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PAGEPAGE6第2講微生物的培育和應(yīng)用一、單項(xiàng)選擇題(每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中只有一個(gè)符合題目要求)1.下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目方法的敘述,錯(cuò)誤的是(C)A.采納平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往少于實(shí)際的菌落數(shù)B.當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落C.為了保證結(jié)果精確,一般采納密度較大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D.在某一濃度下涂布三個(gè)平板,若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大,則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果[解析]當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)活菌連在一起時(shí),平板上視察到的只是一個(gè)菌落,因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少。一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板計(jì)數(shù),密度過大會(huì)使計(jì)數(shù)結(jié)果偏小,影響結(jié)果的精確性。至少涂布3個(gè)平板,作為重復(fù)組,取其平均值計(jì)數(shù)能增加試驗(yàn)的勸服力和精確性。2.下列是從土壤中篩選纖維素分解菌的試驗(yàn)步驟,正確的是(C)①土壤取樣②稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中③吸取0.1mL進(jìn)行平板涂布④依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A.①→②→③→④ B.①→③→②→④C.①→②→④→③ D.①→④→②→③[解析]在分別土壤中某細(xì)菌時(shí),應(yīng)先選取土樣(10g),然后加無菌水獲得土壤浸出液,并進(jìn)行不同倍數(shù)稀釋,最終將稀釋液涂布到培育基表面進(jìn)行培育,并分別和計(jì)數(shù)。3.(2024·甘肅武威十八中高三月考)關(guān)于培育基的配制說法不正確的是(B)A.在配制培育乳酸桿菌的培育基時(shí),需加入維生素B.微生物的適應(yīng)性強(qiáng),配制培育基時(shí)可以不考慮pHC.雖然各種培育基的詳細(xì)配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽D.配制培育基時(shí)要留意各種養(yǎng)分的濃度和比例[解析]培育基除須要滿意碳源、氮源、水和無機(jī)鹽幾種養(yǎng)分物質(zhì)外,還須要滿意微生物生長對(duì)pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求,如培育乳酸桿菌時(shí)須要在培育基中添加維生素,A正確;B錯(cuò)誤;雖然各種培育基的詳細(xì)配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽,C正確;不同微生物的生長對(duì)各種養(yǎng)分物質(zhì)的需求不同,配制培育基時(shí)要留意各種養(yǎng)分的濃度和比例,D正確。4.(2024·北京高三期末)下列有關(guān)微生物培育的敘述正確的是(D)A.通常運(yùn)用液體培育基分別獲得細(xì)菌單菌落B.若培育基須要調(diào)整pH,應(yīng)當(dāng)在滅菌后進(jìn)行C.用顯微鏡干脆計(jì)數(shù)固體培育基中微生物數(shù)量D.倒置平板可防止培育基被滴落的冷凝水污染[解析]常用固體或半固體培育基分別獲得細(xì)菌單菌落,液體培育基無法分別,A錯(cuò)誤;若培育基須要調(diào)整pH,應(yīng)當(dāng)在滅菌前進(jìn)行,B錯(cuò)誤;顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法是測定培育液中微生物數(shù)量的方法,固體培育基上用稀釋涂布法干脆計(jì)數(shù)單個(gè)菌落數(shù),C錯(cuò)誤;平板倒置是避開冷凝的液體掉到培育基上,污染培育基,D正確。5.(2024·上海高三)下表是培育某種細(xì)菌的培育基。以下敘述錯(cuò)誤的是(B)蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水10g5g5g2g0.4g0.065g1000mLA.該培育基屬于選擇培育基B.表中為該細(xì)菌供應(yīng)碳源的只有乳糖C.表中為該細(xì)菌供應(yīng)氮源的只有蛋白胨D.該培育基可以用來鑒定該細(xì)菌是否是大腸桿菌[解析]由表中成分可知,該培育基屬于選擇培育基,A正確;表中供應(yīng)碳源的有蛋白胨、乳糖、蔗糖,B錯(cuò)誤;表中為該細(xì)菌供應(yīng)氮源的只有蛋白胨,C正確;要鑒別所分別出的細(xì)菌是否為大腸桿菌,則應(yīng)當(dāng)在培育基中加入伊紅美藍(lán),視察是否出現(xiàn)黑色菌落,D正確。6.(2024·四川成都七中高三)關(guān)于平板劃線法和涂布平板法的敘述不正確的是(B)A.只能應(yīng)用于固體培育基接種B.都可以用于微生物的計(jì)數(shù)C.接種培育后均可獲得單菌落D.接種用具都需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌[解析]平板劃線法和涂布平板法均是在固體培育基表面操作,A正確。平板劃線法和涂布平板法均可以分別菌落,但平板劃線法不須要考慮濃度,不能用于微生物的計(jì)數(shù),B錯(cuò)誤,C正確。二者均需對(duì)接種用具消毒,D正確。7.下列關(guān)于微生物的培育和分別的敘述中,不正確的是(B)A.細(xì)菌能在培育基中以二分裂方式快速增殖B.噬菌體和大腸桿菌都可干脆在蛋白胨培育基中增殖C.滅菌的目的是殲滅與培育菌競爭的雜菌D.分別得到的菌種采納臨時(shí)保藏的不足在于保存時(shí)間短,簡單被污染或產(chǎn)生變異[解析]細(xì)菌的增殖方式通常是二分裂增殖,能在液體培育基中以二分裂方式快速擴(kuò)增,A正確;噬菌體是病毒,必需在活細(xì)胞中才能增殖,不能在一般培育基中增殖,B錯(cuò)誤;滅菌是殲滅與培育菌相競爭的雜菌,防止污染培育物,C正確;分別得到的菌種可以采納臨時(shí)保藏的方法,首先,將菌種接種到試管的固體斜面培育基上,在合適的溫度下培育。當(dāng)菌落長成后,將試管放入4℃二、不定項(xiàng)選擇題(每小題給出的選項(xiàng)中有一個(gè)或多個(gè)符合題目要求)8.(2024·北京高三期末)空氣中的微生物在重力等作用下會(huì)有肯定程度沉降。某生物愛好小組欲利用平板培育基測定教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布狀況。下列關(guān)于試驗(yàn)的敘述正確的是(ABC)A.在配制培育基時(shí)必需添加瓊脂等凝固劑成分B.將平板培育基放置在教室相同地點(diǎn)的不同高度C.本試驗(yàn)須要設(shè)置不開蓋的平板培育基作為比照D.菌落數(shù)在20~200之間的平板才可以用于計(jì)數(shù)[解析]平板為固體培育基,故須要加入瓊脂等凝固劑成分,A正確;依據(jù)試驗(yàn)?zāi)康目芍?,自變量是教室相同地點(diǎn)的不同高度,所以需將平板培育基放置在教室相同地點(diǎn)的不同高度,B正確;本試驗(yàn)須要設(shè)置不開蓋的平板培育基作為比照,不同高度下放置開蓋平板培育基進(jìn)行試驗(yàn),C正確;為了保證結(jié)果精確,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),D錯(cuò)誤。9.漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類,在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。如圖是分別、純化和保存漆酶菌株的過程,相關(guān)敘述正確的是(BC)A.生活污水中含有大量微生物,是分別產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B.篩選培育基中須要加入漆酶的底物,通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C.在涂布平板上長出的菌落,再通過劃線進(jìn)一步純化D.斜面培育基中含有大量養(yǎng)分物,可在常溫下長期保存菌株[解析]生活污水中含木質(zhì)素的物質(zhì)相對(duì)較少,產(chǎn)漆酶菌株也較少,不宜作為分別產(chǎn)漆酶菌株的樣品;產(chǎn)漆酶菌株可降解木質(zhì)素,在篩選培育基中加入木質(zhì)素可篩選產(chǎn)漆酶的菌株,篩選時(shí)可通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落;在涂布平板上生長的菌落可能還有其他雜菌,可再通過平板劃線法進(jìn)一步純化;對(duì)于須要長期保存的菌種,可以采納甘油管藏的方法,即在-20℃10.(2024·山東省一般中學(xué)學(xué)業(yè)水同等級(jí)考試)生長圖形法是一種測定微生物養(yǎng)分需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類,探討小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需養(yǎng)分物質(zhì)的培育基混合后倒成平板,然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū),將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域,培育結(jié)果如圖所示,下列說法正確的是(AD)A.倒成平板后干脆培育可推斷有無污染B.倒成平板后須要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌須要生長因子乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選[解析]平板上不含任何生長因子,若倒成平板后干脆培育,出現(xiàn)菌落說明已被雜菌感染,因?yàn)樵撌葻峋荒茉谌狈ιL因子的培育基中生長,A正確;制備平板時(shí),先滅菌再倒平板,B錯(cuò)誤;圖中菌落生活在乙丙區(qū)域之間,說明同時(shí)須要乙和丙,C錯(cuò)誤;不同菌種所需生長因子不同,可利用生長圖形法篩選菌種,D正確。三、非選擇題11.(2024·湖南茶陵三中高三月考)下圖為5個(gè)不同濃度的土霉素溶液對(duì)大腸桿菌生長影響的試驗(yàn)結(jié)果。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題:(1)培育基中通常加入瓊脂作為凝固劑。為檢測培育基是否被污染,應(yīng)采納的檢測方法是將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時(shí)間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生。(2)該試驗(yàn)是用稀釋涂布平板法接種大腸桿菌,在接種前要對(duì)培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。依據(jù)圖中結(jié)果,對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯的土霉素濃度是⑤(填圖中數(shù)字),依據(jù)是透亮圈越大,抑制效果越明顯。(3)為探討相同濃度的a、b、c三種不同抗生素對(duì)大腸桿菌生長的影響,依據(jù)上述探討方法,請(qǐng)仿照?qǐng)D繪制處理方法。[解析](1)培育基中通常加入瓊脂作為凝固劑。檢測培育基是否被污染的方法是:將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時(shí)間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生。(2)該試驗(yàn)是用稀釋涂布平板法接種大腸桿菌;培育基須要用高壓蒸汽滅菌法滅菌。透亮圈越大,抑制效果越明顯,圖中⑤號(hào)圓紙片的抑菌圈最大,因此該濃度的土霉素對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯。(3)該方案的自變量為相同濃度的a、b、c三種不同抗生素,留意在圖中要標(biāo)記清晰,依據(jù)比照原則,結(jié)合圖中探討方法可繪制下圖。12.(2024·福建高考模擬)乳酸桿菌是人體有益的微生物之一,常用于生產(chǎn)酸奶,其發(fā)酵產(chǎn)物為乳酸,能溶解四周環(huán)境中的難溶性碳酸鈣?;卮鹣铝袉栴}:(1)為檢測某品牌酸奶中的乳酸桿菌含量是否達(dá)標(biāo),檢驗(yàn)人員進(jìn)行了相關(guān)試驗(yàn)。①配置培育基:培育基中除含水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和瓊脂外,還需添加維生素和CaCO3。②稀釋樣品:取1mL待測酸奶,用無菌水進(jìn)行梯度稀釋。③接種培育:用稀釋涂布平板法接種,培育時(shí)限制的氣體條件是無氧。④視察計(jì)數(shù):菌落四周出現(xiàn)的透亮圈(或溶鈣圈)就是乳酸桿菌的菌落,選擇菌落數(shù)在30~300的平板計(jì)數(shù)。每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,目的是可以防止因培育時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。(2)生產(chǎn)上不能用含有抗生素的牛奶發(fā)酵成酸奶,緣由是抗生素會(huì)抑制乳酸菌(或細(xì)菌)的繁殖。[解析](1)①配置培育基:培育基中除含水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和瓊脂外,還需添加維生素和CaCO3。②稀釋樣品:取1mL待測酸奶,用無菌水進(jìn)行梯度稀釋。③接種培育:用稀釋涂布平板法接種,乳酸菌是厭氧菌,培育時(shí)限制的氣體條件是無氧。④視察計(jì)數(shù):菌落四周出現(xiàn)溶鈣圈的就是乳酸桿菌的菌落,選擇菌落數(shù)在30~300的平板計(jì)數(shù)。每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,目的是可以防止因培育時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。(2)生產(chǎn)上不能用含有抗生素的牛奶發(fā)酵成酸奶,因?yàn)榭股貢?huì)抑制乳酸菌的繁殖。13.(2024·山東高考模擬)自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精,科學(xué)家欲從果園的葡萄上或土壤中分別篩選出這種酵母菌。請(qǐng)回答:(1)獲得純凈培育物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。試驗(yàn)室篩選微生物的原理是供應(yīng)有利于目的菌株生長的條件,同時(shí)抑制或阻擋其他微生物生長。制備的酵母菌培育基在進(jìn)行倒平板操作時(shí),為防止培育皿蓋的冷凝水落入培育基造成污染,應(yīng)將平板倒置。(2)用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中,取其液體用涂布器涂布接種于以木糖為唯一碳源的固體培育基上培育獲得酵母菌菌落,用平板劃線法純化菌株時(shí),劃線的某個(gè)平板培育后,第一劃線區(qū)域的第一條線上都不間斷地長滿了菌落,其次劃線區(qū)域的第一條線上無菌落,其他線上有菌落,造成這種現(xiàn)象的緣由可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端起先。(3)若要統(tǒng)計(jì)土樣中的酵母菌數(shù)量,應(yīng)采納稀釋涂布平板法。在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培育基培育一段時(shí)間,這樣做的目的是檢測培育基平板滅菌是否合格。[解析](1)獲得微生物純凈培育物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。試驗(yàn)室篩選微生物的原理是供應(yīng)有利于目的菌株生長的條件,同時(shí)抑制或阻擋其他微生物生長。制備的酵母菌培育基在進(jìn)行倒平板操作時(shí),為防止培育皿蓋的冷凝水落入培育基造成污染,應(yīng)將平板倒置。(2)要獲得能利用木糖的酵母菌,應(yīng)當(dāng)用以木糖為唯一碳源的固體培育基培育。在其次次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端起先劃線,這樣做的目的是將聚集的菌種逐步削減以獲得單個(gè)菌落。劃線的某個(gè)平板培育后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落,其次劃線區(qū)域的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落,造成劃線無菌落可能的操作失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端起先。(3)接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法,其中只有稀釋涂布平板法可以對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培育基先行培育一段時(shí)間,這樣做的目的是檢測培育基平板滅菌是否合格。14.(2024·山東高考模擬)生物降解法是常用的降解農(nóng)藥的方法,某探討小組為分別出能降解敵敵畏(一種有毒的有機(jī)農(nóng)藥)的細(xì)菌進(jìn)行了以下相關(guān)操作?;卮鹣铝袉栴}:(1)分別原理:土壤中的細(xì)菌能合成(分解敵敵畏的)酶,這種物質(zhì)在把敵敵畏分解成無機(jī)物過程中發(fā)揮重要作用。(2)試驗(yàn)流程:①從富含敵敵畏的環(huán)境中釆集土樣配制成土壤菌液。從稀釋10倍的菌液中取1mL菌液,加入9_mL無菌水中,獲得稀釋100倍的懸液,如此操作直到稀釋1000倍。②配制以敵敵畏為唯一碳源的培育基并滅菌,滅菌后倒平板。冷卻后需將平板倒置,目的是防止皿蓋上凝聚的水珠落入培育基造成污染。③用稀釋涂布平板法接種細(xì)菌,該方法能勝利統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是選擇恰當(dāng)?shù)南♂尪?,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)通常比實(shí)際數(shù)目低的緣由是
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