2025年粵人版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年粵人版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有關(guān)敘述不正確的是（）A.果醋發(fā)酵階段應(yīng)向發(fā)酵瓶中泵入無(wú)菌空氣B.腌制腐乳的鹵湯中應(yīng)含有12%左右的酒精以抑制細(xì)菌的增殖C.將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口部分的鹽要鋪厚一些D.利用自然菌種發(fā)酵果酒時(shí)，將封有葡萄汁的發(fā)酵瓶進(jìn)行高壓滅菌2、注射胰島素是治療Ⅱ型糖尿病的主要手段。下圖是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素的操作示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.通過(guò)過(guò)程⑤的重復(fù)進(jìn)行，可以短時(shí)間內(nèi)獲得大量的胰島素基因B.以細(xì)胞1中提取的mRNA為模板，也可擴(kuò)增出胰高血糖素的基因C.過(guò)程⑦將目的基因與基因載體相連，這是基因工程的核心步驟D.C中往往含有標(biāo)記基因，便于篩選含有胰島素基因的受體細(xì)胞3、下列有關(guān)生物技術(shù)安全性及倫理問(wèn)題的說(shuō)法，正確的是（）A.針對(duì)他人的不同見(jiàn)解，你的正確做法是分析每種觀點(diǎn)的科學(xué)性，理性地看待問(wèn)題，趨利避害B.人類(lèi)利用設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)可以解決不孕夫婦的生育問(wèn)題C.對(duì)于設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)，中國(guó)政府堅(jiān)持四不原則D.克隆技術(shù)如果被不合理利用將給社會(huì)造成災(zāi)難，應(yīng)禁止任何克隆研究4、下列敘述不正確的是（）A.啟動(dòng)子是處于DNA上一段重要的序列，是DNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)B.傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞C.癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.早期胚胎發(fā)育過(guò)程中，在囊胚期就已經(jīng)發(fā)生細(xì)胞分化5、下列關(guān)于生物工程的敘述正確的是（）A.將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞后還需要篩選受體細(xì)胞的原因是導(dǎo)入受體細(xì)胞的目的基因不一定都能夠成功表達(dá)B.胰島素、干擾素和青霉素等藥物都可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)C.試管山羊的早期胚胎需植入同期發(fā)情的代孕母羊的體內(nèi)才能繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育為新個(gè)體D.利用發(fā)酵技術(shù)產(chǎn)生沼氣開(kāi)發(fā)生物能屬于節(jié)水和廢水處理與應(yīng)用的生態(tài)工程6、為探究抗生素對(duì)細(xì)菌的選擇作用，將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養(yǎng)基上（如下圖），一段時(shí)間后測(cè)量并記錄抑菌圈的直徑。從抑菌圈邊緣的菌落上挑取細(xì)菌擴(kuò)大培養(yǎng)，重復(fù)實(shí)驗(yàn)2~5次。下列敘述不正確的是（）

A.接種時(shí)，將高濃度菌液涂布在平板培養(yǎng)基上B.①處濾紙片上不含抗生素，起對(duì)照作用C.重復(fù)2~5次實(shí)驗(yàn)后，抑菌圈的直徑會(huì)變大D.抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細(xì)菌抗藥性較強(qiáng)7、如圖為15N標(biāo)記的某基因結(jié)構(gòu)示意圖；下列說(shuō)法正確的是（）

A.限制酶作用于①部位，DNA連接酶作用于③部位B.A+T的比例越低，DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性越低C.若該DNA上有m個(gè)胞嘧啶，其復(fù)制n次共需（2n-1）m個(gè)鳥(niǎo)嘌呤D.在含14N的培養(yǎng)液中復(fù)制3次后，子代中含15N的DNA分子占1/8評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、2012年6月29日，中國(guó)首例設(shè)計(jì)嬰兒誕生。這個(gè)嬰兒的父母均為地中海貧血基因的攜帶者。此前，二人曾育有一女，患有重度地中海貧血，為了再生一個(gè)健康的孩子，用他的臍帶血幫助姐姐進(jìn)行造血干細(xì)胞移植，設(shè)計(jì)了這個(gè)嬰兒。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”利用體外受精、胚胎移植、植入前胚胎遺傳學(xué)診斷技術(shù)等B.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”均為有性生殖C.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”都要進(jìn)行胚胎選擇，二者選擇的目的相同D.設(shè)計(jì)嬰兒性別是“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的第一步9、微衛(wèi)星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡(jiǎn)單重復(fù)序列。由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富，因此，微衛(wèi)星DNA可以作為分子標(biāo)記，并有著廣泛應(yīng)用。根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點(diǎn)判斷，這種分子標(biāo)記可應(yīng)用于（）A.人類(lèi)親子鑒定B.種群遺傳多樣性研究C.誘導(dǎo)基因突變D.冠狀病毒遺傳物質(zhì)測(cè)序10、2016年初；首位由“三合一”胚胎人工授精技術(shù)培育的嬰兒出生，其培有過(guò)程如下圖所示。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）

A.“三親嬰兒”孕育過(guò)程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植等技術(shù)B.融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MII中期才能完成受精作用C.卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者攜帶的血友病基因能遺傳給“三親嬰兒”D.“三親嬰兒”培育技術(shù)可以用來(lái)避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳11、營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經(jīng)過(guò)人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種生長(zhǎng)因子的能力，只能在補(bǔ)充了相應(yīng)的生長(zhǎng)因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長(zhǎng)的變異菌株。某研究小組對(duì)酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時(shí)間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙、丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進(jìn)一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.乙中生長(zhǎng)的酵母菌都不屬于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株12、廚余垃圾是指居民日常生活及食品加工、飲食服務(wù)、單位供餐等活動(dòng)中產(chǎn)生的垃圾。廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)，易腐爛變質(zhì)，滋生病原微生物等。若處理不當(dāng)，可能造成嚴(yán)重的污染。圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌組合可以將有機(jī)廚余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，減輕環(huán)境污染。為制備分解有機(jī)廚余垃圾的微生物菌劑，某科研小組對(duì)兩菌種進(jìn)行了最佳接種量比的探究實(shí)驗(yàn)，并得出下圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面敘述錯(cuò)誤的是（）

A.巨大芽孢桿菌生長(zhǎng)過(guò)程中需要氮源，圓褐固氮菌生長(zhǎng)過(guò)程中不需要氮源B.要統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法C.將1mL菌液稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為3．9×105D.處理該類(lèi)廚余垃圾廢液，兩菌種的最佳接種量比為1：113、大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述正確的是（）

A.提取DNA時(shí)可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B.將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定C.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理D.根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上一定沒(méi)有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位點(diǎn)，而有限制酶Ⅲ的切割位點(diǎn)14、基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列B.擴(kuò)增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3'-端進(jìn)行子鏈合成C.導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞D.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上15、下列關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述正確的是（）A.從酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素說(shuō)明相應(yīng)的目的基因完成了在受體細(xì)胞中的表達(dá)B.在植物細(xì)胞與組織培養(yǎng)中，花藥不能作為組織培養(yǎng)的材料C.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞D.多種顯微操作和處理技術(shù)使體外受精、胚胎移植和胚胎分割成為可能評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)16、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的____________條件下，將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免__________________的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。17、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。18、近年來(lái)，克隆技術(shù)的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過(guò)與克隆技術(shù)有關(guān)的問(wèn)題嗎？_____。19、有時(shí)還需進(jìn)行______的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物是否出現(xiàn)______。20、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)；蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對(duì)基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進(jìn)行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過(guò)程獲取目的基因→構(gòu)建表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)氨基酸序列→合成DNA→表達(dá)出蛋白質(zhì)實(shí)質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類(lèi)所需要的生物類(lèi)型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達(dá)）定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類(lèi)所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類(lèi)所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進(jìn)行修改。_________評(píng)卷人得分四、判斷題(共1題，共5分)21、我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)22、某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細(xì)胞；需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目為40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。

回答下列問(wèn)題：

（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)___________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外，可能還有________，體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是________________。

（3）雜交瘤細(xì)胞中有______個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_________條。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_____________________。23、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會(huì)發(fā)生落葉、落果，嚴(yán)重時(shí)葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來(lái)自水稻的Xa27基因?qū)敫涕倏色@得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術(shù)則可培育無(wú)病毒植株?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)為了獲得脫毒苗，通?？梢赃x取植株______附近的組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉(zhuǎn)基因植株的過(guò)程：

①基因表達(dá)載體必需的結(jié)構(gòu)除復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時(shí)，Ti質(zhì)粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過(guò)程中，誘導(dǎo)愈傷組織生根、生芽的先后順序?yàn)開(kāi)_____。

⑤從個(gè)體生物學(xué)水平鑒定柑橘再生植株時(shí)可采用______（填具體操作）的方法。經(jīng)鑒定有幾棵植株沒(méi)有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據(jù)______的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后利用______進(jìn)行檢測(cè)；結(jié)果如圖2。

據(jù)圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。24、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過(guò)污染飼料引起畜禽中毒反應(yīng)。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級(jí)”或“次級(jí)”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進(jìn)入豬細(xì)胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動(dòng)子上游的兩個(gè)調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)的機(jī)理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動(dòng)子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達(dá)載體，再分別導(dǎo)入豬肝細(xì)胞，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；24h后檢測(cè)LUC酶活性，計(jì)算啟動(dòng)子活性相對(duì)值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對(duì)CYP3A的誘導(dǎo)；B2是Spl的結(jié)合位點(diǎn)。研究者推測(cè)，NF-Y通過(guò)與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達(dá)。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點(diǎn)，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細(xì)胞核蛋白提取物混合，實(shí)驗(yàn)分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進(jìn)而推測(cè)第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了NF-Y和Spl通過(guò)互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測(cè)CYP3A基因的啟動(dòng)子活性。據(jù)此分析，實(shí)驗(yàn)假設(shè)是_____。評(píng)卷人得分六、綜合題(共2題，共20分)25、CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可以按照人們的意愿精準(zhǔn)剪切；改變?nèi)我獍谢虻倪z傳信息；對(duì)該研究有突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家被授予2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)?？茖W(xué)家正設(shè)想利用基因編輯技術(shù)將豬基因組中“敲入”某種調(diào)節(jié)因子，抑制抗原決定基因的表達(dá)，培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的豬器官，解決人類(lèi)移植器官短缺的難題。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）欲獲得大量的調(diào)節(jié)因子；可以利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。在PCR反應(yīng)體系中需要加入一定的Taq酶和足量的引物（循環(huán)次數(shù)越多，引物加入量越大）等，引物需要足量的原因是_____。

（2）CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)中；SgRNA是根據(jù)靶基因設(shè)計(jì)的引導(dǎo)RNA，準(zhǔn)確引導(dǎo)Cas9切割與SgRNA配對(duì)的靶基因DNA序列，由此可見(jiàn)，Cas9在功能上屬于_____酶，切割的是DNA中的_____鍵。

（3）在相關(guān)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中；為了確認(rèn)豬細(xì)胞中抗原決定基因是否表達(dá)出蛋白質(zhì)，常用的檢測(cè)方法是_____。若檢測(cè)結(jié)果為_(kāi)____，則表明調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用。

（4）將含有調(diào)節(jié)因子的豬細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)；會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象。為了使細(xì)胞更好地貼壁生長(zhǎng)，要求培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)表面_____。

（5）為了獲得沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因豬，需要將調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用的豬細(xì)胞的細(xì)胞核移入_____中，用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成_____，再進(jìn)行胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。26、為探究M基因的功能；科研人員將克隆得到的M基因?qū)霐M南芥植株（自交繁殖），流程如圖所示。回答下列問(wèn)題：

(1)根據(jù)圖中過(guò)程a、b，寫(xiě)出獲得大量M基因的大致方法：____________。

(2)過(guò)程d將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，通常需要用___________處理農(nóng)桿菌。過(guò)程e在擬南芥植株產(chǎn)生大量花序時(shí)，將其花表面部分置于農(nóng)桿菌懸浮液中浸泡20～30s，3～4周后得到轉(zhuǎn)化擬南芥植株的種子T0，這就是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化是指___________。使用T-DNA介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的原因是___________。

(3)將收獲的擬南芥種子T0播種在含有___________的培養(yǎng)基上，能健康生長(zhǎng)的幼苗可確定含有M（目的）基因。若采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得的擬南芥細(xì)胞中只有一條DNA上含有M基因，則要進(jìn)一步獲得M基因穩(wěn)定的突變體，下一步操作是___________（選擇最簡(jiǎn)便的方法）。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、D【分析】【分析】

1.果酒的制作離不開(kāi)酵母菌；酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無(wú)氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過(guò)程當(dāng)中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一種好氧細(xì)菌；只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃。

3.參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；參與果醋制作的醋酸菌是好氧菌；因此果醋發(fā)酵階段需要不斷泵入無(wú)菌空氣，不能封閉充氣口，A正確；

B；腌制腐乳的鹵湯中應(yīng)含有12%左右的酒精以抑制細(xì)菌的增殖；另外還可以起到調(diào)味的作用，B正確；

C；將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐放在瓶中；并逐層加鹽，接近瓶口部分的鹽要鋪厚一些，因?yàn)樵浇咏靠诒浑s菌污染的機(jī)會(huì)越大，C正確；

D；利用自然菌種發(fā)酵果酒時(shí)；菌種是來(lái)自葡萄皮上的野生型酵母菌，因此不能將封有葡萄汁的發(fā)酵瓶進(jìn)行高壓滅菌，否則會(huì)殺死菌種，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】2、B【分析】【分析】

分析題圖：圖中①表示從胰島B細(xì)胞中獲取胰島素mRNA的過(guò)程；②為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；A為胰島素基因；③④⑤為PCR過(guò)程，表示目的基因的擴(kuò)增過(guò)程﹔⑦為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，⑧為重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，⑨為目的基因的增殖，⑩為目的基因的表達(dá)。

【詳解】

A；③④⑤為PCR過(guò)程；表示目的基因的擴(kuò)增過(guò)程，通過(guò)過(guò)程⑤的重復(fù)進(jìn)行，可以短時(shí)間內(nèi)獲得大量的胰島素基因，A正確；

B；細(xì)胞1中含有胰島素mRNA；可知細(xì)胞1是胰島B細(xì)胞，由于基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞1中不含有胰高血糖素mRNA，不能擴(kuò)增出胰高血糖素的基因，B錯(cuò)誤；

C；過(guò)程⑦將目的基因與基因載體相連；⑦為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，這是基因工程的核心步驟，C正確；

D；C重組質(zhì)粒中往往含有標(biāo)記基因；便于篩選含有胰島素基因的受體細(xì)胞，D正確。

故選B。3、A【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

治療性克隆：指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚；神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。

生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類(lèi)個(gè)體。

中國(guó)政府：禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成；不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆人。

【詳解】

A；對(duì)于生物技術(shù)安全性及倫理問(wèn)題；針對(duì)他人的不同見(jiàn)解，正確做法是分析每種觀點(diǎn)的科學(xué)性，理性地看待問(wèn)題，趨利避害，A正確；

B；人類(lèi)利用試管嬰兒技術(shù)解決不孕夫婦的生育問(wèn)題；B錯(cuò)誤；

C；對(duì)克隆技術(shù)中國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），C錯(cuò)誤；

C；對(duì)克隆技術(shù)中國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆，D錯(cuò)誤。

故選A。4、A【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是細(xì)胞增殖（有絲分裂）；傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞；然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖；癌細(xì)胞失去接觸抑制，所以癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象；

2；啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段；它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，轉(zhuǎn)錄形成信使RNA；

3；囊胚的特點(diǎn)：細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)分化（該時(shí)期細(xì)胞的全能性仍比較高）．聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱(chēng)為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織．中間的空腔稱(chēng)為囊胚腔。

【詳解】

A；啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段；它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，轉(zhuǎn)錄形成信使RNA，A錯(cuò)誤；

B；傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞；將其分散成單個(gè)細(xì)胞，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖，B正確；

C；癌細(xì)胞失去接觸抑制；所以癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，C正確；

D；在胚胎發(fā)育過(guò)程中；囊胚期細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化，形成滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】5、C【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定；

2；基因工程藥物（從化學(xué)成分上分析都應(yīng)該是蛋白質(zhì)）：

（1）來(lái)源：轉(zhuǎn)基因工程菌．工程菌是指采用基因工程的方法；使外源基因得到高效率表達(dá)的菌株類(lèi)細(xì)胞系；

（2）成果：人胰島素；細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長(zhǎng)激素、干擾素等；

3；對(duì)良種母山羊和代孕母羊要進(jìn)行同期發(fā)情處理；以保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境；

4；生態(tài)工程包括物質(zhì)循環(huán)利用；節(jié)水廢水處理與應(yīng)用、山區(qū)小流域綜合治理與開(kāi)發(fā)、清潔及可再生能源系統(tǒng)組合利用。

【詳解】

A；篩選含有目的基因的受體細(xì)胞并不是所有的細(xì)胞都接納了重組DNA分子；因此需要篩選含有目的基因的受體細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；青霉素是誘變育種形成的高產(chǎn)青霉菌；再通過(guò)發(fā)酵工程生產(chǎn)的藥物，不是基因工程技術(shù)生產(chǎn)的藥物，B錯(cuò)誤；

C；早期胚胎須移植到供體同期發(fā)情的代孕母羊子宮內(nèi)才能繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育成新個(gè)體；C正確；

D；利用發(fā)酵技術(shù)產(chǎn)生沼氣開(kāi)發(fā)生物能屬于清潔及可再生能源系統(tǒng)組合利用的生態(tài)工程；D錯(cuò)誤。

故選C。6、C【分析】【分析】

本實(shí)驗(yàn)的思路為：將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養(yǎng)基上；濾紙片周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)抑菌圈，在抑菌圈邊緣生長(zhǎng)的細(xì)菌可能是耐藥菌；若抗生素對(duì)細(xì)菌起選擇作用，則隨著培養(yǎng)次數(shù)增多，耐藥菌的比例增大，在連續(xù)培養(yǎng)幾代后，抑菌圈的平均直徑變小。

【詳解】

A；將高濃度菌液涂布在平板培養(yǎng)基上；使平板上長(zhǎng)出密集菌落，利于觀察抑菌圈，A正確；

B；①處濾紙片周?chē)闯霈F(xiàn)抑菌圈；濾紙片上不含抗生素，起對(duì)照作用，B正確；

C；隨重復(fù)次數(shù)增加；抗藥菌株的比例增加，抑菌圈的直徑會(huì)變小，C錯(cuò)誤；

D；抑菌圈邊緣的菌落可能是耐藥菌；所以，抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細(xì)菌抗藥性較強(qiáng)，D正確。

故選C。7、C【分析】【分析】

限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別特定的核苷酸序列；并在特點(diǎn)的位點(diǎn)切割DNA分子。限制性核酸內(nèi)切酶作用于磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；限制酶和DNA連接酶都作用于①磷酸二酯鍵；A錯(cuò)誤；

B；A和T之間是兩個(gè)氫鍵；G和C之間是3個(gè)氫鍵，所以A+T的比例越低，DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性越高，B錯(cuò)誤；

C、DNA分子復(fù)制n次共合成2n個(gè)DNA分子，新合成的DNA相當(dāng)于2n-1個(gè)，每個(gè)DNA上有m個(gè)胞嘧啶那也就有m個(gè)鳥(niǎo)嘌呤，故需要游離的鳥(niǎo)嘌呤（2n-1）m個(gè)；C正確；

D、在含14N的培養(yǎng)液中復(fù)制3次后形成8個(gè)雙鏈DNA分子，其中有兩個(gè)DNA分子含15N，子代中含15N的DNA分子占1/4；D錯(cuò)誤。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)8、A:B【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”利用體外受精、胚胎移植、植入前胚胎遺傳學(xué)診斷技術(shù)等；A正確；

B；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”均利用了體外受精技術(shù)；均為有性生殖，B正確；

C；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”都要進(jìn)行胚胎選擇；但二者選擇的目的不同，C錯(cuò)誤；

D；體外受精獲得許多胚胎是“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的第一步；D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】9、A:B【分析】【分析】

微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡(jiǎn)單重復(fù)序列；由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富，可以作為分子標(biāo)記應(yīng)用于人類(lèi)親子鑒定；種群遺傳多樣性研究。

【詳解】

AB；微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡(jiǎn)單重復(fù)序列；且重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度特異性，因此可用于人類(lèi)親子鑒定、物種間親緣關(guān)系鑒定、物質(zhì)和遺傳多樣性的研究等，AB正確；

C；誘導(dǎo)基因突變的因素有物理因素、化學(xué)因素和生物因素；與微衛(wèi)星DNA的特性無(wú)關(guān)，C錯(cuò)誤；

D；冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是RNA；其測(cè)序與微衛(wèi)星DNA的特性無(wú)關(guān)，D錯(cuò)誤。

故選AB。10、A:B:D【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過(guò)程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。

【詳解】

A；由圖可知；“三親嬰兒”孕育過(guò)程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、體外受精、核移植等技術(shù)，A正確；

B；融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MⅡ中期才具備受精能力；從而完成受精作用，B正確；

C；卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者提供的是細(xì)胞質(zhì)；而其攜帶的血友病基因位于細(xì)胞核內(nèi)的染色體上，所以其攜帶的血友病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯(cuò)誤；

D；“三親嬰兒”培育技術(shù)可以通過(guò)核移植來(lái)避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳；D正確。

故選ABD。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種；劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；由甲平板觀察可知；平板中菌落分布均勻，采用的是稀釋涂布平板法，A正確；

B；由題圖信息分析可知；甲、丙培養(yǎng)基菌落數(shù)目多，含有野生型酵母菌菌株和某種營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，而乙培養(yǎng)皿菌株是某種營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，據(jù)此推測(cè)，乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，甲和丙是補(bǔ)充了相應(yīng)的生長(zhǎng)因子的培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C；由于基因突變具有不定向性；因此接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營(yíng)養(yǎng)缺陷型，且有些菌落不一定由一個(gè)酵母菌形成，故甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少，C正確；

D；由題圖信息分析可知；乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，故該培養(yǎng)皿中能夠形成的菌落是野生型菌株，不屬于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，D正確。

故選ACD。12、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接種的方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。若要對(duì)微生物進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)，接種方法只能是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

【詳解】

A；微生物的生長(zhǎng)需要碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì)；只是有些固氮菌由于能利用氮?dú)庾鳛榈?，不需要在培養(yǎng)基中添加氮源，A錯(cuò)誤；

B；平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)；B錯(cuò)誤；

C、將1mL菌液稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)圖示可知；兩菌種的接種量比為1:1時(shí)比兩菌種的接種量比為2:1時(shí)效果好，但由于該實(shí)驗(yàn)設(shè)置的兩菌種的接種量比例的組數(shù)過(guò)少，所以無(wú)法判斷處理該類(lèi)廚余垃圾廢液的兩菌種的最佳接種量比，D錯(cuò)誤。

故選ABCD。13、A:B:C【分析】【分析】

DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開(kāi)；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA時(shí)可加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；

B；將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑在沸水條件進(jìn)行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，B正確；

C；DNA帶負(fù)電；電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，C正確；

D；因?yàn)橘|(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個(gè)切割位點(diǎn)，也可能沒(méi)有切割位點(diǎn)，D錯(cuò)誤。

故選ABC。14、B:C:D【分析】【分析】

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。基因表達(dá)載體常包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。

【詳解】

A；mRNA是由基因啟動(dòng)子后面的序列編碼而來(lái)的；若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列，A正確；

B、擴(kuò)增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'-端進(jìn)行子鏈合成；B錯(cuò)誤；

C；導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞不是乳腺細(xì)胞；而是受精卵或早期胚胎細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞；并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，將基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法，D錯(cuò)誤。

故選BCD。15、A:C:D【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：取動(dòng)物組織塊--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞--制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2；胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。

【詳解】

A；干擾素是人體的蛋白質(zhì)；故從酵母菌細(xì)胞中提取到人的干擾素，說(shuō)明目的基因已經(jīng)完成了在受體細(xì)胞中的表達(dá)，A正確；

B；在植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)中；花藥可以進(jìn)行離體培養(yǎng)成單倍體植株，B錯(cuò)誤；

C；使用酶解法可以獲得單個(gè)細(xì)胞；故在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞，C正確；

D；對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；使體外受精、胚胎移植和胚胎分割成為可能，D正確。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共5題，共10分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】無(wú)菌毛霉其他菌種17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺18、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過(guò)的與克隆技術(shù)有關(guān)的問(wèn)題有：

①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國(guó)家保護(hù)動(dòng)物以及植物；我們可運(yùn)用克隆，復(fù)制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域；通過(guò)轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；

③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問(wèn)題；比如胚胎干細(xì)胞；

④畜牧業(yè)克隆：應(yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限?！窘馕觥坑?，比如：①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。虎谵r(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，通過(guò)轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問(wèn)題，比如胚胎干細(xì)胞；④畜牧業(yè)克?。簯?yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】個(gè)體生物學(xué)水平抗蟲(chóng)性狀。20、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，其結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)?！窘馕觥康鞍踪|(zhì)工程的結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)四、判斷題(共1題，共5分)21、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。

該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)22、略

【分析】【詳解】

本題以雜交瘤細(xì)胞為背景；考查了動(dòng)物細(xì)胞融合；細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗體效價(jià)大于16000，所以最少需要經(jīng)過(guò)四次免疫.由圖可知，血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上時(shí)，Y的效價(jià)最大，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。

（2）B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在一起融合時(shí)；可能發(fā)生B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B細(xì)胞之間的融合，骨髓瘤細(xì)胞之間的融合和B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。由于細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類(lèi)型的細(xì)胞。

（3）由于核膜也具有流動(dòng)性；故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)雜交的細(xì)胞核。B細(xì)胞有40條染色體，骨髓瘤細(xì)胞有60條染色體，融合后的雜交瘤細(xì)胞有100條染色體。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞是已分化的細(xì)胞；不能無(wú)限增殖，所以多次培養(yǎng)后不能存活。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力?！窘馕觥?YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%1100不能無(wú)限增殖23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無(wú)病毒，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無(wú)病毒。

（2）①基因表達(dá)載體上除有復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子、目的基因外；還有標(biāo)記基因（便于篩選目的基因）；

②農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細(xì)胞；

④先誘導(dǎo)生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導(dǎo)愈傷組織生芽，待長(zhǎng)出芽后，再將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上，進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗；

⑤在個(gè)體生物學(xué)水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來(lái)直接鑒定再生植株；分析再生植株沒(méi)有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據(jù)Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后用（凝膠）電泳分離PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)；植株B、C沒(méi)有出現(xiàn)條帶，則可能是因?yàn)闆](méi)有導(dǎo)入目的基因；植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力，則可能是因?yàn)閷?dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質(zhì)沒(méi)有活性等?！窘馕觥?1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無(wú)病毒。

(2)標(biāo)記基因攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細(xì)胞先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導(dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能表達(dá)（或不能轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質(zhì)沒(méi)有活性等，合理即可）沒(méi)有導(dǎo)入目的基因24、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見(jiàn)的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)其表達(dá)水平升高，當(dāng)用兩種調(diào)控序列同時(shí)連接啟動(dòng)子，啟動(dòng)子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級(jí)代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動(dòng)所必需的，大多存在于細(xì)胞內(nèi)。次級(jí)代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動(dòng)必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴(kuò)散的方式進(jìn)入細(xì)胞。

（2）實(shí)驗(yàn)的自變量是有無(wú)調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對(duì)照組的目的是為了排除無(wú)光變量的影響，除了沒(méi)有調(diào)控序列，其他處理和實(shí)驗(yàn)組相同，所以對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組豬肝細(xì)胞均導(dǎo)入含CYP3A基因啟動(dòng)子及LUC基因的表達(dá)載體，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個(gè)調(diào)控序列和對(duì)照組活性一致，缺失一個(gè)比對(duì)照組活性略強(qiáng)，兩個(gè)都存在活性最高，說(shuō)明這兩個(gè)調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件。故缺失兩個(gè)調(diào)控序列或其中任一個(gè)，T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動(dòng)子活性明顯增強(qiáng)。

（3）①實(shí)驗(yàn)的目的是要驗(yàn)證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點(diǎn)野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點(diǎn)突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會(huì)競(jìng)爭(zhēng)NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過(guò)互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會(huì)降低CYP3A基因的啟動(dòng)子的活性?！窘馕觥?1)次級(jí)自由擴(kuò)散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個(gè)調(diào)控序列或其中任一個(gè)；T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動(dòng)子活性增強(qiáng)。

(3)結(jié)合位點(diǎn)突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會(huì)競(jìng)爭(zhēng)NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過(guò)互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共2題，共20分)25、略

【分析】【分析】

1；PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因：

（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制；

（2）過(guò)程：第一步：加熱至90～95℃；DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。

2；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原