T-GXAS 753-2024 海水 類固醇激素的測(cè)定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

GXASchromatographymassspectrometricI 2 2 3 6 8 8 8 8 9 本文件參照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定1海水類固醇激素的測(cè)定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法警示：使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)17β-雌二醇、雌三醇）等15種類固醇激素的測(cè)定，其他類固醇激素經(jīng)適用性驗(yàn)證可參照?qǐng)?zhí)行。當(dāng)富集5.1當(dāng)樣品中存在基質(zhì)干擾時(shí)，可通過優(yōu)化色譜條件、稀釋樣品、減少進(jìn)樣體積以及對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處5.2當(dāng)樣品中存在同分異構(gòu)體干擾測(cè)定時(shí)，可通過改變色譜條件提高分離度或選擇不同的二級(jí)質(zhì)譜子），），）：26.10類固醇激素標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ=1.0mg/L。將類固醇激素標(biāo)準(zhǔn)貯備液（6.9）用甲醇（6.3）稀釋至在-20℃以下避光保存或參照制造商的產(chǎn)品說明，并在有效期內(nèi)使用。使用時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫，并搖勻。6.15氮?dú)猓杭兌取?9.99%。7.1采樣瓶：1000mL棕色螺口玻璃瓶，瓶蓋具聚四氟乙烯內(nèi)墊。7.2高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀：配有電噴霧電離源（E），7.3色譜柱：C18反相高效液相色譜柱。1.7μm，50mm×2.1mm（內(nèi)徑）或其他等效色譜柱。7.4固相萃取裝置：自動(dòng)或手動(dòng)，流7.7微量注射器或移液槍：10μL、100μL、1mL、5mL。用預(yù)先洗滌干凈并烘干的采樣瓶（7.1）采集水樣。樣品采集后在4℃以下避光保存，7d內(nèi)完成樣依次用10mL乙酸乙酯/甲醇混合液（6.6）、10mL甲醇（6.3）和10mL實(shí)驗(yàn)用水（6.1）以1mL/min流速活化固相萃取柱（7.5在活化過程中應(yīng)量取1000mL海水樣，水樣以約10mL/min的流速通過固相萃取柱，若水樣中目標(biāo)物濃度較高，可根據(jù)實(shí)際情況減少樣品體積。再用10mL水淋洗小柱，去除雜質(zhì)，用氮?dú)猓?.15）吹干小柱。3用10mL乙酸乙酯/甲醇混合溶液（6.6）以1mL/min流速洗脫富集后的小柱，收集洗脫液。用濃縮裝使用渦旋混勻器（7.8）混勻后用針式過濾器（6.1采集樣品時(shí)應(yīng)同時(shí)采集全程序空白樣品。用干凈的1L具塞磨口棕色玻璃瓶裝滿實(shí)驗(yàn)用水帶至采樣），9.1儀器調(diào)試9.1.1液相色譜參考條件表1液相色譜流動(dòng)相梯度洗脫程序（雄激素、孕激素和流動(dòng)相A(%)流動(dòng)相B(%)0555555流動(dòng)相A(%)流動(dòng)相B(%)0134895549.1.1.3進(jìn)樣體積：5.0μL。9.1.2質(zhì)譜參考條件9.1.2.2毛細(xì)管電壓：4.0kV。9.1.2.4干燥氣流速：11L/min。9.1.2.5霧化氣氣壓：1.72×105Pa（25ps雄激素孕激素97.1*97.1*糖皮質(zhì)激素雌激素5雌激素注：帶*的為定量離子，對(duì)于不同質(zhì)譜儀器，參數(shù)可9.1.3質(zhì)譜儀的調(diào)諧9.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立），），9.2.2在儀器最佳工作條件下，按照濃度從低到高的順序上機(jī)測(cè)定，以目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度(μg/L)為橫坐標(biāo)，以其對(duì)應(yīng)的響應(yīng)值與內(nèi)標(biāo)物響應(yīng)值的比值和內(nèi)9.3標(biāo)準(zhǔn)參考譜圖69.4試樣測(cè)定9.5空白試驗(yàn)按照與試樣測(cè)定（9.3）相同的操作步驟進(jìn)行空白試樣在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，樣品中待測(cè)物質(zhì)的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間偏差在±2.5％之內(nèi)；每種化合物的質(zhì)譜定性離子至少應(yīng)包括一個(gè)母離子和兩個(gè)子離子，且樣品中各組分定性離子的相對(duì)豐度（Ksam）與濃度接近的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液中對(duì)應(yīng)的定性離子的相對(duì)豐度（Kstd）進(jìn)行比較，偏差不超過表4規(guī)7采用內(nèi)標(biāo)法定量，根據(jù)平均相對(duì)響應(yīng)因子計(jì)算。標(biāo)準(zhǔn)系列第i點(diǎn)目標(biāo)化合物的相對(duì)響應(yīng)因子RRF，·······················································Ai——標(biāo)準(zhǔn)系列中第i點(diǎn)目標(biāo)化合物的峰面積（或峰高ρis——標(biāo)準(zhǔn)系列中內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度，μg/L；ρi——標(biāo)準(zhǔn)系列中第i點(diǎn)目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度，μg/L。EQ\*jc3\*hps24\o\al(\s\up2(-),R)EQ\*jc3\*hps24\o\al(\s\up2(-),R)EQ\*jc3\*hps24\o\al(\s\up2(-),R)·····························································Ais——試樣中內(nèi)標(biāo)物的峰面積（或峰高ρis——試樣中內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度，μg/L；EQ\*jc3\*hps24\o\al(\s\up2(-),R)EQ\*jc3\*hps24\o\al(\s\up2(-),R)···························································ρs——樣品中目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度，單位為納克每升（ng/Lρx——試樣中目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/LVVD——稀釋倍數(shù)。812.1.2全程序空白應(yīng)每批樣品做1個(gè)，前處理?xiàng)l件或試劑變化時(shí)均應(yīng)重新做全程序空白。每20個(gè)樣品或每批次（少于20個(gè)樣品/批）至少分析1個(gè)平12.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r≥0.995，標(biāo)準(zhǔn)系列目標(biāo)物相對(duì)響應(yīng)因子的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差進(jìn)行1次連續(xù)校準(zhǔn)，測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏差≤20否則需重新建立標(biāo)準(zhǔn)曲線?！囼?yàn)對(duì)象；——所使用的標(biāo)準(zhǔn)（包括發(fā)布或出版年號(hào)——所使用的方法（如果標(biāo)準(zhǔn)中包括