DB32T-核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范 第8部分：外周血采集和生物劑量估算

Q/LB.□XXXXX-XXXXDB32/TXXXX.8—XXXX目次TOC\o"1-1"\h前言 II引言 III1范圍 42規(guī)范性引用文件 43術(shù)語和定義 44外周血采集前準備 55外周血采集 56運輸和保存 57生物劑量估算總則 68生物劑量估算流程 69生物劑量估算質(zhì)量控制 6附錄A（資料性） 8參考文獻 9前言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是DB32/TXXXX《核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》的第8部分。DB32/TXXXX已經(jīng)發(fā)布了以下部分：第1部分：應(yīng)急隊伍建設(shè)；第2部分：應(yīng)急人員防護與個人劑量監(jiān)測；第3部分：現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查；第4部分：人員體表放射性核素污染監(jiān)測與去污；第5部分：食品和飲用水監(jiān)測；第6部分：輻射防護站設(shè)置；第7部分：穩(wěn)定性碘的使用指導(dǎo)；第8部分：外周血采集和生物劑量估算。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康委員會提出并組織實施。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康標準化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、江蘇省腫瘤醫(yī)院、徐州市疾病預(yù)防控制中心、南京醫(yī)科大學(xué)。本文件主要起草人：陳維、周媛媛、劉雅紅、陳群、王進、范向勇、繆雨季、馮子雅、史曉東、王福如、錢如倍、魏鑫狄、邱天元、張子豪。

引言隨著我國經(jīng)濟的發(fā)展和科技的進步，核與輻射技術(shù)在各行各業(yè)的應(yīng)用日益廣泛。然而，核與輻射突發(fā)事件時有發(fā)生，對人類的生命和健康造成了危害，對社會穩(wěn)定和發(fā)展構(gòu)成了威脅。為確保核能與核技術(shù)應(yīng)用的安全發(fā)展，我國制定了一系列的法律和法規(guī)，出臺了大量的安全防護和應(yīng)急標準等，做到安全防護和應(yīng)急有法可依、規(guī)則先行，為我國核與輻射技術(shù)應(yīng)急發(fā)展提供了堅實保障。核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急是該類事件應(yīng)急的重要組成部分，為人民群眾的身體健康和生命安全提供重要保障。DB32/TXXXX《核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》為完善我省核與輻射衛(wèi)生應(yīng)急隊伍建設(shè)，規(guī)范應(yīng)急處置工作流程，最大限度減少人員傷亡而制定，擬由八個部分構(gòu)成。第1部分：應(yīng)急隊伍建設(shè)。第2部分：應(yīng)急人員防護與個人劑量監(jiān)測。第3部分：現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查。第4部分：人員體表放射性核素污染監(jiān)測與去污。第5部分：食品和飲用水監(jiān)測。第6部分：輻射防護站設(shè)置。第7部分：穩(wěn)定性碘的使用指導(dǎo)。第8部分：外周血采集和生物劑量估算。在核與輻射突發(fā)事件應(yīng)急處置中，生物劑量估算是通過外周血淋巴細胞染色體畸變分析等方法，快速、準確、有效地估算受照人員的受照劑量，為評估病情、制定治療方案提供依據(jù)。該標準的制定有助于完善核與輻射突發(fā)事件的應(yīng)急管理體系。通過規(guī)范應(yīng)急情況下受照人員外周血采集及生物劑量估算的要求和方法，提高應(yīng)急情況下人員外周血采集和生物劑量估算的效率和準確性，在緊急情況下能夠迅速、有效地進行劑量估算。核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范第8部分：外周血采集和生物劑量估算范圍本文件規(guī)定了核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急情況下受照人員外周血采集及生物劑量估算的要求和方法。本文件適用于核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急情況下受照人員外周血采集和生物劑量估算。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T28236染色體畸變估算生物劑量方法GBZ2.1工作場所有害因素職業(yè)接觸限值第1部分：化學(xué)有害因素GBZ98放射工作人員健康要求及監(jiān)護規(guī)范GBZ/T328放射工作人員職業(yè)健康檢查外周血淋巴細胞微核檢測方法與受照劑量估算標準WS/T615輻射生物劑量估算早熟染色體凝集環(huán)分析法WS/T661靜脈血液標本采集指南術(shù)語和定義GB/T28236、WS/T615、WS/T661界定的術(shù)語和定義適用于本文件。采集前準備耗材外周血采集所需耗材包括但不限于：一次性注射器、止血帶、75%醫(yī)用酒精、3%碘酊、真空采血管、試管架、抗凝試管、一次性乳膠手套、無菌棉簽或棉球、標記筆、銳器盒。采集人員防護采集人員個人防護應(yīng)按照WS/T661執(zhí)行。采集場所應(yīng)選擇安全可靠、無污染的建筑物作為采集場所，特殊情況下可在野外搭建的臨時場所內(nèi)開展采集工作。采集程序受照人員應(yīng)在現(xiàn)場盡早采集外周靜脈血。采樣人員應(yīng)核對受照人員信息，對樣品進行標識，告知受照人員采集目的和注意事項。采樣人員通過便攜式表面污染測量儀測量采樣部位污染情況。如有污染應(yīng)在去污后采樣，具體方法按照DB32/TXXXX.4—2024的規(guī)定執(zhí)行。外周血采集時間宜在48h之內(nèi)。血樣應(yīng)使用肝素抗凝管，每項檢測方法需采血量2mL，采集后顛倒搖勻。采樣后使用無菌棉球或棉簽按壓采血部位。記錄血樣采集信息，包括采集時間、采集人員、受照人員信息。保存和運輸標本采集后應(yīng)立即放入鉛屏蔽生物采樣箱，保存溫度18℃～24℃，保存時間不宜超過72h。鉛屏蔽生物采樣箱應(yīng)放置在無污染區(qū)指定位置，專人保管。采樣箱表面應(yīng)張貼醒目的標識：“生物樣品，易損，防損壞，避免X射線”。保管人員與轉(zhuǎn)運人員交接血樣時應(yīng)核對標本數(shù)量及完好狀態(tài)，雙方簽字確認。應(yīng)由經(jīng)過培訓(xùn)的專人負責(zé)轉(zhuǎn)運，盡快運輸?shù)街付ǖ攸c。運輸過程中應(yīng)符合血樣儲存條件，關(guān)注樣本儲存狀態(tài)。移交轉(zhuǎn)運人員到達實驗室后，應(yīng)與專人核對移交，雙方簽字確認。每份樣本應(yīng)有唯一編號，編碼規(guī)則由實驗室制定。生物劑量估算基本要求外周血淋巴細胞染色體和微核培養(yǎng)條件、制片方法和分析判斷標準應(yīng)與建立刻度-曲線時相同。應(yīng)選擇和事故條件接近的刻度曲線進行劑量估算，只能在曲線劑量范圍內(nèi)應(yīng)用，不得外推。綜合受照人員的早期癥狀及其嚴重程度（例如嘔吐出現(xiàn)時間）、臨床特征、外周血淋巴細胞計數(shù)等綜合判斷，快速選擇生物劑量估算的方法。生物劑量估算流程生物劑量估算人員選擇事故現(xiàn)場所有人員連續(xù)3次全血細胞計數(shù)異常者應(yīng)進行生物劑量估算,血細胞計數(shù)異常判斷按照GBZ98執(zhí)行。送到場外醫(yī)學(xué)應(yīng)急醫(yī)療機構(gòu)的傷情危重人員應(yīng)就地血常規(guī)檢查，該類人員第一次淋巴細胞檢查應(yīng)在使用腎上腺皮質(zhì)激素或輻射損傷防治藥物前進行。生物劑量估算方法染色體畸變分析法外周血淋巴細胞染色體畸變分析法估算按照GB/T28236執(zhí)行。淋巴細胞微核分析法外周血淋巴細胞微核檢測估算按照GBZ/T328執(zhí)行。早熟染色體凝集環(huán)分析法早熟染色體凝集環(huán)估算生物劑量按照WS/T615執(zhí)行。生物劑量估算質(zhì)量控制人員要求檢測實驗室應(yīng)有2名（含）以上專業(yè)技術(shù)人員，專業(yè)技術(shù)人員應(yīng)具有輻射細胞遺傳學(xué)的基本知識和實際工作經(jīng)驗，受過專業(yè)訓(xùn)練，能準確識別輻射誘發(fā)的各種染色體畸變、早熟染色體凝集環(huán)和微核細胞，準確記錄染色體畸變細胞及微核細胞坐標。儀器設(shè)備要求儀器設(shè)備要求應(yīng)符合附錄A的規(guī)定。染色體制片和閱片要求合格中期細胞的選擇。染色體數(shù)目為46±1；染色體分散良好，長短粗細適中，背景干凈，各條染色體可清楚辨認。染色體制片每樣本應(yīng)檢出不少于200個合格中期分裂細胞。人工閱片的實驗室應(yīng)對畸變細胞拍照，并在原始記錄和圖片文件名中標明顯微鏡編號、樣本編號、畸變細胞坐標、畸變類型和數(shù)目。全自動染色體掃描分析系統(tǒng)的實驗室需要在原始記錄上記錄顯微鏡編號、樣本編號、畸變細胞號、畸變類型和數(shù)目，對畸變細胞標注后保存，并需保存所有樣本高倍中期細胞圖片。染色體畸變應(yīng)由兩名以上技術(shù)人員復(fù)核確認。染色體畸變分析估算劑量范圍為0.1Gy～5.0Gy，事故后宜48h之內(nèi)取血，最遲不超過60天。染色體畸變分析劑量估算原始記錄的格式應(yīng)按照GB/T28236執(zhí)行。微核制片和閱片要求微核制片每樣本應(yīng)檢出不少于1000個合格單核淋巴細胞。人工閱片的實驗室需對微核細胞拍照，并在原始記錄上記錄顯微鏡編號、樣本編號、微核細胞坐標。使用微核自動掃描分析系統(tǒng)的實驗室需要在原始記錄上記錄顯微鏡編號、樣本編號、微核細胞號，并需保存所有樣本單核淋巴細胞圖片。使用微核自動掃描分析系統(tǒng)的實驗室需對單核淋巴細胞和微核圖像人工分析判定，不應(yīng)僅通過軟件識別。淋巴細胞微核法估算劑量范圍為0.25Gy～5.0Gy，事故后宜3天內(nèi)取血，最遲不超過4周。原始記錄的格式應(yīng)按照GBZ/T328執(zhí)行。早熟染色體制片和閱片要求早熟染色體制片每樣本應(yīng)檢出不少于200個合格中期分裂細胞。早熟染色體凝集環(huán)分為空心環(huán)和實心環(huán)。在分析時不應(yīng)計數(shù)實心環(huán)。檢測到早熟染色體凝集環(huán)時，需要進行拍照。將選擇分析的每一個早熟染色體凝集分裂相記錄在早熟染色體凝集環(huán)分析記錄表中。早熟染色體凝集環(huán)分析法估算劑量范圍為4Gy～20Gy，事故后應(yīng)盡早取血，最遲不超過1月。早熟染色體凝集環(huán)分析記錄表和檢測報告應(yīng)按照WS/T615執(zhí)行。

（資料性）

儀器設(shè)備要求儀器設(shè)備要求見表A.1。儀器設(shè)備要求儀器設(shè)備技術(shù)指標要求必備/選配生物安全柜或超凈工作臺超凈工作臺首選雙人雙面、垂直送風(fēng)必備恒溫培養(yǎng)箱應(yīng)選擇隔水式恒溫培養(yǎng)箱，二氧化碳培養(yǎng)箱更佳必備離心機應(yīng)選擇可放置15mL離心管的水平式離心機必備光學(xué)顯微鏡自帶電源和坐標尺，油鏡清晰（63倍或100倍），配備高分辨率數(shù)碼攝像裝置必備冰箱4℃普通冰箱和-20℃低溫冰箱必備電子天平可讀性1mg必備負壓移液裝置或真空吸液泵/必備排風(fēng)裝置通風(fēng)櫥、排風(fēng)罩等，使工作場所有毒物質(zhì)濃度符合《工作場所有害因素職業(yè)接觸限值第1部分：化學(xué)有害因素》（GBZ2.1）要求必備便攜式培養(yǎng)箱溫度可控制在18℃-24℃選配滅菌設(shè)備電熱箱（有空氣強制對流裝置）、熱壓蒸汽滅菌器或環(huán)氧乙烷滅菌器等選配渦旋混合器/選配水浴鍋（箱）/選配全自動染色體掃描分析系統(tǒng)、細胞自動收獲儀、自動制片機、自動染片機