《金蓮花軟膠囊中葒草苷和牡荊苷的含量測(cè)定 高效液相色譜法》

ICS71.040.40

CCSG04

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/HZBXXXXX—2024

金蓮花軟膠囊中葒草苷和牡荊苷的含量測(cè)

定高效液相色譜法

ContentdeterminationoforientinandvitexinforTrolliiChinensisFlosSoftCapsule-

Highperformanceliquidchromatography

（征求意見(jiàn)稿）

2024-XX-XX發(fā)布2024-XX-XX實(shí)施

惠州市標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)發(fā)布

T/HZBXXXXX—2024

金蓮花軟膠囊中葒草苷和牡荊苷的含量測(cè)定高效液相色譜法

1范圍

本文件規(guī)定了金蓮花軟膠囊中葒草苷和牡荊苷的高效液相色譜測(cè)定方法的原理、儀器與設(shè)備、試劑

與材料、測(cè)定步驟、結(jié)果的計(jì)算、精密度等內(nèi)容。

本文件適用于金蓮花軟膠囊主要成分葒草苷和牡荊苷的含量測(cè)定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版。

3術(shù)語(yǔ)和定義

本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。

4原理

試樣用70%乙醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離后，在波長(zhǎng)340nm測(cè)定，外標(biāo)法定量。

5儀器與設(shè)備

高效液相色譜儀：帶紫外檢測(cè)器或DAD檢測(cè)器。

天平：感量為0.1mg和0.01mg。

超聲波振蕩器。

微孔有機(jī)過(guò)濾膜（孔徑0.45μm）。

超純水機(jī)。

6試劑與材料

通則

除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版二

部純化水要求。

乙醇（C2H6O）。

磷酸（H3PO4）。

乙腈(C2H3N)：色譜純。

葒草苷對(duì)照品（C21H20O11）：純度≥98.0%。

牡荊苷對(duì)照品（C21H20O10）：純度≥99.1%。

葒草苷對(duì)照品儲(chǔ)備液（0.2mg/mL）：準(zhǔn)確稱取葒草苷對(duì)照品10mg（精確至0.01mg），用70%

乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，用70%乙醇定容。

牡荊苷對(duì)照品儲(chǔ)備液（0.1mg/mL）：準(zhǔn)確稱取牡荊苷對(duì)照品10mg（精確至0.01mg），用70%

乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用70%乙醇定容。

混合對(duì)照品溶液：分別精密吸取上述葒草苷對(duì)照品儲(chǔ)備液2mL、牡荊苷對(duì)照品儲(chǔ)備液1mL，置10

mL量瓶中，加70%乙醇定容。

7測(cè)定步驟

1

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試樣溶液的制備

取10粒供試品內(nèi)容物，混勻，取約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25mL，

密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足

減失的重量，搖勻，0.45μm濾膜過(guò)濾后進(jìn)行分析。

色譜條件

a)色譜柱：C18色譜柱，4.6mm×250mm，5μm或同等性能的色譜柱；

b)流速：1.0mL/min；

c)柱溫：40℃；

d)檢測(cè)波長(zhǎng)：340nm；

e)進(jìn)樣體積：10μL。

f)流動(dòng)相：A:乙腈,B:0.1%磷酸溶液。梯度洗脫見(jiàn)表1：

表1梯度洗脫表

時(shí)間（min）流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）

0～4011→1589→85

40～4115→1185→89

41～501189

混合對(duì)照品溶液的測(cè)定

將混合對(duì)照品溶液注入液相色譜儀中，記錄相應(yīng)的峰面積?；旌蠈?duì)照品溶液的色譜圖見(jiàn)附錄A中圖

A.1。

試樣溶液的測(cè)定

將試樣溶液注入液相色譜儀中，以保留時(shí)間定性，同時(shí)記錄峰面積，根據(jù)外標(biāo)法以峰面積計(jì)算目標(biāo)

物的含量。

8結(jié)果的計(jì)算

試樣中被測(cè)物的含量按式（1）計(jì)算，計(jì)算結(jié)果保留4位有效數(shù)字：

········································································(1)

??×?

式中：?=??×??×?

X——試樣中被測(cè)物的含量，單位為毫克每克（mg/g）；

CR——對(duì)照品的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；

v——試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL）；

m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）；

AX——試樣溶液的峰面積；

AR——對(duì)照品溶液的峰面積。

9精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算數(shù)平均值的10%。

10檢出限和定量限

2

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本標(biāo)準(zhǔn)中葒草苷的檢出限為0.1μg/mL，定量限為0.4μg/mL；牡荊苷的檢出限為0.1μg/mL，定量限

為0.4μg/mL。

3

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A

附錄A

（資料性）

葒草苷和牡荊苷對(duì)照品的液相色譜圖

A.1葒草苷和牡荊苷色譜圖

見(jiàn)圖A.1。

mAUC

340nm,4nm泵A壓力

75

葒草苷27.0

9

1

508

.

426.0

2牡荊苷

025.0

253

5

.

3

324.0

0