2025年粵人版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年粵人版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷815考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、單克隆抗體可抑制病毒對(duì)宿主細(xì)胞的侵染。下列關(guān)于單抗制備的敘述錯(cuò)誤的是（）A.單克隆抗體制備時(shí)，需要給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射某種抗原B.給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射抗原后，相應(yīng)抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性說(shuō)明發(fā)生了體液免疫C.單抗的制備過(guò)程中需用到DNA分子雜交技術(shù)和抗原一抗體雜交技術(shù)D.動(dòng)物體內(nèi)存在很多種漿細(xì)胞，每種漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體2、下列說(shuō)法中正確的是（）A.將大豆種子用60Co處理后，篩選出一株雜合子抗病植株連續(xù)自交若干代，則其純合抗病植株的比例逐代下降B.抗蟲(chóng)小麥與矮稈小麥雜交，通過(guò)基因重組獲得抗蟲(chóng)矮稈小麥，此實(shí)踐活動(dòng)包含基因工程技術(shù)C.育種專(zhuān)家在稻田中發(fā)現(xiàn)一株十分罕見(jiàn)的“一稈雙穗”植株，經(jīng)鑒定該變異性狀是由基因突變引起的，將該株水稻的花粉離體培養(yǎng)后即可獲得穩(wěn)定遺傳的高產(chǎn)品系D.最簡(jiǎn)捷的育種方法是雜交育種，快速育種時(shí)常選用單倍體育種3、下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.以根尖、莖尖為材料利用組織培養(yǎng)技術(shù)可獲得具有抗病毒的新品種B.單倍體育種過(guò)程中的某個(gè)階段用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)C.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得人參皂甙，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)D.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“白菜-甘藍(lán)”，打破了生殖隔離，實(shí)現(xiàn)了遠(yuǎn)緣雜交4、下列有關(guān)微生物培養(yǎng)或純化的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.微生物在培養(yǎng)前要先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種B.培養(yǎng)液中溶氧量的變化會(huì)影響酵母菌的繁殖和代謝途徑C.分離自養(yǎng)型微生物的方法是用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)D.分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法5、如圖表示某動(dòng)物的卵子的發(fā)生過(guò)程，與此相關(guān)的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.圖中A是第一極體，B是合子，C是受精B.不同動(dòng)物排出的卵子所處細(xì)胞時(shí)期可能不同C.圖中②是減數(shù)第一次分裂，③④是減數(shù)第二次分裂D.當(dāng)觀察到兩個(gè)極體時(shí)，可以表明卵子已經(jīng)完成了受精評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)6、2020年7月20日，國(guó)際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗(yàn)的成果。該試驗(yàn)是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團(tuán)隊(duì)開(kāi)展的研究，試驗(yàn)中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗(yàn)結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護(hù)”，將新冠病毒“拒之門(mén)外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過(guò)檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗7、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是兩種常見(jiàn)的工具酶，它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)依次為G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA獲得目的基因，用BglⅡ切割質(zhì)粒，并連接得到重組質(zhì)粒。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.酶切過(guò)程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時(shí)間等因素B.目的基因經(jīng)BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGC.分別用兩種限制酶切割，保證了目的基因定向插入質(zhì)粒D.經(jīng)兩種酶處理得到的重組質(zhì)粒不能再被這兩種酶所識(shí)別8、細(xì)菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細(xì)菌的競(jìng)爭(zhēng)中占優(yōu)勢(shì)，其中tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細(xì)菌X及其不同突變體進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)：在固體培養(yǎng)基表面放置一張能隔離細(xì)菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養(yǎng)后，對(duì)上、下層菌計(jì)數(shù)得到如圖結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.實(shí)驗(yàn)中的培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基和濾膜均需要進(jìn)行滅菌處理B.對(duì)上、下層菌計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)采用稀釋涂布平板法而不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)C.由甲、乙、丙三組結(jié)果可推測(cè)tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性D.野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體和tcel突變體的競(jìng)爭(zhēng)中均占優(yōu)勢(shì)9、甲流試劑盒中的抗血凝素單克隆抗體能與甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特異性結(jié)合，發(fā)揮診斷作用。利用小鼠制備抗HA單克隆抗體的流程如圖，下列敘述正確的是（）

A.制備抗HA單克隆抗體使用的B淋巴細(xì)胞取自注射過(guò)HA的小鼠脾臟B.在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡C.放入96孔板的細(xì)胞為多種雜交瘤細(xì)胞，均能產(chǎn)生所需抗體D.將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體10、生物技術(shù)的飛速發(fā)展在安全性和倫理道德方面引發(fā)了許多爭(zhēng)論，你認(rèn)為下列說(shuō)法哪些是正確的？（）A.科學(xué)家要對(duì)自己的科學(xué)研究負(fù)責(zé)，對(duì)社會(huì)負(fù)責(zé)B.科學(xué)家應(yīng)向公眾傳播科學(xué)知識(shí)C.公眾應(yīng)該理性地、負(fù)責(zé)任地對(duì)待這些問(wèn)題D.公眾可以根據(jù)自己的價(jià)值觀采取不同的態(tài)度11、新冠肺炎的發(fā)生使我們對(duì)病毒的威力有了深刻體會(huì)，所以更要禁止生物武器，面對(duì)一切可能的生物武器的威脅，我們絕不能掉以輕心！下列關(guān)于禁止生物武器的敘述，正確的是（）A.第二次世界大戰(zhàn)中，侵華日軍在我國(guó)多個(gè)地區(qū)使用過(guò)細(xì)菌武器，給我國(guó)人民帶來(lái)很大苦難B.生物武器相對(duì)容易獲得，也便于攜帶和釋放，一旦被恐怖組織利用，將產(chǎn)生極大的危害C.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以制造各種新型致病菌，這些致病菌可以讓大批感染者突然發(fā)病，而又無(wú)藥可醫(yī)D.1975年3月《禁止生物武器公約》生效，清除生物武器威脅，防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面12、玉米秸稈轉(zhuǎn)化為綠色能源酒精是解決能源危機(jī)的措施之一，具體的工藝流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.用酸或堿預(yù)處理有利于酶與底物充分接觸，提高催化效率B.步驟③中，酵母菌在發(fā)酵初期更多分布在發(fā)酵液的上層C.隨培養(yǎng)次數(shù)的增加，分離出的菌落類(lèi)型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定D.發(fā)酵過(guò)程中酒精濃度升高會(huì)抑制酵母菌代謝活動(dòng)，同時(shí)使發(fā)酵液pH降低，發(fā)酵停止13、下列說(shuō)法中不正確的是（）A.蛋白質(zhì)工程和基因工程的目的都是獲得人類(lèi)需要的蛋白質(zhì)，所以?xún)烧邲](méi)有區(qū)別B.基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)C.通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)仍然是天然的蛋白質(zhì)D.蛋白質(zhì)工程是在蛋白質(zhì)分子水平上直接改造蛋白質(zhì)評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)14、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________15、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。16、本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會(huì)使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基______________來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。17、醋酸菌是一種____________細(xì)菌。醋酸生成反應(yīng)式是_____________________。18、PCR技術(shù)的DNA體外復(fù)制環(huán)境有DNA解旋酶、耐熱DNA聚合酶、DNA母鏈、4種脫氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能夠從引物的________端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為_(kāi)___個(gè)核苷酸。19、DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，二苯胺要___________。20、在日常生活中，我們還遇到哪些有關(guān)生物技術(shù)安全與倫理問(wèn)題？我們能基于所學(xué)生物學(xué)知識(shí)參與這些問(wèn)題的討論嗎？嘗試舉一個(gè)實(shí)例加以說(shuō)明______。21、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________22、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評(píng)卷人得分四、判斷題(共3題，共30分)23、植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性。()A.正確B.錯(cuò)誤24、我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯(cuò)誤25、轉(zhuǎn)入油菜的抗除草劑基因，可能通過(guò)花粉傳入環(huán)境中。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)26、普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱；有人將地衣芽孢桿菌的a-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過(guò)程如圖甲所示）。請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）圖甲中為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以______________作為唯一碳源。②③過(guò)程需重復(fù)幾次，目的是______________。

（2）某同學(xué)嘗試過(guò)程③的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是_____________；推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是___________________________。

（3）以淀粉為原料，用等量的工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵一段時(shí)間，接種_____________菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是______________。

（4）用凝膠色譜法分離a-淀粉酶時(shí)，在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量較_____________。27、某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細(xì)胞；需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目為40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。

回答下列問(wèn)題：

（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)___________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外，可能還有________，體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是________________。

（3）雜交瘤細(xì)胞中有______個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_________條。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_____________________。28、炭疽；是一種由炭疽芽孢桿菌引起的人獸共患性傳染病，也是我國(guó)規(guī)定的乙類(lèi)傳染病?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問(wèn)題：

(1)人通常是通過(guò)接觸患炭疽的動(dòng)物或動(dòng)物制品被感染，皮膚炭疽病在人類(lèi)炭疽病中最為常見(jiàn)，這類(lèi)患者的皮膚滲出物中含有炭疽芽孢桿菌。皮膚炭疽病疑似患者就醫(yī)時(shí)，醫(yī)生先要取患者的皮膚滲出物稀釋后涂布到固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)獲得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培養(yǎng)基上的菌落進(jìn)行如圖所示實(shí)驗(yàn)（注：實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽芽孢桿菌）。

①該實(shí)驗(yàn)的目的是_____。

②對(duì)照組試管中應(yīng)加入_____，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中為避免雜菌污染進(jìn)行的操作包括_____（至少寫(xiě)出兩點(diǎn)）。

③實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_(kāi)____時(shí)；表明該疑似患者被炭疽芽孢桿菌感染。

④實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需將錐形瓶固定在搖床上，在35℃下振蕩培養(yǎng)24h，直至液體培養(yǎng)基變渾濁。振蕩培養(yǎng)說(shuō)明炭疽芽孢桿菌的代謝類(lèi)型是_____，振蕩培養(yǎng)的目的是_____。液體培養(yǎng)基變渾濁的原因是_____。

(3)對(duì)炭疽芽孢桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，選用10-4、10-5、10-6三個(gè)稀釋度的菌液，各取0．2mL涂布，每個(gè)稀釋度作三次重復(fù)，經(jīng)24h恒溫培養(yǎng)后結(jié)果如表。稀釋度10-410-510-6平板編號(hào)A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落數(shù)31529830245535112911

由表可知，最適合計(jì)數(shù)的稀釋度為_(kāi)____，原因是_____。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共18分)29、將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中；可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉，其過(guò)程如下圖所示（注：農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中）。

（1）過(guò)程①需用同種____________酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。為將過(guò)程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)，應(yīng)使用_________________培養(yǎng)基。

（2）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓____________進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是_____________。

（3）若過(guò)程④僅獲得大量的根，則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加_____________以獲得芽；部分接種在無(wú)激素培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根，原因是________________________。

（4）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲(chóng)性狀，常用方法是________________。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉能減少__________________的使用，以減輕環(huán)境污染。30、中國(guó)甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關(guān)鍵酶基因（PDC）密切相關(guān)；推測(cè)澀味程度可能與PDC基因的表達(dá)情況有關(guān)。

（1）啟動(dòng)子位于基因首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，同時(shí)啟動(dòng)子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結(jié)合位點(diǎn)，RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的___________。

（2）為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白；科研人員進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)。

①PDC基因的啟動(dòng)子序列未知，為獲得大量該基因啟動(dòng)子所在片段，可利用限制酶將基因組DNA進(jìn)行酶切，然后在___________的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游，根據(jù)___________和PDC基因編碼序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR．利用質(zhì)粒A(圖1）構(gòu)建含有PDC基因啟動(dòng)子片段的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入代謝缺陷型酵母菌，用不含___________的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。

②質(zhì)粒G(圖2）上的AD基因表達(dá)出的AD蛋白與啟動(dòng)子足夠靠近時(shí)，能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄，因此需獲得待測(cè)蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選?？蒲腥藛T從中國(guó)甜柿中提取RNA，將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導(dǎo)入酵母菌，此時(shí)應(yīng)選擇質(zhì)粒G中的位點(diǎn)______（填序號(hào)1~5）作為cDNA的插入位點(diǎn)；最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。

③重組酵母Y187與Y1H能夠進(jìn)行接合生殖，形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔(dān)子素的培養(yǎng)基中生存，則推測(cè)待測(cè)蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白，請(qǐng)結(jié)合圖示闡述作出該推測(cè)的理由______。

31、特異性重組的Cre/loxP敲除系統(tǒng)是首先利用同源重組將基因組上的靶基因替換為兩端帶有重組位點(diǎn)loxP的karR基因，然后由重組酶Cre識(shí)別loxP位點(diǎn)并發(fā)生重組反應(yīng)，去除基因組上的karR基因，進(jìn)一步利用質(zhì)粒的溫敏特性將其消除，從而實(shí)現(xiàn)靶基因的敲除。下圖是研究人員利用Cre/loxP敲除系統(tǒng)敲除谷氨酸棒狀桿菌argR基因（精氨酸代謝的調(diào)控因子），獲得高產(chǎn)精氨酸菌株的過(guò)程，其中kanR是卡那霉素抗性基因；cat是氯霉素抗性基因，HindⅢ；BanHⅠ是限制酶。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(1)①過(guò)程的原料是_____，所需的酶是_____。

(2)下列引物1、引物2用于擴(kuò)增argR基因上游序列，引物3、引物4用于擴(kuò)增argR基因下游序列，下劃線序列是相關(guān)限制酶識(shí)別序列，則HindⅢ、BamHⅠ的識(shí)別序列分別是_____、_____。

引物1：5'-GTCGACGGTATCGAT____AGGACTCAAACTTATGACTTCACAACCA-3'

引物2：5-CGCCCTATAGTGAGTCGTATTGGGATTTAAGTTTTCCGGTGTTGACG-3'

引物3：5'-CTTTAGTGAGGGTTAATTGCGCGTTAATCGCTTGTTAATGCAGGCA-3'

引物4：5'-CGCTCTAGAACTAGT____CAAAGCCTCGTGAGCCTTAATC-3'

(3)②過(guò)程（融合PCR）是采用具有互補(bǔ)末端引物，形成具有重疊鏈的PCR引物，通過(guò)PCR引物重疊鏈的延伸，從而將不同來(lái)源的DNA片段連接起來(lái)。下列引物5、引物6用于擴(kuò)增兩端含loxP的karR片段，引物5、引物6可分別與_____、_____（引物1；引物2、引物3、引物4）重疊從而實(shí)現(xiàn)不同DNA片段的連接。

引物5：5'-CGTCAACACCGGAAAACTTAAATCCCAATACGACTCACTATAGGGCG-3'

引物6：5-TGCCTGCATTAACAAGCGATTAACGCGCAATTAACCCTCACTAAAG-3'

(4)④過(guò)程將質(zhì)粒3導(dǎo)入_____態(tài)谷氨酸棒狀桿菌，⑤過(guò)程在同源重組的作用下谷氨酸棒狀桿菌株的argR基因被替換為_(kāi)____片段。

(5)⑥過(guò)程導(dǎo)入質(zhì)粒4的目的是_____。

(6)由于質(zhì)粒4的溫敏特性，⑦過(guò)程先在37℃條件下培養(yǎng)消除質(zhì)粒4，然后用影印接種（A、B、C三個(gè)培養(yǎng)基中接種菌種的位置相同）培養(yǎng)驗(yàn)證其抗性，其結(jié)果如下圖，則_____是目的基因被敲除的目的菌株。

參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、C【分析】【分析】

在單克隆抗體的制備過(guò)程中使用的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；在單克隆抗體的制備過(guò)程中，在選擇培養(yǎng)基中有兩次篩選，第一次篩選的目的是選擇出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)；靈敏度高，并可大量制備。

【詳解】

A；為提高單抗制備成功率；往往需要多次給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射同一種抗原，A正確；

B；抗體是體液免疫產(chǎn)生；給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射抗原后，相應(yīng)抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，說(shuō)明發(fā)生了體液免疫，B正確；

C；基因工程中需用到DNA分子雜交技術(shù)和抗原-抗體雜交技術(shù)；單抗的制備過(guò)程中需用到抗原一抗體雜交技術(shù)，C錯(cuò)誤；

D；每種成熟的B細(xì)胞表面只有一種抗原受體；只能識(shí)別一種抗原，一種效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞）只能產(chǎn)生一種抗體，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

常見(jiàn)的育種方法總結(jié)：

1；雜交育種原理：基因重組（通過(guò)基因分離、自由組合或連鎖交換；分離出優(yōu)良性狀或使各種優(yōu)良性狀集中在一起）。

2；誘變育種原理：基因突變；方法：用物理因素（如X射線、γ射線、紫外線、激光等）或化學(xué)因素（如亞硝酸、硫酸二乙脂等）來(lái)處理生物，使其在細(xì)胞分裂間期DNA復(fù)制時(shí)發(fā)生差錯(cuò)，從而引起基因突變，舉例：太空育種、青霉素高產(chǎn)菌株的獲得。

3；單倍體育種原理：染色體變異；方法與優(yōu)點(diǎn)：花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，優(yōu)點(diǎn)：明顯縮短育種年限，原因是純合體自交后代不發(fā)生性狀分離。

4；多倍體育種：原理：染色體變異；方法：最常用的是利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗。秋水仙素能抑制有絲分裂時(shí)紡綞絲的形成，能得到染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞。如八倍體小黑麥的獲得和無(wú)籽西瓜的培育成功都是多倍體育種取得的成就。

5；基因工程育種原理：DNA重組技術(shù)（屬于基因重組范疇）方法：按照人們的意愿；把一種生物的個(gè)別基因復(fù)制出來(lái)，加以修飾改造，放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。操作步驟包括：提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)等。舉例：能分泌人類(lèi)胰島素的大腸桿菌菌株的獲得，抗蟲(chóng)棉，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等。

【詳解】

A、雜合子抗病植株連續(xù)自交若干代，雜合子在第n代所占比例為Fn=則其純合抗病植株的比例為（1-）1/2；其純合抗病植株的比例逐代上升，A錯(cuò)誤；

B；抗蟲(chóng)小麥與矮稈小麥雜交；通過(guò)基因重組獲得抗蟲(chóng)矮稈小麥，沒(méi)有用到基因工程技術(shù)，B錯(cuò)誤；

C；將該株水稻的花粉離體培養(yǎng)后還需誘導(dǎo)染色體加倍；再篩選才能獲得穩(wěn)定遺傳的高產(chǎn)品系，C錯(cuò)誤；

D；最簡(jiǎn)捷的育種方法是雜交育種；快速育種時(shí)常選用單倍體育種，D正確。

故選D。3、A【分析】【分析】

植物細(xì)胞工程：

（1）定義：細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后；仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。

（2）理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的全能性。

（3）在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中；并不是所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性，原因是在特定的時(shí)間和空間條件下，細(xì)胞中的基因會(huì)選擇性地表達(dá)。

（4）已分化細(xì)胞全能表達(dá)的條件：離體；一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等。

【詳解】

A；植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖、根尖）的病毒極少；甚至無(wú)病毒，所以切取一定大小的莖尖或根尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗，而不是抗病毒的品種，A錯(cuò)誤；

B；單倍體育種過(guò)程包括花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理兩個(gè)階段；其中在花藥離體培養(yǎng)中用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，B正確；

C；利用人參細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)人參中重要的活性成分；利用的技術(shù)是植物細(xì)胞培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，C正確；

D；由于不同物種之間存在生殖隔離；傳統(tǒng)的有性雜交只能在同種生物之間進(jìn)行，可利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，培育成新植物體，例如“白菜-甘藍(lán)”，這樣打破了不同物種之間存在的生殖隔離，實(shí)現(xiàn)了遠(yuǎn)緣雜交育種，D正確；

故選A。4、C【分析】【分析】

1；涂布平板法：將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液；盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開(kāi)，使成單個(gè)細(xì)胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，并讓其成長(zhǎng)為單菌落的方法。

【詳解】

A；微生物培養(yǎng)前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基先滅菌再接種；以防培養(yǎng)基被污染，A正確；

B；酵母菌既能進(jìn)行有氧呼吸也能進(jìn)行無(wú)氧呼吸；在有氧呼吸條件下大量繁殖，故溶氧量的變化會(huì)影響酵母菌的繁殖和代謝途徑，B正確；

C；用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基是用來(lái)分離纖維素分解菌的；分離自養(yǎng)型微生物要用不加有機(jī)碳源的培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；

D；篩選分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；常以菌落的特性來(lái)篩選鑒別微生物，D正確。

故選C。5、C【分析】【分析】

由圖分析可知：①為減數(shù)第一次分裂前的間期；完成DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成；③表示減數(shù)第一次分裂，形成的子細(xì)胞為次級(jí)卵母細(xì)胞和極體；④為減數(shù)第二次分裂，在受精過(guò)程中，次級(jí)卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂，并排出第二極體。A為第一極體，B為合子，C為受精作用過(guò)程。

【詳解】

A；圖中③為減數(shù)第一次分裂；④為減數(shù)第二次分裂，在受精過(guò)程中，次級(jí)卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂，因此C是受精過(guò)程，B是合子，A正確；

B；不同動(dòng)物排出的卵子所處細(xì)胞時(shí)期可能不同；如馬、犬排出的卵子可能是初級(jí)卵母細(xì)胞，豬、羊排出的卵子可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，B正確；

C；圖中③為減數(shù)第一次分裂；④為減數(shù)第二次分裂，C錯(cuò)誤；

D；當(dāng)觀察到兩個(gè)極體時(shí)；表明卵子已完成了受精作用，D正確。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)6、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過(guò)體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱(chēng)為亞單位疫苗；是通過(guò)基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱(chēng)基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過(guò)正常的人體生理活動(dòng)產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進(jìn)行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；主要通過(guò)檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。7、B:C【分析】【分析】

關(guān)于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：（1）來(lái)源：主要從原核生物中分離純化出來(lái)。（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；影響酶促反應(yīng)的因素有溫度、pH、酶濃度、底物濃度等；因此酶切過(guò)程中，需控制好酶濃度、溫度和反應(yīng)時(shí)間等因素，A正確；

B；根據(jù)題意可知；限制酶BamHⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)為G↓GATCC，因此目的基因經(jīng)BamHI切割后形成的黏性末端是是-GATC或CTAG-，B錯(cuò)誤；

C；由于這兩種酶切割形成的黏性末端相同；因此分別用這兩種限制酶切割，不能保證目的基因定向插入質(zhì)粒，C錯(cuò)誤；

D；經(jīng)兩種酶處理得到的重組質(zhì)粒的相應(yīng)部位的序列不能再被這兩種酶識(shí)別；D正確。

故選BC。

【點(diǎn)睛】8、A:B:C【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；為避免雜菌的污染；實(shí)驗(yàn)中的濾膜、培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基等均需滅菌處理，A正確；

B；對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法是稀釋涂布平板法；具體方法是：先將菌體進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)偻坎嫉綖V膜的表面，待菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù)，不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)的原因是顯微鏡直接計(jì)數(shù)不能區(qū)分死菌和活菌，B正確；

C；tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白；乙組中野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel-tcil雙突變體，后者無(wú)法產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在競(jìng)爭(zhēng)中占據(jù)優(yōu)勢(shì)；而在丙組中，野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel突變體，后者可以產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生長(zhǎng)受到抑制，由此推測(cè)，tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性，C正確；

D；由甲組、乙組可知；野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體的競(jìng)爭(zhēng)中均占優(yōu)勢(shì)，由甲組、丙組可知，野生型細(xì)菌X在與tcel突變體的競(jìng)爭(zhēng)中不占優(yōu)勢(shì)，D錯(cuò)誤。

故選ABC。9、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗原與抗體的結(jié)合具有特異性；為制備抗HA單克隆抗體，則使用的B淋巴細(xì)胞應(yīng)取自注射過(guò)HA的小鼠脾臟，A正確；

B；在特定的選擇培養(yǎng)基上；未融合的親本細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞類(lèi)型、骨髓瘤細(xì)胞類(lèi)型）和融合的具有同種核的細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞型和骨髓瘤-骨髓瘤細(xì)胞型）都會(huì)死亡，B正確；

C；將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后；放入96孔板，不一定都能產(chǎn)生所需抗體，還需進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)圖可知；圖中細(xì)胞群a在加入HA抗原后呈陽(yáng)性，說(shuō)明細(xì)胞群a產(chǎn)生了抗HA抗原的抗體，故將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體，D正確。

故選ABD。10、A:B:C【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的正確做法是趨利避害；不能因噎廢食.

2；對(duì)生物技術(shù)中的倫理問(wèn)題的爭(zhēng)論；中國(guó)政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆人.

【詳解】

A；科學(xué)家要對(duì)自己的科學(xué)研究負(fù)責(zé)；對(duì)社會(huì)負(fù)責(zé)，重視轉(zhuǎn)基因生物的安全性等問(wèn)題，A正確；

B；科學(xué)家應(yīng)向公眾傳播科學(xué)知識(shí)；使人們正確認(rèn)識(shí)生物技術(shù)的安全性和倫理道德問(wèn)題，B正確；

C；公眾應(yīng)科學(xué)理性地對(duì)待轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品等生物技術(shù)問(wèn)題；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食，C正確；

D；公眾應(yīng)該理性地、負(fù)責(zé)任地對(duì)待這些問(wèn)題；不可以根據(jù)自己的價(jià)值觀采取不同的態(tài)度，D錯(cuò)誤。

故選ABC。11、A:B:C:D【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；中國(guó)政府：禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆人。

3；生物武器種類(lèi)：包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過(guò)食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

AB；生物武器致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣；第二次世界大戰(zhàn)中，侵華日軍在我國(guó)多個(gè)地區(qū)使用過(guò)細(xì)菌武器，給我國(guó)人民帶來(lái)很大苦難，他們的種種暴行遭到國(guó)際輿論的一致譴責(zé)。一些恐怖組織或個(gè)人在試圖尋找各種大規(guī)模殺傷性武器，而生物武器相對(duì)容易獲得，也便于攜帶和釋放，一旦被他們利用，將產(chǎn)生極大的危害，AB正確；

C；利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以制造各種新型致病菌；這些人類(lèi)沒(méi)有接觸過(guò)的致病菌可以讓大批感染者突然發(fā)病，而又無(wú)藥可醫(yī)，C正確；

D；1975年3月《禁止生物武器公約》生效；清除生物武器威脅，防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面，徹底銷(xiāo)毀生物武器是全世界愛(ài)好和平的人民的共同期望，D正確。

故選ABCD。12、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精是利用微生物進(jìn)行生物發(fā)酵的過(guò)程；所利用的微生物為酵母菌，通過(guò)酒精發(fā)酵將葡萄糖轉(zhuǎn)化為酒精，玉米秸稈中含有的糖類(lèi)主要是纖維素，因此需要先將纖維素水解成葡萄糖，再進(jìn)行發(fā)酵。

【詳解】

A；由于纖維素組成成分復(fù)雜、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；生物降解時(shí)難以迅速進(jìn)行，常用酸或堿進(jìn)行預(yù)處理，初步打斷纖維素內(nèi)部的化學(xué)鍵，降低聚合度，利于酶與底物充分接觸，提高催化效率，A正確；

B；在有氧的條件下酵母菌進(jìn)行出芽生殖；上層培養(yǎng)液與空氣接觸部位氧氣較多，短時(shí)間內(nèi)酵母菌更多分布在發(fā)酵液的上層，B正確；

C；在選擇培養(yǎng)基中經(jīng)多次培養(yǎng)；分離出的菌落類(lèi)型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定，C正確；

D、發(fā)酵液pH下降是因?yàn)楫a(chǎn)生了CO2；D錯(cuò)誤。

故選ABC。13、A:C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程和基因工程的區(qū)別。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程和基因工程的目的都是獲得人類(lèi)需要的蛋白質(zhì)；但是二者有區(qū)別，蛋白質(zhì)工程可以獲得自然界中不存在的蛋白質(zhì)，而基因工程獲得的蛋白質(zhì)是自然界中已有的，A錯(cuò)誤；

B；蛋白質(zhì)工程可以看做是第二代基因工程；因此，基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)，B正確；

C；通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)不再是天然的蛋白質(zhì)；C錯(cuò)誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是蛋白質(zhì)；但對(duì)蛋白質(zhì)的改造需要通過(guò)改造相應(yīng)基因的結(jié)構(gòu)來(lái)實(shí)現(xiàn)，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共9題，共18分)14、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快揮發(fā)15、略

【解析】①.接種②.平板劃線法③.稀釋涂布平板法16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2種引物DNA或RNA20—3019、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用20、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到的有關(guān)生物技術(shù)安全與倫理問(wèn)題有：生殖性克隆人倫理問(wèn)題；試管嬰兒與設(shè)計(jì)試管嬰兒倫理問(wèn)題、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性與倫理問(wèn)題和生物武器的安全性等。

例如轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性：轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性的爭(zhēng)議；主要集中在兩個(gè)方面，一是對(duì)人是否安全，二是對(duì)環(huán)境的影響。

對(duì)人的安全方面；支持轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為投放市場(chǎng)的轉(zhuǎn)基因作物都是經(jīng)過(guò)充分實(shí)驗(yàn)的，被改變的基因僅限于增加作物的抗?。豢篂?zāi)害能力，并且在北美地區(qū)轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)使用的很多年，可以說(shuō)現(xiàn)在美國(guó)加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉(zhuǎn)基因食品長(zhǎng)大的；反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因食品有害，他們的證據(jù)主要是一位科學(xué)家的實(shí)驗(yàn)證明，用轉(zhuǎn)基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問(wèn)題是這個(gè)實(shí)驗(yàn)只成功過(guò)一次，后來(lái)別的科學(xué)家在相同的條件下都沒(méi)能再現(xiàn)這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

在環(huán)境方面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的爭(zhēng)議是最大的；也是歐洲人反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的重要依據(jù)，反對(duì)人持有的觀點(diǎn)是，通過(guò)改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲(chóng)害和其他災(zāi)害的植物，這種技術(shù)如果失去控制可能會(huì)把農(nóng)作物改造成適應(yīng)性極強(qiáng)的超級(jí)植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)地位，但轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的超級(jí)植物可能會(huì)打破自然平衡而泛濫成災(zāi)。

倫理問(wèn)題：由于轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進(jìn)行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預(yù)見(jiàn),這就使轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新呈現(xiàn)前所未有的復(fù)雜性,并不可避免地會(huì)引發(fā)很多全新的社會(huì)倫理問(wèn)題,引出種種有關(guān)生物科學(xué)家的道德責(zé)任和學(xué)術(shù)自由的哲學(xué)爭(zhēng)論。在轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新中,功利主義的預(yù)設(shè)和學(xué)術(shù)自由的主張必須以人類(lèi)的價(jià)值、尊嚴(yán)和社會(huì)公正為前提條件。相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)家必須擔(dān)當(dāng)起必要的道德責(zé)任,把握好倫理橫桿,以促使轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新沿著科學(xué)的軌道健康發(fā)展?！窘馕觥吭谌粘Ｉ钪校晃覀冇龅降挠嘘P(guān)生物技術(shù)安全與倫理問(wèn)題有：生殖性克隆人倫理問(wèn)題；試管嬰兒與設(shè)計(jì)試管嬰兒倫理問(wèn)題、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性與倫理問(wèn)題和生物武器的安全性等。

例如轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性：轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性的爭(zhēng)議；主要集中在兩個(gè)方面，一是對(duì)人是否安全，二是對(duì)環(huán)境的影響。

對(duì)人的安全方面；支持轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為投放市場(chǎng)的轉(zhuǎn)基因作物都是經(jīng)過(guò)充分實(shí)驗(yàn)的，被改變的基因僅限于增加作物的抗??；抗災(zāi)害能力，并且在北美地區(qū)轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)使用的很多年，可以說(shuō)現(xiàn)在美國(guó)加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉(zhuǎn)基因食品長(zhǎng)大的；反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因食品有害，他們的證據(jù)主要是一位科學(xué)家的實(shí)驗(yàn)證明，用轉(zhuǎn)基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問(wèn)題是這個(gè)實(shí)驗(yàn)只成功過(guò)一次，后來(lái)別的科學(xué)家在相同的條件下都沒(méi)能再現(xiàn)這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

在環(huán)境方面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的爭(zhēng)議是最大的；也是歐洲人反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的重要依據(jù)，反對(duì)人持有的觀點(diǎn)是，通過(guò)改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲(chóng)害和其他災(zāi)害的植物，這種技術(shù)如果失去控制可能會(huì)把農(nóng)作物改造成適應(yīng)性極強(qiáng)的超級(jí)植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)地位，但轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的超級(jí)植物可能會(huì)打破自然平衡而泛濫成災(zāi)。

倫理問(wèn)題：由于轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進(jìn)行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預(yù)見(jiàn),這就使轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新呈現(xiàn)前所未有的復(fù)雜性,并不可避免地會(huì)引發(fā)很多全新的社會(huì)倫理問(wèn)題,引出種種有關(guān)生物科學(xué)家的道德責(zé)任和學(xué)術(shù)自由的哲學(xué)爭(zhēng)論。在轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新中,功利主義的預(yù)設(shè)和學(xué)術(shù)自由的主張必須以人類(lèi)的價(jià)值、尊嚴(yán)和社會(huì)公正為前提條件。相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)家必須擔(dān)當(dāng)起必要的道德責(zé)任,把握好倫理橫桿,以促使轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新沿著科學(xué)的軌道健康發(fā)展。21、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記22、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共3題，共30分)23、B【分析】【詳解】

植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)，最終獲得了完整的植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，而植物細(xì)胞培養(yǎng)的目的使獲得大量的植物細(xì)胞，從而獲得次生代謝物，利用的原理是細(xì)胞增殖，故錯(cuò)誤。24、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。

該說(shuō)法正確。25、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，則可能通過(guò)減數(shù)分裂進(jìn)入到花粉細(xì)胞中，進(jìn)而傳入環(huán)境中的其他生物體內(nèi)。本說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)26、略

【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖甲為可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種的培育過(guò)程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，是基因工程的關(guān)鍵步驟；②③表示分離純化工程酵母菌菌種。乙圖為稀釋涂布平板法得到的菌落，但是其菌落沒(méi)有均勻分布，說(shuō)明其涂布是不均勻的。

【詳解】

（1）該實(shí)驗(yàn)的目的是獲得可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種；因此其培養(yǎng)基應(yīng)該以淀粉為唯一碳源；②；③過(guò)程為分離純化工程酵母菌菌種，多次重復(fù)篩選可以提高分解淀粉能力強(qiáng)的工程酵母菌菌種的純度。

（2）圖乙顯示平板培養(yǎng)后；形成了多個(gè)菌落，因此該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；但是菌落分布不均勻，集中分布在一定區(qū)域，說(shuō)明是涂布不均勻?qū)е碌摹?/p>

（3）與普通酵母菌相比；在以淀粉為原料的培養(yǎng)條件下，工程酵母菌更能夠高效地利用淀粉，其分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力更強(qiáng)，呼吸作用產(chǎn)生二氧化碳速率更快，所以需要先排氣。

（4）凝膠色譜法分離的原理是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子；不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過(guò)的路程較短，移動(dòng)的速度較快；相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，通過(guò)的路程較長(zhǎng)，移動(dòng)的速度較慢。因此，在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量較小。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的基本步驟、微生物的培養(yǎng)和分離、蛋白質(zhì)的分離等相關(guān)知識(shí)，能夠根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆治雠囵B(yǎng)基成分，并能夠根據(jù)工程菌的特點(diǎn)分析其代謝情況?！窘馕觥康矸圻M(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌（或高效利用利用淀粉的工程酵母菌）稀釋涂布平板法涂布不均勻工程酵母工程菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng)，工程菌呼吸強(qiáng)度大，產(chǎn)生CO2多小27、略

【分析】【詳解】

本題以雜交瘤細(xì)胞為背景；考查了動(dòng)物細(xì)胞融合；細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗體效價(jià)大于16000，所以最少需要經(jīng)過(guò)四次免疫.由圖可知，血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上時(shí)，Y的效價(jià)最大，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。

（2）B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在一起融合時(shí)；可能發(fā)生B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B細(xì)胞之間的融合，骨髓瘤細(xì)胞之間的融合和B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。由于細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類(lèi)型的細(xì)胞。

（3）由于核膜也具有流動(dòng)性；故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)雜交的細(xì)胞核。B細(xì)胞有40條染色體，骨髓瘤細(xì)胞有60條染色體，融合后的雜交瘤細(xì)胞有100條染色體。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞是已分化的細(xì)胞；不能無(wú)限增殖，所以多次培養(yǎng)后不能存活。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力?！窘馕觥?YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%1100不能無(wú)限增殖28、略

【分析】【分析】

1；稀釋涂布平板法：將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液；盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開(kāi)，使成單個(gè)細(xì)胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，并讓其成長(zhǎng)為單菌落的方法。

【詳解】

（1）A；B、C中的菌落分布較均勻；是通過(guò)稀釋涂布平板法獲得的，而D是通過(guò)平板劃線法獲得的，劃線平板法是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。故選ABC。

（2）①?gòu)恼麄€(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程可以看出；實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)皮膚滲出物稀釋培養(yǎng)形成的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后，利用噬菌體的作用檢測(cè)其中是否含有炭疽芽孢桿菌。②對(duì)照組中加入的液體不應(yīng)含有噬菌體，因此應(yīng)加入等量的生理鹽水；在進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)為防止雜菌的混入，消毒和滅菌工作是關(guān)鍵，主要包括對(duì)操作的空間；操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌；實(shí)驗(yàn)操作在酒精燈火焰附近進(jìn)行；操作過(guò)程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周?chē)锲废嘟佑|等。③若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度低于對(duì)照組，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組中的炭疽芽孢桿菌被噬菌體侵染與破壞，即該疑似患者感染了炭疽芽孢桿菌。④炭疽芽孢桿菌屬于細(xì)菌，能寄生在人和動(dòng)物體內(nèi)，說(shuō)明它是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)時(shí)需要借助搖床振蕩培養(yǎng)，說(shuō)明它是需氧型生物；振蕩培養(yǎng)的目的是增加培養(yǎng)液中的氧氣含量，使細(xì)菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，有利于炭疽芽孢桿菌的大量繁殖；培養(yǎng)液變渾濁表明炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

（3）分析表中數(shù)據(jù)可知，只有稀釋度為10-5時(shí)菌落數(shù)在30~300之間，適合用于計(jì)數(shù)?！窘馕觥?1)ABC

(2)檢驗(yàn)皮膚炭疽病疑似患者的皮膚滲出物中是否含有炭疽芽孢桿菌與實(shí)驗(yàn)組等量的生理鹽水對(duì)操作的空間；操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌；實(shí)驗(yàn)操作在酒精燈火焰附近進(jìn)行；操作過(guò)程中避免已經(jīng)滅菌的材料用具與周?chē)锲废嘟佑|實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低（異養(yǎng)）需氧型增加培養(yǎng)液中的氧氣含量；使細(xì)菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸炭疽芽孢桿菌大量繁殖。

(3)10-5稀釋度為10-5時(shí)菌落數(shù)在30~300之間六、綜合題(共3題，共18分)29、略

【分析】（1）過(guò)程①需用同種限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。為將過(guò)程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)；應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基。

（2）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)；旨在讓重組質(zhì)粒中的T－DNA片段進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是篩選獲得T－DNA片段的植物細(xì)胞，即含目的基因的受體細(xì)胞。

（3）若過(guò)程④僅獲得大量的根；則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加細(xì)胞分裂素以獲得芽；部分接種在無(wú)激素培養(yǎng)基