DB21T 3388-2021 規(guī)模化奶牛場乳房炎防治技術規(guī)范

21TechnicalSpecificationForPreventionAndTreatmentOfDairyCattleM遼寧省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定1規(guī)模化奶牛場乳房炎防治技術規(guī)范本文件適用于遼寧省行政區(qū)域內規(guī)?；膛鰧δ膛Ｈ榉垦譔Y/T2962奶牛乳房炎乳汁中金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、無乳鏈球菌分離鑒定方法NY5047無公害食品奶牛飼養(yǎng)獸醫(yī)防疫準則NY/T5049無公害食品奶牛飼養(yǎng)管理準則規(guī)?；膛鍪侵附?jīng)當?shù)剞r業(yè)、工商等行政主管部門批準，具有法人資格，同時奶牛存欄量頭1003.3臨床型乳房炎Clinicalma乳汁稀薄或變稠?；蚧疾咳榉拷M織出現(xiàn)不同程度的充血、腫脹、溫熱和疼痛，乳房上淋巴結3.4亞臨床型乳房炎（隱性乳房炎）Subclinicalma2理變化等，但如果采用體細胞計數(shù)方法，其乳汁中的體細胞數(shù)量＞3×105次個/m按照GB13078、NY5032和NY/4.2衛(wèi)生管理4.2.1人員每日及時清掃牛床內的糞便，并沖洗干凈，每周消毒4.2.3牛舍通道4.2.4運動場4.2.5用具4.3榨乳4.3.1乳房清洗和消毒榨乳前先用40℃~50℃的溫水將乳房擦拭干凈，并選用有效消毒藥4.3.2手工榨乳乳房清洗消毒后，用清洗消毒過的干毛巾抹干凈乳頭，采用拳握法進行榨乳，榨乳速度為84次34.3.3機械榨乳4.4榨乳機的消毒4.4.1榨乳前4.4.2榨乳后4.5乳房護理少，脈搏增速，脫水，全身衰弱、沉郁。當病情發(fā)展很快且癥狀嚴重時可危及生病牛一般沒有全身癥狀，乳汁中有絮片、凝塊，并呈水房萎縮，出現(xiàn)硬結。慢性乳房炎易成為牛群中的4酶類檢測法和乳成分直接檢測法。本文件主要介紹體細胞計數(shù)法。檢測方法參選用抗感染藥物治療。治療前應進行乳汁采樣，進行病原培養(yǎng)，根據(jù)藥敏實驗結果選擇用藥采用乳房基部封閉、乳房按摩、增加擠乳次數(shù)、乳房冷敷、外敷藥物等緩解乳房的腫脹。病牛奶用專用容器集中銷毀，嚴格執(zhí)行休藥期和棄奶規(guī)56進行隱性乳房炎檢測，陰性奶牛方可進行干奶。榨乳后，向每個乳區(qū)注入適量的干奶藥。7A1.金黃色葡萄球菌的檢驗A1.1.1革蘭氏染色：A1.1.1.1涂片、火焰固定。溶液A：結晶紫2g，95%酒精20mL，溶液B：草酸銨0.8g，蒸餾水80mL。將A、B溶液混合，用濾紙過A1.1.1.7沙黃液（稀）染2min后A1.1.2觸酶試驗細菌培養(yǎng)物中，立即觀察結果。有大量氣泡產(chǎn)生者為陽性，無則A1.1.3血漿凝固酶試驗8A1.2乳樣的采集最后用70%的酒精擦拭乳頭。采樣者同時進行手指擦拭消毒。每個乳室先擠去頭2～3把奶，以排除污染A1.3病原菌的分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)：將乳樣搖勻，分別取適量接種于營養(yǎng)肉湯（10%血清）、鮮血瓊脂、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（平板）后，置于37℃溫箱培養(yǎng)24～48h菌落涂片、染色、鏡檢（鏡檢呈葡萄狀排列，無芽孢、莢膜，直徑0.5～1μm，革蘭氏染色陽性），并A1.4生化鑒定A1.5毒力試驗接種，接種量為0.5mL/只（家兔皮下接種1.0mL或者靜脈接種0.1～0.5m），A1.6病原菌的重分離試驗9檢查，觀察所分離菌株是否為原接種菌。如果是則進一步確定病原菌為金黃色葡萄球菌。A2.鏈球菌的檢驗A2.1主要試劑和試驗方法20mm。置37℃溫箱內培養(yǎng)24h后觀察結果A2.2乳樣的采集最后用70%的酒精擦拭乳頭。采樣者同時進行手指擦拭消毒。每個乳室先擠去頭2～3把奶，以排除污染A2.3病原菌的分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)：將乳樣搖勻，分別取適量接種于營養(yǎng)肉湯（10%血清）、鮮血瓊脂、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（平板）后，置于37℃溫箱培養(yǎng)24～48h疑為無乳鏈球菌，如果為α溶血，疑為停乳鏈球菌或者乳血清肉湯中生長初呈均勻渾濁，管底出現(xiàn)絮狀沉淀，上清A2.4生化鑒定鑒定為停乳鏈球菌；若細菌CAMP試驗陰性，水解A2.5動物試驗兔靜脈接種1～2mL，可使動物在1周內死亡。對接種后發(fā)病、死亡小鼠（家兔）的肝臟進行病原菌重分病原菌為停乳鏈球菌。其他兩種鏈球菌并不能使試驗動物致），），100mL，將上列溶液混合搖勻，過濾后備用。二甲苯、95%乙醇。生物顯微鏡、載玻片、10μL微量加樣紙板上用毛筆劃數(shù)個面積為1cm2的方格透干燥、脫脂、固定：涂好乳膜的玻片于37℃溫箱中干燥，然后用二甲苯脫脂5min，再置95%乙醇中染色：玻片干燥后，用美藍染色液染色5min。水洗，鏡檢及計數(shù)：在生物顯微鏡油鏡下觀察（最好用10×目鏡，其視野直徑要求為0.016），計數(shù)100個視野內的細胞數(shù)，然后用下式計算：SCC＝100×視野面積πr2＝3.1416×(0.016/2)2＝0.0SCC＝系數(shù)×每個視野的細胞平均數(shù)（即細胞總數(shù)÷100細胞數(shù)/mL乳。（＋）；CMT是加州乳房炎試驗的簡稱，即首先在美國加利福尼亞州使用的一種乳房炎檢測試驗。它是通過乳中體細胞被破壞，釋放出DNA，進一步作用，使乳汁產(chǎn)生沉淀或形成凝膠。體細胞數(shù)越多，產(chǎn)生的沉是簡便、快速。我國研制出了類似的方法如BMT（北京奶牛研究所）、