2024年魯教版選修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2024年魯教版選修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列說(shuō)法不正確的是()A.胚胎工程技術(shù)包括胚胎移植、胚胎分割、體外生產(chǎn)胚胎技術(shù)B.試管牛的培育過(guò)程屬于克隆過(guò)程C.提供胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“供體”，接受胚胎的個(gè)體叫“受體”D.胚胎移植實(shí)際上是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過(guò)程2、質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，質(zhì)粒有標(biāo)記基因如圖所示，通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)移成功。質(zhì)粒上箭頭表示三種限制酶的酶切位點(diǎn)。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況不同。下表是外源基因插入后(插入點(diǎn)有a,b,c)細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。下列有關(guān)敘述正確的是。

。

細(xì)菌在含青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況。

細(xì)菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況。

①

能生長(zhǎng)。

不能生長(zhǎng)。

②

能生長(zhǎng)。

能生長(zhǎng)。

③

不能生長(zhǎng)。

能生長(zhǎng)。

A.質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)上有RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)B.①②③三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn)①是a②是c③是bC.質(zhì)粒被一種限制酶切開(kāi)時(shí)，被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)D.將外源基因與質(zhì)粒連接時(shí)需用DNA聚合酶3、生物技術(shù)安全性和倫理問(wèn)題是社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá)B.轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因的植物會(huì)導(dǎo)致昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加C.反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒D.生物武器是用微生物、毒素及重組致病菌等來(lái)形成殺傷力4、通過(guò)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育克隆牛的過(guò)程中，未涉及的操作是（）A.用顯微操作技術(shù)去除細(xì)胞核和極體B.將精子和卵細(xì)胞放在受精溶液中C.用物理或化學(xué)方法激活重組細(xì)胞，使其完成發(fā)育進(jìn)程D.選擇合適時(shí)期的胚胎進(jìn)行移植，使其發(fā)育成完整個(gè)體5、利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體C.將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不一定為雜交瘤細(xì)胞D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法不一定能診斷出SARS病毒感染者6、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的體細(xì)胞核移植難度較大B.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度低于胚胎細(xì)胞核移植C.從動(dòng)物卵巢采集卵母細(xì)胞后，要將其在體外培養(yǎng)到MII期D.哺乳動(dòng)物細(xì)胞核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植7、治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義；簡(jiǎn)要流程如圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.過(guò)程①、②分別應(yīng)用了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)B.細(xì)胞培養(yǎng)中需提供5%CO2，目的是調(diào)節(jié)細(xì)胞外液的滲透壓C.胚胎干細(xì)胞可來(lái)源于囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，具有發(fā)育的全能性D.將圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體A，不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、在培育“乳腺生物反應(yīng)器”的過(guò)程中，可能涉及()A.導(dǎo)入外源基因B.誘導(dǎo)細(xì)胞融合C.挑選雌性胚胎D.胚胎移植9、如圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。下列敘述正確的是（）

A.骨髓瘤細(xì)胞和免疫B細(xì)胞可用仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)融合B.骨髓瘤細(xì)胞在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常增殖C.免疫B細(xì)胞的種類(lèi)不唯一所以雜交瘤細(xì)胞仍需進(jìn)一步篩選D.篩選出的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需添加抗生素防止真菌污染10、為了檢測(cè)藥物X、Y和Z的抗癌效果，在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肺癌細(xì)胞使其貼壁生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)組分別加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬（溶劑）的藥物X、Y或Z，培養(yǎng)過(guò)程及結(jié)果如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表：。組別細(xì)胞數(shù)目（個(gè)/孔）對(duì)照7．8×106藥物X6．7×104藥物Y5．3×105藥物Z8．0×106

A.對(duì)照組中只需加入等體積的二甲基亞礬溶劑即可B.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.計(jì)數(shù)時(shí)可用胰蛋白酶處理貼壁細(xì)胞，使肺癌細(xì)胞脫落下來(lái)D.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，三種藥物均具有抗癌效果，但藥物X的抗癌效果最好11、我國(guó)首例綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬的培育過(guò)程如圖所示，其中字母代表結(jié)構(gòu)或生物，數(shù)字代表過(guò)程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.為了①和②的順利完成，需要用滅活的病毒對(duì)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)B.將C的細(xì)胞核去掉，實(shí)質(zhì)上是去除紡錘體—染色體復(fù)合物C.為避免將E植入F時(shí)產(chǎn)生排斥反應(yīng)，移植前應(yīng)給F注射免疫抑制劑D.移入F的桑葚胚要經(jīng)歷囊胚、原腸胚等階段才能形成豬的幼體12、讓羊產(chǎn)牛奶，科學(xué)家對(duì)此做了相關(guān)的構(gòu)想，過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法不正確的是（）

A.圖中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物體細(xì)胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等B.進(jìn)行G操作時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚或原腸胚C.若研究發(fā)現(xiàn)羊N細(xì)胞中線(xiàn)粒體基因的表達(dá)產(chǎn)物豐富，故它的產(chǎn)奶率高，則小羊a會(huì)有這一優(yōu)良性狀D.通過(guò)上述技術(shù)得到小羊a和b的過(guò)程為有性生殖13、為解決腎供體不足的問(wèn)題；科研人員進(jìn)行相應(yīng)的前期研究。利用“異源囊胚補(bǔ)全法”在大鼠體內(nèi)培育出了小鼠腎臟（過(guò)程如下圖），其中Sall基因是腎臟發(fā)育的必需基因。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過(guò)程①表明，缺失Sall基因的大鼠受精卵依然具有全能性B.過(guò)程②的目的是讓大鼠ES細(xì)胞與小鼠ES細(xì)胞發(fā)生融合C.過(guò)程③操作之前需對(duì)代孕大鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理D.大鼠體內(nèi)的小鼠腎臟是否全由小鼠ES細(xì)胞發(fā)育而來(lái)還需進(jìn)一步鑒定14、下圖是我國(guó)華北地區(qū)某生態(tài)農(nóng)業(yè)模式圖。相關(guān)敘述正確的是（）

A.該生態(tài)農(nóng)業(yè)的構(gòu)建主要遵循了物質(zhì)循環(huán)再生、協(xié)調(diào)與平衡原理B.該生態(tài)系統(tǒng)能夠保持相對(duì)穩(wěn)定，不需要外界能量的輸入C.該生態(tài)農(nóng)業(yè)延長(zhǎng)了食物鏈，提高了營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間的能量傳遞效率D.該生態(tài)農(nóng)業(yè)能同時(shí)實(shí)現(xiàn)降低環(huán)境污染、增加農(nóng)民收入、促進(jìn)產(chǎn)業(yè)發(fā)展評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、生物學(xué)家利用基因工程技術(shù)通過(guò)生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的血清蛋白。請(qǐng)根據(jù)相關(guān)知識(shí)回答下列問(wèn)題：

（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是________

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是______

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)，說(shuō)明人和牛______16、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過(guò)胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個(gè)體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對(duì)其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時(shí)，受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。17、基因治療：基因治療是指用正常基因_______或______患者細(xì)胞中有缺陷的基因，從而達(dá)到治療疾病的目的。18、根據(jù)課本知識(shí)填空：

（1）神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過(guò)多次分支；最后每個(gè)小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做________。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或___________________________。

（3）要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；可以用____________________________做探針。

（4）所謂人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的________________________（寫(xiě)出2個(gè)即可）等為材料；經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速_______________葡萄糖。19、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過(guò)其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識(shí)別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_(kāi)________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對(duì)肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時(shí)可通過(guò)適度使用_________對(duì)病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測(cè)相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測(cè)病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對(duì)病毒抑制效果最好的單抗是__________號(hào)。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。20、下圖表示哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）③過(guò)程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來(lái)的；④過(guò)程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過(guò)程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會(huì)發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開(kāi)始的時(shí)期是__________；雌性動(dòng)物卵泡的形成的時(shí)期是__________。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ過(guò)程是在__________時(shí)期完成的，Ⅱ過(guò)程是在__________過(guò)程中完成的。21、請(qǐng)寫(xiě)出基因工程的概念：_________________。請(qǐng)寫(xiě)出胚胎移植的概念：_____________________。請(qǐng)分別寫(xiě)出植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理_________。22、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過(guò)胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個(gè)體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對(duì)其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時(shí)，受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。評(píng)卷人得分四、判斷題(共5題，共10分)23、一般情況下一個(gè)卵細(xì)胞只能由一個(gè)精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯(cuò)誤24、精子入卵后形成雄原核；同時(shí)卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯(cuò)誤25、受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯(cuò)誤26、下圖表示哺乳動(dòng)物發(fā)育過(guò)程的幾個(gè)階段；請(qǐng)判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過(guò)程中有機(jī)物的含量減少。

（_____）（2）A；B時(shí)期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時(shí)期的胚胎。

（_____）（4）圖示過(guò)程細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖，遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變。A.正確B.錯(cuò)誤27、在生態(tài)工程建設(shè)中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共20分)28、下圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑；請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）圖中A基因是由從人細(xì)胞內(nèi)提取的mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，基因A中__________（填“含有”或“不含”）內(nèi)含子序列。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，a和b表示兩種引物，這兩種引物的堿基序列不能互補(bǔ)，原因是__________。

（2）接受目的基因的綿羊的受體細(xì)胞是__________，其性染色體組成為_(kāi)_________。為了從乳汁中獲取產(chǎn)物，應(yīng)在人血清白蛋白基因上游連接上__________等調(diào)控組件。

（3）將含人血清白蛋白基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物受體細(xì)胞通常采用的方法是__________，為了大量獲得基因產(chǎn)物，應(yīng)通過(guò)植物組織培養(yǎng)將受體細(xì)胞培養(yǎng)到__________階段。29、某些膜內(nèi)蛋白以緊密排列的方陣形式存在稱(chēng)為OAPs；OAPs的分布異常與某些神經(jīng)性和神經(jīng)肌肉性疾病相關(guān)。研究AQP4（一種水通道蛋白）與OAPs結(jié)構(gòu)形成的關(guān)系，有助于揭示上述疾病的機(jī)制。請(qǐng)回答問(wèn)題：

(1)AQP4有M1和M23兩種分子量相近的亞型，二者均可獨(dú)立構(gòu)成四聚體發(fā)揮作用?？蒲腥藛T發(fā)現(xiàn)導(dǎo)入并穩(wěn)定表達(dá)M23基因的細(xì)胞；其細(xì)胞膜上有OAPs形成，而敲除該基因的細(xì)胞中未見(jiàn)OAPs的形成，該結(jié)果表明______。

(2)科研人員繼續(xù)對(duì)M1與OAPs形成的關(guān)系進(jìn)行了研究。

①提取大鼠腦組織的總RNA，通過(guò)______法獲得cDNA，并通過(guò)______技術(shù)獲得M1基因。

②將M1基因與質(zhì)粒用______酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，導(dǎo)入中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）中，用______技術(shù)檢測(cè)到受體細(xì)胞已成功表達(dá)M1蛋白。

③科研人員繼續(xù)實(shí)驗(yàn)；方案及結(jié)果如下。

。實(shí)驗(yàn)分組。

1對(duì)照組。

2對(duì)照組。

3實(shí)驗(yàn)組。

實(shí)驗(yàn)處理。

____

____

導(dǎo)入M1基因的CHO細(xì)胞。

培養(yǎng)一段時(shí)間后裂解細(xì)胞并離心；取上清液中蛋白。

培養(yǎng)一段時(shí)間后裂解細(xì)胞并離心；取上清液中蛋白。

檢測(cè)指標(biāo)。

用電泳技術(shù)檢測(cè)____的形成情況。

請(qǐng)將表格中的實(shí)驗(yàn)方案補(bǔ)充完整。a：______，b：______；c：______。

(3)綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，AQP4與OAPs形成的關(guān)系為_(kāi)_____。30、水稻抗稻瘟病的主效基因是P基因；其表達(dá)受乙烯誘導(dǎo)。為確定該基因啟動(dòng)子中響應(yīng)乙烯誘導(dǎo)的必需區(qū)域，研究者利用PCR獲得P基因全長(zhǎng)啟動(dòng)子A及其不同長(zhǎng)度的5′端缺失體B；C、D。構(gòu)建的重組質(zhì)粒分別命名為pA、pB、pC、pD，如下圖所示。

（1）啟動(dòng)子是__________識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)；可以啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

（2）將上述重組質(zhì)粒分別導(dǎo)入水稻愈傷組織后，使用加入__________的培養(yǎng)基；篩選出抗性愈傷組織。

（3）研究者通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)“全長(zhǎng)P基因啟動(dòng)子具有很強(qiáng)的乙烯誘導(dǎo)響應(yīng)”，請(qǐng)根據(jù)這一結(jié)論完成實(shí)驗(yàn)方案_________

。實(shí)驗(yàn)材料。

處理。

預(yù)期結(jié)果。

pA轉(zhuǎn)基因愈傷組織。

乙烯利處理6h

大量藍(lán)色Gus斑點(diǎn)。

乙烯利處理6h

水處理6h

（4）利用__________技術(shù)將上述愈傷組織培養(yǎng)成植株；乙烯利誘導(dǎo)6h后檢測(cè)葉片中Gus基因的表達(dá)水平，結(jié)果如下。

由圖可知，P基因啟動(dòng)子中__________bP區(qū)段是響應(yīng)乙烯誘導(dǎo)的重要區(qū)域。31、神經(jīng)纖毛蛋白-1（NRP-1）是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的新型受體；通過(guò)參與多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)來(lái)促進(jìn)腫瘤血管的生成。本研究將為NRP-1單克隆抗體靶向治療乳腺癌提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

（1）取乳腺癌（MCF7）組織塊，運(yùn)用_____技術(shù)獲得MCF7細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。用重組的人_____蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行注射，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)，制備雜交瘤細(xì)胞，將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，吸取培養(yǎng)孔中的________（填“上清液”或“沉淀細(xì)胞”），進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)。經(jīng)多次篩選和細(xì)胞培養(yǎng)，獲得NRP-1單克隆抗體（NRP-1MAb）。

（2）將MCF7細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液；等量注入4組裸鼠右前腋下，接種后3天開(kāi)始給藥，共給藥7次。每隔5天測(cè)算一次腫瘤的腫瘤體積，如下圖所示。

對(duì)照組注射_____；從上圖中可以看出_____。

（3）注射不同劑量NRP-1MAb33天后；剝離腫瘤組織稱(chēng)重，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖：

該結(jié)果表明____________________________________________________。

（4）基于以上研究，科學(xué)家們對(duì)該抗體的用藥方式有兩種觀點(diǎn)：謹(jǐn)慎用藥和適宜濃度用藥。你支持哪個(gè)觀點(diǎn)，并說(shuō)出理由___________________________________。評(píng)卷人得分六、非選擇題(共4題，共20分)32、人類(lèi)疾病的轉(zhuǎn)基因生物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠（2N）制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示（注：基因B為高血壓相關(guān)基因）。

（1）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過(guò)程中；涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有____________（寫(xiě)出兩項(xiàng)即可）。

（2）體外擴(kuò)增目的基因B可利用_____________技術(shù)；該技術(shù)的基本原理是___________；

（3）如果要建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型；就要檢測(cè)高血壓相關(guān)基因是否已成功表達(dá)，在分子水平上檢測(cè)到相應(yīng)____________，在個(gè)體水平上大鼠出現(xiàn)____________癥狀，證明相關(guān)基因已成功表達(dá)。

（4）基因B在導(dǎo)入受精卵之前要構(gòu)建_________________，這個(gè)步驟是基因工程的核心，構(gòu)建出的分子除含目的基因外，還必須含有_________________。轉(zhuǎn)基因大鼠的胚胎在代孕母體內(nèi)能夠存活的生理學(xué)基礎(chǔ)是_______________。33、我國(guó)已實(shí)現(xiàn)部分“胚胎工程產(chǎn)業(yè)化”；如肉牛；奶牛胚胎工程產(chǎn)業(yè)化。如圖所示是科學(xué)家采用不同方法產(chǎn)業(yè)化培育良種牛的過(guò)程，a～h為操作過(guò)程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）培育“試管牛C”技術(shù)的操作流程是____（填字母），d操作的名稱(chēng)是____，h操作的核心是____，受精時(shí)受體的卵細(xì)胞處于____期。

（2）圖中數(shù)字標(biāo)號(hào)代表的結(jié)構(gòu)名稱(chēng)是：①____，②____，③____。若要獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個(gè)新個(gè)體，可對(duì)發(fā)育到____階段的早期胚胎進(jìn)行分割處理，在進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)注意____。

（3）圖中用到的激素是____，移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是____。34、Bt基因即蘇云金芽胞桿菌基因；因其表達(dá)產(chǎn)物Bt毒蛋白具有殺蟲(chóng)效果好；安全、高效等優(yōu)點(diǎn)而成為應(yīng)用最為廣泛的轉(zhuǎn)殺蟲(chóng)基因。下圖為培育轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)棉幼苗的基本操作過(guò)程，請(qǐng)分析回答：

(1)Bt基因可從構(gòu)建的Bt基因組文庫(kù)中獲取，也可以從其cDNA文庫(kù)中獲取。從前者獲取的Bt基因_______；(含有/不含有)啟動(dòng)子。

(2)若利用PCR技術(shù)從cDNA文庫(kù)中獲取Bt基因(基因序列未知)，需根據(jù)Bt蛋白中的氨基酸序列設(shè)計(jì)引物，引物的序列可以有多種，原因是_____________________________。在PCR體系中需加入其中的_______（全部/任意1種/其中2種)引物。若Bt基因序列已知，則引物的序列通常為_(kāi)______種。

(3)在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，為了方便篩選含有目的基因的細(xì)胞，作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有_______，Ti質(zhì)粒中能幫助目的基因整合到宿主細(xì)胞染色體上的序列稱(chēng)為_(kāi)______。35、許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因；其編碼的產(chǎn)物β－半乳糖苷酶在X－gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。基因工程中常利用該原理從導(dǎo)入質(zhì)粒的受體細(xì)胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過(guò)程如下圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答：

(1)基因工程中；能使目的基因在受體細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是_______。

(2)限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是－G↓AATTC－，SmaⅠ的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是－CCC↓GGG－。圖中目的基因被切割下來(lái)和質(zhì)粒連接之前；需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端，連接的末端序列是__________，連接過(guò)程中需要的基本工具是__________。

(3)轉(zhuǎn)化過(guò)程中；大腸桿菌應(yīng)先用________處理，使其處于能吸收周?chē)鶧NA的狀態(tài)。

(4)菌落顏色為白色的是________；原因是_______________________。

(5)菌落③中的目的基因是否表達(dá)，可采用的檢測(cè)辦法是_________________。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

試管動(dòng)物技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，A正確；

B；試管牛是由受精卵發(fā)育而成；應(yīng)為有性生殖，克隆屬無(wú)性生殖，B錯(cuò)誤；

C；提供胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“供體”；接受胚胎的個(gè)體叫“受體”，C正確；

D；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)；所以胚胎移植實(shí)際上是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過(guò)程，D正確；

故選B。

【點(diǎn)睛】

本題考查胚胎工程技術(shù)的原理及分析判斷能力。2、C【分析】【分析】

由圖可知，a是抗氨芐青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因結(jié)構(gòu)被破壞，細(xì)菌無(wú)抗氨芐青霉素能力，將細(xì)菌放入含有氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，則會(huì)死亡；相反，會(huì)存活。b是抗四環(huán)素基因，如果外源基因插入到b中，抗四環(huán)素基因結(jié)構(gòu)被破壞，細(xì)菌無(wú)抗四環(huán)素能力，將細(xì)菌放入含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，則會(huì)死亡；相反，會(huì)存活。①是b；②是c，③是a，據(jù)此答題。

【詳解】

A；質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)上有DNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)；A錯(cuò)誤；

B、①②③三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn)①是b②是c③是a；B錯(cuò)誤；

C；限制酶能將磷酸二酯鍵水解斷裂；質(zhì)粒被一種限制酶切開(kāi)，磷酸二酯鍵斷裂2個(gè)，C正確；

D；將外源基因與質(zhì)粒連接時(shí)需用DNA連接酶連接；D錯(cuò)誤。

故選C。3、A【分析】【分析】

（1）生物技術(shù)安全性問(wèn)題包括食物安全；生物安全、環(huán)境安全三個(gè)方面。

（2）倫理問(wèn)題主要在克隆人的問(wèn)題上出現(xiàn)爭(zhēng)議。

【詳解】

A；不同生物共用一套遺傳密碼；所以動(dòng)物生長(zhǎng)素基因轉(zhuǎn)入植物后也能表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；由于植物與害蟲(chóng)間是相互選擇的；轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因植物可使昆蟲(chóng)群體抗性基因頻率增加，B正確；

C；反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒；C正確；

D；生物武器是用微生物、毒素及重組致病菌等來(lái)形成殺傷力；D正確。

故選A。4、B【分析】【分析】

核移植指將一個(gè)動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體，稱(chēng)為克隆動(dòng)物。

【詳解】

核移植中用顯微操作技術(shù)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和極體；A正確；核移植中未經(jīng)過(guò)精子和卵細(xì)胞的結(jié)合，B錯(cuò)誤；核移植過(guò)程中用物理或化學(xué)方法激活重組細(xì)胞，使其完成分裂和發(fā)育進(jìn)程，C正確；選擇桑椹胚或囊胚期的胚胎進(jìn)行移植，使其發(fā)育成完整個(gè)體，D正確。故選B。

【點(diǎn)睛】

核移植屬于無(wú)性生殖，試管動(dòng)物經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞的融合，屬于有性生殖。5、C【分析】【分析】

效應(yīng)B細(xì)胞能夠分泌抗體；但不能增殖，而骨髓瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖的能力，因此利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，利用該細(xì)胞制備單克隆抗體；該雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)；靈敏度高、可大量制備等特點(diǎn)，可應(yīng)用于作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物。

【詳解】

A.單克隆抗體是漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞分泌的；用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的抗體不止一種，A錯(cuò)誤；

B.漿細(xì)胞無(wú)增殖能力；故無(wú)法通過(guò)體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞的方式獲得單克隆抗體，B錯(cuò)誤；

C.將等量B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合；經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞；骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞，C正確；

D.單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，該單克隆抗體是以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出的，因此利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者，D錯(cuò)誤。6、B【分析】1；體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。

2；非人靈長(zhǎng)類(lèi)核移植主要難在三個(gè)方面：以獼猴為例：一是猴細(xì)胞核不易識(shí)別；去核難度大；二是猴的卵母細(xì)胞容易提前激活。操作稍一不小心，卵母細(xì)胞就可能被激活，然后它就會(huì)先開(kāi)始自主卵裂，體細(xì)胞就跟不上了，最后導(dǎo)致這個(gè)卵無(wú)法發(fā)育；三是猴的體細(xì)胞克隆胚胎發(fā)育差，培養(yǎng)囊胚效率低，優(yōu)質(zhì)囊胚比例低。

3；哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低；恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，因此，動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度也就明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。

【詳解】

A；非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的體細(xì)胞核移植難度較大；如細(xì)胞核不易識(shí)別，去核難度大及卵母細(xì)胞容易提前激活等，A正確；

B；由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低；恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，因此，動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度也就明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，B錯(cuò)誤；

C；直接從活體動(dòng)物卵巢中吸取采集的卵母細(xì)胞；需要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)至MII中期，C正確；

D；哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植；體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，D正確。

故選B。7、C【分析】【分析】

1；治療性克隆：指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚等）用于治療性移植。

生殖性克隆：指將克隆技術(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類(lèi)個(gè)體。

2；分析題圖：①是核移植技術(shù)；②是早期胚胎培養(yǎng)。

【詳解】

①是核移植技術(shù)，②是早期胚胎培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；5%的二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH，B錯(cuò)誤；胚胎干細(xì)胞來(lái)源于囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始性腺，具有發(fā)育的全能性，C正確；圖中的重組細(xì)胞的細(xì)胞核來(lái)自個(gè)體B，因此將圖中獲得的組織器官移植給A個(gè)體，會(huì)發(fā)生免疫排斥，D錯(cuò)誤。因此，本題答案選C。二、多選題(共7題，共14分)8、A:C:D【分析】【分析】

【詳解】

由上圖分析可知；在培育“乳腺生物反應(yīng)器”的過(guò)程中，涉及基因工程技術(shù)；早期胚胎培養(yǎng)、挑選雌性胚胎、胚胎移植等技術(shù)，ACD正確，B錯(cuò)誤。

故選ACD。9、B:C【分析】【分析】

（1）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖；誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞，主要用于制備單克隆抗體。

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無(wú)限增殖；②骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖。

【詳解】

A；骨髓瘤細(xì)胞和免疫B細(xì)胞可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)融合；形成雜交瘤細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；骨髓瘤細(xì)胞雖然能無(wú)限增殖；但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞、免疫B細(xì)胞都無(wú)法生長(zhǎng)，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)，B正確；

C；因每個(gè)免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體；因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來(lái)的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體，不一定都是人類(lèi)所需要的，還需要進(jìn)一步把能分泌人類(lèi)所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)，C正確；

D；篩選出的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需添加抗生素防止細(xì)菌污染；D錯(cuò)誤。

故選BC。

【點(diǎn)睛】

本題考查單克隆抗體的制備過(guò)程，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力。10、B:D【分析】【分析】

分析題意可知:該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菣z測(cè)藥物X和Y的抗癌活性；自變量是藥物X或Y，因變量是檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量。

【詳解】

A；加入等體積的二甲基亞礬溶作為空白對(duì)照；排除體積和溶劑等無(wú)關(guān)因素的影響，A正確;

B；抗生素具有殺菌(不是殺病毒)作用；為防止培養(yǎng)液被污染，可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，B錯(cuò)誤;

C；要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)；需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，C正確;

D；分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果；加入X的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是6.7×104，加入Y的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是5.3×105，說(shuō)明藥物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌細(xì)胞個(gè)數(shù)是8.0×106，與空白對(duì)照相比無(wú)抗癌作用，D錯(cuò)誤。

故選BD。11、A:C【分析】【分析】

分析圖解，可以看出綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬涉及了多項(xiàng)生物工程技術(shù)。圖中B表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；然后將目的基因?qū)胴i胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞的細(xì)胞核與豬的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞。重組細(xì)胞經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚期，最后經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成轉(zhuǎn)基因克隆豬。由此可見(jiàn)，該過(guò)程中利用基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；①是將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；直接采用顯微注射法，無(wú)需對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，②過(guò)程通常是將細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中，然后利用電融合法使D構(gòu)建成功，A錯(cuò)誤；

B；C是處于MⅡ期的卵母細(xì)胞；這個(gè)時(shí)期的“核”實(shí)際上是紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；

C；受體對(duì)移入的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此無(wú)需給F注射免疫抑制劑，C錯(cuò)誤；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要經(jīng)歷囊胚、原腸胚階段的發(fā)育才能成為豬的幼體，D正確。

故選AC。12、B:C:D【分析】【分析】

分析圖解：圖中A表示目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，B表示受精卵通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因羊N，C表示羊N的體細(xì)胞中取核，D表示羊O的卵母細(xì)胞取核，E表示細(xì)胞核移植，F(xiàn)表示早期胚胎培養(yǎng)，再進(jìn)行G胚胎分割再通過(guò)胚胎移植獲得小羊ab。

【詳解】

A、圖中A表示目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，B表示受精卵通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因羊N，C表示羊N的體細(xì)胞中取核，D表示羊O的卵母細(xì)胞取核，E表示細(xì)胞核移植，F(xiàn)表示早期胚胎培養(yǎng)，再進(jìn)行G胚胎分割再通過(guò)胚胎移植獲得小羊ab；故圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動(dòng)物體細(xì)胞核移植；胚胎移植、胚胎分割和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等，A正確；

B；進(jìn)行G操作時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚；因囊胚期細(xì)胞未分化，而原腸胚已經(jīng)分化，不能進(jìn)行胚胎分割，B錯(cuò)誤；

C；通過(guò)圖解分析可知；小羊只獲得了羊N的細(xì)胞核，其細(xì)胞質(zhì)中的基因不會(huì)遺傳給小羊，C錯(cuò)誤；

D；上述核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物；屬于無(wú)性生殖，D錯(cuò)誤。

故選BCD。13、A:B:C【分析】【分析】

題圖分析：圖示為利用“異源囊胚補(bǔ)全法”在大鼠體內(nèi)培育出了小鼠腎臟的過(guò)程；其中①表示把缺失Salll基因的小鼠的受精卵發(fā)育為囊胚過(guò)程，②表示將熒光蛋白標(biāo)記的小鼠的ES細(xì)胞導(dǎo)入大鼠囊胚，③表示胚胎移植，④表示分娩。

【詳解】

A；過(guò)程①只是把缺失Salll基因的小鼠的受精卵培養(yǎng)為囊胚的過(guò)程；并沒(méi)有形成個(gè)體，不能表明缺失Sall基因的大鼠受精卵依然具有全能性，A錯(cuò)誤；

B；過(guò)程②的目的是表示將熒光蛋白標(biāo)記的小鼠的ES細(xì)胞導(dǎo)入大鼠囊胚；并且使小鼠的Salll基因表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C；過(guò)程③操作之前只需對(duì)代孕大鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理；目的是使其具備孕育的條件，而不是為了使其超數(shù)排卵，C錯(cuò)誤；

D；大鼠體內(nèi)的小鼠腎臟是否全由小鼠ES細(xì)胞發(fā)育而來(lái)還需進(jìn)一步鑒定；不能憑表型就確定，D正確。

故選ABC。14、A:D【分析】【分析】

生態(tài)農(nóng)業(yè)是一個(gè)農(nóng)業(yè)生態(tài)經(jīng)濟(jì)復(fù)合系統(tǒng)；將農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)同農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)綜合統(tǒng)一起來(lái)，以取得最大的生態(tài)經(jīng)濟(jì)整體效益。它也是農(nóng)；林、牧、副、漁各業(yè)綜合起來(lái)的大農(nóng)業(yè)，又是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、加工、銷(xiāo)售綜合起來(lái)，適應(yīng)市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的現(xiàn)代農(nóng)業(yè)。生態(tài)工程的基本原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理和系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理。建立該人工生態(tài)系統(tǒng)的目的是實(shí)現(xiàn)對(duì)能量的多級(jí)利用，提高能量的利用率，減少環(huán)境污染。

【詳解】

A；生態(tài)工程所遵循的基本原理有物質(zhì)循環(huán)再生、協(xié)調(diào)與平衡、整體性、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理和物種多樣性等原理；雞糞秸稈用于沼氣池，最后沼渣用于農(nóng)作物的生產(chǎn)主要符合物質(zhì)循環(huán)再生原理；圖示生態(tài)工程的設(shè)計(jì)利用了還協(xié)調(diào)與平衡原理，A正確；

B；由于生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)是單向流動(dòng)、逐級(jí)遞減的；因此，任何生態(tài)系統(tǒng)均需要不斷得到來(lái)自系統(tǒng)外的能量補(bǔ)充，B錯(cuò)誤；

C；該生態(tài)農(nóng)業(yè)延長(zhǎng)了食物鏈；提高提高能量利用率，不能提高營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間的能量傳遞效率，C錯(cuò)誤；

D；該生態(tài)農(nóng)業(yè)能同時(shí)實(shí)現(xiàn)降低環(huán)境污染、增加農(nóng)民收入、促進(jìn)產(chǎn)業(yè)發(fā)展；從而實(shí)現(xiàn)了自然、經(jīng)濟(jì)和社會(huì)的協(xié)調(diào)發(fā)展，D正確。

故選AD。三、填空題(共8題，共16分)15、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”即切割DNA的是限制核酸內(nèi)切酶簡(jiǎn)稱(chēng)限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是DNA連接酶；

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒；

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)；說(shuō)明人和牛共用一套遺傳密碼。

【考點(diǎn)定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA連接酶質(zhì)粒共用一套遺傳密碼16、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，其中提供胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常見(jiàn)或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動(dòng)物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實(shí)現(xiàn)的前提是受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實(shí)質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補(bǔ)18、略

【分析】【分析】

1；神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹(shù)突和軸突，樹(shù)突短而多，軸突長(zhǎng)而少。神經(jīng)元的軸突末梢經(jīng)過(guò)多次分支，最后每個(gè)小枝末端膨大，呈杯狀或球狀，叫做突觸小體。

2；目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

3；人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料；經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子，在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗。

【詳解】

（1）神經(jīng)元由細(xì)胞體和突起兩部分組成；突起又分為樹(shù)突和軸突，樹(shù)突短而多，軸突長(zhǎng)而少；軸突末端的多次分支后，每個(gè)小枝末端膨大的部分稱(chēng)為突觸小體。

（2）抗體可以與病原體結(jié)合；從而抑制病原體的繁殖或?qū)θ梭w細(xì)胞的黏附。

（3）檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA可采用分子雜交技術(shù)。

（4）人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體；不定芽、頂芽、腋芽為材料；經(jīng)過(guò)人工包膜包裝得到的種子，可以在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)就是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，或者是打破了生殖隔離。

（5）胰島素能促進(jìn)組織細(xì)胞加速攝?。焕煤蛢?chǔ)存葡萄糖；從而使血糖水平降低。

【點(diǎn)睛】

本題考查教材基礎(chǔ)知識(shí)，旨在考查考生的理解、記憶能力，要求考生熟記關(guān)鍵語(yǔ)句，并能運(yùn)用專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)準(zhǔn)確作答。【解析】突觸小體對(duì)人體細(xì)胞的黏附放射性同位素）標(biāo)記的目的基因胚狀體、不定芽、腋芽、頂芽攝取、利用和儲(chǔ)存19、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線(xiàn)圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對(duì)被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時(shí)可通過(guò)適度使用免疫抑制劑對(duì)病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識(shí)記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，掌握其優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶20、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過(guò)程，④是受精作用；

2；哺乳動(dòng)物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場(chǎng)所唯一（MⅠ和MⅡ的場(chǎng)所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場(chǎng)所不唯一，（MⅠ場(chǎng)所在卵巢，MⅡ場(chǎng)所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時(shí)間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動(dòng)物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過(guò)程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過(guò)程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來(lái)的；④過(guò)程是受精過(guò)程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過(guò)程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線(xiàn)。

（3）雄性動(dòng)物精子產(chǎn)生的時(shí)期是初情期；雌性動(dòng)物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時(shí)期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過(guò)程中完成的。

【點(diǎn)睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過(guò)程和受精作用等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生識(shí)記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問(wèn)題的能力。【解析】高爾基體輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用21、略

【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱(chēng)基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來(lái)源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。

3；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，其原理是細(xì)胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱(chēng)受精卵移植，是指將雌性動(dòng)物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)③.植物細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖22、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，其中提供胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常見(jiàn)或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動(dòng)物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實(shí)現(xiàn)的前提是受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實(shí)質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。四、判斷題(共5題，共10分)23、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個(gè)卵細(xì)胞一般只能同一個(gè)精子結(jié)合，形成受精卵，這句話(huà)是正確的。24、A【分析】【詳解】

受精過(guò)程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開(kāi)始。精子入卵后形成雄原核，同時(shí)被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動(dòng)，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說(shuō)法正確。

故正確。25、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯(cuò)誤。26、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過(guò)程中細(xì)胞均需要消耗能量；故胚胎中有機(jī)物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細(xì)胞，故A時(shí)期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞，囊胚期時(shí)細(xì)胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細(xì)胞不是全能細(xì)胞，（2）錯(cuò)誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時(shí)期的胚胎；處于A或B時(shí)期的胚胎，（3）錯(cuò)誤。

（4）圖示過(guò)程細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖；有絲分裂過(guò)程中可能發(fā)生突變，遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。27、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性是有一定限度的，導(dǎo)致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問(wèn)題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共20分)28、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟是：

1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4；目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。據(jù)此答題。

【詳解】

（1）由mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的基因A；其結(jié)構(gòu)中不含內(nèi)含子序列，兩種引物的堿基序列不能互補(bǔ)，否則會(huì)減弱與目的基因的結(jié)合。

（2）要從綿羊的乳汁中獲取人血清白蛋白；轉(zhuǎn)基因綿羊必須是雌性。接受目的基因的綿羊的受體細(xì)胞是受精卵，其性染色體組成為XX。為了從乳汁中獲取產(chǎn)物，應(yīng)在人血清白蛋白基因上游連接上乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件。

（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；可以通過(guò)植物組織培養(yǎng)將受體細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織階段，以便大量獲得基因產(chǎn)物。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力?！窘馕觥坎缓琣和b引物若能互補(bǔ)會(huì)發(fā)生配對(duì)，從而會(huì)減弱與目的基因的結(jié)合受精卵XX乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法愈傷組織29、略

【分析】【分析】

1；基因工程的操作過(guò)程。

(1)目的基因的獲取。

①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取。

基因文庫(kù)包括：基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)(其中的cDNA文庫(kù)是利用反轉(zhuǎn)錄法獲取的)。

②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。

a.變性(90～95℃)：雙鏈DNA模板在熱作用下；氫鍵斷裂，形成單鏈。

b.復(fù)性(55～60℃)：引物與DNA模板結(jié)合；形成局部雙鏈。

c.延伸(70～75℃)：在Taq酶的作用下；合成與模板互補(bǔ)的子鏈。

d.循環(huán)重復(fù)上述過(guò)程；n次循環(huán)后，目的基因的量將被擴(kuò)增2n倍。

③利用化學(xué)方法人工合成：基因比較?。缓塑账嵝蛄幸阎獣r(shí)，選擇該方法。

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

①通常用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒；然后用DNA連接酶將二者連接，改造后成為基因表達(dá)載體。

②組成：目的基因；標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子和復(fù)制原點(diǎn)。

(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。

。生物種類(lèi)。

植物。

動(dòng)物。

微生物。

常用方法。

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

顯微注射技術(shù)。

感受態(tài)細(xì)胞法。

受體細(xì)胞。

體細(xì)胞或受精卵。

受精卵。

原核細(xì)胞。

轉(zhuǎn)化過(guò)程。

將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上→表達(dá)。

將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動(dòng)物。

Ca2＋處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→重組表達(dá)載體DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子。

(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定。

①分子水平的檢測(cè)。

a．利用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因的有無(wú)。

b．利用分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因的轉(zhuǎn)錄。

c．利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因的翻譯。

②個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定；如抗蟲(chóng)；抗病的接種實(shí)驗(yàn)等。

【詳解】

(1)題干提到“導(dǎo)入并穩(wěn)定表達(dá)M23基因的細(xì)胞，其細(xì)胞膜上有OAPs形成，而敲除該基因的細(xì)胞中未見(jiàn)OAPs的形成”，該結(jié)果表明M23可促進(jìn)細(xì)胞膜上OAPs聚集。

(2)由基因工程的操作過(guò)程可知：

①提取大鼠腦組織的總RNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄法獲得cDNA，并通過(guò)PCR技術(shù)獲得M1基因。

②將M1基因與質(zhì)粒用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，導(dǎo)入中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）中，用抗原—抗體技術(shù)檢測(cè)到受體細(xì)胞已成功表達(dá)M1蛋白。

③由（1）可知M23可促進(jìn)細(xì)胞膜上OAPs聚集；由此設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案：

。實(shí)驗(yàn)分組。

1對(duì)照組。

2對(duì)照組。

3實(shí)驗(yàn)組。

實(shí)驗(yàn)處理。

導(dǎo)入M23基因的CHO細(xì)胞。

導(dǎo)入空質(zhì)粒的CHO細(xì)胞。

導(dǎo)入M1基因的CHO細(xì)胞。

培養(yǎng)一段時(shí)間后裂解細(xì)胞并離心；取上清液中蛋白。

培養(yǎng)一段時(shí)間后裂解細(xì)胞并離心；取上清液中蛋白。

檢測(cè)指標(biāo)。

用電泳技術(shù)檢測(cè)OAPs的形成情況。

實(shí)驗(yàn)電泳圖表明M1不能促進(jìn)細(xì)胞膜上OAPs聚集。

(3)由于AQP4有M1和M23兩種分子量相近的亞型，二者均可獨(dú)立構(gòu)成四聚體發(fā)揮作用，經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明M23可促進(jìn)細(xì)胞膜上OAPs聚集，M1不能促進(jìn)細(xì)胞膜上OAPs聚集，因此可得，M1與OAPs的形成無(wú)關(guān)，M23與OAPs的形成有關(guān)。

【點(diǎn)睛】

本題設(shè)計(jì)基因工程的操作過(guò)程，結(jié)合情境分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行解題?！窘馕觥縈23可促進(jìn)細(xì)胞膜上OAPs聚集①逆轉(zhuǎn)錄PCR②限制酶和DNA連接酶抗原抗體雜交導(dǎo)入M23基因的CHO細(xì)胞導(dǎo)入空質(zhì)粒的CHO細(xì)胞OAPsM1與OAPs的形成無(wú)關(guān)，M23與OAPs的形成有關(guān)30、略

【分析】植物組織培養(yǎng)-3572?-2692

試題分析：據(jù)圖分析；圖示為pA；pB、pC、pD四種重組質(zhì)粒的示意圖，四者長(zhǎng)度依次減小，其中A是全長(zhǎng)長(zhǎng)啟動(dòng)子，后三者是缺失體；重組質(zhì)粒中的標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因。

（1）啟動(dòng)子為與DNA上；是RNA聚合酶的識(shí)別位點(diǎn)，可以啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

（2）據(jù)圖分析可知；重組質(zhì)粒上的標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因，因此篩含有選重組質(zhì)粒的愈傷組織時(shí)，培養(yǎng)基中應(yīng)該加入潮霉素。

（3）根據(jù)題干信息分析；實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是發(fā)現(xiàn)全長(zhǎng)P基因啟動(dòng)子具有很強(qiáng)的乙烯誘導(dǎo)響應(yīng)，則應(yīng)該設(shè)計(jì)非轉(zhuǎn)基因愈傷組織；和不含乙烯利的對(duì)照組，且非轉(zhuǎn)基因愈傷組織的對(duì)照組應(yīng)該沒(méi)有藍(lán)色Gus斑點(diǎn)，不含乙烯利的對(duì)照組應(yīng)該藍(lán)色Gus斑點(diǎn)數(shù)較少甚至沒(méi)有，實(shí)驗(yàn)方案如下表：

。實(shí)驗(yàn)材料。

處理。

結(jié)果或預(yù)期結(jié)果。

非轉(zhuǎn)基因愈傷組織。

無(wú)藍(lán)色Gus斑點(diǎn)。

pA轉(zhuǎn)基因愈傷組織。

少量（無(wú)）藍(lán)色Gus斑點(diǎn)。

（4）將上述愈傷組織培養(yǎng)成完整的植株需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)；根據(jù)柱狀圖分析，乙烯利誘導(dǎo)6h后pA轉(zhuǎn)基因植株基因的表達(dá)最旺盛，而其他缺失體基因的表達(dá)都降低了，說(shuō)明題圖中pA與pB之間缺失的序列最重要，即P基因啟動(dòng)子中-3572?-2692bP區(qū)段是響應(yīng)乙烯誘導(dǎo)的重要區(qū)域。

【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是分析題圖中的四個(gè)重組質(zhì)粒，與A相比確定B、C、D的長(zhǎng)度依次減少，并能夠根據(jù)標(biāo)記基因確定篩選應(yīng)該加入的物質(zhì)；還能夠根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的與結(jié)果，結(jié)合實(shí)驗(yàn)的基本原則設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。【解析】RNA聚合酶潮霉素。

。實(shí)驗(yàn)材料。

處理。

結(jié)果或預(yù)期結(jié)果。

非轉(zhuǎn)基因愈傷組織。

無(wú)藍(lán)色Gus斑點(diǎn)。

pA轉(zhuǎn)基因愈傷組織。

少量（無(wú)）藍(lán)色Gus斑點(diǎn)。

31、略

【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞融合；又稱(chēng)細(xì)胞雜交，指將兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，融合后形成具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱(chēng)為雜交細(xì)胞。

單克隆抗體制備的過(guò)程中需要經(jīng)過(guò)兩次篩選；第一次用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次用專(zhuān)一抗體檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）取乳腺癌（MCF7）組織塊，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行分散處理后，運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得MCF7細(xì)胞。要制備N(xiāo)RP-1單克隆抗體，需要用重組的人NRP-1蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行注射，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，與該漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合處理，制備雜交瘤細(xì)胞。將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，可以從培養(yǎng)液即上清液中提取到單克隆抗體，可以用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)。經(jīng)多次篩選和細(xì)胞培養(yǎng)，獲得NRP-1單克隆抗體（NRP-1MAb）。

（2）實(shí)驗(yàn)的自變量是給藥的劑量和時(shí)間，因變量是腫瘤的體積，對(duì)照組應(yīng)該注射等量的生理鹽水，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，NRP-1MAb能夠有效地降低腫瘤的體積；中；高濃度抗體的降低效果比低濃度的效果更顯著。

（3）注射不同劑量NRP-1MAb33天后，剝離腫瘤組織稱(chēng)重，根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，NRP-1MAb可以明顯降低腫瘤組織的重量；中；高濃度抗體的降低效果稍微沒(méi)有低濃度的好，但這種差異并不顯著。

（4）支持謹(jǐn)慎用藥理由：隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，中高劑量和低劑量的NRP-1MAb在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上出現(xiàn)的不一致性可能會(huì)加大；應(yīng)進(jìn)行后續(xù)研究，現(xiàn)階段謹(jǐn)慎用藥。

支持適宜濃度用藥理由：該抗體已經(jīng)顯示了顯著的抑瘤效果，中高劑量和低劑量的NRP-1MAb在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上雖然出現(xiàn)了不一致性；但這種不一致性很小，可以考慮適宜濃度用藥。

【點(diǎn)睛】

本題的難點(diǎn)在于需要考生根據(jù)題目信息分析NRP-1MAb抑制腫瘤的作用機(jī)理，具有一定的難度。要求考生能夠從題干和題圖中獲取有效解題信息，分析作答?！窘馕觥縿?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)神經(jīng)纖毛蛋白-1（NRP-1）上清液等量的生理鹽水NRP-1MAb能夠有效地降低腫瘤的體積，中、高濃度抗體的降低效果比低濃度的效果更顯著NRP-1MAb可以明顯降低腫瘤組織的重量，中、高濃度抗體的降低效果稍微沒(méi)有低濃度的好，但這種差異并不顯著）第1種答案：支持謹(jǐn)慎用藥理由：隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，中高劑量和低劑量的NRP-1MAb在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上出現(xiàn)的不一致性可能會(huì)加大，應(yīng)進(jìn)行后續(xù)研究，現(xiàn)階段謹(jǐn)慎用藥。第2種答案：支持適宜濃度用藥理由：該抗體已經(jīng)顯示了顯著的抑瘤效果，中高劑量和低劑量的NRP-1MAb在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上雖然出現(xiàn)了不一致性，但這種不一致性很小，可以考慮適宜濃度用藥。六、非選擇題(共4題，共20分)32、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：圖示是利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程圖。圖中包括體外受精過(guò)程、采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因（基因B）導(dǎo)入受精卵的過(guò)程、早期胚胎發(fā)育過(guò)程以及胚胎移植過(guò)程。

2；目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)