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DB37DB37/T2842—2016鴨坦布蘇病毒抗體間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)2016-09-18發(fā)布2016-10-18實(shí)施山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布IDB37/T2842—2016本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省畜牧業(yè)專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：刁有祥、唐熠、陳浩、馮強(qiáng)、提金鳳、高緒慧。1DB37/T2842—20161范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了鴨坦布蘇病毒抗體間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)方法所需試劑及儀器、檢測(cè)步驟、結(jié)果判定等。中坦布蘇病毒特異性抗體。2.1試劑2.1.5磷酸鹽緩沖液(PBS),見A.1。2.1.7洗滌液，見A.3。2.1.8樣品稀釋液(封閉液),見A.4。2.1.10終止液，見A.5。4.1試驗(yàn)試劑預(yù)溫到20℃~25℃。2DB37/T2842—20164.2將抗原按照濃度為2.6ng/μL用碳酸鹽緩沖液稀釋，每孔100μL加入到96孔聚苯乙烯板中，4℃孵育過(guò)夜后，用洗滌液100μL洗板3次，每次置于水平振蕩器300r/min震蕩34.3每孔加入200μL封閉液，37℃溫箱孵育1h,用4.2方法洗板。值)/2;陽(yáng)性對(duì)照OD均值等于(A3孔OD值+A4孔OD值)/2。試驗(yàn)條件成立，否則重做。5.3.1陽(yáng)性樣品OD450≥0.40,待檢血清為陽(yáng)性；即已感染坦布蘇病毒。5.3.2陰性樣品OD450≤0.20,待檢血清為陰性；即未感染坦布蘇病毒。5.3.3可疑樣品0.20<0D450<0.40,判為可疑，重新測(cè)定。3DB37/T2842—2016試劑配制A.1磷酸鹽緩沖液(PBS,0.01mol/LpH7.4)KC10.2gKH?PO?0.2gNa?HPO?·12H?O0.2gA.2包被液(0.05mol/LpH9.6)Na?CO?0.2756gNaHCO?0.6216gA.3洗滌液Tween-20
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