥物還包括抗體藥物偶聯(lián)物、大分子修飾的蛋白質(zhì)藥物、融合蛋白、病毒樣顆?；蚱渌夹g(shù)路徑制備的創(chuàng)新納米制劑。本指導(dǎo)原則適用于藥物納米粒、載體類(lèi)納米藥物。藥物納米粒和載體類(lèi)納米藥物通常在體內(nèi)外均具有明確的物理界面，其納米結(jié)構(gòu)應(yīng)能表現(xiàn)出納米尺度效應(yīng)，應(yīng)對(duì)納米藥物進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制研究；載體類(lèi)納米藥物常涉及載體材料，其質(zhì)量控制研究與藥物納米粒有所不同。四、納米藥物的質(zhì)量控制研究（一）納米藥物的基本信息納米藥物的基本信息包括申請(qǐng)類(lèi)型、制劑分類(lèi)、組成、粒徑、劑型、給藥途徑和具體給藥方式等。由于納米藥物具有特殊的結(jié)構(gòu)與尺度屬性，因此除處方組成和輔料列表之外，還應(yīng)對(duì)納米藥物和納米載體材料的結(jié)構(gòu)（實(shí)心、囊泡、核殼或多層結(jié)構(gòu)等）和形態(tài)（球形、棒狀、圓盤(pán)狀等）等進(jìn)行詳實(shí)描述；需明確各處方組成成分的主要功能（如增溶劑、載藥載體、包衣穩(wěn)定劑、配體修飾靶向遞送劑等）；還建議提供藥物與載體的結(jié)合方式，以及藥物/載體材料在納米結(jié)構(gòu)中的空間分布等信息。（二）納米藥物的質(zhì)量控制指標(biāo)在納米藥物的研發(fā)過(guò)程中，應(yīng)對(duì)納米藥物和納米材料質(zhì)量相關(guān)的性能指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)和考察。相對(duì)而言，性能指標(biāo)可分為納米相關(guān)特性和基本特性兩大類(lèi)。應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注與納米藥物生產(chǎn)過(guò)程相關(guān)的質(zhì)量指標(biāo)（如無(wú)菌、凍干復(fù)溶等），和可能與體內(nèi)行為相關(guān)的質(zhì)量指標(biāo)（如粒徑、表面電荷、藥物釋放度等）。根據(jù)研究結(jié)果選擇相應(yīng)的質(zhì)量控制指標(biāo)，酌情列入納米藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。與納米特性相關(guān)的性能指標(biāo)包括平均粒徑及其分布、納米粒結(jié)構(gòu)特征、藥物/聚合物摩爾比、微觀形態(tài)、表面性質(zhì)（電荷、比表面積、包衣及厚度、配體及密度等）、包封率、載藥量、納米粒濃度、納米粒穩(wěn)定性、藥物從載體的釋放，以及聚合物的平均分子量及其分布、臨界膠束濃度、臨界聚集濃度等。其中納米粒的穩(wěn)定性包括藥物和載體的化學(xué)穩(wěn)定性，以及納米藥物和載體的物理穩(wěn)定性等，應(yīng)關(guān)注納米藥物的聚集狀態(tài)及演變過(guò)程。制劑基本特性相關(guān)的質(zhì)量控制指標(biāo)包括特性鑒別、含量測(cè)定、有關(guān)物質(zhì)等，以及不同劑型藥典要求的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，如注射液的pH值、粘度、滲透壓、細(xì)菌內(nèi)毒素、無(wú)菌、不溶性微粒等，口服固體制劑的重量差異、崩解時(shí)限、體外釋放度、微生物限度等。需要注意的是，不同納米藥物的質(zhì)量研究重點(diǎn)和內(nèi)容可能不同，應(yīng)根據(jù)納米藥物的結(jié)構(gòu)、組成、功能、用法和臨床用途等，按“具體問(wèn)題具體分析”的原則，設(shè)置具有針對(duì)性的、科學(xué)合理的評(píng)價(jià)指標(biāo)。例如，對(duì)于藥物納米?？裳芯科浣Y(jié)晶性等；對(duì)于載體類(lèi)納米藥物可研究藥物存在形式和狀態(tài)、藥物與載體的結(jié)合方式等；對(duì)臨床即配型納米藥物應(yīng)關(guān)注臨床配制過(guò)程中關(guān)鍵納米特性的變化等。基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的納米藥物質(zhì)量控制研究需要確定其關(guān)鍵質(zhì)量屬性。納米藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性（Criticalqualityattributes，CQAs）及其限度范圍的確定應(yīng)考慮到影響產(chǎn)品性能的所有直接和潛在因素，包括制劑的質(zhì)量屬性、中間體的質(zhì)量屬性、載體材料和/或輔料等的質(zhì)量屬性等。應(yīng)特別關(guān)注這些質(zhì)量屬性在制備、貯存和使用過(guò)程中的變化對(duì)最終產(chǎn)品性能的影響。應(yīng)重點(diǎn)考察與納米特性直接相關(guān)的質(zhì)量屬性。納米藥物的質(zhì)量控制指標(biāo)和CQAs研究，可用于納米藥物的處方工藝篩選和穩(wěn)定性考察等，并為后續(xù)的非臨床研究乃至臨床研究提供參考和依據(jù)。（三）納米藥物的質(zhì)量評(píng)價(jià)為了對(duì)納米藥物和載體材料進(jìn)行全面的質(zhì)量控制研究，必須建立相應(yīng)的質(zhì)量控制方法，并進(jìn)行優(yōu)化和驗(yàn)證。鑒于納米藥物和載體材料的多樣性，對(duì)現(xiàn)有方法需進(jìn)行規(guī)范的方法學(xué)驗(yàn)證；也可建立更具針對(duì)性的檢測(cè)方法并進(jìn)行系統(tǒng)驗(yàn)證；應(yīng)通過(guò)不同方法之間的比較驗(yàn)證等來(lái)證明方法選擇的合理性。在選擇質(zhì)量控制方法時(shí)，應(yīng)注意不同方法提供的產(chǎn)品信息不同，應(yīng)充分考慮不同方法之間的互補(bǔ)性，以實(shí)現(xiàn)對(duì)納米藥物關(guān)鍵質(zhì)量屬性的全面覆蓋和系統(tǒng)研究；同時(shí)應(yīng)關(guān)注擬表征的質(zhì)量屬性與擬采用的檢測(cè)方法之間的契合度，以保證研究方法的適用性。如：1）采用何種檢測(cè)方法能更好地表征納米藥物的特性（粒徑測(cè)定可比較激光衍射、光散射或顯微技術(shù)等）；2）檢測(cè)時(shí)樣品的處理過(guò)程（如稀釋、干燥、超聲、過(guò)濾等）是否會(huì)改變納米藥物的性狀等；3）分析儀器或材料是否與納米藥物發(fā)生相互作用（如濾膜吸附等）。在進(jìn)行相關(guān)質(zhì)量控制研究時(shí)，應(yīng)考慮分析樣本的取樣是否具有代表性，取樣點(diǎn)是否代表各階段產(chǎn)品的狀態(tài)（生產(chǎn)中、中間體、成品、儲(chǔ)存過(guò)程中、臨床使用中），取樣數(shù)量是否符合檢驗(yàn)檢測(cè)要求等。納米藥物的質(zhì)量評(píng)價(jià)包括但不限于以下方面。3.1納米藥物的原輔料質(zhì)量控制對(duì)于納米藥物，其原料藥和關(guān)鍵輔料的質(zhì)量是影響藥物質(zhì)量的重要因素，應(yīng)考察不同來(lái)源原輔料的質(zhì)量并進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量控制研究。藥物納米粒一般由原料藥、穩(wěn)定劑和其他非活性成分組成。除對(duì)原料藥進(jìn)行常規(guī)質(zhì)量控制之外，還應(yīng)關(guān)注其粒徑、晶型等。同時(shí)，鑒于相關(guān)輔料可能對(duì)藥物納米粒的形成、粒徑大小、穩(wěn)定性、生物利用度、生物相容性等產(chǎn)生重要影響，應(yīng)對(duì)最終制劑中的相關(guān)輔料進(jìn)行質(zhì)量控制研究。藥物納米粒中其他非活性成分包括凍干保護(hù)劑、制備過(guò)程中用到的溶劑和試劑等。載體類(lèi)納米藥物一般由原料藥、載體材料和其他非活性成分組成。載體材料包括天然或合成脂質(zhì)、聚合物、蛋白類(lèi)等。載體材料關(guān)系到活性成分的包載、保護(hù)以及最終產(chǎn)品的體內(nèi)外性能，應(yīng)明確載體類(lèi)材料的規(guī)格、純度、分子量和分子量分布范圍等，并通過(guò)處方工藝和質(zhì)量控制研究等證明載體材料選擇的合理性。在納米藥物的開(kāi)發(fā)過(guò)程中，輔料的選擇和使用應(yīng)綜合考慮其功能性和安全性。在納米藥物中按常規(guī)用量和方式使用藥用輔料時(shí)，按一般藥用輔料進(jìn)行質(zhì)量控制即可。為了獲得特殊功能，有時(shí)在納米藥物的開(kāi)發(fā)過(guò)程中需要改變常規(guī)輔料的性能、使用方式或用量，此時(shí)應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注這些特異性改變帶來(lái)的安全性風(fēng)險(xiǎn)。如將現(xiàn)有常規(guī)輔料制備成具有納米結(jié)構(gòu)的輔料，或減少輔料粒徑至納米尺度后，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量控制研究；有時(shí)納米藥物開(kāi)發(fā)中需要制備和使用新的納米材料、載體材料或輔料，此時(shí)除按一般藥用輔料的要求進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量控制研究外，在納米藥物的質(zhì)量控制研究中，應(yīng)選擇其關(guān)鍵質(zhì)量屬性進(jìn)行研究（見(jiàn)“2.納米藥物的質(zhì)量控制指標(biāo)”），必要時(shí)部分質(zhì)量指標(biāo)可列入納米藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。在改變常規(guī)輔料性能或使用新輔料時(shí)，需要結(jié)合輔料的真實(shí)暴露水平、暴露時(shí)間和給藥途徑等，開(kāi)展系統(tǒng)的非臨床安全性評(píng)價(jià)，具體可參考輔料非臨床安全性評(píng)價(jià)相關(guān)指導(dǎo)原則。3.2納米藥物的粒徑大小及分布納米藥物的粒徑大小不僅影響活性成分的載藥量和釋放行為，也與藥代動(dòng)力學(xué)、生物分布和清除途徑等密切相關(guān)，甚至可能與納米藥物的遞送機(jī)制相關(guān)。納米藥物的粒徑分布涉及到納米藥物質(zhì)量穩(wěn)定或變化的程度。因此，納米藥物的粒徑大小和分布對(duì)其質(zhì)量和藥效發(fā)揮具有重要影響，是納米藥物重要的質(zhì)量控制指標(biāo)。準(zhǔn)確的粒徑及分布的控制對(duì)于保證納米藥物的質(zhì)量穩(wěn)定性是必須的。對(duì)納米藥物的粒徑與分布的控制標(biāo)準(zhǔn)，可根據(jù)納米藥物的類(lèi)型、給藥途徑和臨床需求等綜合選擇制定。應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)臏y(cè)定方法對(duì)納米藥物的粒徑及分布進(jìn)行研究，并進(jìn)行完整的方法學(xué)驗(yàn)證及優(yōu)化。粒徑及分布通常采用動(dòng)態(tài)光散射法（Dynamiclightscattering，DLS）進(jìn)行測(cè)定，需要使用經(jīng)過(guò)認(rèn)證的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（Certifiedreferencematerial，CRM）進(jìn)行校驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果為流體動(dòng)力學(xué)粒徑（Rh），粒徑分布一般采用多分散系數(shù)（Polydispersityindex，PDI）表示。除此之外，顯微成像技術(shù)（如透射電鏡（Transmissionelectronmicroscopy，TEM）、掃描電鏡（Scanningelectronmicroscopy，SEM）和原子力顯微鏡（Atomicforcemicroscopy，AFM）、納米顆粒跟蹤分析系統(tǒng)(Nanoparticletrackinganalysis,NTA)、小角X射線散射（Small-angleX-rayscattering，SAXS）和小角中子散射（Small-angleneutronscattering，SANS）等也可提供納米藥物粒徑大小的信息。對(duì)于非單分散的樣品，可考慮將粒徑測(cè)定技術(shù)與其它分散/分離技術(shù)聯(lián)用。3.3納米藥物的結(jié)構(gòu)及形態(tài)納米藥物的結(jié)構(gòu)和形狀可能影響納米藥物在體內(nèi)與蛋白質(zhì)和細(xì)胞膜的相互作用、藥物的釋放、納米顆粒的降解和轉(zhuǎn)運(yùn)等。不同納米技術(shù)制備的納米結(jié)構(gòu)包括囊泡、實(shí)心納米粒、空心納米粒、核-殼結(jié)構(gòu)或多層結(jié)構(gòu)等；納米藥物常見(jiàn)的形狀包括球形、類(lèi)球形、棒狀或纖維狀等。納米藥物的結(jié)構(gòu)形狀可通過(guò)電子顯微鏡等不同的技術(shù)方法進(jìn)行檢測(cè)。必要時(shí)可選擇適當(dāng)?shù)姆椒?，檢測(cè)并控制納米藥物中包封藥物的存在形式和/或晶體狀態(tài)等，從而保證藥物質(zhì)量的可靠性。研究方法包括電鏡法（Electronmicroscopy，EM）、X射線粉末衍射法（X-raypowderdiffraction，XRD）、差示掃描量熱法（Differentialscanningcalorimetry，DSC）、偏振光顯微鏡檢查等。3.4納米藥物的表面性質(zhì)納米藥物的表面電荷可能影響其聚集性能和穩(wěn)定性、與細(xì)胞的相互作用和生物分布等。表面電位取決于納米藥物的粒徑大小、組成以及分散介質(zhì)等。納米藥物的表面電荷一般是基于Zeta電位進(jìn)行評(píng)估。Zeta電位的測(cè)定值依賴于測(cè)定條件，如分散介質(zhì)、離子濃度、pH和儀器參數(shù)等，應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)姆椒ê徒橘|(zhì)進(jìn)行研究，如相分析動(dòng)態(tài)光散射法（Phaseanalysislightscattering，PALS）、電泳光散射法（Electrophoreticlightscattering，ELS）或可調(diào)電阻脈沖感應(yīng)技術(shù)（Tunableresistivepulsesensing，TRPS）等。納米藥物表面的包衣或功能化修飾可能改善其生物相容性、增加體內(nèi)循環(huán)時(shí)間、實(shí)現(xiàn)靶向遞送等。采用適當(dāng)?shù)谋碚骷夹g(shù)對(duì)納米藥物的表面結(jié)構(gòu)等進(jìn)行分析可提供評(píng)價(jià)信息。相關(guān)研究方法包括X射線光電子能譜技術(shù)（X-rayphotoelectronspectroscopy，XPS）、X射線能量色散譜（Energy-dispersiveX-rayspectroscopy，EDS）、飛行時(shí)間-次級(jí)離子質(zhì)譜分析法（Time-of-flightsecondaryionmassspectrometry，TOF-SIMS）、核磁共振（Nuclearmagneticresonance，NMR）、元素分析或高效液相色譜法（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）等。3.5納米藥物的包封率和載藥量對(duì)于載體類(lèi)納米藥物，有效的藥物包封和載藥能力可能增加藥物的體內(nèi)外穩(wěn)定性、控制藥物釋放速度、調(diào)節(jié)藥物的體內(nèi)分布等。包封率和載藥量與納米藥物處方組成和制備工藝等密切相關(guān)，應(yīng)結(jié)合具體藥物的特點(diǎn)、給藥途徑以及治療劑量等進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的制定。包封率是指包封的藥量與納米藥物中總藥量的比值。包封率測(cè)定的關(guān)鍵是分離游離藥物與包封藥物，分離的方法包括葡聚糖凝膠柱法、超速離心法和超濾法等。應(yīng)根據(jù)納米藥物的特點(diǎn)進(jìn)行方法的適用性研究和驗(yàn)證。載藥量是指裝載的藥量與載體類(lèi)納米藥物量（藥量+載體量）的比值。載藥量與藥物-載體的相互作用程度有關(guān)。低載藥量可能導(dǎo)致輔料使用量過(guò)多、納米粒濃度增加或注射體積變大等，使得臨床應(yīng)用受限，且成本和安全風(fēng)險(xiǎn)可能增加。3.6納米藥物的體外溶出或釋放藥物的溶出/釋放是納米藥物的重要質(zhì)量屬性，對(duì)藥物的吸收、體內(nèi)安全性、有效性和體內(nèi)外穩(wěn)定性等可能有明顯影響。體外溶出/釋放不僅是納米藥物的質(zhì)量控制指標(biāo)，也可在一定程度上反映納米藥物的體內(nèi)行為。無(wú)論是使用現(xiàn)有方法或修訂及重新建立，納米藥物的溶出/體外釋放測(cè)定法均應(yīng)經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證，以確保方法的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性；對(duì)于產(chǎn)品之間存在的可能影響其臨床療效的差異，應(yīng)具有較好的區(qū)分性，對(duì)處方和生產(chǎn)過(guò)程中的變化具有一定的敏感性。納米藥物的體外溶出/釋放測(cè)定的方法，有取樣和分離、連續(xù)流和透析等不同類(lèi)型。在進(jìn)行體外溶出/釋放測(cè)定時(shí)，應(yīng)充分考慮方法的適用性，詳細(xì)描述所用方法、試驗(yàn)條件和參數(shù)（如設(shè)備/儀器的型號(hào)規(guī)格、介質(zhì)、攪拌/旋轉(zhuǎn)速度、溫度、pH值、表面活性劑的類(lèi)型和濃度等），以說(shuō)明方法選擇的合理性。一般應(yīng)繪制完整的釋放曲線，至釋放達(dá)到平臺(tái)期，或釋放80%以上。3.7注射用納米藥物的內(nèi)毒素和無(wú)菌檢測(cè)在評(píng)估納米藥物的免疫毒性和安全性時(shí)，無(wú)菌和細(xì)菌內(nèi)毒素的檢測(cè)非常重要。對(duì)無(wú)菌和內(nèi)毒素的要求根據(jù)納米藥物處方和給藥途徑的不同而不同。內(nèi)毒素通常用鱟試劑（LimulusAmebocyteLysate，LAL）法測(cè)定，有三種形式：顯色、濁度和凝膠檢測(cè)。在一些情況下納米顆?？赡軙?huì)干擾LAL測(cè)定，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確或重現(xiàn)性差。常見(jiàn)的干擾包括有色納米制劑會(huì)干擾熒光測(cè)定，納米混懸劑會(huì)干擾濁度測(cè)定，以及用纖維素濾器過(guò)濾的納米顆粒會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性。在使用某一種LAL法測(cè)定受到干擾時(shí)，應(yīng)考慮采用另一種測(cè)定形式。許多納米藥物因其組成和結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性，可能無(wú)法通過(guò)常規(guī)的終端滅菌程序進(jìn)行滅菌，因此無(wú)菌檢測(cè)對(duì)于納米藥物非常重要。（四）納米藥物全過(guò)程質(zhì)量控制一般認(rèn)為，僅通過(guò)檢測(cè)最終產(chǎn)品的質(zhì)量屬性來(lái)保證產(chǎn)品質(zhì)量是不充分的，有必要加強(qiáng)從生產(chǎn)到使用的全過(guò)程的質(zhì)量控制，以確保納米藥物的質(zhì)量。具體而言，要對(duì)納米藥物所用到的原料藥、輔料、包裝材料等以及生產(chǎn)階段、運(yùn)輸階段、臨床配制階段和使用階段分別進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量控制研究，避免不同階段納米藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性產(chǎn)生明顯變化，并影響其人體安全性和有效性等。對(duì)于藥物納米粒，其原輔料的質(zhì)量控制見(jiàn)“3.1納米藥物原輔料的質(zhì)量控制”部分。對(duì)于載體類(lèi)納米藥物，聚合物等載體材料不僅應(yīng)按照藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)，而且其生產(chǎn)過(guò)程也應(yīng)作為納米藥物制備過(guò)程的一部分，進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，以保證其制備工藝和質(zhì)量的可靠性。對(duì)載體材料的過(guò)程控制一般應(yīng)包括：合成、提取和純化過(guò)程；任何起始物料的來(lái)源、規(guī)格、分子量及分布范圍；生產(chǎn)過(guò)程中的雜質(zhì)或反應(yīng)副產(chǎn)物；關(guān)鍵中間體的識(shí)別和控制；生物技術(shù)衍生和/或生物來(lái)源的物質(zhì)作為起始材料時(shí)，應(yīng)符合相關(guān)藥用要求等。為確保制備工藝的可靠性，應(yīng)對(duì)納米藥物制備工藝參數(shù)和生產(chǎn)設(shè)備的采取在線或過(guò)程控制，應(yīng)提供詳細(xì)的生產(chǎn)工藝開(kāi)發(fā)研究資料、生產(chǎn)設(shè)備的廠家、型號(hào)等信息；應(yīng)對(duì)制備過(guò)程和關(guān)鍵工藝參數(shù)進(jìn)行詳細(xì)的描述，并制定合理的過(guò)程控制策略，如關(guān)鍵步驟的生產(chǎn)條件和時(shí)限、關(guān)鍵生產(chǎn)設(shè)備的規(guī)格和設(shè)置、關(guān)鍵中間體的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)、保存條件與時(shí)限等；建立和確定CQAs對(duì)于納米藥物制備的過(guò)程控制和優(yōu)化都非常重要，應(yīng)在系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上根據(jù)納米藥物的特性等建立完善合理的檢測(cè)指標(biāo)；應(yīng)重視納米藥物關(guān)鍵生產(chǎn)工藝的優(yōu)化和驗(yàn)證，如對(duì)藥物納米粒的均質(zhì)工藝條件、無(wú)菌納米藥物的無(wú)菌工藝條件等進(jìn)行充分的優(yōu)化和篩選，并進(jìn)行齊全的驗(yàn)證。另外，納米藥物制備工藝研究是一個(gè)動(dòng)態(tài)的持續(xù)的過(guò)程，應(yīng)隨著研究的進(jìn)展進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整和驗(yàn)證，以保證最終產(chǎn)品質(zhì)量連續(xù)可靠。納米藥物的生產(chǎn)規(guī)模同樣會(huì)影響其質(zhì)量、安全性和有效性。生產(chǎn)規(guī)模的改變可能會(huì)影響其表觀理化性質(zhì)、制劑/產(chǎn)品穩(wěn)定性和工藝材料的殘留等，從而影響納米藥物的體內(nèi)作用、藥代動(dòng)力學(xué)與組織分布，導(dǎo)致影響藥物的療效和安全性。因此，應(yīng)特別關(guān)注生產(chǎn)批量對(duì)納米藥物質(zhì)量可控性的影響，在改變生產(chǎn)規(guī)模時(shí)應(yīng)進(jìn)行全面的質(zhì)量對(duì)比檢查。為了全面地評(píng)估批次間的一致性，不僅要考慮納米藥物的理化性能，還必須考察其生物功能、藥物釋放行為或其它因素。同樣地，盡早建立CQAs并監(jiān)測(cè)不同批次的相關(guān)參數(shù)，有助于不同批次納米藥物之間的質(zhì)量銜接性（如早期開(kāi)發(fā)批和正式商業(yè)批），減少批次不同的風(fēng)險(xiǎn)。當(dāng)納米藥物應(yīng)用于臨床時(shí)，應(yīng)評(píng)估其批間差異。注冊(cè)批和商業(yè)批的生產(chǎn)工藝及批量原則上應(yīng)保持一致。（五）納米藥物的穩(wěn)定性研究建立適當(dāng)?shù)姆椒▉?lái)準(zhǔn)確評(píng)估納米藥物的穩(wěn)定性非常重要?？赡軙?huì)影響納米藥物穩(wěn)定性的因素包括：聚合物或納米顆粒的降解、納米顆粒的聚集、藥物的降解、載體內(nèi)藥物的泄露、表面修飾分子或包衣材料的降解等。通過(guò)簡(jiǎn)單的粒徑和表面電荷測(cè)定有時(shí)難以全面評(píng)估納米粒的穩(wěn)定性，需要結(jié)合納米藥物自身特點(diǎn)，建立符合要求的評(píng)價(jià)方法或指標(biāo)。穩(wěn)定性試驗(yàn)應(yīng)關(guān)注但不限于以下指標(biāo)及其變化：粒徑及分布、粒子形狀和電荷；藥物或納米顆粒的分散狀態(tài)；納米顆粒的再分散性；藥物的體外溶出、釋放或泄露；納米顆粒的降解（包括表面配體的清除或交換）；納米顆粒和包材的相容性；配制與使用中與稀釋液、注射器、輸液袋等的相容性。納米藥物穩(wěn)定性的研究包括儲(chǔ)存期間、配制階段和臨床使用中的穩(wěn)定性以及影響因素考察。（六）納米藥物的上市后變更納米藥物上市后的藥學(xué)變更研究可參考相關(guān)指導(dǎo)原則，根據(jù)變更對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響程度開(kāi)展藥學(xué)比較研究、體內(nèi)生物等效性（Bioequivalence，BE）研究或臨床研究等。應(yīng)保留關(guān)鍵批次的樣品用于變更前后的數(shù)據(jù)對(duì)比。關(guān)于變更研究深入程度，取決于納米藥物自身特征、變更類(lèi)型及變更階段等。提供的變更資料應(yīng)包括不同批次納米藥物的體外關(guān)鍵性質(zhì)的比較，特別是可能受變更影響或不能確定影響程度的檢測(cè)指標(biāo)。體內(nèi)研究則應(yīng)證明變更后藥品的安全性和有效性是否發(fā)生改變等。五、參考文獻(xiàn)FDA.GuidanceforIndustry:ConsideringWhetheranFDA-RegulatedProductInvolvestheApplicationofNanotechnology.2014.FDA.GuidanceforIndustry:DrugProducts,IncludingBiologicalProducts,thatContainNanomaterials（draft）.2017.FDA.Nanotechnology:AreportoftheU.S.FoodandDrugAdministrationNanotechnologyTaskForce，2007.FDA.GuidanceforIndustry:LiposomeDrugProductsChemistry,Manufacturing,andControls;HumanPharmacokineticsandBioavailability;andLabelingDocumentation.2002.USNationalInstitutesofHealthCampus.Reportonthe2016GlobalSummitonRegulatoryScience(GSRS16):NanotechnologyStandardsandApplications[EB/OL].2016.EMA.Surfacecoatings:generalissuesforconsiderationregardingparenteraladministrationofcoatednanomedicineproducts.2013.EMA.Datarequirementsforintravenousiron-basednano-colloidalproductsdevelopedwithreferencetoaninnovatormedicinalproduct.2015.EMA.Datarequirementsforintravenousliposomalproductsdevelopedwithreferencetoaninnovatorliposomalproduct.2013.EMA.Developmentofblock-copolymer-micellemedicinalproducts.2014.MHLW.Reflectionpaperonnucleicacids(siRNA)-loadednanotechnology-baseddrugproducts.2016.MHLW.GuidelinefortheDevelopmentofLiposomeDrugProducts.2016.NanomedicineCharacterisationLaboratory.AssayCascade.http://www.euncl.eu/about-us/assay-cascade.NMPA.化學(xué)藥品注射劑仿制藥（特殊注射劑）質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求.2020.NMPA.鹽酸多柔比星脂質(zhì)體注射液仿制藥研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）.2020.TahaMS,PadmakumarS,SinghA,etal.Criticalqualityattributesinthedevelopmentoftherapeuticnanomedicinestowardclinicaltranslation.Drugdeliveryandtranslationalresearch.2020,10(3):766-790./Paper/Detail/PeriodicalPaper_PM32170656/Paper/Detail/PeriodicalPaper_PM32170656TynerKM,ZhengN,ChoiS,etal.HowHasCDERPreparedfortheNanoRevolution?AReviewofRiskAssessment,RegulatoryResearch,andGuidanceActivities.TheAAPSjournal.2017,19(4):1071-1083./content/ssam/15507416/2017/00000019/00000004/art00015/content/ssam/15507416/2017/00000019/00000004/art00015CristRM,GrossmanJH,PatriAK,etal.Commonpitfallsinnanotechnology:lessonslearnedfromNCI'sNanotechnologyCharacterizationLaboratory.IntegrativeBiology.2013,5(1):66-73./content/rsoc/17579694/2013/00000005/00000001/art00010/content/rsoc/17579694/2013/00000005/00000001/art00010RawalM,SinghA,AmijiMM.Quality-by-DesignConceptstoImproveNanotechnology-BasedDrugDevelopment.PharmRes.2019,36(11):153./31482243//31482243//openview/d9101b7e1edcca05b8d80b3f28525d14/1?pq-origsite=gscholar&cbl=37334原文只有1頁(yè)。PallottaA,BoudierA,CreusotB,etal.Qualitycontrolofgoldnanoparticlesaspharmaceuticalingredients.IntJPharm.2019,569:118583.https://www.sci-hub.se/10.1016/j.ijpharm.2019.118583原文共https://www.sci-hub.se/10.1016/j.ijpharm.2019.118583原文共9頁(yè)，但是未編號(hào)，也未查到期號(hào)。AnsarSM,MudaligeT.Directandsimultaneousdeterminationofintra-liposomalandexternalsulfateinliposomaldoxorubicinformulationsbycapillaryelectrophoresis/inductivelycoupledplasma-tandemmassspectrometry(CE/ICP-MS/MS).IntJPharm.2019;561:283-288.中心要求參考文獻(xiàn)英文雜志名寫(xiě)縮寫(xiě)，前同。/science/article/abs/pii/S0378517319301784中心要求參考文獻(xiàn)英文雜志名寫(xiě)縮寫(xiě)，前同。/science/article/abs/pii/S0378517319301784未查到期號(hào)。CotyJ-B,VauthierC.Characterizationofnanomedicines:Areflectiononafieldunderconstructionneededforclinicaltranslationsuccess.JControlRelease.2018,275:254-268/29454063/未查到期號(hào)。./29454063/未查到期號(hào)。VarenneF,HillaireauH,BatailleJ,中心要求參考文獻(xiàn)作者姓名姓在前。FannyVarenne、H.Hillaireau、J.Bataille中心要求參考文獻(xiàn)作者姓名姓在前。FannyVarenne、H.Hillaireau、J.Bataille/publication/327484480_Application_of_Validated_Protocols_to_Characterize_Size_and_Zeta_Potential_of_Dispersed_Materials_using_Light_Scattering_Methods雜志全稱為ColloidsandSurfacesAPhysicochemicalandEngineeringAspects，縮寫(xiě)為COLLOIDSURFACEA未查到期號(hào)。D'SouzaS.Areviewofinvitrodrugreleasetestmethodsfornano-sizeddosageforms.Adv.Pharm.,2014,2014(2),1-12./archive/2014/304757.pdf/archive/2014/304757.pdfFontanaF,FigueiredoP,ZhangP,etal.Productionofpuredrugnanocrystalsandnanoco-crystalsbyconfinementmethods.Adv.DrugDeliv.Rev.2018,131,3-21/science/article/abs/pii/S0169409X18300838未