1-2微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

1.2.1微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1.什么是培養(yǎng)基，如何配置2.什么是無菌技術(shù)3.怎樣進(jìn)行酵母菌的純培養(yǎng)1.2微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

在上述傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作過程中，我們沒有接種菌種，而是利用了天然存在的菌種。菌種差異、雜菌情況不明和發(fā)酵過程的控制缺乏標(biāo)準(zhǔn)等，往往會造成發(fā)酵食品的品質(zhì)不一。為了縮短發(fā)酵時間，確保品質(zhì)穩(wěn)定，工業(yè)上大規(guī)模生產(chǎn)時，通常會先通過微生物培養(yǎng)技術(shù)獲得單一菌種，再將它們接種到物料中進(jìn)行發(fā)酵。3.制作果酒與果醋

當(dāng)把少量制作轉(zhuǎn)化為大規(guī)模生產(chǎn)時，需要解決哪些實際問題？你能從中體會到技術(shù)與工程的區(qū)別的和聯(lián)系嗎？

例如，少量制作果醋時，不需要專門的攪拌裝置。而大規(guī)模生產(chǎn)果醋時，由于發(fā)酵罐容積很大，就需要安裝攪拌器，以保障醋酸菌對O2的需求。可見在大規(guī)模生產(chǎn)發(fā)酵產(chǎn)品時，需要進(jìn)行更為全面周詳?shù)目紤]，如考慮原料的來源與選樣、菌種的選育與培養(yǎng)、發(fā)酵設(shè)備的選擇、發(fā)酵條件的自動化控制、發(fā)酵產(chǎn)品的質(zhì)量控制、成本價格等。

自己制作的果酒和果醋并非商品意義上的產(chǎn)品。在實際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過沉淀、過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒或醋。果酒還需要在一定條件下進(jìn)行后續(xù)發(fā)酵，以獲得特定的風(fēng)味和色澤。

通過深入思考，可以感悟到，工程、技術(shù)與科學(xué)的不同——科學(xué)以“發(fā)現(xiàn)”為核心，技術(shù)以“發(fā)明”為核心，工程以“建造”和“產(chǎn)品”為核心。技術(shù)要通過工程設(shè)計等環(huán)節(jié)，將一系列相關(guān)技術(shù)體系化地組合起來，才能轉(zhuǎn)化應(yīng)用在工程中，大規(guī)模生產(chǎn)人們需要的產(chǎn)品。

3.制作果酒與果醋

向經(jīng)過殺菌處理的牛奶中添加某些對人體有益的細(xì)菌，再經(jīng)過發(fā)酵就可以制成酸奶，由于制作工藝并不復(fù)雜，一些人會在家里自制酸奶，自制酸奶雖然方便，但是食用自制酸奶導(dǎo)致腸胃不適的事件屢見不鮮，主要原因是在制作過程中有雜菌混入。那么，怎樣才能保證無處不在的雜菌不混入發(fā)酵物中呢？1.微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

應(yīng)該先對制作用具和原料進(jìn)行滅菌處理，再接種純的菌種，并控制發(fā)酵條件，避免雜菌進(jìn)入。1.微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的缺點：菌種差異、雜菌情況不明、發(fā)酵過程的控制缺乏標(biāo)準(zhǔn)等，往往會造成發(fā)酵食品的品質(zhì)不一。

為了縮短發(fā)酵時間，確保品質(zhì)穩(wěn)定，工業(yè)上大規(guī)模生產(chǎn)時，通常先通過微生物培養(yǎng)技術(shù)獲得單一菌種，再將它們接種到物料中進(jìn)行發(fā)酵。

防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提，也是發(fā)酵工程的重要基礎(chǔ)。在實驗室培養(yǎng)微生物，一方面要為人們需要的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件;另一方面要確保其他微生物無法混入，并將需要的微生物分離出來。培養(yǎng)基無菌技術(shù)【微生物】:難以用肉眼觀察的微小生物的統(tǒng)稱。無細(xì)胞結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞真核細(xì)胞微生物的類群病毒：SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌體等DNA病毒細(xì)菌：藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌、乳酸菌等；放線菌：鏈霉菌等真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履蟲、變形蟲等1.何為微生物桿菌霍亂弧菌葡萄球菌螺旋菌核糖體細(xì)胞質(zhì)莢膜細(xì)胞壁細(xì)胞膜鞭毛DNA纖毛細(xì)菌結(jié)構(gòu)模式圖1.何為微生物微生物的結(jié)構(gòu)直徑在30～200nm之間直徑在0.5～5μm之間直徑3～6μm之間1.何為微生物

微生物結(jié)構(gòu)簡單、形體微小，眼睛看不到，若想看某種純凈的微生物。我們該怎么做？若想通過肉眼能看到細(xì)菌，我們又該如何？

必須對其進(jìn)行分離純化；

對微生物進(jìn)行大量培養(yǎng)，致使其在培養(yǎng)基表面或內(nèi)部形成菌落。不同的細(xì)菌具有不同的菌落。

分散的微生物在適宜的瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，可以形成肉眼可見的菌落。1.何為微生物沙門氏菌毛霉2.培養(yǎng)基的配制1.概念：培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2.作用：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基有無瓊脂長有酵母菌菌落盛有液體培養(yǎng)基分離、計數(shù)、鑒定等擴大培養(yǎng)、用于工業(yè)生產(chǎn)3.類型：固體培養(yǎng)基：不含凝固劑（如瓊脂）、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基：含凝固劑（如瓊脂）、呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基為3.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成4.基本成分：水、碳源、氮源和無機鹽①

碳源無機碳源：CO2、CO32-、HCO3-等有機碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物②

氮源無機氮源：NH4＋、NO3-、NH3等有機氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等注：含C、H、O、N的有機物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源③

無機鹽：Ca、K、Mg等為大量元素Zn、Cu、Mn、Co、Mo等為微量元素*一般情況下，不添加氮源培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)_____微生物固氮2.培養(yǎng)基的配制表1-11000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成組分含量提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g氮源和維生素等NaCl5g無機鹽H2O定容至1000ml水（2）在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對______、__________________以及________的需求；培養(yǎng)乳酸菌要添加維生素；培養(yǎng)霉菌要調(diào)酸性；培養(yǎng)細(xì)菌要調(diào)至中性或弱堿性；培養(yǎng)厭氧菌要提供無氧條件。（1）基本成分：碳源、氮源、水、無機鹽牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等特殊營養(yǎng)物質(zhì)4.基本成分及功能：2.培養(yǎng)基的配制pH特殊營養(yǎng)物質(zhì)O21.下列四種生物的能源、碳源、氮源和代謝類型的描述，正確的是()A.硝化細(xì)菌B.乳酸菌C.酵母菌D.衣藻硝化細(xì)菌乳酸菌酵母菌衣藻能源氧化NH3分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖類糖類CO2氮源NH3N2N2NO3-代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異樣需氧型自養(yǎng)需氧型A2.培養(yǎng)基的配制2.培養(yǎng)基的配制1．該表為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述錯誤的是(

)成分NaNO3KH2PO4MgSO4·7H2O含量3g1g0.5g成分(CH2O)蒸餾水青霉素含量30g定容至1000mL0.1萬單位

A．根據(jù)物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B．根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C．根據(jù)培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型D．固體培養(yǎng)基中加入少量水即可形成液體培養(yǎng)基D2．微生物種類繁多，培養(yǎng)條件也各不相同。下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基的描述正確的是(

)A．同一物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量，氮源有些也能提供能量C．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是培養(yǎng)細(xì)菌、病毒等常用的培養(yǎng)基D．培養(yǎng)硝化細(xì)菌，可用無機碳源的培養(yǎng)基2.培養(yǎng)基的配制D1.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵：______________2.無菌技術(shù)應(yīng)圍繞________________________展開，主要包括消毒和滅菌。3.無菌技術(shù)工作兩個方面①對操作的_____、操作者的_____和____進(jìn)行______和_______；②對用于微生物培養(yǎng)的_______、__________和_______等進(jìn)行______；

防止雜菌污染如何避免雜菌的污染空間衣著手清潔消毒器皿接種用具培養(yǎng)基滅菌3.無菌技術(shù)*做好消毒滅菌工作后，要注意避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。*為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，許多操作都應(yīng)在超凈工作臺并在酒精燈火焰附近進(jìn)行。類型適用范圍操作方法消毒較為溫和理化生方法，殺死部分微生物（不包括芽孢、孢子）。煮沸消毒法日常生活100℃煮沸5～6min巴氏消毒法不耐高溫的液體62～65℃消毒30min或80～90℃消毒30s～1min化學(xué)藥物消毒法生物活體、水源等用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源紫外線照射消毒法紫外線照射30min接種室、接種箱，超凈工作臺。3.無菌技術(shù)——消毒①概念：②方法：用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外“所有”微生物（包括芽孢和孢子）?！狙挎摺浚河行┘?xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個橢圓形的休眠體，叫做芽孢。芽孢壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強的抵抗力。例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時以后才死亡?！炬咦印浚杭?xì)菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖作用的無性生殖細(xì)胞。能直接發(fā)育成新個體。濕熱滅菌干熱滅菌灼燒滅菌3.無菌技術(shù)——滅菌①概念：②方法：原理：高溫蒸汽破壞蛋白質(zhì)、核酸等結(jié)構(gòu)使其變性。優(yōu)點：操作簡便，效果可靠，可以殺滅所有的生物，包括最耐熱的某些微生物的休眠體?；颈３峙囵B(yǎng)基的營養(yǎng)成分不被破壞。對象：培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿等注：使用后的培養(yǎng)基必須滅菌后才能丟棄，以免污染環(huán)境。(1).濕熱滅菌法：高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)100kPa、121℃下維持15～30min。高壓蒸汽滅菌鍋②方法：3.無菌技術(shù)——滅菌原理：使微生物細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥等。對象：耐高溫，需保持干燥的物品，適用于

玻璃器皿

(如試管、培養(yǎng)皿、吸管、注射器)

金屬器具(如針頭、鑷子、剪刀等)的滅菌。(2).干熱滅菌法：干熱滅菌箱內(nèi)160～170℃下加熱2～3h。干熱滅菌箱②方法：3.無菌技術(shù)——滅菌(3).灼燒滅菌法：直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒效果：最徹底原理：使微生物燃燒對象：接種的金屬工具如接種環(huán)、接種針，以及接種過程中的試管口或瓶口等易被污染部位。灼燒滅菌3．下列有關(guān)無菌技術(shù)的說法，正確的是(

)A．無菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅實驗室中所有的微生物B．培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C．經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅，不能在常溫下長期保存D．無菌技術(shù)中，若處理對象為液體，則只能消毒，不能滅菌3.無菌技術(shù)C4．微生物的實驗室培養(yǎng)要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌和消毒。下列關(guān)于滅菌和消毒的敘述，正確的是(

)A．滅菌和消毒均可以殺死環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B．無菌操作時，對實驗操作的空間、操作者的衣物和手進(jìn)行滅菌C．灼燒法滅菌的對象是金屬器具，不可以是玻璃器具D．消毒和滅菌的原理是相同的3.無菌技術(shù)D由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。②.方法步驟：01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05微生物群分散或稀釋單個細(xì)胞單個菌落繁殖4.微生物的純培養(yǎng)①概念：

分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，這就是菌落。采用平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。③.酵母菌的純培養(yǎng)：目的要求：

1.學(xué)會配制培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基并倒平板。

2.學(xué)會進(jìn)行無菌操作。

3.嘗試通過平板劃線操作來獲得純化的酵母菌菌落。材料用具：

酵母菌培養(yǎng)液、馬鈴薯、葡萄糖(或蔗糖)、瓊脂、蒸餾水、天平、小刀、紗布、燒杯、錐形瓶、棉塞、牛皮紙(或報紙)、皮筋、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、酒精燈、超凈工作臺、高壓蒸汽滅菌鍋、干熱滅菌箱和恒溫培養(yǎng)箱等。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05配制培養(yǎng)基：稱取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛，用紗布過濾。向濾液中加入20g葡萄糖(可用蔗糖代替)、15-20g瓊脂，用蒸餾水定容至1000ml。表1-11000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成組分含量提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g氮源和維生素等NaCl5g無機鹽H2O定容至1000ml水4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在定容完成后，滅菌之前進(jìn)行操作。01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05滅菌：將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加棉塞，包上牛皮紙，并用皮筋勒緊，再放入高壓蒸汽滅菌鍋中，在壓力為100KPa、溫度為121℃的條件下，滅菌15~30min。將5~8套培養(yǎng)皿包成一包，用幾層牛皮紙包緊，放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160~170℃滅菌2h。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。倒平板的具體操作步驟如下：4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：①拔出錐形瓶的棉塞。②將瓶口迅速通過火焰。③用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基（10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋。④等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來放置。01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。倒平板的具體操作步驟如下：4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：2.在倒平板的過程中，為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。

瓊脂是一種多糖，在44℃以下凝固，倒平板時，若低于50℃不及時操作，瓊脂會凝固。倒平板時高于50℃則會燙手。1.培養(yǎng)基滅菌后為什么要冷卻到50℃左右時開始倒平板？3.為什么倒平板時，將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不能完全打開？防止雜菌污染培養(yǎng)基01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。倒平板的具體操作步驟如下：4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：5.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？不能；因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。4.在倒平板的過程中，若不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05接種：指在無菌條件下將微生物或含菌材料轉(zhuǎn)移到合適其生長繁殖的培養(yǎng)基中的過程。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：接種工具：接種針——用于穿刺接種；接種環(huán)——用于斜面接種或平板劃線接種；玻璃涂布器——用于涂布平板接種；01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05接種的方法：涂布平板法、穿刺接種法、斜面接種法、平板劃線法4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05

通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。經(jīng)過數(shù)次劃線后培養(yǎng)可以分離得到單菌落。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)：連續(xù)劃線法分區(qū)劃線法①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)的金屬絲燒紅。②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并拔出裝有酵母菌的棉塞。③將試管口通過火焰④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中，蘸取一環(huán)菌液。⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05——平板劃線法⑥左手在火焰附近將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)基。⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05——平板劃線法12345灼燒接種環(huán)蘸取菌液第1區(qū)接種灼燒接種環(huán)第2區(qū)接種灼燒接種環(huán)第3區(qū)接種第4區(qū)接種注意：①接種環(huán)只蘸一次菌液,但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次。②劃線首尾不能相接③每次劃線前接種環(huán)進(jìn)行滅菌4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)——平板劃線法01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05灼燒接種環(huán)第4區(qū)接種灼燒接種環(huán)1.為什么在操作第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)灼燒時期目的取菌種前每次劃線前接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。殺死上次劃線時殘留菌種，使下一次劃線的菌種直接來源上次劃線的末端，從而使每次劃線時菌種數(shù)目逐漸減少，直至得到單個細(xì)胞。殺死接種環(huán)上原有微生物，避免污染培養(yǎng)物2.在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻再進(jìn)行劃線，目的是什么？避免溫度過高殺死菌種3.除第一次劃線外，每次劃線都從上一次劃線的末端開始，目的是什么？使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落4.為什么劃線時要注意不能劃破培養(yǎng)基？①一旦劃破，會造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；②存留在劃破處的單個細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會沿著劃破處生長，會形成一個條狀的菌落4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)培養(yǎng)：完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個未接種的平板倒置，放入28℃左右（培養(yǎng)溫度因酵母菌種類的不同而稍有差異）的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)01020304配制培養(yǎng)基滅菌倒平板接種和分離培養(yǎng)05避免雜菌污染2.為什么倒平板和接種整個過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行？1.未接種的培養(yǎng)基直接培養(yǎng)起什么作用？做空白對照，若培養(yǎng)后培養(yǎng)基表面無菌落，則說明培養(yǎng)基沒有污染。警示：在實驗室中，切不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，以防止被微生物感染。使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)分析評價：1.在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長？如果有，說明了什么？2.這些菌落的顏色、大小是否一致？如果你觀察到了不同形態(tài)的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的嗎？在未接種的培養(yǎng)基表面應(yīng)該沒有菌落生長，如果有，說明培養(yǎng)基被雜菌污染。如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無菌操作不規(guī)范等原因引起的。

有一段時間，水果“酵素”風(fēng)靡各地。水果“酵素”制作的大致過程是：將洗凈、切成塊狀的水果放入潔凈的容器，再加入糖和水,密封，置于陰涼處發(fā)酵一至兩周。有人說，吃水果“酵素”可以美容、減肥、促進(jìn)消化和提高免疫力。請評估這一論點是否可信。追問以下問題可以幫助你分析。

“酵素”是什么？水果“酵素”的制作原理是什么？水果“酵素”中可能含有哪些成分？它是否含有人們無法從其他食品中獲取但又是維護健康所必需的成分？水果“酵素”中的所有成分都有益于人體健康嗎？

如果要更加有力地支持或反駁水果“酵素”有益健康的論點，應(yīng)該怎樣獲取證據(jù)？4.微生物的純培養(yǎng)

所謂"酵素"，就是"酶"的另一種說法。"酵素"制作就是利用微生物進(jìn)行無氧呼吸的原理，進(jìn)行像制作泡菜一樣的發(fā)酵。這樣制作的"酵素"中可能有糖類（包括一些簡單的糖和膳食纖維等）、蛋白質(zhì)（包括多種酶）、有機酸等成分，不存在它獨有的、特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，其中甚至可能含有微生物發(fā)酵產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，食用后可能會危害人體健康。因此，"吃水果'酵素'可以美容、減肥、促進(jìn)消化和提高免疫力"的論點值得懷疑。可以通過查閱專業(yè)學(xué)術(shù)期刊上發(fā)表的有關(guān)研究論文，或親自檢測水果"酵素"中的成分，獲取科學(xué)可靠的證據(jù)進(jìn)行全面論證。4.微生物的純培養(yǎng)③.酵母菌的純培養(yǎng)1.微生物的純培養(yǎng)既需要適宜的培養(yǎng)基，又要防止雜菌污染。判斷下列相關(guān)表述是否正確。（1）培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對微生物的生長越有利。（）（2）消毒和滅菌的殺菌程度存在差異。（）（3）微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物。（）×√×2.日常生活中保存食品的方法有哪些？這些方法是如何阻止或抑制微生物生長的？日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低溫儲存等。干制可以降低食品的水分含量；腌制可以通過食鹽、糖等制造高滲環(huán)境，從而抑制微生物的生長和繁殖；低溫則是通過降低微生物的代謝速率來抑制微生物的生長和繁殖。4.微生物的純培養(yǎng)1.某同學(xué)將5個手指尖在貼有“洗手前”標(biāo)簽的培養(yǎng)基上輕輕按一下。然后用肥皂將該手洗干凈，再將5個指尖在貼有“洗手后”標(biāo)簽的同種培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩個培養(yǎng)皿放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，發(fā)現(xiàn)貼有“洗手后”標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中菌落較少。請分析回答下列問題。（1）這個實驗中需要進(jìn)行滅菌處理的材料用具有？