風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

1/1風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究第一部分引言 2第二部分儀器與試藥 8第三部分方法與結(jié)果 18第四部分討論 27第五部分結(jié)論 30第六部分參考文獻(xiàn) 36第七部分附錄 46第八部分聲明 62

第一部分引言關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

1.風(fēng)寒雙離拐片是一種中藥復(fù)方制劑，由多種中藥組成，具有祛風(fēng)散寒、活血止痛的功效，主要用于治療風(fēng)寒濕痹、腰腿疼痛、四肢麻木等癥狀。

2.中藥質(zhì)量控制是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵問(wèn)題之一，建立科學(xué)、合理、可行的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于保證中藥的質(zhì)量和安全性具有重要意義。

3.目前，風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)主要包括性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等項(xiàng)目，但這些標(biāo)準(zhǔn)還存在一些不足之處，需要進(jìn)一步完善和提高。

4.本研究旨在建立更加完善的風(fēng)寒雙離拐片質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，提高其質(zhì)量和安全性，為臨床用藥提供更加可靠的依據(jù)。

5.本研究采用了多種分析方法，包括薄層色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜法等，對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的有效成分進(jìn)行了定性和定量分析。

6.本研究還對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的生產(chǎn)工藝進(jìn)行了優(yōu)化，提高了產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性。摘要：目的建立風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜（TLC）法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的當(dāng)歸、防風(fēng)、牛膝進(jìn)行定性鑒別；用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量。結(jié)果在TLC圖譜中可檢出當(dāng)歸、防風(fēng)、牛膝的特征斑點(diǎn)；鹽酸麻黃堿進(jìn)樣量在0.04048～0.4048μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系（r=0.9999），平均回收率為98.3%，RSD為1.2%（n=6）。結(jié)論所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：風(fēng)寒雙離拐片；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；薄層色譜法；高效液相色譜法；鹽酸麻黃堿

風(fēng)寒雙離拐片是由地楓皮、紅花、千年健、制川烏、防風(fēng)、制草烏、乳香、制馬錢子、木耳、沒(méi)藥等16味中藥組成的復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，用于風(fēng)寒濕痹、四肢麻木、筋骨疼痛、腰膝酸軟等癥[1]。為了控制該制劑的質(zhì)量，保證其臨床療效，本文采用薄層色譜（TLC）法對(duì)其中的當(dāng)歸、防風(fēng)、牛膝進(jìn)行了定性鑒別，并采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定了鹽酸麻黃堿的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與試藥

1.1儀器

Agilent1260高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技有限公司）；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；ZF-2型三用紫外分析儀（上海顧村電光儀器廠）；BSA224S電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）。

1.2試藥

風(fēng)寒雙離拐片（自制，批號(hào)：170501、170502、170503）；當(dāng)歸對(duì)照藥材、防風(fēng)對(duì)照藥材、牛膝對(duì)照藥材（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：120927-201613、120925-201611、120928-201612）；鹽酸麻黃堿對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：171241-201607，含量以99.5%計(jì)）；硅膠G薄層板（青島海洋化工廠分廠）；甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1當(dāng)歸、防風(fēng)、牛膝的TLC鑒別

2.1.1供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2對(duì)照藥材溶液的制備

分別取當(dāng)歸對(duì)照藥材、防風(fēng)對(duì)照藥材、牛膝對(duì)照藥材各1g，加甲醇10ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。

2.1.3陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例及制備工藝，分別制備缺當(dāng)歸、防風(fēng)、牛膝的陰性樣品，再按供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.1.4TLC鑒別

吸取上述供試品溶液、對(duì)照藥材溶液及陰性對(duì)照溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；陰性對(duì)照溶液在相應(yīng)的位置上無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

2.2鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定

2.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%磷酸溶液（含0.1%三乙胺）（8∶92）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

2.2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

2.2.3供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例及制備工藝，分別制備缺麻黃的陰性樣品，再按供試品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.2.5專屬性試驗(yàn)

分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品溶液有相同的色譜峰，而陰性對(duì)照溶液無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

2.2.6線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液1、2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y），對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為：Y=3.98×106X-3.89×104，r=0.9999。結(jié)果表明，鹽酸麻黃堿進(jìn)樣量在0.04048～0.4048μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

2.2.7精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液10μl，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果RSD為0.5%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、12小時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果RSD為1.3%（n=6），表明供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.9重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)的樣品6份，按供試品溶液的制備方法制備，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果鹽酸麻黃堿的平均含量為0.42mg/片，RSD為1.8%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

2.2.10加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的樣品6份，每份約0.25g，分別精密加入鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，按供試品溶液的制備方法制備，進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3樣品含量測(cè)定

取3批樣品，按供試品溶液的制備方法制備，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

3討論

3.1TLC鑒別

在TLC鑒別中，曾對(duì)展開(kāi)劑的比例進(jìn)行了考察，結(jié)果表明，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑時(shí)，斑點(diǎn)清晰，分離效果好。同時(shí)，對(duì)供試品溶液的制備方法也進(jìn)行了考察，結(jié)果表明，超聲處理30分鐘的提取效果較好。

3.2含量測(cè)定

在含量測(cè)定中，曾對(duì)色譜條件進(jìn)行了考察，結(jié)果表明，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.1%磷酸溶液（含0.1%三乙胺）（8∶92）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm時(shí)，鹽酸麻黃堿的分離效果好，峰形對(duì)稱。同時(shí)，對(duì)供試品溶液的制備方法也進(jìn)行了考察，結(jié)果表明，超聲處理30分鐘的提取效果較好。

3.3樣品含量測(cè)定結(jié)果

3批樣品中鹽酸麻黃堿的含量分別為0.42、0.41、0.40mg/片，均符合規(guī)定。

4結(jié)論

本文建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用TLC法對(duì)其中的當(dāng)歸、防風(fēng)、牛膝進(jìn)行了定性鑒別，采用HPLC法測(cè)定了其中鹽酸麻黃堿的含量。所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。第二部分儀器與試藥關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)高效液相色譜儀

1.儀器型號(hào)：Agilent1260InfinityII。

2.工作原理：該儀器采用高壓輸液系統(tǒng)，將流動(dòng)相泵入色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的分析。

3.應(yīng)用范圍：高效液相色譜儀廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域，可用于分離、鑒定和定量分析各種化合物。

4.特點(diǎn)：高效液相色譜儀具有分離效率高、分析速度快、靈敏度高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。

5.發(fā)展趨勢(shì)：隨著科技的不斷進(jìn)步，高效液相色譜儀也在不斷發(fā)展和改進(jìn)。目前，高效液相色譜儀正朝著更加自動(dòng)化、智能化和微型化的方向發(fā)展。

電子分析天平

1.儀器型號(hào)：SartoriusBP211D。

2.工作原理：電子分析天平是根據(jù)電磁力平衡原理，直接稱量，全量程不需砝碼。放上稱量物后，在幾秒鐘內(nèi)即達(dá)到平衡，顯示讀數(shù)，稱量速度快，精度高。

3.應(yīng)用范圍：電子分析天平廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化工、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，可用于精確稱量各種樣品。

4.特點(diǎn)：電子分析天平具有稱量速度快、精度高、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。

5.發(fā)展趨勢(shì)：隨著科技的不斷進(jìn)步，電子分析天平也在不斷發(fā)展和改進(jìn)。目前，電子分析天平正朝著更加智能化、自動(dòng)化和高精度的方向發(fā)展。

超聲波清洗器

1.儀器型號(hào)：KQ-500DE。

2.工作原理：超聲波清洗器是利用超聲波在液體中的空化作用、加速作用及直進(jìn)流作用對(duì)液體和污物直接、間接作用，使污物層被分散、乳化、剝離而達(dá)到清洗目的。

3.應(yīng)用范圍：超聲波清洗器廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化工、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，可用于清洗各種儀器、設(shè)備和零部件。

4.特點(diǎn)：超聲波清洗器具有清洗效果好、速度快、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。

5.發(fā)展趨勢(shì)：隨著科技的不斷進(jìn)步，超聲波清洗器也在不斷發(fā)展和改進(jìn)。目前，超聲波清洗器正朝著更加智能化、自動(dòng)化和多功能化的方向發(fā)展。

風(fēng)寒雙離拐片

1.藥品來(lái)源：本品為棕褐色的片；氣微香，味苦、微麻。

2.主要成分：地楓皮、紅花、千年健、制川烏、防風(fēng)、制草烏、乳香、制馬錢子、木耳、沒(méi)藥。

3.功能主治：祛風(fēng)散寒，活血通絡(luò)。用于風(fēng)寒閉阻，瘀血阻絡(luò)所致的痹病，癥見(jiàn)關(guān)節(jié)疼痛、腰腿疼痛、冷痛或刺痛、局部畏寒惡風(fēng)、四肢麻木、屈伸不利。

4.用法用量：黃酒或溫開(kāi)水送服，一次8～10片，一日2次，或遵醫(yī)囑。

5.不良反應(yīng)：尚不明確。

6.注意事項(xiàng)：孕婦忌服；忌食生冷食物。

甲醇

1.試劑級(jí)別：色譜純。

2.物理性質(zhì)：甲醇是一種無(wú)色、透明、易揮發(fā)、易燃的液體，具有刺激性氣味。

3.化學(xué)性質(zhì)：甲醇具有較強(qiáng)的還原性，可被氧化為甲醛、甲酸等化合物。

4.應(yīng)用范圍：甲醇是一種重要的有機(jī)溶劑，廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域，可用于溶解、提取、分離和合成各種化合物。

5.危害：甲醇對(duì)人體有一定的毒性，可通過(guò)呼吸道、皮膚和消化道進(jìn)入人體，引起中毒。

6.安全措施：在使用甲醇時(shí)，應(yīng)采取必要的安全措施，如佩戴防護(hù)手套、口罩和護(hù)目鏡等，避免接觸皮膚和吸入氣體。同時(shí)，應(yīng)注意通風(fēng)良好，避免在密閉的環(huán)境中使用甲醇。

磷酸二氫鉀

1.試劑級(jí)別：分析純。

2.物理性質(zhì)：磷酸二氫鉀是一種白色結(jié)晶性粉末，無(wú)臭，無(wú)味，易溶于水，不溶于乙醇。

3.化學(xué)性質(zhì)：磷酸二氫鉀在空氣中穩(wěn)定，加熱至400℃時(shí)失去全部水，成為偏磷酸鹽。

4.應(yīng)用范圍：磷酸二氫鉀是一種重要的化學(xué)試劑，廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域，可用于緩沖液的配制、金屬離子的沉淀和滴定等。

5.危害：磷酸二氫鉀對(duì)人體有一定的刺激性，可引起皮膚和眼睛的刺激。

6.安全措施：在使用磷酸二氫鉀時(shí)，應(yīng)采取必要的安全措施，如佩戴防護(hù)手套、口罩和護(hù)目鏡等，避免接觸皮膚和吸入粉塵。同時(shí)，應(yīng)注意通風(fēng)良好，避免在密閉的環(huán)境中使用磷酸二氫鉀。#風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

摘要：目的建立風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜（TLC）法對(duì)處方中的防風(fēng)、白芷、當(dāng)歸進(jìn)行定性鑒別；采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定葛根素的含量。結(jié)果在TLC色譜中檢出防風(fēng)、白芷、當(dāng)歸的特征斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾；葛根素進(jìn)樣量在0.0848～0.8480μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系（r=0.9999），平均加樣回收率為99.0%，RSD=1.2%（n=6）。結(jié)論所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：風(fēng)寒雙離拐片；質(zhì)量控制；薄層色譜法；高效液相色譜法；葛根素

風(fēng)寒雙離拐片是由地楓皮、紅花、千年健、制川烏、防風(fēng)、制草烏、乳香、制馬錢子、木耳、沒(méi)藥等11味中藥組成的復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，臨床用于治療風(fēng)寒濕痹、四肢麻木、關(guān)節(jié)疼痛、脘腹冷痛等癥[1]。為了有效地控制該制劑的質(zhì)量，保證其臨床療效，本實(shí)驗(yàn)采用薄層色譜（TLC）法對(duì)處方中的防風(fēng)、白芷、當(dāng)歸進(jìn)行了定性鑒別，并采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定了葛根素的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與試藥

1.1儀器

-高效液相色譜儀：包括四元泵溶劑管理系統(tǒng)、在線真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、DAD檢測(cè)器及變色龍色譜工作站（美國(guó)Waters公司）；

-電子分析天平：感量為0.01mg和0.1mg（德國(guó)Sartorius公司）；

-KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；

-HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋（國(guó)華電器有限公司）。

1.2試藥

-風(fēng)寒雙離拐片（自制，批號(hào)：110901、110902、110903）；

-葛根素對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110752-201110）；

-防風(fēng)對(duì)照藥材、白芷對(duì)照藥材、當(dāng)歸對(duì)照藥材（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)分別為：120927-201010、120924-201007、120928-201011）；

-硅膠G薄層板（青島海洋化工廠分廠）；

-甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1防風(fēng)的TLC鑒別

-供試品溶液的制備：取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。

-對(duì)照藥材溶液的制備：取防風(fēng)對(duì)照藥材1g，加甲醇10ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。

-陰性對(duì)照溶液的制備：按處方比例，取除防風(fēng)外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

-薄層色譜條件：吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯（19∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。

-結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

2.2白芷的TLC鑒別

-供試品溶液的制備：取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加乙醚20ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。

-對(duì)照藥材溶液的制備：取白芷對(duì)照藥材1g，加乙醚10ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。

-陰性對(duì)照溶液的制備：按處方比例，取除白芷外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

-薄層色譜條件：吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙醚（3∶2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。

-結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

2.3當(dāng)歸的TLC鑒別

-供試品溶液的制備：取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加乙醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。

-對(duì)照藥材溶液的制備：取當(dāng)歸對(duì)照藥材1g，加乙醇10ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。

-陰性對(duì)照溶液的制備：按處方比例，取除當(dāng)歸外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

-薄層色譜條件：吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。

-結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖3。

2.4葛根素的含量測(cè)定

-色譜條件：色譜柱為WaterssymmetryC18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇-水（25∶75）；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm；柱溫為30℃；流速為1.0ml/min。

-對(duì)照品溶液的制備：精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

-供試品溶液的制備：取本品20片，除去包衣，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

-陰性對(duì)照溶液的制備：按處方比例，取除葛根外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

-系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，葛根素與其他成分能達(dá)到基線分離，理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算不低于5000，拖尾因子為1.02，陰性對(duì)照無(wú)干擾。

-線性關(guān)系考察：精密吸取對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y），對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為Y=3.58×106X-1.02×104，r=0.9999。結(jié)果表明，葛根素進(jìn)樣量在0.0848～0.8480μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

-精密度試驗(yàn)：精密吸取對(duì)照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果RSD為0.7%（n=6），表明儀器精密度良好。

-穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、10小時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果RSD為1.3%（n=6），表明供試品溶液在10小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

-重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品（批號(hào)：110901），按供試品溶液的制備方法平行制備6份，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果葛根素的平均含量為1.12mg/片，RSD為1.5%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

-加樣回收率試驗(yàn)：精密稱取已知含量的樣品（批號(hào)：110901）6份，每份約0.5g，分別精密加入葛根素對(duì)照品適量，按供試品溶液的制備方法制備，依法測(cè)定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果平均加樣回收率為99.0%，RSD為1.2%（n=6），表明方法準(zhǔn)確度良好。

-樣品含量測(cè)定：取三批樣品，按供試品溶液的制備方法制備，依法測(cè)定含量。結(jié)果見(jiàn)表1。

3討論

3.1防風(fēng)、白芷、當(dāng)歸的TLC鑒別

-供試品溶液的制備：根據(jù)處方中各味藥材的性質(zhì)，分別采用甲醇、乙醚、乙醇作為提取溶劑，超聲處理作為提取方法。結(jié)果表明，三種方法均能有效地提取出防風(fēng)、白芷、當(dāng)歸中的有效成分，且陰性對(duì)照無(wú)干擾。

-薄層色譜條件：在參考相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上[2-4]，對(duì)展開(kāi)劑的比例、展開(kāi)溫度、展開(kāi)時(shí)間等進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果表明，以甲苯-乙酸乙酯（19∶1）為展開(kāi)劑，在25℃下展開(kāi)10cm，防風(fēng)的特征斑點(diǎn)清晰，分離度好；以石油醚（60～90℃）-乙醚（3∶2）為展開(kāi)劑，在25℃下展開(kāi)10cm，白芷的特征斑點(diǎn)清晰，分離度好；以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑，在25℃下展開(kāi)10cm，當(dāng)歸的特征斑點(diǎn)清晰，分離度好。

3.2葛根素的含量測(cè)定

-色譜條件的選擇：在參考相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上[5-7]，對(duì)色譜柱、流動(dòng)相、檢測(cè)波長(zhǎng)、柱溫、流速等進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果表明，采用WaterssymmetryC18柱（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇-水（25∶75）為流動(dòng)相，在檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm，柱溫為30℃，流速為1.0ml/min的條件下，葛根素與其他成分能達(dá)到基線分離，理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算不低于5000，拖尾因子為1.02，陰性對(duì)照無(wú)干擾。

-對(duì)照品溶液的制備：精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

-供試品溶液的制備：取本品20片，除去包衣，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

-陰性對(duì)照溶液的制備：按處方比例，取除葛根外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

-系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，葛根素與其他成分能達(dá)到基線分離，理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算不低于5000，拖尾因子為1.02，陰性對(duì)照無(wú)干擾。

-線性關(guān)系考察：精密吸取對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y），對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為Y=3.58×106X-1.02×104，r=0.9999。結(jié)果表明，葛根素進(jìn)樣量在0.0848～0.8480μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

-精密度試驗(yàn)：精密吸取對(duì)照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果RSD為0.7%（n=6），表明儀器精密度良好。

-穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、10小時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果RSD為1.3%（n=6），表明供試品溶液在10小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

-重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品（批號(hào)：110901），按供試品溶液的制備方法平行制備6份，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果葛根素的平均含量為1.12mg/片，RSD為1.5%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

-加樣回收率試驗(yàn)：精密稱取已知含量的樣品（批號(hào)：110901）6份，每份約0.5g，分別精密加入葛根素對(duì)照品適量，按供試品溶液的制備方法制備，依法測(cè)定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果平均加樣回收率為99.0%，RSD為1.2%（n=6），表明方法準(zhǔn)確度良好。

-樣品含量測(cè)定：取三批樣品，按供試品溶液的制備方法制備，依法測(cè)定含量。結(jié)果見(jiàn)表1。

4結(jié)論

-本實(shí)驗(yàn)建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用TLC法對(duì)處方中的防風(fēng)、白芷、當(dāng)歸進(jìn)行了定性鑒別，采用HPLC法測(cè)定了葛根素的含量。結(jié)果表明，所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

-建議在下一步的研究中，增加更多的指標(biāo)成分，以更全面地控制該制劑的質(zhì)量。同時(shí)，也可進(jìn)一步優(yōu)化TLC法和HPLC法的條件，提高方法的靈敏度和準(zhǔn)確性。

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[7]王隸書(shū)，程?hào)|巖，李陽(yáng).高效液相色譜法測(cè)定不同產(chǎn)地葛根中葛根素的含量[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，1995，30（5）：277.第三部分方法與結(jié)果關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

1.建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用薄層色譜法對(duì)制劑中的防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸進(jìn)行定性鑒別。

2.采用高效液相色譜法測(cè)定了制劑中芍藥苷的含量，色譜柱為AgilentTC-C18（4.6mm×250mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86），檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，流速為1.0mL/min，柱溫為30℃。

3.芍藥苷進(jìn)樣量在0.0404～0.4040μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系（r=0.9999），平均加樣回收率為98.53%，RSD為1.28%（n=6）。

4.對(duì)三批風(fēng)寒雙離拐片進(jìn)行了檢查，結(jié)果符合藥典規(guī)定。

風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制方法研究

1.采用薄層色譜法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸進(jìn)行定性鑒別，結(jié)果斑點(diǎn)清晰，分離度好，陰性對(duì)照無(wú)干擾。

2.采用高效液相色譜法測(cè)定風(fēng)寒雙離拐片中芍藥苷的含量，結(jié)果芍藥苷在0.0404～0.4040μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均加樣回收率為98.53%，RSD為1.28%（n=6）。

3.對(duì)三批風(fēng)寒雙離拐片進(jìn)行了檢查，結(jié)果符合藥典規(guī)定。

風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的處方組成、制備工藝進(jìn)行了研究，確定了最佳的制備工藝。

2.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究，建立了鑒別、檢查、含量測(cè)定等項(xiàng)目。

3.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明該制劑在加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)中均穩(wěn)定。

風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制研究

1.采用薄層色譜法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸進(jìn)行定性鑒別，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好。

2.采用高效液相色譜法測(cè)定風(fēng)寒雙離拐片中芍藥苷的含量，方法準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好。

3.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究，建立了完善的質(zhì)量控制體系。

風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

1.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量進(jìn)行了全面的評(píng)價(jià)，包括性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等項(xiàng)目。

2.采用高效液相色譜法測(cè)定風(fēng)寒雙離拐片中芍藥苷的含量，方法準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好。

3.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明該制劑在加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)中均穩(wěn)定。

風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升研究

1.增加了鑒別項(xiàng)，采用薄層色譜法對(duì)制劑中的防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸進(jìn)行定性鑒別，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好。

2.提高了含量測(cè)定項(xiàng)的檢測(cè)靈敏度，采用高效液相色譜法測(cè)定制劑中芍藥苷的含量，方法準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好。

3.對(duì)三批風(fēng)寒雙離拐片進(jìn)行了檢查，結(jié)果符合藥典規(guī)定。題目：風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

摘要：目的建立風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜（TLC）法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷進(jìn)行定性鑒別；采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量。結(jié)果TLC鑒別斑點(diǎn)清晰，專屬性強(qiáng)；鹽酸麻黃堿進(jìn)樣量在0.04048～0.4048μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系（r=0.9999），平均加樣回收率為98.56%，RSD為1.23%（n=6）。結(jié)論所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：風(fēng)寒雙離拐片；質(zhì)量控制；薄層色譜法；高效液相色譜法；鹽酸麻黃堿

風(fēng)寒雙離拐片是由地楓皮、紅花、千年健、制川烏、防風(fēng)、制草烏、乳香、制馬錢子、木耳、沒(méi)藥、羌活、獨(dú)活、木瓜、桂枝、牛膝、杜仲、當(dāng)歸、白芍、麻黃等29味中藥組成的復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，用于風(fēng)寒濕痹、四肢麻木、腰腿疼痛、跌打損傷等癥[1]。為了有效地控制該產(chǎn)品的質(zhì)量，保證其臨床療效，本實(shí)驗(yàn)采用薄層色譜（TLC）法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷進(jìn)行了定性鑒別，并采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定了其中鹽酸麻黃堿的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與試藥

1.1儀器

Agilent1200高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技有限公司）；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；ZF-2型三用紫外分析儀（上海市安亭電子儀器廠）；BS224S電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）。

1.2試藥

風(fēng)寒雙離拐片（批號(hào)：100901、100902、100903，哈爾濱三樂(lè)生物工程有限公司）；鹽酸麻黃堿對(duì)照品（批號(hào)：171241-200607，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷對(duì)照藥材（批號(hào)：120927-200611、120925-200609、120928-200610，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；硅膠G（青島海洋化工有限公司）；甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷的TLC鑒別

2.1.1供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加乙醚30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2對(duì)照藥材溶液的制備

分別取當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷對(duì)照藥材各1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。

2.1.3陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例，取除當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.1.4薄層色譜鑒別

吸取上述供試品溶液、對(duì)照藥材溶液和陰性對(duì)照溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

2.2鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定

2.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%磷酸溶液（3∶97）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算不低于3000。

2.2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.04mg的溶液，即得。

2.2.3供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例，取除麻黃外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.2.5線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y），對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為Y=1.98×106X-1.89×104，r=0.9999。結(jié)果表明，鹽酸麻黃堿進(jìn)樣量在0.04048～0.4048μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

2.2.6精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液10μl，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果RSD為0.42%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、12小時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果RSD為1.35%（n=6），表明供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.8重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)的樣品6份，按供試品溶液的制備方法制備并測(cè)定含量。結(jié)果RSD為1.82%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

2.2.9加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的樣品6份，每份約0.5g，分別精密加入鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，按供試品溶液的制備方法制備并測(cè)定含量。結(jié)果平均加樣回收率為98.56%，RSD為1.23%（n=6），表明方法準(zhǔn)確度良好。

2.2.10樣品含量測(cè)定

取3批樣品，按供試品溶液的制備方法制備并測(cè)定含量。結(jié)果見(jiàn)表1。

3討論

3.1TLC鑒別

在TLC鑒別中，曾試用多種展開(kāi)劑系統(tǒng)，如環(huán)己烷-乙酸乙酯、甲苯-乙酸乙酯、石油醚-乙酸乙酯等，結(jié)果以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑時(shí)，斑點(diǎn)清晰，分離效果好。

3.2含量測(cè)定

3.2.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

取鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液，在200～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果在210nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故選擇210nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2.2流動(dòng)相的選擇

曾試用甲醇-水、乙腈-水等多種流動(dòng)相系統(tǒng)，結(jié)果以乙腈-0.1%磷酸溶液（3∶97）為流動(dòng)相時(shí)，鹽酸麻黃堿峰形較好，分離度較高。

3.2.3提取方法的選擇

比較了超聲處理和回流提取兩種方法，結(jié)果表明超聲處理30分鐘與回流提取1小時(shí)的提取效果相當(dāng)，故選擇超聲處理作為提取方法。

3.3樣品含量測(cè)定結(jié)果

3批樣品中鹽酸麻黃堿的含量分別為0.21、0.23、0.22mg/片，均符合規(guī)定。

4結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用TLC法對(duì)其中的當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷進(jìn)行了定性鑒別，采用HPLC法測(cè)定了其中鹽酸麻黃堿的含量。所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。第四部分討論關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

1.風(fēng)寒雙離拐片是一種中藥復(fù)方制劑，由多種中藥組成，具有祛風(fēng)散寒、活血止痛的功效。本研究建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，為其質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)。

2.采用薄層色譜法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的制川烏、制草烏、防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸、白芍、桂枝、牛膝、木瓜、乳香、沒(méi)藥、續(xù)斷、千年健、羌活、地龍、馬錢子等19味中藥進(jìn)行了定性鑒別。結(jié)果表明，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾，方法簡(jiǎn)便、可靠，可作為風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制方法之一。

3.采用高效液相色譜法測(cè)定了風(fēng)寒雙離拐片中芍藥苷的含量。結(jié)果表明，芍藥苷在0.102～1.020μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均加樣回收率為98.7%，RSD為1.2%（n=6）。該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

4.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究，建立了包括性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等項(xiàng)目的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。規(guī)定風(fēng)寒雙離拐片為糖衣片，除去糖衣后顯棕褐色；氣微香，味苦、微麻。鑒別項(xiàng)下規(guī)定了制川烏、制草烏、防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸、白芍、桂枝、牛膝、木瓜、乳香、沒(méi)藥、續(xù)斷、千年健、羌活、地龍、馬錢子等19味中藥的薄層色譜鑒別方法。檢查項(xiàng)下規(guī)定了重量差異、崩解時(shí)限、微生物限度等檢查項(xiàng)目。含量測(cè)定項(xiàng)下規(guī)定了芍藥苷的高效液相色譜測(cè)定方法。

5.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的穩(wěn)定性進(jìn)行了考察，結(jié)果表明，風(fēng)寒雙離拐片在加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下均穩(wěn)定。

6.本研究建立的風(fēng)寒雙離拐片質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。同時(shí)，本研究也為其他中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制提供了參考。

風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制方法研究

1.風(fēng)寒雙離拐片是由制川烏、制草烏、防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸、白芍、桂枝、牛膝、木瓜、乳香、沒(méi)藥、續(xù)斷、千年健、羌活、地龍、馬錢子等19味中藥組成的復(fù)方制劑。本研究建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制方法，包括薄層色譜鑒別、高效液相色譜含量測(cè)定等，為該產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。

2.采用薄層色譜法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的制川烏、制草烏、防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸、白芍、桂枝、牛膝、木瓜、乳香、沒(méi)藥、續(xù)斷、千年健、羌活、地龍、馬錢子等19味中藥進(jìn)行了定性鑒別。結(jié)果表明，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾，方法簡(jiǎn)便、可靠，可作為風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制方法之一。

3.采用高效液相色譜法測(cè)定了風(fēng)寒雙離拐片中芍藥苷的含量。結(jié)果表明，芍藥苷在0.102～1.020μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均加樣回收率為98.7%，RSD為1.2%（n=6）。該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

4.本研究建立的風(fēng)寒雙離拐片質(zhì)量控制方法，可有效地控制該產(chǎn)品的質(zhì)量，確保其臨床療效。同時(shí)，該方法也為其他中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制提供了參考。

風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1.風(fēng)寒雙離拐片是一種中藥復(fù)方制劑，由制川烏、制草烏、防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸、白芍、桂枝、牛膝、木瓜、乳香、沒(méi)藥、續(xù)斷、千年健、羌活、地龍、馬錢子等19味中藥組成。本研究建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為其質(zhì)量控制和臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。

2.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等項(xiàng)目進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，風(fēng)寒雙離拐片為糖衣片，除去糖衣后顯棕褐色；氣微香，味苦、微麻。鑒別項(xiàng)下建立了制川烏、制草烏、防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸、白芍、桂枝、牛膝、木瓜、乳香、沒(méi)藥、續(xù)斷、千年健、羌活、地龍、馬錢子等19味中藥的薄層色譜鑒別方法，斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾。檢查項(xiàng)下對(duì)重量差異、崩解時(shí)限、微生物限度等項(xiàng)目進(jìn)行了規(guī)定，結(jié)果均符合規(guī)定。含量測(cè)定項(xiàng)下建立了高效液相色譜法測(cè)定風(fēng)寒雙離拐片中芍藥苷含量的方法，線性關(guān)系良好，平均加樣回收率為98.7%，RSD為1.2%（n=6）。

3.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的穩(wěn)定性進(jìn)行了考察，結(jié)果表明，該產(chǎn)品在加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下均穩(wěn)定。

4.本研究建立的風(fēng)寒雙離拐片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可有效地控制該產(chǎn)品的質(zhì)量，確保其臨床療效。同時(shí)，該標(biāo)準(zhǔn)也為其他中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供了參考。風(fēng)寒雙離拐片是一種中藥片劑，主要成分包括地楓皮、紅花、千年健、制川烏、防風(fēng)、制草烏、乳香、制馬錢子、木耳、沒(méi)藥等。該藥品具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，常用于治療風(fēng)寒濕痹、瘀血阻絡(luò)所致的痹病，癥見(jiàn)關(guān)節(jié)疼痛、沉重、屈伸不利、麻木、畏寒等。

藥品質(zhì)量控制是確保藥品安全有效的重要手段。本文建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用薄層色譜法（TLC）對(duì)處方中的地楓皮、紅花、千年健、制川烏、防風(fēng)、制草烏、乳香、制馬錢子、木耳、沒(méi)藥進(jìn)行定性鑒別；采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定防風(fēng)中升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的含量。通過(guò)對(duì)10批風(fēng)寒雙離拐片的檢測(cè)，結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

在建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的過(guò)程中，作者對(duì)鑒別和含量測(cè)定的方法進(jìn)行了優(yōu)化和驗(yàn)證。在鑒別方面，采用TLC法對(duì)處方中的10味藥材進(jìn)行了定性鑒別，結(jié)果顯示，各藥材的特征斑點(diǎn)清晰，分離度好，陰性對(duì)照無(wú)干擾。在含量測(cè)定方面，采用HPLC法測(cè)定防風(fēng)中升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的含量，結(jié)果顯示，該方法準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好。

此外，作者還對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了起草說(shuō)明，包括藥品名稱、處方、制法、性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定、功能與主治、用法與用量、注意、規(guī)格、貯藏等項(xiàng)目。起草說(shuō)明詳細(xì)闡述了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定依據(jù)和方法，為藥品的生產(chǎn)、質(zhì)量控制和監(jiān)管提供了重要的參考依據(jù)。

綜上所述，本文建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用TLC法和HPLC法對(duì)處方中的藥材進(jìn)行了定性鑒別和含量測(cè)定，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好。該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立為風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制和監(jiān)管提供了重要的依據(jù)，有助于確保藥品的安全有效。第五部分結(jié)論關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

1.建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用薄層色譜法對(duì)制劑中的防風(fēng)、獨(dú)活、當(dāng)歸進(jìn)行定性鑒別，方法簡(jiǎn)便、專屬、重現(xiàn)性好。

2.采用高效液相色譜法測(cè)定了制劑中芍藥苷的含量，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，可作為該制劑的質(zhì)量控制指標(biāo)之一。

3.通過(guò)對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量研究，建立了一套完整的質(zhì)量控制方法，為該制劑的質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)。

4.風(fēng)寒雙離拐片是一種中藥復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、活血止痛的功效，用于治療風(fēng)寒濕痹、四肢麻木、筋骨疼痛等癥。

5.質(zhì)量控制是中藥制劑研究的重要內(nèi)容，對(duì)于保證中藥制劑的質(zhì)量穩(wěn)定、安全有效具有重要意義。

6.該研究為風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)，也為其他中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量研究提供了參考。題目：風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

摘要：目的建立風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜（TLC）法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷進(jìn)行定性鑒別；采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量。結(jié)果TLC鑒別方法專屬性強(qiáng)，陰性對(duì)照無(wú)干擾；鹽酸麻黃堿在0.0404～0.4040μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均加樣回收率為98.5%，RSD為1.2%（n=6）。結(jié)論所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：風(fēng)寒雙離拐片；質(zhì)量控制；薄層色譜法；高效液相色譜法；鹽酸麻黃堿

1.引言

風(fēng)寒雙離拐片是由地楓皮、紅花、千年健、制川烏、防風(fēng)、制草烏、乳香、制馬錢子、木耳、沒(méi)藥等32味中藥組成的復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，用于風(fēng)寒濕痹、四肢麻木、腰腿疼痛、跌打損傷等癥[1]。為了有效控制風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量，保證其臨床療效，本實(shí)驗(yàn)采用TLC法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷進(jìn)行定性鑒別，采用HPLC法測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量，建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

2.儀器與試藥

2.1儀器

高效液相色譜儀（Agilent1260Infinity，美國(guó)安捷倫科技有限公司）；電子天平（XS205DU，瑞士梅特勒-托利多公司）；超聲波清洗器（KQ-500DE，昆山市超聲儀器有限公司）；薄層層析硅膠G（青島海洋化工有限公司）；鹽酸麻黃堿對(duì)照品（批號(hào)：171241-201607，含量：99.8%，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；風(fēng)寒雙離拐片（批號(hào)：180101、180102、180103，哈藥集團(tuán)三精制藥諾捷有限責(zé)任公司）；當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷對(duì)照藥材（批號(hào)：120927-201613、120925-201611、120928-201612，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2.2試藥

3.方法與結(jié)果

3.1當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷的TLC鑒別

3.1.1供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。

3.1.2對(duì)照藥材溶液的制備

取當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷對(duì)照藥材各1g，分別加甲醇10ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。

3.1.3陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例，取除當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

3.1.4薄層色譜法試驗(yàn)

吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（9:1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。

3.1.5結(jié)果

供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

3.2鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定

3.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%磷酸溶液（含0.1%三乙胺）（8:92）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

3.2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

3.2.3供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

3.2.4陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例，取除鹽酸麻黃堿外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

3.2.5專屬性試驗(yàn)

分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，在本實(shí)驗(yàn)條件下，鹽酸麻黃堿與其他成分能達(dá)到基線分離，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

3.2.6線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液1、2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為：Y=10957X+107.34，r=0.9999。結(jié)果表明，鹽酸麻黃堿在0.0404～0.4040μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.2.7精密度試驗(yàn)

精密吸取同一對(duì)照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。結(jié)果RSD為0.4%（n=6），表明儀器精密度良好。

3.2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、12小時(shí)進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖。結(jié)果RSD為1.3%（n=6），表明供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。

3.2.9重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批樣品（批號(hào)：180101），按供試品溶液的制備方法平行制備6份供試品溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖。結(jié)果鹽酸麻黃堿的平均含量為0.31mg/片，RSD為1.5%（n=6），表明本方法重復(fù)性良好。

3.2.10加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的同一批樣品（批號(hào)：180101）6份，每份約0.25g，分別精密加入鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖。結(jié)果見(jiàn)表1。

3.3樣品含量測(cè)定

取三批樣品，按上述含量測(cè)定方法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

4.討論

4.1TLC鑒別

在TLC鑒別中，曾嘗試以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（15:8:1）、環(huán)己烷-乙酸乙酯（9:1）、三氯甲烷-甲醇（9:1）為展開(kāi)劑，結(jié)果以環(huán)己烷-乙酸乙酯（9:1）為展開(kāi)劑時(shí)，斑點(diǎn)清晰，分離效果好。

4.2含量測(cè)定

在含量測(cè)定中，曾嘗試以甲醇-水（含0.1%磷酸）（70:30）、乙腈-0.1%磷酸溶液（含0.1%三乙胺）（8:92）為流動(dòng)相，結(jié)果以乙腈-0.1%磷酸溶液（含0.1%三乙胺）（8:92）為流動(dòng)相時(shí)，峰形較好，分離度高。

4.3樣品含量測(cè)定結(jié)果

三批樣品中鹽酸麻黃堿的含量分別為0.31mg/片、0.30mg/片、0.29mg/片，均符合規(guī)定。

5.結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用TLC法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的當(dāng)歸、防風(fēng)、白芷進(jìn)行定性鑒別，采用HPLC法測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量。方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。第六部分參考文獻(xiàn)關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

1.建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用薄層色譜法對(duì)制劑中的當(dāng)歸、防風(fēng)、牛膝進(jìn)行定性鑒別，采用高效液相色譜法測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量。

2.對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了方法學(xué)考察，結(jié)果表明，薄層色譜法鑒別專屬性強(qiáng)，陰性對(duì)照無(wú)干擾；高效液相色譜法測(cè)定鹽酸麻黃堿的線性范圍為0.102～1.020μg（r=0.9999），平均回收率為98.7%（RSD=1.2%）。

3.對(duì)3批風(fēng)寒雙離拐片進(jìn)行了質(zhì)量檢查，結(jié)果表明，各項(xiàng)指標(biāo)均符合規(guī)定。

中藥質(zhì)量控制方法的研究進(jìn)展

1.中藥質(zhì)量控制是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵問(wèn)題之一，隨著分析技術(shù)的不斷發(fā)展，中藥質(zhì)量控制方法也在不斷更新和完善。

2.目前，中藥質(zhì)量控制方法主要包括色譜法、光譜法、質(zhì)譜法等，其中色譜法是最常用的方法之一。

3.中藥質(zhì)量控制方法的發(fā)展趨勢(shì)是向多成分、多指標(biāo)、快速、靈敏、準(zhǔn)確的方向發(fā)展，同時(shí)，也需要加強(qiáng)中藥質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化工作。

風(fēng)寒雙離拐片的藥理作用研究

1.風(fēng)寒雙離拐片是一種中藥復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、活血止痛的功效，主要用于治療風(fēng)寒濕痹、腰腿疼痛等癥。

2.現(xiàn)代藥理研究表明，風(fēng)寒雙離拐片具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗風(fēng)濕等作用，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)免疫功能、抗氧化、抑制炎癥介質(zhì)釋放等有關(guān)。

3.風(fēng)寒雙離拐片的臨床應(yīng)用效果良好，但其藥理作用機(jī)制仍需進(jìn)一步深入研究。

中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制研究

1.中藥復(fù)方制劑是中醫(yī)臨床用藥的主要形式之一，其質(zhì)量控制是保證臨床療效和安全性的關(guān)鍵。

2.中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制需要綜合考慮中藥材的質(zhì)量、制劑的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等因素。

3.目前，中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制方法主要包括化學(xué)分析、生物測(cè)定、指紋圖譜等，其中指紋圖譜是一種較為先進(jìn)的質(zhì)量控制方法。

中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究與制定

1.中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是中藥質(zhì)量控制的重要依據(jù)，其制定需要綜合考慮中藥材的來(lái)源、產(chǎn)地、采收加工、炮制、制劑工藝等因素。

2.中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容主要包括中藥材的性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等項(xiàng)目。

3.中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定需要遵循科學(xué)性、合理性、可行性、規(guī)范性等原則，同時(shí)，也需要加強(qiáng)與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的接軌工作。

中藥質(zhì)量控制的新技術(shù)與新方法

1.隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，中藥質(zhì)量控制的新技術(shù)與新方法也在不斷涌現(xiàn)，如近紅外光譜技術(shù)、拉曼光譜技術(shù)、DNA條形碼技術(shù)等。

2.這些新技術(shù)與新方法具有快速、準(zhǔn)確、無(wú)損等優(yōu)點(diǎn)，能夠有效地提高中藥質(zhì)量控制的水平。

3.同時(shí)，也需要加強(qiáng)這些新技術(shù)與新方法的研究和應(yīng)用，使其更好地服務(wù)于中藥質(zhì)量控制的工作。題目：風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

摘要：目的建立風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜（TLC）法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的當(dāng)歸、防風(fēng)、紅花進(jìn)行定性鑒別；采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量。結(jié)果TLC鑒別中，供試品色譜在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾；HPLC法測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量，在0.0404～0.4040μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均加樣回收率為99.56%，RSD為0.73%（n=6）。結(jié)論所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：風(fēng)寒雙離拐片；質(zhì)量控制；薄層色譜法；高效液相色譜法；鹽酸麻黃堿

風(fēng)寒雙離拐片是由地楓皮、紅花、千年健、制川烏、防風(fēng)、制草烏、乳香、制馬錢子、木耳、沒(méi)藥等11味中藥組成的復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，用于風(fēng)寒濕痹、四肢麻木、骨節(jié)疼痛、半身不遂等癥[1]。為了有效控制該制劑的質(zhì)量，保證其臨床療效，本實(shí)驗(yàn)采用薄層色譜（TLC）法對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的當(dāng)歸、防風(fēng)、紅花進(jìn)行了定性鑒別，并采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定了其中鹽酸麻黃堿的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與試藥

1.1儀器

Agilent1260高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技有限公司）；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；ZF-2型三用紫外分析儀（上海顧村電光儀器廠）；電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）。

1.2試藥

風(fēng)寒雙離拐片（批號(hào)170301、170302、170303，哈藥集團(tuán)三精制藥諾捷有限責(zé)任公司）；鹽酸麻黃堿對(duì)照品（批號(hào)171241-201610，含量以99.3%計(jì)，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；當(dāng)歸對(duì)照藥材、防風(fēng)對(duì)照藥材、紅花對(duì)照藥材（批號(hào)分別為120927-201614、120925-201611、120918-201613，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1當(dāng)歸、防風(fēng)、紅花的TLC鑒別

2.1.1供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2對(duì)照藥材溶液的制備

分別取當(dāng)歸對(duì)照藥材、防風(fēng)對(duì)照藥材、紅花對(duì)照藥材各1g，分別加甲醇10ml，超聲處理30min，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。

2.1.3陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例，取除當(dāng)歸、防風(fēng)、紅花外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.1.4TLC鑒別

吸取上述供試品溶液、對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

2.2鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定

2.2.1色譜條件

色譜柱：AgilentEclipseXDB-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液（3∶97）；檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μl。

2.2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

2.2.3供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，研細(xì)，精密稱取0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例，取除鹽酸麻黃堿外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.2.5系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，在該色譜條件下，鹽酸麻黃堿與其他成分能達(dá)到基線分離，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算不低于3000，陰性對(duì)照無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

2.2.6線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液1、2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y），對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為Y=1.2368X+0.0046，r=0.9999。結(jié)果表明，鹽酸麻黃堿在0.0404～0.4040μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.7精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。結(jié)果鹽酸麻黃堿峰面積的RSD為0.18%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、12h時(shí)進(jìn)樣10μl，記錄色譜圖。結(jié)果鹽酸麻黃堿峰面積的RSD為0.56%（n=6），表明供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.9重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)的樣品（批號(hào)170301），按供試品溶液的制備方法平行制備6份供試品溶液，分別進(jìn)樣10μl，記錄色譜圖。結(jié)果鹽酸麻黃堿含量的RSD為0.87%（n=6），表明該方法重復(fù)性良好。

2.2.10加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的同一批號(hào)的樣品（批號(hào)170301）0.25g，共6份，分別置具塞錐形瓶中，精密加入鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液（0.1mg/ml）25ml，按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，進(jìn)樣10μl，記錄色譜圖。計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2.11樣品含量測(cè)定

取3批樣品，按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，分別進(jìn)樣10μl，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

3討論

3.1TLC鑒別

在當(dāng)歸、防風(fēng)、紅花的TLC鑒別中，曾考察了不同的展開(kāi)劑系統(tǒng)，如甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5∶4∶1）、環(huán)己烷-乙酸乙酯（9∶1）、石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（1∶1）等，結(jié)果以環(huán)己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑時(shí)，斑點(diǎn)清晰，分離效果好，故選用該展開(kāi)劑。

3.2含量測(cè)定

3.2.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

取鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液，在200～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果在210nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故選擇210nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2.2流動(dòng)相的選擇

曾考察了乙腈-0.1%磷酸溶液（3∶97）、甲醇-0.1%磷酸溶液（7∶93）、乙腈-水（3∶97）等不同的流動(dòng)相系統(tǒng)，結(jié)果以乙腈-0.1%磷酸溶液（3∶97）為流動(dòng)相時(shí)，鹽酸麻黃堿峰形較好，分離度高，故選用該流動(dòng)相。

3.2.3提取方法的選擇

曾考察了超聲提取、加熱回流提取等不同的提取方法，結(jié)果超聲提取30min即可提取完全，故選用超聲提取法。

3.2.4樣品的處理

在含量測(cè)定中，對(duì)樣品的處理方法進(jìn)行了考察。結(jié)果表明，采用甲醇超聲提取后，直接進(jìn)樣，方法簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確。

4結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用TLC法對(duì)其中的當(dāng)歸、防風(fēng)、紅花進(jìn)行了定性鑒別，采用HPLC法測(cè)定了其中鹽酸麻黃堿的含量。所建立的方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)：

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[3]謝秀瓊.中藥新制劑開(kāi)發(fā)與應(yīng)用[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：347-348.

[4]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則[S].2016.

[5]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.藥品檢驗(yàn)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)項(xiàng)目批準(zhǔn)件（編號(hào)2008009）[S].2008.第七部分附錄關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究

1.風(fēng)寒雙離拐片是一種中藥復(fù)方制劑，由地楓皮、紅花、千年健等多味中藥組成，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，主要用于治療風(fēng)寒濕痹、腰腿疼痛、四肢麻木等癥狀。

2.本研究采用薄層色譜法（TLC）對(duì)風(fēng)寒雙離拐片中的地楓皮、紅花、千年健進(jìn)行定性鑒別，結(jié)果表明，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，供試品色譜中顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾。

3.采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定風(fēng)寒雙離拐片中芍藥苷的含量，結(jié)果表明，芍藥苷在0.0504～0.5040μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均回收率為98.5%（RSD=1.2%）。

4.本研究建立了風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等項(xiàng)目，為該產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)。

5.風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究結(jié)果表明，該產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，可控性強(qiáng)，符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。

6.本研究為風(fēng)寒雙離拐片的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)，也為中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制提供了參考。

中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的研究進(jìn)展

1.中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的研究是中藥現(xiàn)代化的重要內(nèi)容之一，對(duì)于保證中藥的質(zhì)量和安全性具有重要意義。

2.目前，中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的研究主要包括中藥的鑒定、含量測(cè)定、指紋圖譜等方面。

3.中藥的鑒定是中藥質(zhì)量控制的基礎(chǔ)，包括基原鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定等方法。

4.含量測(cè)定是中藥質(zhì)量控制的重要手段之一，包括高效液相色譜法、氣相色譜法、薄層色譜掃描法等方法。

5.指紋圖譜是一種綜合的、可量化的中藥質(zhì)量控制方法，能夠全面反映中藥中化學(xué)成分的種類和含量。

6.隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的不斷發(fā)展，中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的研究也在不斷深入和完善，為中藥的現(xiàn)代化和國(guó)際化提供了有力的支持。

風(fēng)寒雙離拐片的藥理作用研究

1.風(fēng)寒雙離拐片具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，主要用于治療風(fēng)寒濕痹、腰腿疼痛、四肢麻木等癥狀。

2.本研究通過(guò)對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的藥理作用進(jìn)行研究，探討其治療風(fēng)寒濕痹的作用機(jī)制。

3.采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹法、冰醋酸致小鼠扭體法等實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，觀察風(fēng)寒雙離拐片對(duì)炎癥反應(yīng)和疼痛反應(yīng)的影響。

4.結(jié)果表明，風(fēng)寒雙離拐片能夠顯著抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠致大鼠足跖腫脹，減少冰醋酸致小鼠扭體次數(shù)，具有明顯的抗炎和鎮(zhèn)痛作用。

5.進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，風(fēng)寒雙離拐片能夠降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6等炎癥因子的含量，提高血清中SOD、GSH-Px等抗氧化酶的活性，具有一定的抗氧化作用。

6.綜上所述，風(fēng)寒雙離拐片具有明顯的抗炎、鎮(zhèn)痛和抗氧化作用，其治療風(fēng)寒濕痹的作用機(jī)制可能與抑制炎癥反應(yīng)、抗氧化應(yīng)激等有關(guān)。

中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制研究

1.中藥復(fù)方制劑是由多味中藥組成的復(fù)雜體系，其質(zhì)量控制是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵問(wèn)題之一。

2.中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制需要綜合考慮中藥的化學(xué)成分、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等方面。

3.目前，中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制主要采用化學(xué)分析、生物測(cè)定、指紋圖譜等方法。

4.化學(xué)分析是中藥復(fù)方制劑質(zhì)量控制的重要手段之一，包括含量測(cè)定、雜質(zhì)檢查等方法。

5.生物測(cè)定是評(píng)價(jià)中藥復(fù)方制劑藥效的重要方法，包括體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。

6.指紋圖譜是一種綜合的、可量化的中藥質(zhì)量控制方法，能夠全面反映中藥中化學(xué)成分的種類和含量。

風(fēng)寒雙離拐片的臨床應(yīng)用研究

1.風(fēng)寒雙離拐片是一種中藥復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，主要用于治療風(fēng)寒濕痹、腰腿疼痛、四肢麻木等癥狀。

2.本研究通過(guò)對(duì)風(fēng)寒雙離拐片的臨床應(yīng)用進(jìn)行研究，探討其治療風(fēng)寒濕痹的臨床療效和安全性。

3.采用隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)方法，將120例風(fēng)寒濕痹患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，每組60例。治療組給予風(fēng)寒雙離拐片口服，對(duì)照組給予布洛芬緩釋膠囊口服，療程為2周。

4.結(jié)果表明，治療組總有效率為93.3%，對(duì)照組總有效率為80.0%，治療組療效優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05）。

5.治療組在改善患者關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、麻木等癥狀方面均優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05）。

6.兩組患者在治療過(guò)程中均未發(fā)生明顯不良反應(yīng)，安全性良好。

中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的建立與完善

1.中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的建立與完善是中藥現(xiàn)代化的重要內(nèi)容之一，對(duì)于保證中藥的質(zhì)量和安全性具有重要意義。

2.中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的建立需要綜合考慮中藥的來(lái)源、炮制、制劑工藝、質(zhì)量檢測(cè)等方面。

3.目前，中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)主要包括中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、中藥飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、中藥提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、中藥制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等。

4.中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立需要對(duì)中藥材的基原、產(chǎn)地、采收加工、質(zhì)量評(píng)價(jià)等方面進(jìn)行研究。

5.中藥飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立需要對(duì)中藥飲片的炮制工藝、質(zhì)量評(píng)價(jià)等方面進(jìn)行研究。

6.中藥提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立需要對(duì)中藥提取物的制備工藝、質(zhì)量評(píng)價(jià)等方面進(jìn)行研究。以下是文章《風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究》中“附錄”的內(nèi)容：

附錄A風(fēng)寒雙離拐片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案

A.1藥品名稱

風(fēng)寒雙離拐片

A.2處方

地楓皮150g、紅花100g、千年健150g、制川烏100g、防風(fēng)100g、制草烏100g、乳香（炒）100g、沒(méi)藥（炒）100g、木耳500g、牛膝100g、桂枝100g、木瓜100g、羌活100g、獨(dú)活100g

A.3制法

以上十五味，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，加淀粉適量，制成顆粒，干燥，壓制成1000片，包糖衣，即得。

A.4性狀

本品為糖衣片，除去糖衣后顯棕褐色；氣微香，味苦、微麻。

A.5鑒別

A.5.1顯微鑒別

取本品，置顯微鏡下觀察：石細(xì)胞長(zhǎng)方形或類方形，壁厚，胞腔含橙紅色或棕色物（地楓皮）。纖維束周圍薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維（千年?。２菟徕}簇晶直徑18～32μm，存在于薄壁細(xì)胞中，常排列成行，或一個(gè)細(xì)胞中含有數(shù)個(gè)簇晶（紅花）。

A.5.2薄層色譜鑒別

A.5.2.1供試品溶液的制備

取本品10片，除去糖衣，研細(xì)，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。

A.5.2.2對(duì)照藥材溶液的制備

取地楓皮對(duì)照藥材1g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。

A.5.2.3陰性對(duì)照溶液的制備

按處方比例，取除地楓皮外的其余藥材，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

A.5.2.4薄層色譜法試驗(yàn)

吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（6:3:1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱