肉類(lèi)產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法擴(kuò)增子測(cè)序法-編制說(shuō)明

一、項(xiàng)目來(lái)源根據(jù)《廣西標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)關(guān)于下達(dá)2022年第十八批團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知》（桂標(biāo)協(xié)〔2022〕56號(hào)）精神，由廣西壯族自治區(qū)藥品監(jiān)督管理局提出，廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所、廣西-東盟食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心、廣西愛(ài)生生命科技有限公司、深圳華大智造科技股份有限公司共同起草的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《肉類(lèi)產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法擴(kuò)增子測(cè)序法》（項(xiàng)目編號(hào)2022-1801）獲批立項(xiàng)。二、項(xiàng)目背景及目的意義禽肉是我國(guó)第二大肉類(lèi)消費(fèi)品。我國(guó)肉類(lèi)消費(fèi)常年穩(wěn)定在8000萬(wàn)噸以上，主要以豬肉、禽肉、牛肉和羊肉為主。根據(jù)國(guó)家統(tǒng)計(jì)局公布的數(shù)據(jù)顯示，2019年我國(guó)居民人均肉類(lèi)消費(fèi)量為26.91kg/年，其中人均豬肉消費(fèi)量為20.28kg/年，人均牛肉消費(fèi)量為2.2kg/年，人均羊肉消費(fèi)量為1.19kg/年，人均禽類(lèi)消費(fèi)量為10.8kg/年。2020年我國(guó)居民豬牛羊肉人均占有量37.38kg/年。隨著我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)水平及人民生活水平的大幅提高，動(dòng)物源性食品在我國(guó)城鄉(xiāng)居民的日常膳食消費(fèi)中所占比例逐年增長(zhǎng)，同時(shí)消費(fèi)者對(duì)動(dòng)物源性食品的質(zhì)量安全越來(lái)越關(guān)注。近年來(lái)部分不法分子為了追求高利潤(rùn)，用價(jià)格低廉的肉類(lèi)替代產(chǎn)品標(biāo)簽中的高價(jià)肉類(lèi)，對(duì)消費(fèi)者造成欺詐，嚴(yán)重影響及破壞食品安全秩序。牛肉在世界肉類(lèi)消耗中排名第三，牛肉中含有大量的蛋白質(zhì)和氨基酸，牛肉的肉類(lèi)結(jié)構(gòu)組織更適合人類(lèi)的需要，可以增加人體的抗病能力，對(duì)于長(zhǎng)身體的孩子來(lái)說(shuō)非常有益。牛肉可以起到補(bǔ)血的功效，缺血可以用牛肉來(lái)補(bǔ)。牛肉也是食肉朋友的最?lèi)?ài)，在美國(guó)等國(guó)家牛肉成為主食，甚至美式早餐中都有牛肉的身影。第一種，用其他肉類(lèi)來(lái)代替牛肉。用廉價(jià)的肉類(lèi)來(lái)代替牛肉是商販最常用的手段，多是用雞肉和鴨肉這類(lèi)肉來(lái)代替，有的會(huì)用豬肉代替。或許會(huì)有疑問(wèn)，為什么這類(lèi)肉會(huì)有牛肉的味道呢？制作假牛肉是會(huì)放入牛肉精添加劑，加入牛肉精后肉類(lèi)的顏色和光澤會(huì)變得和不相上下，最后再用肉精膏涂抹均勻，這樣制作出的假牛肉簡(jiǎn)直和真牛肉一模一樣。第二種是合成肉，這類(lèi)肉多是用牛肉的邊角料，或者用其他肉類(lèi)、爛肉做出。制作這種假牛肉更是簡(jiǎn)單，只需將碎肉用類(lèi)似于“粘合劑”的添加劑粘合起來(lái)，就成了以假亂真的牛肉了。這種牛肉多會(huì)制作成價(jià)格低廉的牛排、烤肉中的牛肉片、火鍋中的肥牛等。第三種是利用各種爛肉、內(nèi)臟風(fēng)干制成的牛肉干。這種肉含有大量的添加劑，對(duì)人體傷害非常大。目前國(guó)內(nèi)外用于肉制品的摻假檢驗(yàn)以PCR-RFLP、多重PCR、實(shí)時(shí)熒光PCR等方法為主。然而，這些技術(shù)一般每次僅能檢測(cè)一種或兩種指標(biāo)，無(wú)法全面分析檢測(cè)食品中所涉及的多種動(dòng)物源性成分，當(dāng)遇到幾個(gè)不同品種的混合樣品時(shí)，要確定每個(gè)品種在混合物中的相對(duì)量需要找到品種中唯一的已知目標(biāo)序列作為參考序列，要獲得精確的測(cè)定結(jié)果非常困難，并且現(xiàn)有檢測(cè)方法難以滿足高效快速、批量大、大規(guī)模、操作簡(jiǎn)單等檢測(cè)需求，無(wú)法滿足市場(chǎng)監(jiān)管、企業(yè)原料及成品質(zhì)量實(shí)時(shí)控制的迫切需求。因此，制定團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《肉類(lèi)產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法擴(kuò)增子測(cè)序法》十分必要和緊迫。三、項(xiàng)目編制過(guò)程（一）成立標(biāo)準(zhǔn)編制工作組團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《肉類(lèi)產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法擴(kuò)增子測(cè)序法》項(xiàng)目任務(wù)下達(dá)后，廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所牽頭組織成立了標(biāo)準(zhǔn)編制工作組，制定了標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)方案，明確任務(wù)職責(zé)，確定工作技術(shù)路線，開(kāi)展標(biāo)準(zhǔn)研制工作，具體由廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所、廣西-東盟食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心、廣西愛(ài)生生命科技有限公司、深圳華大智造科技股份有限公司相關(guān)人員配合。（二）收集整理文獻(xiàn)資料標(biāo)準(zhǔn)編制工作組收集了國(guó)內(nèi)有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全和高通量測(cè)序的相關(guān)技術(shù)文獻(xiàn)資料。主要有：SN/T2557-2010畜肉食品中牛成分定性檢測(cè)方法實(shí)時(shí)熒光PCR法GB/T5009.1食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法理化部分總則GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T30989高通量基因測(cè)序技術(shù)規(guī)程GB/T33681.1高通量基因測(cè)序樣本預(yù)處理方法第1部分：動(dòng)物組織樣本預(yù)處理GB/T35537高通量基因測(cè)序結(jié)果評(píng)價(jià)要求GB/T40664用于高通量測(cè)序的核酸類(lèi)樣本質(zhì)量控制通用要求（三）研討確定標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編制工作組在對(duì)收集的資料進(jìn)行整理研究之后，標(biāo)準(zhǔn)編制工作組召開(kāi)了標(biāo)準(zhǔn)編制會(huì)議，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的整體框架結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵性內(nèi)容進(jìn)行了初步探討。經(jīng)過(guò)研究，標(biāo)準(zhǔn)的主體內(nèi)容確定為擴(kuò)增子測(cè)序法的檢測(cè)原理、試劑和材料、主要儀器設(shè)備、樣本采集與處理、檢測(cè)方法、結(jié)果分析及判定。（四）調(diào)研及形成草案、征求意見(jiàn)稿、2022年7月，在前期工作的基礎(chǔ)之上，通過(guò)理清邏輯脈絡(luò)，整合已有的參考資料中有關(guān)高通量測(cè)序的要求，并結(jié)合動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法實(shí)際要求的基礎(chǔ)上，按照簡(jiǎn)化、統(tǒng)一等原則編制完成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《肉類(lèi)產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法擴(kuò)增子測(cè)序法》（草案）。2023年3月，標(biāo)準(zhǔn)編制工作組對(duì)前期的研究和數(shù)據(jù)進(jìn)了整理并結(jié)合前期技術(shù)咨詢會(huì)、征求意見(jiàn)會(huì)、技術(shù)審查會(huì)的內(nèi)容針對(duì)擴(kuò)增子測(cè)序法進(jìn)行多次討論、研究，最終形成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《肉類(lèi)產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法擴(kuò)增子測(cè)序法》（征求意見(jiàn)稿）和編制說(shuō)明。四、標(biāo)準(zhǔn)制定原則（一）實(shí)用性原則本文件是在充分收集相關(guān)資料和文獻(xiàn)，分析動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法當(dāng)前現(xiàn)狀，調(diào)研高通量測(cè)序分析方法情況，在現(xiàn)有國(guó)家、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法要求的基礎(chǔ)上，結(jié)合多年經(jīng)驗(yàn)而總結(jié)起草的。符合當(dāng)前動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法的方向與需求，有利于行業(yè)的長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展，具有較強(qiáng)的實(shí)用性和可操作性。（二）協(xié)調(diào)性原則本文件編寫(xiě)過(guò)程中注意了與高通量測(cè)序方法相關(guān)法律法規(guī)的協(xié)調(diào)問(wèn)題，在內(nèi)容上與現(xiàn)行法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致。（三）規(guī)范性原則本文件嚴(yán)格按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求和規(guī)定編寫(xiě)本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容，保證標(biāo)準(zhǔn)的編寫(xiě)質(zhì)量。（四）前瞻性原則本文件通過(guò)擴(kuò)增子測(cè)序法，驗(yàn)證分析肉類(lèi)樣品，建立動(dòng)物源性產(chǎn)品中肉類(lèi)摻假檢測(cè)分析平臺(tái)，彌補(bǔ)擴(kuò)增子高通量測(cè)序法在標(biāo)準(zhǔn)領(lǐng)域的缺失，在標(biāo)準(zhǔn)中體現(xiàn)了個(gè)別特色性、前瞻性和先進(jìn)性條款，作為對(duì)動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法的指導(dǎo)。五、標(biāo)準(zhǔn)主要章節(jié)內(nèi)容及確定依據(jù)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《肉類(lèi)產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法擴(kuò)增子測(cè)序法》主要內(nèi)容包括術(shù)語(yǔ)和定義、要求、檢測(cè)原理、試劑和材料、主要儀器設(shè)備、樣本采集與處理、檢測(cè)方法、結(jié)果分析及判定。自2012年起，廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所就開(kāi)始對(duì)肉類(lèi)產(chǎn)品中動(dòng)物源性成分進(jìn)行檢測(cè)，完成幾百份樣品的檢測(cè)分析，數(shù)據(jù)量豐富，在不斷的試驗(yàn)過(guò)程中試驗(yàn)方法得到不斷完善，最終形成準(zhǔn)確度高、可操作性強(qiáng)的動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法。本標(biāo)準(zhǔn)采用高通量測(cè)序法對(duì)動(dòng)物源性成分進(jìn)行測(cè)定。術(shù)語(yǔ)和定義高通量測(cè)序high-throughputgenesequencing主要依據(jù)GB/T30989《高通量基因測(cè)序技術(shù)規(guī)程》3.19的“高通量測(cè)序high-throughputgenesequencing”術(shù)語(yǔ)和定義的要求。原理選取線粒體16SrRNA基因中的特殊區(qū)域作為動(dòng)物物種的遺傳標(biāo)記，包括可變區(qū)和保守區(qū)，可變區(qū)用于在屬或種水平對(duì)動(dòng)物物種進(jìn)行分類(lèi)。采用帶有index序列的特定引物，對(duì)待測(cè)樣本的DNA樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增建庫(kù)，并對(duì)所構(gòu)建的文庫(kù)進(jìn)行高通量測(cè)序。然后，通過(guò)對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行生物信息學(xué)比對(duì)，分析能比對(duì)到物種數(shù)據(jù)庫(kù)中對(duì)應(yīng)的物種及其數(shù)據(jù)量比例，即可對(duì)混合樣品中的各成分進(jìn)行準(zhǔn)確定性和定量分析。試劑除另有規(guī)定外，所有試劑應(yīng)為不含DNA和Dnase的分析純或生化試劑，實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682一級(jí)水的要求。CTAB提取液：CTAB20g/L，氯化鈉1.4mol/L，Tris0.1mol/L，EDTA20mmol/L，pH8.0，121℃高壓滅菌20min。使用前加入終濃度為2%的β-巰基乙醇。CTAB沉淀液：CTAB5g/L，氯化鈉0.04mol/L，pH8.0，121℃高壓滅菌20min。測(cè)序試劑盒：根據(jù)測(cè)序目標(biāo)和平臺(tái)，選用相應(yīng)的試劑盒。標(biāo)準(zhǔn)文庫(kù)試劑：基于測(cè)序平臺(tái)，選用相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)文庫(kù)。儀器設(shè)備磁力架，孔徑：12mm；適用于1.5-2mL離心管。移液器，單道可調(diào)量程移液器0.1-2.5μL、0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL。PCR儀。Qubit?Fluorometer。高速冷凍離心機(jī)。恒溫水浴鍋或金屬浴。-20℃冰箱。核酸濃度測(cè)定儀器。電泳儀。凝膠成像系統(tǒng)。高通量基因測(cè)序儀：基于不同的測(cè)序平臺(tái)，選用合適的測(cè)序儀。Bioanalyzer芯片生物分析儀。樣本采集與處理1.樣本采集要求樣本的采集、運(yùn)輸、放置過(guò)程中應(yīng)盡量避免受到其它種類(lèi)樣本的污染。在采樣過(guò)程中應(yīng)確保采樣器具清潔、干燥、無(wú)異味。采樣、制樣器具及樣本容器所用材質(zhì)不應(yīng)對(duì)采集樣本造成污染。為了避免交叉污染，盡可能使用不同的采樣器具采集不同的樣本，盛裝樣本的容器或包裝應(yīng)盡可能一次性使用。本標(biāo)準(zhǔn)中檢測(cè)樣本為動(dòng)物組織及其產(chǎn)品，采樣要求參照GB/T5009.1中8的要求。2.樣本處理要求動(dòng)物組織樣本處理應(yīng)符合GB/T33681.1的要求，并按8.1中核酸制備樣本處理步驟進(jìn)行前處理。加工食品的前處理方法宜參考SN/T2557-2010中的要求。檢測(cè)方法1.核酸提?。?）樣本應(yīng)提取全基因組DNA，提取方法宜參考附錄A或者按照所使用的商業(yè)化試劑盒說(shuō)明提取。（2）提取后的核酸應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，使用合適的核酸濃度測(cè)定儀器（如紫外分光光度計(jì)，nanodrop等）測(cè)定OD260/OD280，比值為1.5～2.0，基因組的完整性和濃度應(yīng)符合GB/T40664-2021中4.2要求。2.建庫(kù)與高通量測(cè)序（參考附錄B或附錄C）（1）擴(kuò)增區(qū)域應(yīng)選擇線粒體16SrRNA基因上一段連續(xù)的，在不同物種間變異程度較高的區(qū)域。擴(kuò)增區(qū)域應(yīng)在樣品可能包含的物種間具有較高的差異性，且應(yīng)包括至少一個(gè)高可變區(qū)。擴(kuò)增區(qū)域應(yīng)符合測(cè)序策略要求的片段大小。（2）將待測(cè)序文庫(kù)應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制檢測(cè)。按照瓊脂糖凝膠電泳方法或者熒光定量方法進(jìn)行文庫(kù)質(zhì)控，文庫(kù)質(zhì)檢時(shí)，文庫(kù)的片段大小分布應(yīng)符合預(yù)期，文庫(kù)濃度應(yīng)不低于1.2ng/μL。建庫(kù)過(guò)程中宜設(shè)置陰性對(duì)照與陽(yáng)性對(duì)照。（3）將多個(gè)質(zhì)檢合格的文庫(kù)混合，選擇適合的工作流程進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序應(yīng)遵照DNA測(cè)序儀的操作規(guī)范進(jìn)行。測(cè)序策略應(yīng)與擴(kuò)增子大小相匹配，測(cè)序條件應(yīng)進(jìn)行合理控制，使數(shù)據(jù)質(zhì)量達(dá)到測(cè)序平臺(tái)要求。（4）測(cè)序結(jié)果應(yīng)符合GB/T35537-2017要求。結(jié)果分析及判定根據(jù)需要鑒定的物種拉丁名在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)(/nuccore)中獲取各個(gè)物種的特異性序列，構(gòu)建用于本地?cái)?shù)據(jù)分析的物種數(shù)據(jù)庫(kù)。高通量測(cè)序得到的數(shù)據(jù)中，篩選有效OTU的前50個(gè)堿基序列，與物種數(shù)據(jù)庫(kù)基因序列進(jìn)行比對(duì)，相似度100%的物種則為該肉類(lèi)樣品中的有效成分；統(tǒng)計(jì)各成分物種有效OTU的reads數(shù)，得到不同物種的百分比例，認(rèn)為該比例是該肉類(lèi)樣品中各成分的比例，精確定量可參考各物種中參考基因的拷貝數(shù)與質(zhì)量對(duì)應(yīng)表推算。1.數(shù)據(jù)質(zhì)控樣本經(jīng)過(guò)測(cè)序得到的原始數(shù)據(jù)，應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制，去除含有接頭或者低質(zhì)量的序列和外源基因組序列，再進(jìn)行后續(xù)生物信息學(xué)分析。2.軟件測(cè)序結(jié)果比對(duì)（1）定性比對(duì)分析：使用AnimalDNAMetabarcodingAnalysis軟件，將質(zhì)控得到的樣品數(shù)據(jù)FASTQ文件，比對(duì)物種基因組數(shù)據(jù)庫(kù)，分析得到物種的拉丁名和基因序列。（2）定量比對(duì)分析：使用AnimalDNAMetabarcodingAnalysis軟件，統(tǒng)計(jì)比對(duì)到各成分物種基因序列中前50個(gè)堿基的比例，該比例認(rèn)為是樣品中各成分的比例。3.網(wǎng)頁(yè)測(cè)序結(jié)果比對(duì)登錄動(dòng)物DNA宏條形碼鑒定分析平臺(tái)（:9003），完成測(cè)序結(jié)果分析。方法的準(zhǔn)確度選取9個(gè)不同物種進(jìn)行檢測(cè)，按試驗(yàn)方法，使用不同品牌測(cè)序儀在2家實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。分析結(jié)果與樣品組分一致，而且同一樣品在2家實(shí)驗(yàn)室使用不同品牌測(cè)序儀獲得的測(cè)試結(jié)果一致。說(shuō)明本方法的準(zhǔn)確度好，具有普遍性，適合推廣使用。表1樣品準(zhǔn)確度檢測(cè)結(jié)果實(shí)驗(yàn)室/測(cè)序儀編號(hào)組分測(cè)序結(jié)果總Reads數(shù)鑒定物種物種比例廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所/IlluminaMiseqzhu豬318813Sus_scrofa100.00%ji雞25836Gallus_gallus100.00%niu牛80729Bubalus_bubalis100.00%mao貓19852Felis_catus100.00%ge鴿52306Columba_livia100.00%shu鼠29863Mus_musculus100.00%yang羊358281Ovis_aries100.00%xia蝦83754Penaeus_latisulcatus100.00%ya鴨27632Anas_platyrhynchos100.00%深圳華大智造科技股份有限公司/MGIDNBSEQ-E25zhu豬1070046Sus_scrofa100.00%ji雞621948Gallus_gallus100.00%niu牛1019269Bubalus_bubalis100.00%mao貓1472329Felis_catus100.00%ge鴿481137Columba_livia100.00%shu鼠725382Mus_musculus100.00%yang羊1016920Ovis_aries100.00%xia蝦718355Penaeus_latisulcatus100.00%ya鴨1057980Anas_platyrhynchos100.00%方法的精密度按實(shí)驗(yàn)方法對(duì)混合有不同物種的2個(gè)樣品進(jìn)行測(cè)定，選取3家實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)，分別得出2個(gè)平行樣的測(cè)定結(jié)果,見(jiàn)表2。從測(cè)定結(jié)果可以看出，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD值)均小于8％，說(shuō)明方法的精密度高。而且在重復(fù)條件下3家實(shí)驗(yàn)室獲得的測(cè)試結(jié)果的RSD值均小于2％。表2樣品精密度測(cè)定結(jié)果實(shí)驗(yàn)室/測(cè)序儀編號(hào)組分（比例/%）測(cè)序結(jié)果Reads數(shù)鑒定物種（比例/%）平均值（％）RSD（％）廣西壯族自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所/IlluminaMiseqHE-1牛：50羊：5050902Bos_taurus:51.74Ovis_aries:48.26Bos_taurus:52.29Ovis_aries:47.71Bos_taurus:1.49Ovis_aries:1.63HE-2牛：50羊：5034778Bos_taurus:52.84Ovis_aries:47.16HF-1牛：99羊：124886Bos_taurus:98.23Ovis_aries:1.77Bos_taurus:98.32Ovis_aries:1.68Bos_taurus:0.13Ovis_aries:7.58HF-2牛：99羊：149670Bos_taurus:98.41Ovis_aries:1.59廣西國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心（南寧海關(guān)口岸門(mén)診部）/IlluminaMiseqHE-1牛：50羊：5033567Bos_taurus:53.01Ovis_aries:46.99Bos_taurus:52.78Ovis_aries:47.22Bos_taurus:0.60Ovis_aries:0.67HE-2牛：50羊：5060956Bos_taurus:52.56Ovis_aries:47.44HF-1牛：99羊：179037Bos_taurus:98.56Ovis_aries:1.44Bos_taurus:98.58Ovis_aries:1.42Bos_taurus:0.03Ovis_aries:1.99HF-2牛：99羊：147236Bos_taurus:98.60Ovis_aries:1.40深圳華大智造科技股份有限公司/MGIDNBSEQ-E25HE-1牛：50羊：501015420Bos_taurus:52.23Ovis_aries:47.77Bos_taurus:52.69Ovis_aries:47.31Bos_taurus:1.23Ovis_aries:1.38HE-2牛：50羊：503434882Bos_taurus:53.15Ovis_aries:46.85HF-1牛：99羊：1849283Bos_taurus:98.30Ovis_aries:1.70Bos_taurus:98.27Ovis_aries:1.73Bos_taurus:0.04Ovis_aries:2.45HF-2牛：99羊：12683836Bos_taurus:98.24Ovis_aries:1.76六、國(guó)內(nèi)外同類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)制修訂情況及與法律法規(guī)、強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)關(guān)系經(jīng)查閱，與肉類(lèi)產(chǎn)品動(dòng)物源性成分檢測(cè)方法相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及地方標(biāo)準(zhǔn)有：SN/T2051-2008《食品、化妝品和飼料中牛羊豬源性成分檢測(cè)方法實(shí)時(shí)PCR法》、SN/T2980-2011《動(dòng)物產(chǎn)品中牛、山羊和綿羊源性成分三重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法》、SN/T37