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…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2025年人教新課標選擇性必修3生物上冊月考試卷638考試試卷考試范圍:全部知識點;考試時間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級:______考號:______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題,共14分)1、某中學(xué)生物興趣小組采用不同方法進行DNA粗提取實驗;具體流程如下圖所示。查閱資料得知,SDS(一種表面活性劑)除了能瓦解細胞膜和核膜外,還能與脂質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)合。當(dāng)SDS遇到鉀離子時,鉀離子可以置換SDS中的鈉離子,產(chǎn)生不溶于水的PDS沉淀。下列分析正確的是()
。3g新鮮豬肝。
盡量剪碎;加2g食鹽、快速研磨后;加20mL蒸餾水,攪排,獲得勺漿。
方法一。
①向勻漿中加入2mL的洗滌劑;放入65℃水浴鍋中水浴10min,期間攪拌3次;
②用2層紗布過濾勻漿取濾液。
向相關(guān)液體中加入2倍體積的95%的冷酒精;靜置3min,可見絮狀物生成。
絮狀物呈淺黃色。
方法二。
①向勻漿中加入2mL10%的SDS;放入65℃水浴鍋中水浴10min,期間攪拌3次;
②用2層紗布過濾勻漿取濾液。
絮狀物略呈黃色。
①向勻漿中加入2mL10%的SDS;放入65℃水浴鍋中水浴10min,期間攪拌3次;
②用2層紗布過濾勻漿取濾液。
絮狀物略呈黃色。
方法三。
①②步驟同方法二;
③向勻漿中加入2mL10%氯化鉀溶液,攪拌均勻后,離心3min,取_____________________。
絮狀物呈白色。
①②步驟同方法二;
③向勻漿中加入2mL10%氯化鉀溶液,攪拌均勻后,離心3min,取_____________________。
絮狀物呈白色。
A.向剪碎的豬肝中加入食鹽的目的是使細胞過度失水破裂B.洗滌劑與SDS的使用都有利于去除脂質(zhì)和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)C.65℃處理可去除部分蛋白質(zhì)是因為DNA與蛋白質(zhì)對高溫的耐受性不同D.方法三的“?”處為“上清液”,該方法所得DNA純度最低2、甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。研究小組擬利用植物體細胞雜交培育同時含有A和B的新型藥用植物。下列不正確的是()A.誘導(dǎo)甲、乙植物的細胞融合可以用PEGB.同時含有A和B的新型藥用植物屬于單倍體C.植物體細胞雜交能克服遠緣雜交不親和的障礙D.這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖3、華南虎是國家一級保護動物;可采用試管動物技術(shù)進行人工繁殖,該技術(shù)包括的環(huán)節(jié)有。
①轉(zhuǎn)基因
②核移植
③體外受精
④細胞培養(yǎng)
⑤胚胎移植A.①②④B.③④⑤C.②③⑤D.①②③④⑤4、有3種限制酶對DNA分子的識別序列和剪切位點(圖中箭頭所示)依次為:限制酶1:﹣﹣↓GATC﹣﹣;限制酶2:﹣﹣CCGC↓GG﹣﹣;限制酶3:﹣﹣G↓GATCC﹣﹣。下列敘述錯誤的是()A.不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點B.限制酶2和限制酶3識別的序列都包含6個堿基對C.限制酶1和限制酶3剪出的黏性末端相同D.能夠識別和切割RNA分子的酶只有限制酶25、轉(zhuǎn)座子是基因組中可移動的DNA片段,玉米Ac轉(zhuǎn)座子能編碼轉(zhuǎn)座酶而自主轉(zhuǎn)座,Ds轉(zhuǎn)座元件只有與Ac轉(zhuǎn)座子同時存在時,才能從原位點切離并插入到新位點中。研究者利用玉米轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)構(gòu)建煙草突變體,下列敘述錯誤的是()A.推測Ds轉(zhuǎn)座元件不具有編碼轉(zhuǎn)座酶功能B.可構(gòu)建同時含有Ac/Ds的基因表達載體C.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因表達載體導(dǎo)入煙草細胞D.Ds與其被插入的基因間發(fā)生基因重組6、CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要由向?qū)NA(SgRNA)和Cas9蛋白兩部分組成,SgRNA可引導(dǎo)Cas9蛋白到特定基因位點進行切割,其機制如圖所示。下列說法正確的是()
A.SgRNA通過堿基互補配對原則識別目標DNA分子,Cas9蛋白的功能與DNA連接酶相似B.若要利用CRISPR/Cas9技術(shù)將一個基因從目標DNA分子上去除,通常需設(shè)計兩個序列不同的SgRNAC.CRISPR/Cas9技術(shù)編輯基因有時會因SgRNA錯誤結(jié)合而出現(xiàn)“脫靶”現(xiàn)象,一般SgRNA序列越短,脫靶率越低D.向?qū)NA可以在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下合成,合成的原料包括四種核糖核苷酸7、蛋白質(zhì)工程可以說是基因工程的延伸。下列相關(guān)表述正確的是()A.基因工程需要對基因進行操作,蛋白質(zhì)工程不需要對基因進行操作B.蛋白質(zhì)工程需要改變蛋白質(zhì)分子的所有氨基酸序列C.蛋白質(zhì)工程可以改造酶,但不能提高酶的熱穩(wěn)定性D.蛋白質(zhì)工程最終達到的目的是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)評卷人得分二、多選題(共5題,共10分)8、三聚氰胺是小分子有機物;下圖為采用單克隆技術(shù)制備三聚氰胺特異性抗體的過程,下列有關(guān)敘述錯誤的是()
A.三聚氰胺分子經(jīng)“擴容”后可激活小鼠的免疫系統(tǒng)B.從自然免疫的小鼠體內(nèi)可獲得產(chǎn)生該特異性抗體的B淋巴細胞C.經(jīng)培養(yǎng)篩選后得到的雜交瘤細胞只具有產(chǎn)生單一抗體的特點D.在基因水平上將單克隆抗體改造為嵌合抗體可降低對人體的不良反應(yīng)9、關(guān)于胚胎工程的敘述,不正確的是()A.胚胎工程的理論基礎(chǔ)是體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育B.胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取卵子C.受精的標志為雌原核和雄原核融合D.胚胎移植時對所有供體牛和受體牛都要進行同期發(fā)情處理10、苯丙酮尿癥是一種嚴重的單基因遺傳病。圖1是某患者的家族系譜圖,其中部分成員Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1和Ⅱ2的DNA經(jīng)限制酶MspⅠ酶切,產(chǎn)生不同的片段,經(jīng)電泳后與相應(yīng)探針雜交結(jié)果見圖2.下列分析正確的是()
A.個體Ⅱ1是雜合體的概率為2/3B.個體Ⅱ2與一雜合體婚配生患病孩子的概率為0C.個體Ⅱ3是隱性純合體,有19kb探針雜交條帶D.個體Ⅱ4可能為雜合體,有2個探針雜交條帶11、為探究不同糖源(蜂蜜、黃冰糖)對藍莓酒發(fā)酵產(chǎn)物的影響,某研究小組研發(fā)出如下的藍莓酒發(fā)酵工藝,其中“主發(fā)酵”時酵母菌會繁殖、大部分糖的分解和代謝物會生成,“后發(fā)酵”是在低溫、密閉的環(huán)境下藍莓酒會成熟。下列敘述錯誤的是()
A.菌種甲在產(chǎn)生CO2的同時會產(chǎn)生酒精B.切片后需對發(fā)酵液進行消毒然后再分組C.倒罐均需保留空間以促進菌種有氧呼吸D.主發(fā)酵要控制無氧,后發(fā)酵要控制有氧12、在中國的傳說中,醋最早是由“酒圣”杜康之子發(fā)明。杜康的兒子墨塔在-.次釀酒時發(fā)酵過頭,直至第21天開缸時,發(fā)現(xiàn)酒液已變酸,但香氣撲鼻,且酸甜可口,于是墨塔便把“廿一日”加一“西”字,給這種酸水起名為“醋”。下列敘述正確的是()A.酒發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進酵母菌進行有氧呼吸,大量增殖B.酒精是在酵母菌細胞的線粒體中產(chǎn)生,可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測C.墨塔釀酒反成醋的原因可能是發(fā)酵裝置密封不嚴或發(fā)酵裝置沒有清洗干凈D.釀酒時糖類未耗盡,酵母菌的發(fā)酵也會停止,原因可能是pH降低和酒精含量增多評卷人得分三、填空題(共5題,共10分)13、一般包括______、______等技術(shù)14、基因工程的原理是_____,又叫_____或_____。通俗地說,就是按照_____,把一種生物的_____提取出來,加以_____,然后放到_____,_____地改造生物的遺傳性狀。15、醋酸菌的最適生長溫度為____________________℃。16、其它載體:_______17、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似,只是前者熱穩(wěn)定性較差,進入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評卷人得分四、判斷題(共3題,共12分)18、基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面。(選擇性必修3P87)()A.正確B.錯誤19、蛋白質(zhì)工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)。(選擇性必修3P93)()A.正確B.錯誤20、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。(選擇性必修3P111)()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題,共40分)21、多發(fā)性硬化癥是一種由纖維蛋白滲入大腦引發(fā)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病。科研人員欲應(yīng)用生物工程技術(shù)治療該病。請回答下面有關(guān)問題。
(1)研究人員將纖維蛋白作為_________注射到小鼠體內(nèi),激活了小鼠的________免疫,進而制備出抗纖維蛋白的單克隆抗體(5B8)。該項技術(shù)屬于_______范疇(填寫下面正確選項)。
A.基因工程B.細胞工程C.胚胎工程D.蛋白質(zhì)工程。
(2)制備5B8的基本流程如下:從注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲取________,與小鼠的骨髓瘤細胞進行融合。然后用特定的__________篩選符合要求的雜交瘤細胞后;再通過克?。粰z測、篩選、培養(yǎng)等環(huán)節(jié),最終從小鼠腹水中提取到5B8。
(3)活性氧(ROS)是氧分子正常代謝的副產(chǎn)物;當(dāng)吞噬細胞中大量產(chǎn)生ROS并釋放時,會毒害周圍神經(jīng)元。NADPH氧化酶是催化細胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的主要酶。為研究5B8的作用機制,研究者檢測了經(jīng)5B8處理后吞噬細胞中NADPH氧化酶和ROS的含量,結(jié)果如圖一;圖二。
①作為標準參照的GADPH蛋白表達量穩(wěn)定且含量豐富,可排除_________對實驗結(jié)果的影響。
②綜合兩幅圖的檢測結(jié)果,通過對比_______組可知,纖維蛋白可以______________,使其對神經(jīng)元產(chǎn)生毒害;而通過對比______組結(jié)果發(fā)現(xiàn):5B8能_________。
③經(jīng)臨床實驗證實,單克隆抗體5B8確實對多發(fā)性硬化癥有明顯療效。請根據(jù)上述結(jié)果分析其具有療效的原因____________________。22、豆豉是中國傳統(tǒng)特色發(fā)酵豆制品調(diào)味料。豆豉以黑豆或黃豆為主要原料;利用毛霉;曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用,經(jīng)復(fù)雜工序制作而成。程序如下:黑豆→篩選→洗滌→浸泡→瀝干→蒸煮→冷卻→接種→制曲→洗豉→浸→拌鹽→發(fā)酵→晾干→成品(干豆豉)。請回答下列問題:
(1)蒸煮目的是_________,冷卻后再接種的原因是_____________。
(2)觀察發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器中上層豆類的發(fā)酵效果比底層的好,說明該菌是________。
(3)制作過程中要加入適量的鹽,鹽能______________;避免變質(zhì)。
(4)從黑豆到豆豉。它的成分會發(fā)生一定的變化。其中最顯著的變化是________。
(5)豆豉制作過程中用到的菌種與課本上_________________________制作的菌種最接近,從細胞結(jié)構(gòu)看,它們屬于___________生物。23、《本草綱目》記載;“蟬花可治療驚癇,夜啼心悸,功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體,內(nèi)含蟲草多糖;甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人員從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進行人工培養(yǎng)。
(1)制備培養(yǎng)基:
①該實驗選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基,配方如下:馬鈴薯200g,葡萄糖20g,KH2PO42g,MgSO40.5g,瓊脂20g,用蒸餾水定容至1000mL,自然pH,培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供_____等營養(yǎng)成分(至少寫出2種),該培養(yǎng)基的自然pH為______性范圍。
②為了便于篩選蟬擬青霉菌株,培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生長。該培養(yǎng)基從功能上分類屬于______培養(yǎng)基。
③配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理,目的是_______。檢測固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是_____。
(2)蟬擬青霉的分離純化:取新鮮蟬花,挑取蟲體胸腔中的少量菌絲采用_______法接種至PDA培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。
(3)發(fā)酵生產(chǎn):發(fā)酵生產(chǎn)中常用液體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)。下表為發(fā)酵菌絲體和天然蟬花的主要成分及含量的測定結(jié)果,據(jù)表判斷_______(填“能”或“不能”)用發(fā)酵菌絲體替代天然蟬花,判斷的理由是_______。粗蛋白(%)粗纖維(%)灰份(%)水分(%)蟲草多糖(mg/g)甘露醇(mg/g)發(fā)酵菌絲體25.388.327.878.9233.278.9天然蟬花19.653.127.849.8128.553.624、干燥綜合征(SS)是臨床常見的一種自身免疫??;患者血清中存在多種抗體,其中以SSB抗體特異性最強。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對小鼠進行免疫的過程?;卮鹣铝袉栴}:
(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA(多聚腺嘌呤核糖核苷酸)保護尾部不被降解。為了針對性獲得cDNA,應(yīng)如何設(shè)計逆轉(zhuǎn)錄第一步時的DNA引物______,設(shè)計引物的目的是______。
(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接,對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時,應(yīng)在相應(yīng)引物的_______(填“5'”或“3'”)端加上______酶切位點。
(3)③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時,需要用Ca2+處理大腸桿菌,目的是______,然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基(A)上培養(yǎng),待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基(B)上培養(yǎng),收集_______菌落進一步純化后將菌體破碎處理;篩選得到SSB蛋白。
(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性,則后續(xù)實驗內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。評卷人得分六、綜合題(共2題,共6分)25、小豆起源于中國。栽培小豆種皮多為紅色;此外還有白色;綠色、褐色等各種類型。
(1)為探究種皮顏色的遺傳規(guī)律;用4個不同種皮顏色的小豆品種進行如下雜交實驗。
①根據(jù)雜交實驗Ⅰ結(jié)果推測,小豆種皮的顏色(紅色、綠色和褐色)是由___________對等位基因控制。雜交實驗Ⅱ的F2白色種皮個體中雜合子的比例為___________。
②有人根據(jù)以上雜交實驗結(jié)果推測小豆種皮相關(guān)色素的代謝途徑;如圖1。
為探究R/r基因與B/b基因之間的位置關(guān)系,利用上述4個品種中的白色和綠色品種進行雜交實驗,F(xiàn)1自交獲得F2。在上述推測成立的情況下,若F2小豆的種皮顏色及比例為___________,則說明R/r基因與B/b基因位于同源染色體上;且減數(shù)分裂時不發(fā)生交換。
(2)小豆種皮顏色與花青素等物質(zhì)的種類有關(guān);蛋白M1和M2調(diào)控花青素合成相關(guān)基因的表達。
①分別用帶有M1和M2基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化植株,得到M1和M2過表達植株,檢測其花青素的含量,結(jié)果如圖2。根據(jù)實驗結(jié)果推測,M1基因________。
②研究發(fā)現(xiàn),M2基因過表達植株的一些組織中M1的表達量升高。為研究M2與M1基因的關(guān)系,將M2蛋白與用M1基因的啟動子部分片段制作的探針混合并電泳,結(jié)果如圖3(生物素越多則條帶顏色越深)。圖3結(jié)果表明____。
③綜合以上研究,請補充完善M1、M2、花青素合成的關(guān)系圖(括號內(nèi)填寫“促進”或“抑制”),并從物質(zhì)和能量的角度解釋這種關(guān)系的意義____。
26、圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請回答下列問題:
(1)EcoRV酶切位點為EcoRV酶切出來的線性載體P1為___________末端。
(2)用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段;其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理,在兩端各添加了一個堿基為___________的脫氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在__________酶作用下,形成重組質(zhì)粒P3。
(3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落;采用含有不同抗生素的平板進行篩選,得到A;B、C三類菌落,其生長情況如下表(“+”代表生長,“﹣”代表不生長)。根據(jù)表中結(jié)果判斷,應(yīng)選擇的菌落是__________(填表中字母)類,另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是_____、________________。
(4)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計引物進行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置,PCR鑒定時應(yīng)選擇的一對引物是__________。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp片段,原因是_______________。參考答案一、選擇題(共7題,共14分)1、C【分析】【分析】
DNA粗提取和鑒定的原理:
1;DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液;但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。
2;DNA的鑒定:在沸水浴的條件下;DNA遇二苯胺會被染成藍色。
【詳解】
A;實驗中;向剪碎的豬肝中加入食鹽,食鹽能溶解DNA,A錯誤;
B;根據(jù)題干信息;洗滌劑可破壞細胞的脂質(zhì)細胞膜及核膜,而SDS除了能瓦解細胞膜和核膜外,還能與脂質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)合,所以洗滌劑不利于出去蛋白質(zhì),SDS有利于除去蛋白質(zhì),B錯誤;
C;將豬肝勻漿放入65℃水浴鍋中水浴10min以除去部分雜質(zhì)的主要實驗原理是蛋白質(zhì)在65℃高溫下會變性而DNA能耐受這一溫度;C正確;
D;方法三的步驟③中;由于鉀離子可以置換SDS中的鈉離子,產(chǎn)生不溶于水的PDS沉淀,因此離心3min,可以除去不溶于水的PDS沉淀,上清液中含有DNA,故離心后應(yīng)取上清液,但此時純度不高,還需要加入2倍體積的95%的冷酒精進行提純,此時純度更高,D錯誤。
故選C。
【點睛】2、B【分析】【分析】
題意分析;植物體細胞雜交技術(shù)的過程是:取植物甲和植物乙的體細胞,先用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,獲得具有活力的原生質(zhì)體甲;原生質(zhì)體乙,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑聚乙二醇誘導(dǎo)融合形成雜種細胞;再借助植物組織培養(yǎng)技術(shù),讓雜種細胞先經(jīng)過脫分化培養(yǎng)形成愈傷組織,再經(jīng)過再分化形成根、芽,進而長成完整植株。
【詳解】
A;PEG試劑常作為誘導(dǎo)植物細胞融合的誘導(dǎo)劑;因此,可以誘導(dǎo)甲、乙植物的細胞融合,A正確;
B;同時含有A和B的新型藥用植物是利用植物體細胞雜交培育的;故屬于四倍體,B錯誤;
C;植物體細胞雜交可以將存在生殖隔離的兩種植物細胞融合形成雜種細胞;進一步發(fā)育成雜種植物,能克服遠緣雜交不親和的障礙,C正確;
D;將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子;可以大量繁殖植物體,D正確。
故選B。
【點睛】3、B【分析】【分析】
【詳解】
試管動物是通過體外受精技術(shù)獲得的。以華南虎為例;從母虎體內(nèi)取出卵細胞,若未成熟,需通過細胞培養(yǎng)至成熟,再在試管或培養(yǎng)皿中完成受精,然后將發(fā)育正常的早期胚胎移植到受體子宮內(nèi)著床;妊娠、發(fā)育,直至分娩。由此可知,該技術(shù)包括了體外受精和胚胎移植兩個環(huán)節(jié),因此正確選項為③④⑤,故本題正確答案為B。
【點睛】4、D【分析】【分析】
關(guān)于限制酶;考生可以從以下幾方面把握:
(1)來源:主要從原核生物中分離純化出來。
(2)特異性:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列;并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。
(3)結(jié)果:形成黏性末端或平末端。
【詳解】
A;酶具有專一性;不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點,A正確;
B;限制酶2和3識別的序列分別是CCGCGG和GGATCC;均為6個堿基對,B正確;
C;限制酶1和3剪出的黏性末端相同;均為-GATC,C正確;
D;限制酶只能識別和切割DNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列;D錯誤。
故選D。5、D【分析】【分析】
題中的轉(zhuǎn)座就是轉(zhuǎn)座子在基因組上的轉(zhuǎn)移。轉(zhuǎn)座需要轉(zhuǎn)座酶;而且從原位點切離后要能插入到新位點中。農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上可轉(zhuǎn)移的T-DNA就是一段轉(zhuǎn)座子,在有相關(guān)酶和轉(zhuǎn)座所需的特異性序列的情況下,T-DNA能切離,整合到受體細胞的染色體DNA上,利用這些原理,可以將目的基因轉(zhuǎn)化入受體細胞,最后進行選擇培養(yǎng);篩選獲得轉(zhuǎn)基因植株。
【詳解】
A;玉米Ac轉(zhuǎn)座子能編碼轉(zhuǎn)座酶而自主轉(zhuǎn)座;Ds轉(zhuǎn)座元件只有與Ac轉(zhuǎn)座子同時存在時,才能從原位點切離并插入到新位點中,說明Ds轉(zhuǎn)座元件不具有編碼轉(zhuǎn)座酶功能,A正確;
B;Ds轉(zhuǎn)座元件與Ac轉(zhuǎn)座子同時存在時;能讓轉(zhuǎn)座子從原位點切離并插入到新位點中,所以可以構(gòu)建同時含有Ac/Ds的基因表達載體,將目的基因插入轉(zhuǎn)座子,讓目的基因隨轉(zhuǎn)座子插入到受體細胞,B正確;
C;農(nóng)桿菌易感染植物細胞;其Ti質(zhì)粒上的T-DNA就是可轉(zhuǎn)移的DNA,即轉(zhuǎn)座子,Ti質(zhì)粒上的轉(zhuǎn)座子可轉(zhuǎn)移并整合到受體細胞的染色體DNA上。在基因工程中,可以用農(nóng)桿菌作為轉(zhuǎn)移基因表達載體的工具。利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,先將基因表達載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌,繼而農(nóng)桿菌在侵染煙草細胞后,基因表達載體中包含目的基因的轉(zhuǎn)座子就會整合到煙草細胞的染色體DNA中,C正確;
D;基因重組是指控制不同性狀的基因重新組合的過程;Ds轉(zhuǎn)座元件不一定是一段基因,而且當(dāng)Ds轉(zhuǎn)座元件插入基因,Ds轉(zhuǎn)座元件本身的中間序列已經(jīng)發(fā)生了改變,所以,Ds轉(zhuǎn)座元件與插入它內(nèi)部的基因間不是發(fā)生了基因重組,D錯誤。
故選D。6、B【分析】【分析】
由圖示可知;SgRNA可通過與特定基因位點的堿基互補配對,來引導(dǎo)Cas9蛋白到該位點進行切割,即SgRNA是通過堿基互補配對原則來識別目標DNA分子的。
【詳解】
A;由圖可知;SgRNA可通過與特定基因位點的堿基互補配對,來引導(dǎo)Cas9蛋白到該位點進行切割。即SgRNA通過堿基互補配對原則識別目標DNA分子,而Cas9蛋白的功能與限制酶相似,A錯誤;
B;為了防止因目的基因兩側(cè)的“黏性末端”相同而導(dǎo)致的自身環(huán)化;若要利用CRISPR/Cas9技術(shù)將一個基因從目標DNA分子上去除,通常需設(shè)計兩個序列不同的SgRNA,B正確;
C;CRISPR/Cas9技術(shù)編輯基因有時會因SgRNA錯誤結(jié)合而出現(xiàn)“脫靶”現(xiàn)象;SgRNA的序列越短,可識別的DNA上的特定堿基序列越短,越容易發(fā)生脫靶現(xiàn)象,即脫靶率越高,C錯誤;
D;向?qū)NA是以DNA的一條鏈為模板通過轉(zhuǎn)錄形成的;可以在RNA聚合酶的催化下合成,合成的原料包括四種核糖核苷酸,D錯誤。
故選B。7、D【分析】【分析】
1;基因工程是將一種生物的基因轉(zhuǎn)移到另一種生物體內(nèi);產(chǎn)生它本不能產(chǎn)生的蛋白質(zhì),進而表現(xiàn)出新的性狀,但只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì);
2;蛋白質(zhì)工程是通過修改基因或創(chuàng)造合成新基因來改變生物的遺傳和表達形狀;合成新的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)工程從屬于基因工程,蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程。
【詳解】
A;基因控制蛋白質(zhì)的合成;蛋白質(zhì)工程也需要對基因進行操作,A錯誤;
B;蛋白質(zhì)工程改變的是蛋白質(zhì)分子的少數(shù)氨基酸;B錯誤;
C;蛋白質(zhì)工程可以改造酶;提高酶的熱穩(wěn)定性,C錯誤;
D;蛋白質(zhì)工程是在深入了解蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上進行的;它最終要達到的目的是改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì),滿足人類的需求,D正確。
故選D。二、多選題(共5題,共10分)8、B:C【分析】【分析】
分析題圖:該圖是制備三聚氰胺特異性抗體的過程。由于三聚氰胺分子量過??;不足以激活高等動物的免疫系統(tǒng),制備抗體前必須對三聚氰胺分子進行有效“擴容”。
【詳解】
A;根據(jù)試題的分析;由于三聚氰胺分子量過小,不足以激活高等動物的免疫系統(tǒng),制備抗體前必須對三聚氰胺分子進行有效“擴容”,以激活小鼠的免疫反應(yīng),A正確;
B;三聚氰胺是小分子有機物;不會被動物的免疫細胞的受體所識別,B錯誤;
C;經(jīng)培養(yǎng)篩選得到的雜交瘤細胞具有雙親的特性;既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體,C錯誤;
D;通過對鼠和人控制抗體產(chǎn)生的基因進行拼接;實現(xiàn)對鼠源雜交瘤抗體的改造,能生產(chǎn)出對人體的不良反應(yīng)減少、效果更好的鼠-人嵌合抗體,D正確。
故選BC。9、B:C:D【分析】【分析】
1;胚胎工程--指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術(shù);如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎,還需移植到雌性動物體內(nèi)產(chǎn)生后代,以滿足人類的各種需求。理論基礎(chǔ):哺乳動物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律。
2;精過程為:頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶(透明帶反應(yīng))→卵細胞膜反應(yīng)(卵黃膜封閉作用)→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失;雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。
3;胚胎移植的基本程序主要包括:①對供、受體的選擇和處理(選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體;有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發(fā)情處理,用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理);②配種或人工授精;③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(對胚胎進行質(zhì)量檢查,此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段);④對胚胎進行移植;⑤移植后的檢查。
【詳解】
A;胚胎工程的理論基礎(chǔ)是哺乳動物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律;A正確;
B;胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取早期胚胎;B錯誤;
C;受精的標志為在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個極體;C錯誤;
D;胚胎移植時對供體母牛和受體牛都要進行同期發(fā)情處理;對供體公牛不需要進行同期發(fā)情處理,D錯誤。
故選BCD。
【點睛】10、B:C:D【分析】苯丙酮尿癥是一種嚴重的單基因遺傳病,假設(shè)該病受一對等位基因A、a控制,分析圖1,Ⅰ1、Ⅰ2都無病,但其女兒Ⅱ3卻有病,所以該病為常染色體隱性遺傳病,Ⅱ3基因型為aa,Ⅰ1和Ⅰ2的基因型都為Aa,再結(jié)合圖2的酶切結(jié)果可知,Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1的基因型相同,因此Ⅱ1的基因型為Aa,Ⅱ2表現(xiàn)正常,且從酶切結(jié)果看,Ⅱ2與Ⅱ1基因型(Aa)不同,所以Ⅱ2的基因型為AA,由此可以推知,23kb探針雜交條帶對應(yīng)正常顯性基因A,19kb探針雜交條帶對應(yīng)隱性基因a。
【詳解】
A、由分析可知,個體Ⅱ1的基因型為Aa;雜合體的概率為1,A錯誤;
B、由分析可知,個體Ⅱ2的基因型為AA;與雜合體Aa婚配,生患病孩子aa的概率為0,B正確;
C、個體Ⅱ3是患者,是隱性純合體,故有19kb探針雜交條帶;C正確;
D、個體Ⅱ4是Ⅰ1(Aa)和Ⅰ2(Aa)所生的表現(xiàn)正常的后代;基因型可能是AA或Aa,若為雜合體就有2個探針雜交條帶,D正確。
故選BCD。11、A:C:D【分析】【分析】
酵母菌是一類單細胞真菌;能以多種糖類作為營養(yǎng)物質(zhì)和能量的來源,因此在一些含糖量較高的水果;蔬菜表面經(jīng)??梢园l(fā)現(xiàn)酵母菌的存在。酵母菌是兼性厭氧微生物,在無氧條件下能進行酒精發(fā)酵,可用于釀酒、制作饅頭和面包等。溫度是影響酵母菌生長的重要因素,釀酒酵母的最適生長溫度約為28℃。
【詳解】
A、發(fā)酵產(chǎn)生果酒的菌種是酵母菌,酵母菌在有氧呼吸產(chǎn)生CO2;但不產(chǎn)生酒精,A錯誤;
B;切片后對發(fā)酵液進行消毒;防止雜菌污染,再進行分組,B正確;
C;壓榨倒罐用于主發(fā)酵需保留空間以促進酵母菌的有氧呼吸;二次倒罐時菌種是進行無氧呼吸,C錯誤;
D;主發(fā)酵先有氧促進酵母菌大量繁殖;后無氧進行酒精發(fā)酵,后發(fā)酵要控制無氧,D錯誤。
故選ACD。12、A:C:D【分析】【分析】
參與果酒制作的微生物是酵母菌;其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣;糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>
【詳解】
A;酵母菌是兼性厭氧型微生物;所以發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進酵母菌進行有氧呼吸,大量增殖,A正確;
B;酒精是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物;在酵母菌細胞的細胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生,可以用酸性重鉻酸鉀試劑檢測酒精的產(chǎn)生,B錯誤;
C;酒變酸是醋酸桿菌發(fā)酵的結(jié)果;墨塔釀酒反成醋的原因可能是:發(fā)酵裝置密封不嚴,發(fā)酵裝置沒有清洗干凈,導(dǎo)致醋酸菌混入發(fā)酵液中,C正確;
D;在釀酒的過程中;糖類即使未耗盡,酵母菌的發(fā)酵過程也會停止,原因可能是pH降低和酒精含量增多,對發(fā)酵起抑制作用,導(dǎo)致酵母菌發(fā)酵停止,D正確;
故選ACD。三、填空題(共5題,共10分)13、略
【解析】①.動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動物細胞融合與單克隆抗體14、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】基因重組基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)人們意愿某種基因修飾改造另一種生物細胞里定向15、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】30~3516、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】噬菌體、動植物病毒17、略
【分析】【詳解】
要提高酶的熱穩(wěn)定性,可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸,改善其功能,需要從改造控制該酶合成的基因著手,具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?!窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸,提高該酶的熱穩(wěn)定性,從改造控制該酶合成的基因著手,具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共3題,共12分)18、A【分析】【詳解】
目前,基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面,例如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物;將植物花青素代謝相關(guān)的基因?qū)霠颗;ㄖ?,使其呈現(xiàn)自然界沒有的顏色,提高了觀賞價值;將外源生長素基因?qū)膈庺~體內(nèi),轉(zhuǎn)基因鯉魚生長速率加快等,所以正確。19、B【分析】【詳解】
基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程,通過改造和合成基因來改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)或制造出一種新的蛋白質(zhì),可見蛋白質(zhì)工程可以制造出自然界不存在的、但是能符合人類生產(chǎn)和生活需求的蛋白質(zhì),故說法錯誤。20、A【分析】【詳解】
生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。故該說法正確。五、實驗題(共4題,共40分)21、略
【分析】【分析】
單克隆抗體的制備:(1)制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞:向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原;然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細胞。(2)獲得雜交瘤細胞。①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合;②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞,該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。(3)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。(4)將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。(5)提取單克隆抗體:從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。(6)單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強,靈敏度高,能大量制備。
【詳解】
(1)抗體參與體液免疫;科研人員將纖維蛋白作為抗原注射到小鼠體內(nèi),激活體液免疫過程,制備出抗纖維蛋白的單克隆抗體(5B8)。該項技術(shù)為單克隆抗體的制備,屬于細胞工程范疇,即B正確,ACD錯誤。
故選B。
(2)制備抗纖維蛋白的單克隆抗體5B8的基本技術(shù)流程為:先從注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲取的相應(yīng)的B細胞(能產(chǎn)生特定的抗體)與小鼠的骨髓瘤細胞融合獲得雜交細胞;用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選;獲得雜交瘤細胞;對雜交瘤細胞進行克隆和抗體檢測,獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;獲得的雜交瘤細胞在體外環(huán)境或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng);然后從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體5B8。
(3)①活性氧(ROS)是氧分子正常代謝的副產(chǎn)物;NADPH氧化酶是催化細胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的主要酶。由于細胞中GAPDH蛋白表達量穩(wěn)定且含量豐富,在實驗中可作為標準參照,排除實驗操作等無關(guān)變量對結(jié)果的影響。
②對比1和2組檢測結(jié)果;細胞中NADPH氧化酶和ROS的含量升高,說明纖維蛋白提高了吞噬細胞中NADPH氧化酶和ROS的含量,使其對神經(jīng)元產(chǎn)生毒害。通過對比1;2、3組結(jié)果發(fā)現(xiàn),經(jīng)5B8處理后,NADPH氧化酶和ROS的含量會下降,說明5B8能減輕纖維蛋白對NADPH氧化酶和ROS的含量的影響,使兩種物質(zhì)含量下降。
③由第②題可知;經(jīng)5B8處理后,NADPH氧化酶和ROS的含量會下降,說明單克隆抗體588與纖維蛋白結(jié)合,可以降低吞噬細胞NADPH氧化酶的量,進而降低ROS產(chǎn)量,從而減小對神經(jīng)元的傷害,因此單克隆抗體5B8對多發(fā)性硬化癥有明顯療效。
【點睛】
本題考查單克隆抗體的制備過程和抗纖維蛋白的單克隆抗體(5B8)的作用機理,意在考查考生對所學(xué)知識的理解和應(yīng)用能力?!窘馕觥靠乖w液B相應(yīng)的B淋巴細胞;選擇培養(yǎng)基無關(guān)變量(如實驗操作等)1和2提高吞噬細胞中NADPH氧化酶和ROS的含量1、2、3組(2、3組)減輕纖維蛋白對NADPH氧化酶和ROS含量的影響,使兩種物質(zhì)含量下降單克隆抗體5B8與纖維蛋白結(jié)合,可以降低吞噬細胞NADPH氧化酶的量,進而降低ROS產(chǎn)量,從而減小對神經(jīng)元的傷害,起到治療多發(fā)性硬化癥的作用。22、略
【分析】豆豉的制作原理與腐乳的制作類似:起主要作用的是真菌中的毛霉;適宜溫度為15℃~18℃;毛霉能夠產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶,將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸;甘油和脂肪酸。
【詳解】
(1)黃豆煮熟的目的主要破壞黃豆內(nèi)部結(jié)構(gòu);使蛋白質(zhì)變性,淀粉達到糊化程度,易于水解,同時可起到滅菌的作用,冷卻后再接種的原因是防止高溫殺死菌種;
(2)發(fā)酵裝置的上層含氧量比較高;發(fā)酵裝置內(nèi)上層黃豆的發(fā)酵效果比底層好,說明該發(fā)酵菌是需氧菌,其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型;
(3)鹽能抑制微生物生長所以制作豆豉過程中要加入適量的鹽;避免變質(zhì);
(4)大豆到豆豉的過程中;主要利用毛霉;曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用,所以其中最顯著的變化是蛋白質(zhì)被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸;
(5)腐乳的制作過程也是利用了毛霉;曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用;毛霉、曲霉等微生物都是真核生物。
【點睛】
本題考查了豆豉制作的相關(guān)知識,要求考生能夠識記豆豉制作的原理;能夠利用酶的專一性解答蛋白酶和脂肪酶作用的產(chǎn)物是解答本題的關(guān)鍵?!窘馕觥科茐拇蠖箖?nèi)部分子結(jié)構(gòu),使蛋白質(zhì)適度變性,淀粉達到糊化程度,易于水解,同時可起到滅菌的作用防止高溫殺死菌種好氧菌抑制微生物生長蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變成氨基酸和肽。腐乳真核23、略
【分析】【分析】
為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物;實驗所配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理;可將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間,以檢測培養(yǎng)基的滅菌效果,若培養(yǎng)基中無菌落長出,說明培養(yǎng)基的滅菌是合格的;在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。
【詳解】
(1)①馬鈴薯中含有淀粉;蛋白質(zhì)和無機鹽等物質(zhì);故培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供碳源、氮源、無機鹽等營養(yǎng)成分;
培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性;培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性,即培養(yǎng)蟬擬青霉的培養(yǎng)基的自然pH為酸性范圍。
②氯霉素等抗生素可以通過抑制肽聚糖(細菌細胞壁的主要成分)的合成來抑制細菌的生長;而對真菌的生長無影響。為了便于篩選蟬擬青霉(真菌)菌株,培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制細菌的生長,該培養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。
③為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物;配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理;將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間,若培養(yǎng)基中無菌落長出,說明固體培養(yǎng)基的滅菌是合格的。
(2)蟬擬青霉的分離純化:由(1)的題干信息可知;PDA為固體培養(yǎng)基,在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。
(3)根據(jù)題意“蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體,內(nèi)含蟲草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”,并結(jié)合表格信息可知,發(fā)酵菌絲體中各種活性成分的含量明顯高于天然蟬花,故能用發(fā)酵菌絲體來替代天然蟬花?!窘馕觥?1)碳源;氮源、無機鹽酸細菌選擇殺滅培養(yǎng)基中的微生物將滅菌的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間;觀察是否長出菌落。
(2)平板劃線(稀釋涂布平板)
(3)能發(fā)酵菌絲體活性成分的含量明顯高于天然蟬花24、略
【分析】【分析】
1;基因工程的四個步驟:目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。
2、在基因工程操作中,常用原核生物作為受體細胞,其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2+處理大腸桿菌細胞;使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),然后再將重組的基因表達載體導(dǎo)入其中。
【詳解】
(1)利用RNA通過①過程(逆轉(zhuǎn)錄)獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶;已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA(多聚腺嘌呤核糖核苷酸)保護尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈;新鏈與模板鏈反向平行,由于新鏈只能由5'端向3'端延伸,所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA(多聚腺嘌呤核糖核苷酸)互補配對,即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物;設(shè)計引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
(2)對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時;引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接,應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因,由圖可知,使用EcoRI酶會破環(huán)SSB基因,故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點。
(3)由題圖分析可知:質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因,由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因,所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長,③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時,需要用Ca2+處理大腸桿菌;目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài),然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基(A)上培養(yǎng),待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基(B)上培養(yǎng),收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的菌落進一步純化后將菌體破碎處理,經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。
(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性,如果該蛋白有抗原性,會引起機體的免疫反應(yīng),產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實驗內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體,利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體?!窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
(2)5’BamHⅠ和XhoI
(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的。
(4)提取其中的抗體,利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體六、綜合題(共2題,共6分)25、略
【分析】【分析】
基因自由組合定律:位于非同源染色體上的非等位基因的分離或組合是互不干擾的;在減數(shù)分裂過程中;同源染色體上的等位基因彼此分離的同時,非同源染色體上的非等位基因自由組合。
啟動子:是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點;用于驅(qū)動RNA轉(zhuǎn)錄。
【詳解】
(1)①雜交實驗Ⅰ結(jié)果中F2總和為16,性狀分離比為9:3:4,為9:3:3:1的變式,可推測小豆種皮的顏色(紅色、綠色和褐色)是由2對或2對以上等位基因控制。雜交實驗Ⅱ的F2的結(jié)果總和為16,也為9:3:3:1
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