DB21T 2219.1-2014 玉米 高粱主要病害抗性鑒定技術規(guī)范第 1 部分 高粱靶斑病抗性鑒定　　

ICS65.020.01B47DB21DB21/T2219.1—2014RulesforevaluationofsorghumandmaizeforresistancetodiseasesPart1:Ruleforevaluationofsorghumforresistancetotargetleafspot遼寧省質量技術監(jiān)督局發(fā)布1DB21/T2219.1—2014本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。《玉米、高粱主要病害抗性鑒定技術規(guī)范》分為六個部分：——第1部分：高粱靶斑病抗性鑒定；——第2部分：高粱煤紋病抗性鑒定；——第3部分：高粱鐮孢菌莖腐病抗性鑒定；——第4部分：高粱絲黑穗病抗性鑒定；——第5部分：玉米灰斑病抗性鑒定；——第6部分：玉米彎孢菌葉斑病抗性鑒定。本部分為DB21/T2219-2014的第1部分。本標準由遼寧省農(nóng)村經(jīng)濟委員會提出并歸口。本標準由遼寧省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所起草。本標準主要起草人：胡蘭、姜鈺、劉可杰、徐婧、張明會、魏家彪、王麗娟、郭瑛瑋、徐秀德。2DB21/T2219.1—2014《玉米、高粱主要病害抗性鑒定技術規(guī)范》第1部分：高粱靶斑病抗性鑒定，本部分規(guī)定了高粱抗靶斑病[Bipolarissorghicola(Lefebvre&Sherwin)Alcorn]鑒定技術的術語和定義、病原物接種體制備、田間抗性鑒定、病情調查、抗性評價和鑒定記載方法。本標準適用于粒用高粱[Sorghumbicolor(L.)Moench]品系、品種、雜交種及種質資源對高粱靶斑病抗性的田間鑒定及評價。2術語和定義下列術語和定義適用于本標準。2.1抗病性diseaseresistance植物體所具有的能夠減輕或克服病原物致病作用的可遺傳性狀。2.2致病性pathogenicity病原物所具有的侵染寄主植物引起發(fā)病的能力。2.3抗性評價evaluationofresistance根據(jù)采用的技術標準判別寄主植物對特定病害反應程度和抵抗水平的描述。2.4抗病性鑒定identificationofdiseaseresistance通過適宜技術方法鑒別植物對其特定侵染性病害的抵抗水平。2.5人工接種artificialinoculation3DB21/T2219.1—2014在適宜條件下，通過人工操作將接種體接于植物體適當部位并使植物發(fā)病的過程。2.6病情級別diseaseratingscale植物個體或群體發(fā)病程度的量化描述。2.7分離物isolate采用人工方法從植物發(fā)病部位分離獲得的病原體的純培養(yǎng)物。2.8培養(yǎng)基medium可以使病原物生長的自然或人工配制的基質。2.9接種體inoculums用于接種以引起病害的病原體或病原體的一部分。2.10高粱靶斑病targetleafspot由高粱生雙極蠕孢菌[Bipolarissorghicola(Lefebvre&Sherwin)Alcorn，異名HelminthosporiumsorghicolaLefebvreandSherwin]引起的一種為害高粱葉片和葉鞘，產(chǎn)生紫紅色或黃褐色病斑的病害。3病原物接種體制備3.1病原物分離采用常規(guī)組織分離法從發(fā)病植株葉片的典型病斑上分離靶斑病病原物。經(jīng)單孢分離純化后，形態(tài)學鑒定為高粱生雙極蠕孢菌[Bipolarissorghicola(Lefebvre&Sherwin)Alcorn]，經(jīng)致病性測定后4℃下保存或30%甘油液體中-40℃下低溫長期保存、備用。3.2接種體繁殖與保存接種前用高粱籽粒培養(yǎng)基進行病原物接種體的繁殖。高粱籽粒培養(yǎng)基的制備方法：高粱籽粒浸泡12h后煮至稍見開裂，涼水冷卻后，控去多余水分裝入廣口瓶或罐頭瓶中，每瓶裝高粱籽粒量不超過瓶總容積的2/3,121℃高壓滅菌60min，24h后重復滅菌1次，冷卻后備用。將PDA平板培養(yǎng)基培養(yǎng)的病菌接種于滅菌的高粱籽粒培養(yǎng)基上，置于25℃~28℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)7d~10d（每3d搖瓶1次待4DB21/T2219.1—2014高粱籽粒表面長滿菌絲或分生孢子，備用。4田間抗性鑒定4.1抗性鑒定圃設置人工接種鑒定的鑒定圃設置在具備良好的自然發(fā)病環(huán)境條件和灌溉條件、地勢平坦、地力均勻的地塊。4.2鑒定設計鑒定材料按品種生育期順序排列，如品種生育期相似可采用隨機排列，行長5m，單行區(qū)，行距0.6m，小區(qū)保苗25株左右。3次重復。每50份鑒定材料各設1組抗、感病對照，抗病對照品種為L407B，感病對照品種為Tx622B。4.3種植要求鑒定材料播種時間與大田生產(chǎn)播種時間相同或適當調整，以使植株接種期和發(fā)病期能夠與適宜的氣候條件（濕度、溫度）相遇，確保鑒定結果的準確性。土壤肥力水平和栽培管理與大田生產(chǎn)相同。4.4接種4.4.1接種期高粱靶斑病抗性鑒定接種期為植株喇叭口期，一般中熟、晚熟類型高粱品種10片~11片葉期，早熟類型品種9葉期接種。選擇傍晚或小雨天進行接種為宜。4.4.2接種方法將長滿病菌分生孢子的高粱粒投入喇叭口中，每株接種5?！?粒，間隔3d再接種1次，共接種2次。4.5接種后管理在接種期間若遇干旱天氣，應及時進行田間澆灌或葉面噴霧，確保病害發(fā)生。5病情調查5.1調查時間接種后40d~50d左右，高粱籽粒進入乳熟期進行病害調查。5.2調查方法5DB21/T2219.1—2014目測每份鑒定材料發(fā)病狀況，重點調查接種部位的上方和下方各2片葉。根據(jù)病害癥狀描述，逐葉進行調查，記載病情級別。5.3病情分級病情分級及其對應的癥狀描述見表1。表1高粱抗靶斑病鑒定病情級別劃分標準病情級別病害癥狀描述0葉片上無可見病斑1葉片病斑占葉面積5%以下3葉片病斑占葉面積的5.1%～25%5葉片病斑占葉面積25.1%～50%7葉片病斑占葉面積50.1%～75%9葉片病斑占葉面積75%以上，多數(shù)葉片枯死6抗性評價6.1鑒定有效性判別當感病對照材料達到其相應感病程度（7級或9級該批次材料抗靶斑病鑒定視為有效。6.2抗性評價標準依據(jù)鑒定材料的群體發(fā)病程度（病情級別確定其對靶斑病的抗性水平。以50%以上發(fā)病個體（葉片）的病情級別作為鑒定材料群體的病情級別值，確定鑒定材料的抗性，劃分標準見表2。表2高粱對靶斑病抗性評價標準病情級別抗性0免疫Immunity（IM）1高抗Highlyresistant（HR）3抗Resistant（R）5中抗Moderatelyresistant（MR）7感Susceptible（S）9高感Highlysusceptible（HS）7鑒定記載表格6DB21/T2219.1—2014高粱抗靶斑病鑒定結果記載見表3。表3年高粱抗靶斑病鑒定結果記載表名稱來源調查總數(shù)病情級別抗性評價013579注1:鑒定地點注2:接種病原菌分離物編號注3:接種日期調查日期鑒定技術負責人（簽字）：7DB21/T2219.1—2014（規(guī)范性附錄）高粱靶斑病菌A.1學名和形態(tài)描述A.1.1學名高粱靶斑病菌為雙極蠕孢菌[Bipolarissorghicola(Lefebvre&Sherwin)Alcorn，異名HelminthosporiumsorghicolaLefebvreetSherwin]，屬無性態(tài)真菌雙極蠕孢屬。A.1.2形態(tài)描述病菌分生孢子梗單生或2根~4根自氣孔或從寄主表皮細胞間生出，通常不分枝，偶有分枝，淺褐色至欖褐色，具隔膜，基部呈半球形，大小50μm~730μm×4.8μm~7.5μm，孢子梗上著生1個~4個分生孢子。當濕度大或菌落周圍有水滴時，分生孢子可直接萌發(fā)，產(chǎn)生較短的分生孢子梗，其上再生分生孢子，連續(xù)不斷地生長形成分生孢子鏈。分生孢子淺褐色至淡欖褐色，微彎，兩端鈍圓，2個~8個隔膜，以4個~6個者居多，分生孢子大小72.5μm~92.5μm×10μm~12.5μm。分生孢子臍點明顯可見，但不凹入基細胞內，幾乎與基部邊緣平齊。8DB21/T2219.1—2014(規(guī)范性附錄)高粱靶斑病癥狀B.1病名和癥狀描述B.1.1病名高粱靶斑病sorghumtargetleafspotB.1.2癥狀描述高粱靶斑病主要危害植株的葉片和葉鞘。發(fā)病初期，葉面上出現(xiàn)淡紫色或黃褐色小斑點，外圍著黃色暈圈，后成橢圓形、卵圓