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探究?實踐低溫誘導(dǎo)植物細(xì)胞染色體數(shù)目的變化三倍體無籽西瓜除了秋水仙素能誘導(dǎo)多倍體的形成,還有沒有其他的方法也能誘導(dǎo)多倍體?低溫處理低溫能夠抑制紡錘體的形成,使染色體不能被拉向兩極,細(xì)胞不能分裂成兩個子細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞的染色體數(shù)目發(fā)生變化。實驗原理著絲粒分裂抑制紡錘體形成著絲粒分裂低溫誘導(dǎo)紡錘中央體胞質(zhì)分裂面4條染色體8條染色體4條染色體無紡錘體8條染色體低溫處理正常情況1、低溫誘導(dǎo)任何一種植物細(xì)胞都可以嗎?2、如何實現(xiàn)低溫誘導(dǎo)?不是,選擇具有分裂能力的細(xì)胞利用冰箱的冷藏室(4℃)進(jìn)行低溫誘導(dǎo)任務(wù)一蒜的根尖分生區(qū)細(xì)胞冰箱蓋玻片、載玻片培養(yǎng)皿燒杯剪刀鑷子濾紙顯微鏡實驗用具卡諾氏液甲紫溶液清水95%的酒精15%的鹽酸實驗試劑方法步驟培養(yǎng)根尖固定根尖制作裝片顯微觀察方法步驟(1)培養(yǎng)根尖①低溫放置:低溫冷藏室(4℃),放置一周②水培:長出約1cm的不定根③低溫誘導(dǎo):放入冰箱冷藏室,誘導(dǎo)48—72h目的:解除休眠,促進(jìn)生根目的:獲取含有分裂能力的細(xì)胞目的:誘導(dǎo)染色體數(shù)目變化(2)固定根尖①剪取誘導(dǎo)處理的根尖0.5—1cm②放入卡諾氏液中浸泡0.5—1h③用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精沖洗2次目的:選取并獲得分生區(qū)細(xì)胞目的:固定細(xì)胞形態(tài),維持染色體結(jié)構(gòu)完整性;增強(qiáng)染色效果目的:洗去卡諾氏液方法步驟無水乙醇/冰醋酸培
養(yǎng)
根
尖(3)制作臨時裝片①解離:將誘導(dǎo)的根尖放入解離液中,3-5分鐘②漂洗:清水漂洗根尖約1分鐘③染色:0.01g/ml的甲紫溶液染色3—5分鐘目的:使細(xì)胞彼此分離目的:洗去解離液,防止解離過度目的:使染色體著色④制片:搗碎根尖,蓋上蓋玻片,拇指按壓目的:使細(xì)胞分散開,便于觀察方法步驟(4)顯微觀察低倍鏡:在分生區(qū)細(xì)胞,尋找染色體形態(tài)較好的分裂象高倍鏡:觀察染色體數(shù)目變化方法步驟制
作
裝
片任務(wù)二2、通過上述實驗?zāi)芊竦贸觥暗蜏卣T導(dǎo)植物細(xì)胞染色體數(shù)目發(fā)生變化”這一結(jié)論?為什么?不能,因為實驗設(shè)計不嚴(yán)密,應(yīng)設(shè)置對照組,即未經(jīng)低溫誘導(dǎo)處理的根尖細(xì)胞。1、整個實驗中有幾次用到體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精?目的是什么?第一次,卡諾氏液固定細(xì)胞之后,目的是洗去卡諾氏液;第二次,配制解離液,用于使細(xì)胞彼此分離。實驗結(jié)果染色數(shù)目加倍細(xì)胞正常細(xì)胞(比較觀察處于分裂前期的細(xì)胞)對照(放大400倍)低溫誘導(dǎo)72h(放大400倍)染色數(shù)目加倍細(xì)胞正常細(xì)胞(比較觀察處于分裂中期的細(xì)胞)實驗結(jié)果對照(放大400倍)低溫誘導(dǎo)72h(放大400倍)實驗結(jié)果(比較觀察處于分裂后期的細(xì)胞)正常細(xì)胞染色數(shù)目加倍細(xì)胞實驗結(jié)論:低溫會使植物細(xì)胞的染色體數(shù)目發(fā)生變化。對照(放大400倍)低溫誘導(dǎo)72h(放大400倍)注意事項大蒜水培的適宜溫度為25℃左右(建議在春秋季開展該實驗),并保持環(huán)境通風(fēng),夏天放置在空調(diào)房較難生根,建議放置在地下室進(jìn)行。
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