臨床血液學與血液學檢驗

1、關于臨床血液學和血液學檢驗第一張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第一章 血液學概述和發(fā)展史血液學 (hematology) 主要研究對象是血液和造血組織。它的內容包括：血細胞形態(tài)學、生理學、血液生化學、血液免疫學、遺傳血液學、血液流變學、實驗血液學、血細胞生物學、血液分子生物學。臨床血液學（clinical hematology) 是以疾病為研究對象、基礎理論與臨床實踐相結合的綜合性臨床學科。研究重點：血細胞（各型白血?。⒃煅M織（再生障礙性貧血）、出血傾向（血友病、DIC等）、血栓栓塞。血液學發(fā)展史：最早見于黃帝內經(jīng)希波克拉底 系統(tǒng)研究始于顯微鏡問世(十七世紀1673） 二十世紀初

2、迅速發(fā)展第二張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月血細胞的認識血細胞數(shù)量的檢測，1953年第一臺血細胞自動計數(shù)儀紅細胞的認識，1901，血型白細胞的認識，粒細胞 單核細胞 淋巴細胞、漿細胞第三張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月血栓與止血的認識止血修補血管壁，聚集、粘附功能血友病，瀑布學說第四張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月骨髓干細胞和造血調控的認識造血干細胞的認識骨髓間質干細胞的認識造血調控的認識第五張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第二章 血液學與臨床的關系血液學與疾病的關系血液學與檢驗的關系血液檢驗與循證醫(yī)學的關系第六張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月

3、血液學與疾病的關系非血液系統(tǒng)疾病的血液學改變：白細胞增高可見于各種感染；某些藥物治療后可見粒細胞減少；其他系統(tǒng)疾病導致的貧血；慢性缺氧性疾病導致的紅細胞增高；各科急癥導致的DIC等。血液病的非血液系統(tǒng)表現(xiàn)：巨幼細胞性貧血的神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)；骨髓瘤的腎功衰竭表現(xiàn)；淋巴瘤的皮膚表現(xiàn)，血友病等。血液制品的臨床應用：根據(jù)臨床需要，選擇有針對性的血液成分輸注 成分輸血：節(jié)約血液、減少輸血的副作用 紅細胞懸液、血小板懸液、血漿、丙種球蛋白、血漿因子、凝血酶原復合物、纖維蛋白原復合物第七張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月血液學與檢驗的關系血液學檢驗的任務檢驗醫(yī)師的責任第八張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于20

4、22年6月血液檢驗與循證醫(yī)學的關系循證醫(yī)學血液檢驗與循證醫(yī)學的關系第九張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 造血檢驗的基礎理論 第一節(jié) 造血器官 造血細胞起源于中胚層間葉細胞 造血器官是指生成并支持造血細胞分化、發(fā)育、成熟的組織器官， 包括 胚胎期造血器官 出生后造血器官胚胎期造血器官: 中胚葉造血期 （人胚29周）：血島形成，HSC形成胎肝造血期 （胚胎6周7月）：先以紅細胞為主，以后產(chǎn)生粒細胞， 與此同時脾、胸腺、淋巴結也參與造血。 骨髓造血期 （胚胎3月）： 第十張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 造血檢驗的基礎理論出生后造血器官: 骨髓造血、淋巴器官造血骨髓造

5、血 紅骨髓：具有活躍造血功能的骨髓 ，扁平骨、短骨、長管骨的近心端 黃骨髓：是指脂肪化的骨髓，占骨髓總量的50%，具有潛在造血能。淋巴器官造血 胸腺：產(chǎn)生淋巴細胞和分泌胸腺素 脾：制造淋巴細胞，具有造血、儲血、濾血和免疫反應功能 淋巴結：負責淋巴細胞的二次增殖第十一張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 造血檢驗的基礎理論 第二節(jié) 造血微環(huán)境造血微環(huán)境（hematopoietic microenvironment,HIM） 由骨髓基質細胞和細胞外基質組成。是造血干細胞賴以生存的場所。包括微血管系統(tǒng)、末梢神經(jīng)、基質及基質細胞分泌的細胞因子。HSC定居在適宜的造血微環(huán)境后，在各種成分的誘

6、導下，啟動造血增殖、分化、成熟等過程。骨髓基質細胞主要有成纖維細胞、內皮細胞、脂肪細胞、巨噬細胞等基質細胞分泌的細胞因子：GM-CSF、SCF、LIF、TGF-第十二張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 造血檢驗的基礎理論第三節(jié) 造血干(祖)細胞 干細胞的分類：全能干細胞，多能干細胞，專能干細胞 HSC ( hematopietic stem cell ) 的特性：HSC是由胚胎干細胞發(fā)育而來，在骨髓造血微環(huán)境及造血因子的誘導下，分化發(fā)育成各系造血祖細胞、原始及幼稚細胞、成熟細胞，釋放入血。 HSC的特性：具有高度自我更新能力和多向分化能力；多數(shù)細胞處于G0期或靜止期；多數(shù)表達CD

7、34和Thy-1；低表達或不表達CD38和HLA-DR；缺乏系特異系列抗原表面標志。 HSC只進行不對稱有絲分裂，兩個子細胞中，一個分化為早期造血祖細胞，另一個保持造血干細胞特性不變。第十三張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 造血檢驗的基礎理論 第三節(jié) 造血干(祖)細胞 HPC ( hematopietic progenitor cell ) 的特性：是由HSC分化來的，部分或全部失去了自我更新能力的過渡性、增殖性細胞群，也稱造血定向干細胞。HPC可分為：淋巴系祖細胞、紅系祖細胞、粒-單系祖細胞、巨核細胞系祖細胞、嗜酸性粒系系祖細胞、嗜堿性粒系系祖細胞HPC與HSC不同，HPC低

8、表達CD34、可能表達CD38和一些系特異性抗原HPC進行對稱性有絲分裂，其自我更新和自我維持的能力下降，細胞邊增殖邊分化。HSC在體內能夠長期重建造血；HPC只能短期重建造血。HSC、HPC在維持一生的造血中起著非常重要的作用，任何原因引起造血干、祖細胞發(fā)生異常增生或抑制，均可導致血液系統(tǒng)疾病的發(fā)生。第十四張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第三章 造血檢驗的基礎理論 第四節(jié) 血細胞的發(fā)育和成熟血細胞的增殖：細胞通過數(shù)代的有絲分裂進行復制和DNA的合成，增加各系細胞的數(shù)量。一個原始紅細胞可以最終產(chǎn)生1632個成熟紅細胞。血細胞的分化：是指發(fā)育過程中細胞失去某些潛能同時有獲得新的功能的過

9、程。血細胞的成熟：包含在整個細胞的發(fā)育過程中，每一次有絲分裂和分化都伴有細胞的成熟。血細胞的釋放：終末細胞通過骨髓屏障進入血循環(huán)的過程。血細胞發(fā)育過程中形態(tài)演變規(guī)律：細胞大小、核質比例、核大小、形狀、核染色質結構、顏色、核膜、核仁、胞質的量、顏色、胞質顆粒第十五張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十六張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月造血的調控造血的基因調控，原癌基因，抑癌基因，信號轉倒的調控造血的體液調控，正向調控因子，負向調控因子第十七張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四章 造血檢驗的基本方法第一節(jié) 血象和骨髓象檢驗正常血細胞形態(tài)（略）血象檢驗：計數(shù)、分類一定數(shù)量

10、的有核細胞，同時注意觀察各種細胞的形態(tài)有無異常及有無異常細胞觀察的內容： 粒細胞系統(tǒng)：數(shù)量和形態(tài)，注意有無幼稚細胞、棒狀小體、毒性改變、分葉過多、過少、雙核、巨幼樣變等 紅細胞系統(tǒng)：細胞大小、形態(tài)、色澤、淡染區(qū)、有無幼紅細胞、大紅細胞、環(huán)形紅細胞、點彩紅細胞、豪-周小體、卡波氏環(huán)等。 淋巴細胞系統(tǒng)：數(shù)量和形態(tài)，有無幼稚及異形淋巴細胞 漿細胞系統(tǒng)：正常血片中無 血小板系統(tǒng)：數(shù)量、大小、形態(tài) 其他：有無異常細胞及寄生蟲第十八張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四章 造血檢驗的基本方法第一節(jié) 血象和骨髓象檢驗 骨髓象檢驗臨床應用 ： 適應證：外周血細胞數(shù)量、形態(tài)異常及出現(xiàn)異常細胞 不名原因的

11、發(fā)熱、肝脾淋巴結腫大 不名原因的骨痛、骨質破壞、黃疸、紫癜、肝腎功能異常等 血液病療效觀察 協(xié)助其他檢查（免疫分型、細胞培養(yǎng)、染色體分析、細菌學檢測等） 禁忌證：血友病 骨髓穿刺：部位的選擇及操作方法 第十九張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四章 造血檢驗的基本方法第一節(jié) 血象和骨髓象檢驗骨髓細胞學檢查： 低倍鏡觀察 油鏡觀察 低倍鏡觀察 1 涂片染色情況 2 骨髓增生程度：五級分類法 3 巨核細胞計數(shù)：全片735個，轉油鏡進行分類 4 全片觀察：有無異常細胞，如轉移癌細胞、惡性組織細胞、淋巴瘤細胞等第二十張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四章 造血檢驗的基本方法 第一節(jié)

12、血象和骨髓象檢驗骨髓細胞學檢查：骨髓增生程度：五級分類法 根據(jù)有核細胞的多少來判斷 有核細胞：成熟紅細胞 增生極度活躍： 1：1 增生明顯活躍： 1：10 增生活躍： 1：20 增生減低： 1：50 增生極度減低： 1：200第二十一張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四章 造血檢驗的基本方法第一節(jié) 血象和骨髓象檢驗骨髓細胞學檢查： 低倍鏡觀察 油鏡觀察油鏡觀察有核細胞計數(shù)分類：2001000個有核細胞，并逐一分類觀察內容：各系細胞的數(shù)量、比例、形態(tài)；有無異常細胞及寄生蟲。結果計算：計算各系細胞的百分比及各期細胞的百分比（白血病是需計算非紅系細胞百分比） 計算粒紅比值 計算各期巨核細胞

13、的個數(shù)第二十二張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四章 造血檢驗的基本方法骨髓象檢查的注意事項：觀察要全面注意涂片染色的影響有些細胞兼具上下兩個階段的特征時，一般歸入下一階段細胞介于兩系之間難以判斷時，采用大數(shù)歸類法急性白血病時，要結合化學染色判斷細胞歸屬難于識別的細胞可歸入 “分類不明”細胞注意標本凝固的影響做骨髓檢查時，應同時做血象細胞學檢查第二十三張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四章 造血檢驗的基本方法大致正常骨髓象增生程度：增生活躍粒紅比值：24：1粒細胞系統(tǒng)：約50%，原始2%，早幼5%，各階段形態(tài)比例正常。紅細胞系統(tǒng)：約2025%，原始1%，早幼5%，各階段形態(tài)

14、比例正常。淋巴細胞系統(tǒng)：約2025%，以成熟淋巴細胞為主單核細胞系統(tǒng)：4%，以成熟單核細胞為主漿細胞系統(tǒng)：2%，均為成熟漿細胞巨核細胞系統(tǒng)：全片735個，原巨偶見，幼巨5%，顆粒巨、產(chǎn)板巨各占50%其他非造血細胞偶見成熟細胞形態(tài)正常第二十四張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四章 造血檢驗的基本方法第二節(jié)細胞化學染色 以細胞形態(tài)學為基礎，結合化學反應原理對血細胞內的各種化學物質（酶類、脂類、糖類、鐵、蛋白質、核酸）作定性、定位、半定量分析的方法。常用于急性白血病鑒別的有：過氧化物酶染色（POX）過碘酸-雪夫染色（糖原染色PAS）醋酸AS-D萘酚酯酶染色及氟化鈉抑制試驗（NSE）中性粒細

15、胞堿性磷酸酶染色（NAP）：積分值的計算方法臨床應用：類白血病反應與慢粒鑒別 細菌性感染與病毒性感染的鑒別 再生障礙性貧血與陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿的鑒別鐵染色：細胞內鐵 細胞外鐵 用于缺鐵性貧血與鐵粒幼細胞性貧血的鑒別第二十五張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月一、過氧化物酶染色原理 血細胞中的過氧化物酶（peroxidase POX）能分解試劑中的底物H2O2，釋出新生態(tài)氧，使無色聯(lián)苯胺氧化為藍色聯(lián)苯胺藍，后者與亞硝基鐵氰化鈉結合形成藍黑色顆粒，沉著于胞漿中。結果 陰性：胞質中無藍黑色顆粒 弱陽性：胞質中見藍黑色細小顆粒、分布稀疏 強陽性：胞質中見藍黑色粗大顆粒、分布密集臨床意義 急粒

16、：強陽性 急單：弱陽性或陰性 急淋：陰性 用于白血病的鑒別第二十六張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月二、醋酸萘酚酯酶又稱非特異性酯酶染色原理 血細胞內的醋酸萘酚酯酶又稱非特異性酯酶(non specific esterase NSE)，能將基質液中的-醋酸萘酚水解，產(chǎn)生-萘酚，萘酚與重氮染料偶聯(lián)，形成不溶性的有色沉淀，定位于胞質中。結果 陰性：胞質中無灰黑色顆粒 弱陽性：胞質中見灰黑色細小顆粒、分布稀疏 強陽性：胞質中見灰黑色粗大顆粒、分布密集臨床意義 用于白血病的鑒別 急單：陽性 急粒：弱陽性或陰性 急淋：陰性 氟化鈉抑制試驗： 急單白血病可被氟化鈉抑制 急粒不被氟化鈉抑制第二十七張

17、，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月三、碘酸-Schiff反應（糖原染色）原理 又稱過碘酸-Schiff反應 (periodic acid-Schiffs reaction,PAS)過碘酸能將血細胞內的糖原氧化，生成醛基。醛基與Schiff液中的無色品紅結合，形成紫紅色沉淀物，定位于胞漿中。結果 陽性：胞漿中出現(xiàn)紅色物質，可呈顆粒狀、小塊狀或彌漫均勻紅色。臨床意義第二十八張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月三、碘酸-Schiff反應（糖原染色）臨床意義鑒別良惡性淋巴細胞增生性疾病 ALL、CLL、NHL時PAS積分增高 病毒感染時積分正常鑒別紅細胞增生的性質 紅白血病時幼紅細胞PAS

18、強陽性，積分增加 增生性貧血（溶貧、巨幼貧）時積分正常三種白血病的鑒別 急粒：PAS（-） 急單：PAS（+，彌漫均勻紅色） 急淋：PAS（+，粗顆?；驂K狀）確定不典型巨核細胞第二十九張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月急性白血病常用組化染色的鑒別 急淋 急粒 急單 紅白血病POX - +3+ 不定PAS +顆粒狀 - +彌漫均勻NSE - + +NaF抑制 不被抑制 能被抑制第三十張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月四、中性粒細胞堿性磷酸酶染色原理 血細胞中的堿性磷酸酶將基質液中的-磷酸萘酚鈉水解，產(chǎn)生的萘酚與重氮鹽偶聯(lián)形成灰黑色沉淀，定位于胞質內。 結果 反應強度分級 -、1+

19、、2+、3+、4+ 積分法: 1040%，4080分臨床意義慢粒與類白血病反應鑒別細菌性感染與病毒心性感染鑒別再生障礙性貧血與陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿鑒別第三十一張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月五、鐵染色原理 普魯士藍反應結果 細胞外鐵 ：1+2+ 細胞內鐵：鐵粒幼紅細胞2040%臨床意義 缺鐵性貧血時，細胞外鐵 （-），鐵粒幼紅細胞15%第三十二張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第六章 紅細胞檢驗的基礎理論 第一節(jié) 紅細胞膜一、紅細胞膜的功能維持紅細胞的正常形態(tài)和變形性物質的交換：O2、CO2、離子、水、葡萄糖紅細胞膜的抗原性：血型抗原紅細胞的免疫功能：清除IC、免疫調控、調

20、節(jié)補體活性紅細胞膜上的受體：激素類、遞質類等二、影響紅細胞膜穩(wěn)定的因素： 遺傳性缺陷、免疫因素、化學因素、生物因素、酶的異常第三十三張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第六章 紅細胞檢驗的基礎理論 第二節(jié) 血紅蛋白 血紅蛋白的組成： 珠蛋白肽鏈（、）+血紅素 血紅蛋白的功能：運輸O2、CO2 影響血紅蛋白結構和功能的因素：珠蛋白基因缺失或缺陷、酶的缺陷、化學因素 生理性血紅蛋白：2條鏈和2條非鏈組成 HbA（22）：9698% HbA2（22）：1.03.1% HbF （22）:100 32 3235 巨幼細胞性貧血正細胞正色素性貧血 80100 2632 3235 再生障礙性貧血 溶血

21、性貧血 急性失血性貧血小細胞低色素性貧血 80 15% 鐵代謝的其他檢驗第七十六張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 巨幼細胞性貧血概述 巨幼細胞性貧血( megaloblastic anemia,MgA)是由于維生素B12和（或）葉酸缺乏或其他原因導致DNA合成障礙，使細胞核發(fā)育障礙所致的一類貧血。第七十七張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月巨幼細胞性貧血紅細胞核苷酸代謝(p104)一、葉酸和維生素DNA合成中的作用 脫氧尿苷酸脫氧胸苷酸脫氧胸腺三磷酸DNA 四氫葉酸葉酸 維生素 5-甲基四氫葉酸第七十八張，PPT共八十六頁，創(chuàng)作于2022年6月巨幼細胞性貧血二、葉酸的代謝葉酸存在于新鮮蔬菜、水果中，不耐熱，過度烹煮可被破壞。人體不能合成葉酸，必須食物供給。葉酸的作用：參與DNA合成；在組氨酸轉為谷氨酸的反映中TFH參加三、維生素B12的代謝維生素B12存在于食物，在十二指腸形成維生素B12-內因子復合物，吸收部位在回腸末端。影響其吸收與