DB2308T 210-2024北方粳稻苗期耐冷精準高效鑒定技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB05DB23082024-11-28發(fā)布佳木斯市市場監(jiān)督管理局發(fā)布IDB2308/T210—2024本文件依據(jù)GB/T1.1-2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由佳木斯市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件由佳木斯市市場監(jiān)督管理局批準發(fā)布。本文件起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所、黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所。本文件主要起草人：鄭天清、郭震華、馬文東、郭博言、張文雨。本文件為2024年首次發(fā)布。DB2308/T210—2024本文件確立了佳木斯市水稻苗期耐低溫鑒定評價的程序，規(guī)定了試驗準備、耐低溫鑒定評價等階段的操作指示，描述了記錄與檔案等追溯方法。本文件適用于佳木斯市的北方粳稻種質(zhì)苗期耐低溫的鑒定與評價。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4404.1糧食作物種子第1部分：禾谷類DB22T3633直播水稻萌發(fā)期耐低溫和耐低氧性鑒定評價技術(shù)規(guī)程。3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1存活率水稻苗受冷脅迫后，在正常生長條件恢復(fù)7～10d，統(tǒng)計能夠繼續(xù)生長的稻苗數(shù)量占處理前稻苗總數(shù)的比例。3.2枯萎度水稻苗受冷脅迫，在正常生長條件恢復(fù)7～10d，統(tǒng)計的葉片枯萎程度，4鑒定及評價流程4.1試驗準備4.1.1試驗儀器培養(yǎng)箱、恒溫箱、人工氣候室或人工氣候箱、周轉(zhuǎn)箱等。2DB2308/T210—20244.1.2種子準備種子質(zhì)量應(yīng)符合GB4404.1的規(guī)定。4.1.3種子處理選取50粒左右的飽滿水稻種子裝在浸種袋里，將所有種子（含已知耐冷品種，如空育131等；以及不耐冷品種如東農(nóng)422等，作為試驗對照）分三個生物學(xué)重復(fù)，一次性將所有材料全部進行低溫處理，具體操作如下：將分好的種子依次編號并串聯(lián)起來，在50℃的烘箱中放置2～3d來打破休眠。將烘好的種子用2%的過氧化氫消毒液進行消毒30min，并用自來水沖洗3～5次，直至無消毒液殘留，然后在30℃黑暗條件下浸種48h。4.2育苗及冷脅迫處理4.2.1育苗種子浸泡使其充分吸水后，在28℃的條件下催芽12h，然后選取發(fā)芽一致的種子播種，育苗方式可分為兩種，第一種是土培：在裝滿壤土的育秧盤中，每個育秧盤播21份材料，每個材料播種約50粒，兩次生物學(xué)重復(fù)。將育秧盤放在平均氣溫25℃~28℃的大棚內(nèi)，正常培育，每周噴施殺蟲劑一次，防控蟲害。第二種是水培：在切割好的96孔PCR板中，每個PCR板播2份材料，每個材料播種40粒，播時芽朝上，3次生物學(xué)重復(fù)。將PCR板放置在裝有鐵架子的培養(yǎng)盒中（PCR板置于鐵架子上加入培養(yǎng)液，每7d更換一次，培養(yǎng)液高高于鐵架子上表面。培養(yǎng)液第一周為純凈水，7d后換為PH值6左右的營養(yǎng)液（營養(yǎng)元素為氮、磷、鉀、鈣、鎂及微量元素，具體配方見表1）。將培養(yǎng)盒放在28℃的人工氣候室內(nèi)，恒溫培養(yǎng)，光照設(shè)置：13h光照、11h黑暗，光照強度為750Lx～1250Lx。表1營養(yǎng)液原液配方成份試劑名稱g/4L原液360L營養(yǎng)液（mL）大量元素3DB2308/T210—2024成份試劑名稱g/4L原液360L營養(yǎng)液（mL）N(NH4)2SO4603.64450.0040.00PNaH2PO4.2H2O161.17KK2SO4285.3640.00CaCaCl2.2H2O469.4240.00MgMgSO4.7H2O298.0040.00微量元素MnMnCl2.4H2O5.74450.000.50Mo(NH4)6Mo7O2.4H2O0.290.05ZnZnSO4.7H2O0.01BH3BO33.660.20CuCuSO4.5H2O0.130.01FeFeCl3.6H2O30.972.00檸檬酸C6H8O7.H2O47.60原液配制流程如下:(1)大量元素：按表1稱量后置于1000mL燒杯中加750mL蒸餾水溶解，定容到4L,磁棒攪拌15min后轉(zhuǎn)移至棕色瓶中貯藏。(2)微量元素：微量元素的配制很關(guān)鍵，濃度過低導(dǎo)致缺素，過高引起毒害。各種成份必須分開配制。按表1稱量，除氯化鐵用100mL蒸餾水溶解外，其余均用50mL蒸餾水溶解，按Mn、Mo、Zn、B、Cu、Fe和檸檬酸溶液順序倒入盛有1L蒸餾水的2L容量瓶中攪拌15min，再加100mL碳酸混勻后定容到4L，攪拌10min后倒入棕色瓶中貯藏，溶液的最終呈淺褐色。所有原液必須用標簽標明并單獨貯藏。4.2.2冷脅迫處理在人工氣候室進行苗期耐冷試驗。幼苗生長到兩葉一心期至三葉一心期開始處理，處理方式為：5℃培養(yǎng)6d左右，低溫培養(yǎng)結(jié)束后將育苗盤再放回自然條件或者大棚或者培養(yǎng)室/箱中恢復(fù)生長，并記錄每日平均溫度，恢復(fù)正常生長7d左右?？筛鶕?jù)材料的耐冷水平，適4DB2308/T210—2024當(dāng)調(diào)整處理時間和溫度，以便達到最佳處理效果。4.3耐低溫鑒定及評價4.3.1存活率和枯萎度統(tǒng)計分別調(diào)查各材料的存活率和枯萎度級別。4.3.2評價標準存活率按照如下公式計算：存活苗數(shù)/總苗數(shù)×100%?？菸裙卜譃?個等級，評價標準參考韓龍植等的方法并稍加修改，如表1所示：表2水稻苗期枯萎度分級標準枯萎度等級表型描述1所有幼苗葉片為青綠或接近青綠色3幼苗葉片出現(xiàn)脫色或變黃現(xiàn)象5幼苗近50%的葉片干枯，部分幼苗死亡7一半以上幼苗枯萎死亡，少數(shù)存活9幼苗全部死亡與苗期耐