DB51T 2687-2020 羊包蟲病防治技術(shù)規(guī)范

DB51DB51/T2687—2020羊包蟲病防治技術(shù)規(guī)范2020-07-14發(fā)布2020-08-01實(shí)施四川省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I 1 1 1 1 2 2 3 5 6 7 81GB/T32948犬科動(dòng)物感染細(xì)粒棘球絳蟲糞抗原的抗體夾心酶聯(lián)NY/T541動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)采樣方法3.1羊包蟲病由細(xì)粒棘球絳蟲（Echinococcusgranulosus）幼蟲寄生于綿羊、山羊等的肝、肺等器官所引起4診斷4.1.2流行區(qū)域肝、肺等臟器可見大小不等的囊狀突起，也可在脾、腎、肌肉、皮下等多處發(fā)現(xiàn)包囊。包囊周圍度一般為3～5mm，包囊內(nèi)充滿液體，液體沉淀后用肉眼或在解剖鏡下可見許多生發(fā)囊與原頭蚴。由將采集的疑似包囊病灶樣品,以4%福爾馬林鹽水固定,采用常規(guī)組織學(xué)技術(shù)染色檢測(cè)。顯微鏡下觀察，結(jié)締組織下出現(xiàn)過(guò)碘酸雪夫氏(PAS)陽(yáng)性無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的角質(zhì)層,內(nèi)層為具有細(xì)胞核結(jié)構(gòu)的生發(fā)膜,動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)接到疫情報(bào)告并確認(rèn)后,按有關(guān)規(guī)定及時(shí)逐級(jí)上報(bào)，并及時(shí)向同級(jí)獸醫(yī)行政3按犬只每公斤體重5～10mg的劑量一次性口服吡喹酮，每4～6周驅(qū)蟲一次，一年8～12次。投藥前家犬應(yīng)禁食1天，然后將藥片夾在食物中（如饅頭、肉等，或用含誘食在2～8℃下保存，避免高溫和陽(yáng)光直射，忌劇烈搖蕩。疫苗稀釋后，如不能當(dāng)日用完，可在-20℃疫苗使用前應(yīng)置于室溫（22～25℃)2小時(shí)，使用時(shí)充分搖勻，保持勻質(zhì)。疫苗啟封后，24小時(shí)內(nèi)按瓶簽注明的頭份，用滅菌生理鹽水稀釋，每羊群在同批次疫苗接種前和免疫后3周，分別靜脈采血3-5mL分離血清，檢測(cè)羊的免疫抗體水平，及時(shí)在羊皮下注射0.1%鹽酸腎上腺素1mL，視病情緩解程度，20分鐘后重復(fù)注射相同劑量1次；肌5對(duì)羊群每年進(jìn)行一次血清學(xué)監(jiān)測(cè)，每縣（市）在不同鄉(xiāng)應(yīng)抽檢300頭（只）以上，年齡應(yīng)在12月齡A.1材料準(zhǔn)備A.1.1抗原A.2操作方法A.2.1用滴管吸取血清或全血，垂直、緩慢、逐滴地準(zhǔn)確將2滴樣品滴入裝有樣品稀釋液的滴瓶?jī)?nèi)。A.2.3將檢測(cè)卡平衡至室溫后從鋁箔袋中取出，放置在平整表面。A.2.4用滴瓶緩慢、逐滴準(zhǔn)確地滴加3滴稀釋后的樣品到檢測(cè)卡的加樣孔中。A.2.5室溫下(18～25℃)放置10分鐘內(nèi)判斷結(jié)果，超過(guò)10分鐘結(jié)果無(wú)效。如果環(huán)境溫度過(guò)低或過(guò)高，A.3結(jié)果判斷陽(yáng)性：檢測(cè)(T)線區(qū)及對(duì)照(C)線區(qū)同時(shí)出現(xiàn)紅色線。陰性：只有對(duì)照(C)線區(qū)出現(xiàn)一條紅色線。無(wú)效：對(duì)照(C)線區(qū)不出現(xiàn)紅色線。7B.2.4加底物：通常加鄰苯二胺（OPD）底物溶液（10mgOPD＋25mLpH5．0檸檬酸緩沖液＋30%B.2.5加中止液：2mol／LH(下標(biāo)始)2(下標(biāo)終)SO(下標(biāo)始)4在酶標(biāo)專用比色計(jì)上讀取492nmOD值，以待測(cè)樣本（S）對(duì)陰性對(duì)照血清（N）的S／N值≥2．1取2μLPCR擴(kuò)增產(chǎn)物（包括陰陽(yáng)性對(duì)照）及4μLDNA標(biāo)準(zhǔn)Maker對(duì)照，于1.5％瓊脂糖F:TGTACTGGTTGGGGTGGR:GCCTCA