適用于新教材2025版高考生物一輪總復(fù)習(xí)課時(shí)規(guī)范練50基因工程的基本工具與操作程序新人教版

課時(shí)規(guī)范練50一、選擇題1.(2024屆普寧期中)下列有關(guān)限制酶和DNA連接酶的敘述,正確的是()A.用限制酶酶切獲得一個(gè)外源基因時(shí)得到兩個(gè)切口,有兩個(gè)磷酸二酯鍵被斷開(kāi)B.限制酶識(shí)別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大C.序列-CATG↓-和-G↓GATCC-被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)不同D.T4DNA連接酶和E.coliDNA連接酶都能催化平末端和黏性末端的連接答案:B2.(2024濟(jì)南一模)A基因中含兩種限制酶BamHⅠ和MspⅠ(5'C↓CGG3')的酶切位點(diǎn),HpaⅡ和MspⅠ酶切位點(diǎn)相同,酶切位點(diǎn)處的胞嘧啶可能被甲基化,HpaⅡ?qū)Π奏ぜ谆舾?即不能切割甲基化的酶切位點(diǎn)),而MspⅠ則對(duì)胞嘧啶甲基化不敏感。某種小鼠(Aa)有兩種表型,用每種表型的小鼠A基因分別做了三組的酶切試驗(yàn):第一組單獨(dú)運(yùn)用BamHⅠ,其次組運(yùn)用BamHⅠ+MspⅠ,第三組運(yùn)用BamHⅠ+HpaⅡ;每組完全酶切產(chǎn)物(每一個(gè)酶切位點(diǎn)均被切割)通過(guò)電泳分別并運(yùn)用探針得到雜交帶,如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.第一組處理后均可得到包含探針的8.9kb基因片段B.若表型1中的A基因經(jīng)過(guò)其次組和第三組處理后的酶切結(jié)果分別是3.5kb和8.9kb,說(shuō)明表型1中的A基因中四個(gè)MspⅠ酶切位點(diǎn)均被甲基化C.若表型2中A基因第三組酶切結(jié)果介于3.5kb和8.9kb之間,說(shuō)明A基因中至少有2個(gè)HpaⅡ酶切位點(diǎn)被甲基化D.該種小鼠(Aa)有兩種表型可能是A基因甲基化程度不同影響了基因的表達(dá)答案:C3.(2024青島一模)DNA瓊脂糖凝膠電泳的分子篩效應(yīng)是指作為支持介質(zhì)的瓊脂糖,具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),使大分子物質(zhì)在通過(guò)時(shí)受到較大阻力,借此分別不同大小的DNA片段。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.瓊脂糖凝膠電泳可用于分別、鑒定DNA分子的混合物B.雙鏈DNA分子片段的長(zhǎng)度越大,在瓊脂糖中的移動(dòng)速率越大C.凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合,用于分別后DNA的檢測(cè)D.凝膠中的DNA分子通過(guò)染色,可在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)答案:B解析:凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小有關(guān),雙鏈DNA分子片段的長(zhǎng)度越大,在瓊脂糖中的移動(dòng)速率越小,B項(xiàng)錯(cuò)誤。4.(2024泰安三模)以菜花為材料提取DNA時(shí),需將材料進(jìn)行研磨,研磨液的成分常含有SDS(蛋白質(zhì)變性劑)、EDTA(DNA酶抑制劑)、Tris(緩沖劑)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.為了使研磨更加充分,可以先用纖維素酶處理菜花B.SDS可以使染色體中的DNA和蛋白質(zhì)分別C.EDTA可以防止DNA被細(xì)胞中的酶水解D.Tris可以使DNA形成白色絮狀物答案:D解析:可以先用纖維素酶處理菜花,水解細(xì)胞壁,使研磨更加充分,A項(xiàng)正確;SDS是蛋白質(zhì)變性劑,可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變得松散,使染色體中的DNA和蛋白質(zhì)分別,B項(xiàng)正確;EDTA是DNA酶抑制劑,可以防止DNA被細(xì)胞中的DNA酶水解,C項(xiàng)正確;Tris是緩沖劑,可調(diào)整溶液的pH,肯定濃度的NaCl可以使DNA形成白色絮狀物析出,D項(xiàng)錯(cuò)誤。5.將含有基因修飾系統(tǒng)的T-DNA(一段雙鏈DNA序列)插入到水稻細(xì)胞M的某條染色體上,在該修飾系統(tǒng)的作用下,一個(gè)DNA分子單鏈上的一個(gè)C脫去氨基變?yōu)閁,該脫氨基過(guò)程在細(xì)胞M中只發(fā)生一次。利用培育技術(shù)將細(xì)胞M培育成植株N。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.N的每一個(gè)細(xì)胞中都含有T-DNAB.N自交,子一代中含T-DNA的植株占3/4C.M經(jīng)3次有絲分裂后,含T-DNA且脫氨基位點(diǎn)為A—T的細(xì)胞占1/2D.含有基因修飾系統(tǒng)的T-DNA可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將修飾基因轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞答案:C解析:假如M經(jīng)3次有絲分裂后,形成子細(xì)胞有8個(gè),由于M細(xì)胞DNA分子單鏈上的一個(gè)C脫去氨基變?yōu)閁,兩條鏈對(duì)應(yīng)的堿基為G、U,所以復(fù)制三次后,有4個(gè)細(xì)胞脫氨基位點(diǎn)為G—C,3個(gè)細(xì)胞脫氨基位點(diǎn)為A—T,1個(gè)細(xì)胞脫氨基位點(diǎn)為A—U,因此含T-DNA且脫氨基位點(diǎn)為A—T的細(xì)胞占3/8,C項(xiàng)錯(cuò)誤。6.(2024石家莊二模)探針是段帶有放射性或熒光標(biāo)記的DNA片段。囊性纖維化的診斷陣列是表面結(jié)合有單鏈DNA探針的特別濾紙,其中“0”處放置正常基因的探針,“1~10”處放置該基因不同突變的探針,這些突變基因均為該病致病基因。檢測(cè)#1~#3個(gè)體的相關(guān)基因,結(jié)果如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是()A.放置多種探針的理論依據(jù)是基因突變具有隨機(jī)性B.依據(jù)檢測(cè)結(jié)果可判定#1和#2正常、#3患有該病C.由該檢測(cè)結(jié)果可推知,囊性纖維化是一種多基因遺傳病D.依據(jù)該原理也可以用來(lái)推斷樣本中病毒的類(lèi)型答案:D解析:由題干信息可知:診斷陣列是DNA單鏈探針結(jié)合在一種特別的濾紙上,用于檢測(cè)相關(guān)基因單鏈,在圖中0號(hào)位置放置正?；蛱结?1~10號(hào)放置囊性纖維化不同基因突變位點(diǎn)的探針,#1~#3為個(gè)體,放置多種探針的依據(jù)是基因突變具有不定向性,A項(xiàng)錯(cuò)誤;據(jù)圖僅知#2個(gè)體含有一個(gè)正?；蚝鸵粋€(gè)突變基因,但顯隱性未知,故無(wú)法推斷#2是正常還是患病,B項(xiàng)錯(cuò)誤;由題干信息和圖像綜合分析可知,囊性纖維化的突變位點(diǎn)許多,很可能是由復(fù)等位基因限制的,C項(xiàng)錯(cuò)誤;若將診斷陣列上放置不同病毒的基因探針,依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,也可診斷樣本中病毒的類(lèi)型,D項(xiàng)正確。7.人參是一種珍貴藥材,具有良好的滋補(bǔ)作用。干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有肯定療效。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程。①~④表示相關(guān)的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶,它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如下表所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)EcoRⅠG↓AATTCBamHⅠG↓GATCCA.過(guò)程①所需的兩種引物中分別加上GAATTC和GGATCC序列有利于后續(xù)操作B.構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),目的基因必需位于啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行表達(dá)C.過(guò)程③利用的是T-DNA的特性將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA中D.過(guò)程④需限制培育基中植物激素的種類(lèi)和比例,以防止愈傷組織細(xì)胞發(fā)生再分化答案:C解析:過(guò)程③是將目的基因?qū)朕r(nóng)桿菌中,根瘤農(nóng)桿菌是原核生物,無(wú)染色體,C項(xiàng)錯(cuò)誤。二、非選擇題8.(2024菏澤一模)一般棉花中含β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2),能在纖維細(xì)胞中特異性表達(dá),產(chǎn)生的β-甘露糖苷酶催化半纖維素降解,棉纖維長(zhǎng)度變短?？蒲腥藛T通過(guò)構(gòu)建反義GhMnaA2基因表達(dá)載體,利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入棉花細(xì)胞,勝利獲得轉(zhuǎn)基因棉花品種,詳細(xì)過(guò)程如下。(1)基因表達(dá)載體除圖示組成外,還有復(fù)制原點(diǎn)、等(答兩個(gè))。①②過(guò)程中所用的限制酶分別是和。

(2)PCR技術(shù)擴(kuò)增β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2)原理是,該過(guò)程須要依據(jù)GhMnaA2基因設(shè)計(jì)種引物,為保證GhMnaA2插入質(zhì)粒2中,需在引物的端添加限制酶識(shí)別序列。

(3)③過(guò)程中用酶切法可鑒定正、反義基因表達(dá)載體。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切割正義基因表達(dá)載體獲得0.1kb、3.75kb、5.25kb、8.6kb四種長(zhǎng)度的DNA片段,則用NotⅠ酶切反義基因表達(dá)載體獲得DNA片段的長(zhǎng)度應(yīng)是和。

(4)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2能阻擋β-苷露糖苷酶合成,使棉纖維更長(zhǎng)的原理是。

(5)為什么不能用GhMnaA2探針進(jìn)行DNA分子雜交來(lái)鑒定基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞?答案:(1)終止子、標(biāo)記基因(缺一不行)HindⅢ和BamHⅠ(缺一不行)SmaⅠ(2)DN