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植物提取物中原花青素的測(cè)定紫外/可見(jiàn)天津市市場(chǎng)監(jiān)督管理委員會(huì)發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:天津市農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:劉征輝、趙琳琳、魏靜娜、張強(qiáng)、趙云平、薛天凱、徐石勇、鄭貴忠。1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了采用紫外/可見(jiàn)分光光度法測(cè)定植物提取物中原花青素含量的原理、試劑材料、儀器設(shè)備、分析步驟、分析結(jié)果表述和精密度。本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物提取物中原花青素的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。原花青素本身無(wú)色,但經(jīng)過(guò)用熱酸處理后,可以生成深紅色的花青素離子,用分光光度法測(cè)定原花青素在水解過(guò)程中生成的花青素離子,計(jì)算試樣中原花青素含量。4試劑和材料4.1.1甲醇(CH?OH4.1.3鹽酸(HCL):純度為35%~37%(g/g)。4.1.4硫酸鐵銨(NH?Fe(SO?)2·12H?O)。4.1.5水(H?O):GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。4.2試劑配制4.2.1鹽酸-正丁醇溶液:取正丁醇50mL,于100mL容量瓶中,準(zhǔn)確量取鹽酸5mL,用正丁醇定容,搖4.2.22mol/L鹽酸溶液:準(zhǔn)確量取鹽酸20mL于燒杯中,加100mL水,搖勻,備用。4.2.3硫酸鐵銨溶液:稱(chēng)取硫酸鐵銨2.0g于三角瓶中,加2mol/L鹽酸溶液,放置于沸水浴中,至其全部溶解后,取出放置至室溫,將其轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中用2mol/L鹽酸溶液定容至刻度。4.3標(biāo)準(zhǔn)品原花青素標(biāo)準(zhǔn)品純度≥95%,或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書(shū)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。24.4.1原花青素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL):取原花青素標(biāo)準(zhǔn)品10mg,精密稱(chēng)定,置10mL容量瓶中,4.4.2原花青素標(biāo)準(zhǔn)系列工作液:準(zhǔn)確量取原花5.1紫外分光光度計(jì),配1cm比色杯,波長(zhǎng)范圍(110~900)nm。5.4天平:感量0.01mg。5.5具蓋安瓿瓶:10mL。5.6封口鉗。5.7容量瓶:10mL、50mL、100mL。6分析步驟取樣品(10~100)mg,精密稱(chēng)定,置50mL容量瓶中,加入30mL甲醇,超聲處理(功率250W,頻率50kHz)20min,放至室溫后,加甲醇至刻度,搖勻,離心或放至澄清后取上清液作為供試品溶液。6.2測(cè)定準(zhǔn)確吸取原花青素標(biāo)準(zhǔn)系列工作液各1mL,置于安瓿瓶中,精密加入鹽酸-正丁醇溶液(4.2.1)6mL,硫酸鐵銨溶液(4.2.3)0.2mL,混勻,用封口鉗將其密封,置沸水中加熱40min后,取出,立即置冰精密吸取6.1項(xiàng)下的供試品溶液1mL,置于安瓿瓶中,然后按照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作步驟執(zhí)行。以相應(yīng)試7分析結(jié)果表述試樣中原花青素的含量按式(1)計(jì)算:3X——試樣中原花青素的含量,單位為克每100克
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