2025年北師大版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年北師大版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷621考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，正確的是（）A.在果酒和果醋制作全過程中，都需要嚴(yán)格滅菌B.果酒發(fā)酵、果醋發(fā)酵過程中溫度分別控制在30℃、20℃C.果醋發(fā)酵過程中，要適時(shí)通過充氣口充氣D.利用酵母菌釀酒時(shí)，密封時(shí)間越長，產(chǎn)生的酒精量就越多2、下列有關(guān)乳腺生物反應(yīng)器的敘述錯(cuò)誤的是（）A.乳腺生物反應(yīng)器是將目的基因轉(zhuǎn)入哺乳動(dòng)物受精卵獲得的B.乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)的藥物是自然界沒有的C.可從具有目的基因的轉(zhuǎn)基因雌性動(dòng)物乳汁中提取藥物D.乳腺生物反應(yīng)器是轉(zhuǎn)基因技術(shù)在畜牧業(yè)中的應(yīng)用3、某線性DNA分子含有5000個(gè)堿基對(duì)（bp），先用限制酶a切割，再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a、b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列有關(guān)說法正確的是（）

。酶a切割產(chǎn)物長度（bp）

酶b再次切割產(chǎn)物長度（bp）

2100；1400；1000；500

1900；200；800；600；1000；500

A.該DNA分子中酶a與酶b的識(shí)別序列分別有3個(gè)和2個(gè)B.酶a與酶b切出的黏性末端不能相互連接C.酶a與酶b切斷的化學(xué)鍵不相同D.若酶a切割與該DNA序列相同的質(zhì)粒，得到的切割產(chǎn)物有4種4、限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的脫氧核苷酸序列。如圖所示為四種限制酶BamHI、EcoRI、HindⅢ以及BglⅡ的識(shí)別序列，箭頭表示每一種限制酶的特定切割位點(diǎn)，切割出來的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合的是_________（限制酶），其正確的末端互補(bǔ)序列應(yīng)該為（）

A.BamHⅠ和EcoRI；末端互補(bǔ)序列為B.BamHⅠ和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列為C.EcoRI和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列為D.BamHⅠ和BglⅡ；末端互補(bǔ)序列為5、下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)說法正確的是（）A.在同一培養(yǎng)基中生長的微生物菌落所表現(xiàn)的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色均相同B.在微生物培養(yǎng)的接種過程中超凈工作臺(tái)需要在紫外燈照射下進(jìn)行，以防止雜菌污染C.小鼠肺炎病毒（PVM）的培養(yǎng)過程需要進(jìn)行滅菌操作D.在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的時(shí)候需要將某一適宜的稀釋度下的各平行組和對(duì)照組菌落數(shù)目相加取其平均值6、據(jù)統(tǒng)計(jì)不孕不育患病率目前已經(jīng)高達(dá)18%。體外受精技術(shù)是胚胎工程的技術(shù)之一、下列有關(guān)胚胎工程的說法錯(cuò)誤的是（）A.采用超數(shù)排卵技術(shù)處理可以獲得較多女性患者的卵子B.體外受精前要對(duì)無菌條件取得的男性患者的精子進(jìn)行獲能處理C.胚胎移植后通過胚胎診斷可以避免人類遺傳性疾病傳給后代D.利用Y染色體上性別決定基因-PCR技術(shù)（SRY-PCR）可鑒定胚胎性別7、圖是將目的基因?qū)氪竽c桿菌內(nèi)制備“工程菌”的示意圖，其中引物1～4在含有目的基因的DNA上的結(jié)合位置如圖甲所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindⅢ在質(zhì)粒上的識(shí)別位點(diǎn)如圖乙所示。下列說法正確的是（）

A.過程①中應(yīng)使用限制酶HimdⅢ切割質(zhì)粒B.應(yīng)選擇引物2和3擴(kuò)增目的基因C.過程②可用Ca2+處理來促進(jìn)大腸桿菌的轉(zhuǎn)化D.若將該基因片段擴(kuò)增6次，則消耗128個(gè)引物分子評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來做基因工程中的載體，這與它的哪項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)有關(guān)()A.具有黏性末端B.分子呈環(huán)狀，便于限制酶切割C.對(duì)宿主細(xì)胞的生存沒有決定性作用D.分子小，能自主復(fù)制，有標(biāo)記基因9、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因；其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似（如圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列敘述正確的是（）

A.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列B.設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成堿基互補(bǔ)配對(duì)而造成引物自連C.退火溫度過高可能導(dǎo)致PCR得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物D.每一循環(huán)都消耗引物和原料，需要在操作中及時(shí)補(bǔ)充10、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述，正確的是（）A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產(chǎn)生二次污染B.種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量，對(duì)環(huán)境沒有任何負(fù)面影響C.如果轉(zhuǎn)基因花粉中有毒蛋白或過敏蛋白，可能會(huì)通過食物鏈傳遞到人體內(nèi)D.轉(zhuǎn)基因生物所帶來的安全性問題是可以解決的11、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述正確的是（）

A.圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基B.A操作的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量C.B的正確操作是用涂布器蘸取菌液后均勻地涂布在②表面D.經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進(jìn)行純化培養(yǎng)12、某種病毒的主要表面抗原為S蛋白，用S蛋白制備的單克隆抗體可用于該種病毒的檢測。下列說法正確的是（）

A.B淋巴細(xì)胞分離自經(jīng)S蛋白免疫過的小鼠B.稀釋培養(yǎng)后多孔玻璃板中的雜交瘤細(xì)胞數(shù)目可能不到細(xì)胞總數(shù)的一半C.集落①的細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生單克隆抗體D.集落②～④的細(xì)胞可用于擴(kuò)大化培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體13、如圖是單克隆抗體制備過程示意圖，1～3代表相關(guān)過程，a～e代表相關(guān)細(xì)胞，其中c是兩兩融合的細(xì)胞。以下敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過程1是給小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)B.過程2的促融方法可采用電融合技術(shù)，該技術(shù)能擊穿核膜促使核融合C.c細(xì)胞有三種，每種細(xì)胞染色體組數(shù)不相等，e細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞D.過程3是進(jìn)行抗體檢測，并克隆產(chǎn)生陽性細(xì)胞的過程14、北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述不正確的是（）

A.過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B.將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C.過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其表達(dá)評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質(zhì))、_________________(提供氮元素的物質(zhì))和__________________。16、20世紀(jì)70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果，進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術(shù)一樣，生物技術(shù)也同樣具有雙刃劍效應(yīng)。如同其他高新技術(shù)一樣，轉(zhuǎn)基因成果和轉(zhuǎn)基因技術(shù)也需要你的理性看待。在轉(zhuǎn)基因生物安全方面；

（1）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些優(yōu)點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（2）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些缺點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（3）你對(duì)于轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度是__________。17、______——“分子縫合針”18、植物基因工程：______。19、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的____________條件下，將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免__________________的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。20、DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，二苯胺要___________。21、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。22、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)；蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對(duì)基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進(jìn)行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過程獲取目的基因→構(gòu)建表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測與鑒定預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列→合成DNA→表達(dá)出蛋白質(zhì)實(shí)質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達(dá)）定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進(jìn)行修改。_________評(píng)卷人得分四、判斷題(共3題，共30分)23、釀酒酵母的最適生長溫度為30度。()A.正確B.錯(cuò)誤24、從牛卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接用于體細(xì)胞核移植。（選擇性必修3P53）()A.正確B.錯(cuò)誤25、如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因源于自然界，則不會(huì)存在安全性問題。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、綜合題(共1題，共7分)26、科研人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將抗TMV基因（一種抗煙草花葉病毒的基因）轉(zhuǎn)人到煙草細(xì)胞中；從而培育出抗TMV的煙草，主要流程如圖所示。請(qǐng)回答下列問題。

(1)科研人員通過逆轉(zhuǎn)錄的方法人工合成目的基因，并利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，在PCR反應(yīng)體系中除了含有緩沖溶液、目的基因、原料之外，還應(yīng)含有________。

(2)構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí)需要使用________將目的基因和Ti質(zhì)粒進(jìn)行拼接，這類酶的作用是恢復(fù)被同種限制酶切開的______。重組Ti質(zhì)粒中包含啟動(dòng)子、終止子及抗生素抗性基因等，其中啟動(dòng)子是_________的部位；從而驅(qū)動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄。

(3)構(gòu)建成功的重組Ti質(zhì)粒常用_________法導(dǎo)入到煙草細(xì)胞中。將煙草細(xì)胞培養(yǎng)在含卡那霉素的培養(yǎng)基中的目的是____________，從而培育出抗TMV的煙草植株。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、C【分析】【分析】

1.果酒的制作離不開酵母菌；酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過程當(dāng)中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一種好氧細(xì)菌；只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。

【詳解】

A；家庭制作果酒、果醋和腐乳時(shí)不需要嚴(yán)格滅菌處理；A錯(cuò)誤；

B；果酒發(fā)酵過程中溫度控制在20℃；果醋發(fā)酵過程中溫度控制在30℃，B錯(cuò)誤；

C；參與果醋制作的醋酸菌是嗜氧菌；因此在果醋發(fā)酵過程中，要適時(shí)通過充氣口充氣，從而有利于醋酸菌的代謝，C正確；

D；利用酵母菌釀酒時(shí)；在一定范圍內(nèi)，發(fā)酵時(shí)間越長，產(chǎn)生的酒精量越多，但時(shí)間過長后，由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗等原因，酒精產(chǎn)量減少，D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】2、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因技術(shù)就是把一個(gè)生物體的基因轉(zhuǎn)移到另一個(gè)生物體DNA中的生物技術(shù)；生物反應(yīng)器的研究開發(fā)重點(diǎn)是動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器和動(dòng)物血液反應(yīng)器，目前乳腺生物反應(yīng)器是迄今為止最理想的生物反應(yīng)器。乳腺生物反應(yīng)器即人類通過對(duì)某種動(dòng)物的遺傳基因進(jìn)行改造，使這些動(dòng)物的乳腺可以產(chǎn)生和分泌出人們所需要的某些物質(zhì)，可以節(jié)省建設(shè)廠房和購買儀器設(shè)備費(fèi)用，可以減少生產(chǎn)程序和環(huán)境污染，因此這里所說的“某結(jié)構(gòu)’是指該動(dòng)物的遺傳基因。

【詳解】

A；乳腺生物反應(yīng)器是通過基因工程技術(shù)；將目的基因轉(zhuǎn)入哺乳動(dòng)物受精卵獲得的，A正確；

B；乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)的藥物在自然界中可以找到；只不過在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物體內(nèi)更容易提取到較大量的藥物，B錯(cuò)誤；

C；因?yàn)槊谌槭谴菩詣?dòng)物的特征；因此，可從具有目的基因的轉(zhuǎn)基因雌性動(dòng)物乳汁中提取藥物，C正確；

D；乳腺生物反應(yīng)器是轉(zhuǎn)基因技術(shù)在畜牧業(yè)方面的具體應(yīng)用；也可用該方法生成轉(zhuǎn)基因藥品，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】3、A【分析】【分析】

分析題圖：a酶和b酶識(shí)別的脫氧核苷酸序列不同；但切割后產(chǎn)生的黏性末端相同；

分析表格：a酶可以把原有DNA切成4段，說明有該DNA分子上有3個(gè)切口，即a酶的識(shí)別序列有3個(gè)；b酶把大小是2100的DNA切成大小分別為1900和200兩個(gè)片段，把大小是1400的DNA切成大小分別為800和600兩個(gè)片段，且a酶和b酶的識(shí)別位點(diǎn)不同，說明b酶的識(shí)別序列有2個(gè)。

【詳解】

A、酶a可以把原有線性DNA切成4段，說明該DNA分子上有3個(gè)切口，即酶a的識(shí)別序列有3個(gè)；酶b把長度為2100bp的DNA切成長度分別為1900bp和200bp的兩個(gè)片段，把長度為1400bp的DNA切成長度分別為800bp和600bp的兩個(gè)片段，說明酶b在該DNA分子上有2個(gè)切口，即酶b的識(shí)別序列有2個(gè)；A正確；

B、由圖可以看出，酶a和酶b切割后產(chǎn)生的黏性末端相同；它們之間能相互連接，B錯(cuò)誤；

C；限制酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵；C錯(cuò)誤；

D；酶a的識(shí)別序列有3個(gè)；僅用酶a切割與該DNA分子序列相同的質(zhì)粒，得到的切割產(chǎn)物有3種，D錯(cuò)誤。

故選A。4、D【分析】【分析】

1；限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）是“分子手術(shù)刀”。來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。

2；解答本題的關(guān)鍵是理解限制酶的特點(diǎn)。切割目的基因和運(yùn)載體時(shí)；一般要使用同一種限制性內(nèi)切酶，這樣，切出的切口才一樣，才能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)連接起來。兩個(gè)黏性末端只要相同就可以進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，再通過DNA連接酶連接起來。

【詳解】

BamHⅠ切割出的末端序列為—GATC—；EcoRI切割出的末端序列為－AATT－，HindⅢ切割出的末端序列為－AGCT－，BglⅡ切割出的末端序列為－GATC－，BamHⅠ與BglⅡ切割出的末端序列一致，故只有D項(xiàng)所示兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端才能互補(bǔ)黏合，D正確；

故選D。5、C【分析】1；微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的關(guān)鍵就在于防止雜菌污染；故實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)時(shí)需嚴(yán)格無菌操作對(duì)培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌、培養(yǎng)皿用干熱滅菌接種環(huán)用灼燒滅菌實(shí)驗(yàn)者的雙手用酒精擦拭消毒處理。

2；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。

3；菌落的特征有菌落的形狀、大小、隆起程度、和顏色等方面；同種微生物菌落特征相對(duì)穩(wěn)定。

【詳解】

A；菌落的特征有菌落的形狀、大小、隆起程度、和顏色等方面；同種微生物菌落特征相對(duì)穩(wěn)定一般相同，A錯(cuò)誤；

B；在微生物培養(yǎng)的接種過程中；超凈工作臺(tái)不需要在紫外燈照射下進(jìn)行，B錯(cuò)誤；

C；小鼠肺炎病毒的培養(yǎng)過程需要進(jìn)行滅菌操作；C正確；

D；在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的時(shí)候；需要將某以一適宜的稀釋度下的各平行組菌落數(shù)目相加取其平均值，D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】6、C【分析】【分析】

胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；由體外受精；胚胎移植、胚胎分割、胚胎冷凍保存和性別控制鑒定技術(shù)等組成的現(xiàn)代生物技術(shù)。

【詳解】

A；用某些激素對(duì)女性患者進(jìn)行超數(shù)排卵技術(shù)治療后；可以讓女性患者排出較多卵母細(xì)胞，A正確；

B；剛剛排出的精子不能立即與卵子受精；必須進(jìn)行體外獲能處理才能獲得受精能力，B正確；

C；胚胎遺傳診斷是在胚胎著床之前對(duì)配子或胚胎進(jìn)行遺傳物質(zhì)分析；選擇沒有遺傳物質(zhì)異常的胚胎進(jìn)行移植，C錯(cuò)誤；

D；人類的性別由性染色體決定；根據(jù)Y染色體上性別決定基因（SRY基因）的DNA序列設(shè)計(jì)核酸引物，通過PCR技術(shù)可鑒定胚胎的男女性別，D正確。

故選C。7、C【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。④個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；①是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；若使用EcoRⅠ切割質(zhì)粒會(huì)將目的基因掐入啟動(dòng)子上游；目的基因不能正確表達(dá)；使用HamdⅢ切割質(zhì)粒將破壞標(biāo)記基因，不利于目的基因的鑒定和篩選，因此該過程中應(yīng)使用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒，A錯(cuò)誤；

B；由于DNA聚合酶只能從5′→3′延伸子鏈；因此擴(kuò)增目的基因時(shí)應(yīng)選擇引物1和4，B錯(cuò)誤；

C、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是鈣離子處理法，所以過程②可用Ca2+處理來促進(jìn)大腸桿菌的轉(zhuǎn)化；C正確；

D、PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因時(shí)，緩沖液中需要加入的引物個(gè)數(shù)計(jì)算公式為2n+1-2，因此PCR過程完成6輪循環(huán)，理論上至少需加入引物26+1-2=126個(gè)；D錯(cuò)誤。

故選C。二、多選題(共7題，共14分)8、C:D【分析】【分析】

1；作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)；②要有標(biāo)記基因（如抗性基因）；以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來；

2；大腸桿菌的質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

【詳解】

A；質(zhì)粒是一種獨(dú)立于細(xì)菌擬核外的環(huán)狀DNA分子；沒有切割時(shí)不含具有黏性末端，A錯(cuò)誤；

B；基因工程的運(yùn)載體必須要有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)；便于與目的基因連接形成重組DNA分子，B錯(cuò)誤；

C；質(zhì)粒對(duì)宿主細(xì)胞的生存沒有決定性作用；C正確；

D；作為載體的質(zhì)粒分子?。荒茏灾鲝?fù)制，且常含有抗生素抗性基因，可以作為標(biāo)記基因，對(duì)重組后重組子進(jìn)行篩選，D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】9、A:B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴(kuò)增；②原理：DNA復(fù)制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即約2n；⑤過程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

【詳解】

A；用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)；只要知道目的基因前后的序列用以設(shè)計(jì)引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正確；

B；PCR過程中需要兩種引物分子；不同引物能靠堿基互補(bǔ)配對(duì)而形成（部分）雙鏈的話會(huì)造成引物不能同模板DNA結(jié)合，也就不能發(fā)生進(jìn)一步的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，這一點(diǎn)需要避免，B正確；

C；若退火溫度過高；則引物與模板DNA無法形成部分雙鏈，PCR也就不能發(fā)生，C正確；

D；PCR技術(shù)中的引物和原料是一次性添加的；不需要補(bǔ)充，D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】10、A:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因植物可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅理由：①轉(zhuǎn)基因植物擴(kuò)散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉(zhuǎn)基因植物競爭能力強(qiáng)，可能成為“入侵的外來物種”，③轉(zhuǎn)基因植物的外源基因與細(xì)菌或病毒雜交，重組出有害的病原體，④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級(jí)雜草”。

【詳解】

A；重組的微生物在降解污染物的過程中可能產(chǎn)生二次污染；造成環(huán)境安全問題，A正確；

B；種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量；保護(hù)環(huán)境，但轉(zhuǎn)基因植物可能會(huì)與野生植物雜交，造成基因污染，可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅，B錯(cuò)誤；

C；轉(zhuǎn)基因花粉中若有毒蛋白或過敏蛋白；可能會(huì)通過食物鏈傳遞到人體內(nèi)，轉(zhuǎn)基因作物可通過花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫，C正確；

D；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)；應(yīng)趨利避害，可以避免轉(zhuǎn)基因生物引發(fā)的安全性問題，轉(zhuǎn)基因生物所帶來的環(huán)境安全問題在今后有可能得到解決，D正確。

故選ACD。11、A:D【分析】【分析】

由題圖信息分析可知；圖中首先利用培養(yǎng)基擴(kuò)增菌體，然后在涂布在平板上，再通過影印法將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中，分別是基本培養(yǎng)基；完全培養(yǎng)基；野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，而氨基酸營養(yǎng)缺陷型菌株由于發(fā)生基因突變無法合成某種氨基酸只能在完全培養(yǎng)基上生長，據(jù)此利用培養(yǎng)基的種類便可以選擇出氨基酸突變株。

【詳解】

A；野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長；氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④中含有菌落，①②④為完全培養(yǎng)基，③中影印處無菌落，③為基本培養(yǎng)基，A正確；

B；紫外線可以提高突變的頻率；而A操作即培養(yǎng)的目的是提高已經(jīng)突變菌株的濃度（A操作不能提高突變率），即增加突變株的數(shù)量，B錯(cuò)誤；

C；B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面；再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，C錯(cuò)誤；

D；從圖中可看出；D在③基本培養(yǎng)基中無法生長，在完全培養(yǎng)基中可生長，說明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C過程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，D正確。

故選AD。12、A:B:C【分析】【分析】

13、B:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞融合；細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞篩選；從題干信息圖可看出，過程1代表的是注射特異性抗原使小鼠免疫，從而獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞；過程2是將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程；過程3是克隆培養(yǎng)篩選后的陽性細(xì)胞，一共需要進(jìn)行兩次，最終獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，此后在培養(yǎng)基或小鼠腹腔中培養(yǎng)。

【詳解】

A；圖中過程1是通過注射抗原或抗原蛋白來獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞；A正確；

B；過程2是促進(jìn)細(xì)胞融合的過程；其中電融合技術(shù)是用低壓電流擊穿細(xì)胞膜促使細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；

C；c細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞；有三種，分別是骨髓瘤細(xì)胞-骨髓瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞，其中骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞都有兩個(gè)染色體組，融合后的細(xì)胞都含有4個(gè)染色體組，其中e細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D；過程3是專一抗體檢測及克隆培養(yǎng)篩選后獲得陽性細(xì)胞；該過程需要多次進(jìn)行，D正確。

故選BC。14、A:C:D【分析】【分析】

分析題圖：①表示反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；之后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將目的基因?qū)敕呀M織塊；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將導(dǎo)入目的基因的番茄組織細(xì)胞培養(yǎng)成抗凍番茄植株?；虮磉_(dá)載體通常由啟動(dòng)子；目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。

【詳解】

A；過程①是通過人工合成法獲取的目的基因；由于真核生物體內(nèi)的基因含有不能編碼蛋白質(zhì)的序列（內(nèi)含子），導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，因此人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A錯(cuò)誤；

B；抗凍蛋白的11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列重復(fù)次數(shù)越多；抗凍能力越強(qiáng)，并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復(fù)次數(shù)越多抗凍能力越強(qiáng)，抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，B正確；

C；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；基因表達(dá)載體通常由啟動(dòng)子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，可以通過DNA分子雜交或PCR技術(shù)檢測受體細(xì)胞是否含有目的基因，C錯(cuò)誤；

D；利用DNA探針技術(shù)檢測目的基因是否導(dǎo)入到受體細(xì)胞；但表達(dá)的產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)，可利用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達(dá)出來，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共8題，共16分)15、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無機(jī)鹽16、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點(diǎn)是打破了生殖隔離。但由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，目前科學(xué)家對(duì)基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時(shí)，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的，因此在轉(zhuǎn)基因生物中，有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因生物具有以下優(yōu)點(diǎn)：

作物產(chǎn)量高；能解決糧食短缺問題；利用基因工程生產(chǎn)的抗蟲作物能夠減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長迅速；營養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產(chǎn)稀缺的生化藥物。

（2）轉(zhuǎn)基因生物受限于科學(xué)發(fā)展水平；可能會(huì)產(chǎn)生以下問題：

轉(zhuǎn)基因生物與同種生物雜交；可能產(chǎn)生重組病菌；重組病毒或超級(jí)雜草；導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因生物的外源基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細(xì)菌或病毒雜交，從而重組出對(duì)人類或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)取得了巨大的成果；但科學(xué)技術(shù)是把雙刃劍，面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點(diǎn)睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，意在考查學(xué)生對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性問題的識(shí)記與理解?！窘馕觥拷鉀Q糧食短缺問題減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營養(yǎng)，提高附加值能產(chǎn)生有毒