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DB51DB51/T1836—2014牦牛源沙門氏菌分離鑒定技術(shù)規(guī)范2014-09-19發(fā)布2014-10-01實(shí)施四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I 1 1 1 2 3 4 4 5 5 61沙門氏菌屬salmonella4.1.4無菌工作臺(tái)24.3.3DNA提取試劑：蛋白酶K、十二烷基硫酸鈉（SDS）、3黑色，中等大小的菌落3～5個(gè)或透明，針尖大小的菌落，和XLD平板康凱平板上，于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h，觀察麥康凱平板上生長的菌落，挑取3～5個(gè)細(xì)小無色于底層穿刺；接種針不要滅菌，直接接種賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂平板，于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h，必要時(shí)可延長至48h。在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi)，沙門氏菌屬的反表1沙門氏菌屬在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧KA+(-)+(-)+KA+(-)+(-)-AA+(-)+(-)+AA+/-+/--KK+/-+/-+/-7.1.1固體培養(yǎng)基上的菌落用接種環(huán)鉤取后用于DNA提取，液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)物經(jīng)），7.1.4轉(zhuǎn)移上清到另一離心管中，45相關(guān)試劑配制A.1.1成分pH7.2±0.2A.1.2制法A.2.1基礎(chǔ)液pH7.0±0.2gg6A.2.6制法碘溶液煌綠水溶液A.3.1成分pH7.4±0.2A.3.2制法將上述兩溶液混合均勻后，再加入指示劑，待冷至50℃~55℃傾注平皿。7注:本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌，在制備過程中不宜過分加熱，避免降低其選擇性，A.4.1成分A.4.2制法臨用時(shí)加熱溶化瓊脂，趁熱加入乳糖，冷至50℃~55℃時(shí)，加入結(jié)晶紫和中性紅水溶液，搖勻后A.5.1成分胨水 A.5.2制法加入瓊脂，加熱融化后，121℃滅菌20分鐘，再加入其余成分，搖勻，冷至約60℃,傾注平皿。8A.6.1成分pH7.4±0.2A.6.2制法A.7.1成分L-賴氨酸或DL-賴氨酸0.5gA.7.2

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