細胞狀態(tài)產(chǎn)品

關鍵詞：細胞狀態(tài)，增殖，凋亡，CCK8技術類文章飛躍的載體鐵死亡Ferroptosis）——細胞狀態(tài)新模式程序性細胞死亡研究層出不窮，本期小編要與大家分享的是細胞狀態(tài)研究的另一熱點專題——鐵死亡(Ferroptosis）,從過去幾年國家自然科學基金中標的項目我們發(fā)現(xiàn)，從2013年申請第一項關于“鐵死亡”的項目，2017年增加到16項，到2019年增至76項，累計資助經(jīng)費6008.2萬，都說明了鐵死亡研究不斷受到科學家的重視，成為細胞死亡研究新的“寵兒”。說到鐵死亡，小伙伴們就會有很多疑惑了：鐵死亡是不是與鐵離子有關系呢？它的原理是什么呢？它與細胞凋亡、壞死的區(qū)別是什么呢？我們應該從哪些方面來研究它呢？從發(fā)生機制上講鐵死亡主要是在二價鐵離子或酯氧合酶的作用下，催化細胞膜上高表達的不飽和脂肪酸，發(fā)生脂質體過氧化，從而誘導細胞死亡，還表現(xiàn)在抗氧化體系谷胱甘肽GSH和谷胱甘肽過氧化物酶4-GPX4的表達量降低。圖片來自網(wǎng)絡鐵死亡主要有以下幾個特點：一、細胞形態(tài)方面：鐵死亡會導致細胞線粒體變小，膜密度增高，嵴減少、消失，外膜破碎。細胞核中形態(tài)變化不明顯。超微形態(tài)學特征顯示細胞膜斷裂和出泡，線粒體變小、膜密度增高、線粒體脊減少或消失、線粒體外膜斷裂，細胞核大小正常、但缺乏染色質凝聚。電鏡下表現(xiàn)為細胞內線粒體變小及雙層膜密度增高。細胞成分方面：鐵死亡表現(xiàn)為脂質過氧化增高，ROS升高。也有一些特征基因發(fā)生變化。（1）生物學特征為鐵和活性氧（ROS）聚集，激活絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase，MAPK）系統(tǒng)，通過降低胱氨酸的攝取、耗竭谷胱甘肽，抑制ystemXc-和增加還原型酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶，釋放花生四烯酸等介質。（2）免疫學特征為損傷相關分子模式（damage-associatedmolecularpatternsmolecules，DAMPs）釋放前炎癥介質（如高遷移率族蛋白B1等）。（3）基因水平上主要受核糖體蛋白L8（ribosomalproteinL8，RPL8），鐵反應元件結合蛋白（ironresponseelementbindingprotein2，IREB2），ATP合成酶F0復合體亞基C3（ATPsynthaseF0complexsubunitC3，ATP5G3），三四肽重復結構域35（tetratricopeptiderepeatdomain35，TTC35），檸檬酸合成酶（citratesynthase，CS），?；o酶A合成酶家族成員2（acyl-CoAsynthetasefamilymember2，ACSF2）以及受代謝、儲存基因TFRC、ISCU、FTH1、FTL、SLC11A2的調節(jié)?，F(xiàn)在比較認可的鐵死亡的檢測方法如下所示1、新陳代謝（1）細胞活性：CCK-8；（2）細胞內鐵水平：可以使用PGSK探針檢測，通過流式細胞術或共聚焦顯微鏡監(jiān)測活細胞內鐵含量的細胞膜透性染料，結果表明，在鐵死亡的細胞中，PGSK的綠色熒光會減弱；（3）活性氧的水平：通過C11-BODIPY探針檢測，在鐵死亡細胞中，探針會由紅色轉化為綠色；（4）QPCR/WesternBlot：檢測細胞內與鐵死亡相關的因子的變化，例如COX-2,ACSL4,PTGS2,NOX1,GPX4和FTH1等，其中COX-2,ACSL4,PTGS2和NOX1在鐵死亡細胞中表達上調；GPX4和FTH1在鐵死亡細胞中表達下調。2、形態(tài)觀察（1）透射電鏡直接對細胞形態(tài)進行觀察：細胞發(fā)生鐵死亡時線粒體變小以及線粒體膜密度較大；（2）線粒體膜電位檢測：通過流式細胞儀收集TMRE陽性細胞的比例；（3）線粒體形態(tài)觀察：向細胞內轉染LifeAct-GFP熒光蛋白，一定時間后通過有絲分裂追蹤器觀察線粒體的形態(tài)。相關產(chǎn)品詳情產(chǎn)品名稱貨號規(guī)格價格（元）SuperKine?超敏型細胞增殖檢測試劑（CCK-8）BMU106-CN200T/1000T/10000T98/298/2398細胞增殖/毒性檢測試劑盒（CCK-8法）KTA10201000T/10000T498/2998一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（綠色熒光）KTA201050T/100T1898/3198一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（紅色熒光）KTA201150T/100T1898/3198AnnexinV-AbFluor?488/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒KTA000250T/100T498/598AnnexinV-EGFP/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒KTA000520T/50T/100T198/398/498線粒體膜電位分析試劑盒（JC-1法）KTA400120T/100T/500T416/998/3616Caspase-1活性分析試劑盒（比色法）KTA302020T/50T/100T739/1269/2316CheKine?活性氧（ROS）含量檢測試劑盒（熒光法）KTB191050T/100T358/639CheKine?還原型谷胱甘肽（GSH）檢測試劑盒（微量法）KTB160048T/96T278/339以上鐵死亡相關研究試劑盒均具有試劑齊全，操作簡便，實驗結果可靠的特點，符合科研工作者的實驗需求。歡迎廣大“蝌蚪”多多關注Abbkine公眾號，還會有更多科研驚喜等著大家喲。同時，Abbkine的技術專家為了給廣大讀者提供學習生物知識的平臺，經(jīng)過不懈努力，將多種高端生物實驗的干貨整理出來，后期陸續(xù)在微信公眾號中刊登，請廣大熱愛科學的讀者持續(xù)關注Abbkine公眾號。Abbkine專注于蛋白學和細胞學領域，致力于創(chuàng)新和研發(fā)各類抗體、蛋白質、分析試劑與試劑盒，以期成為生命科學研究發(fā)展、藥物研發(fā)等領域的關鍵推動者。我們?yōu)槟峁┑鞍缀兔庖哐芯坑脩糇钕矏鄣漠a(chǎn)品，從免疫學基礎產(chǎn)品，如蛋白提取定量，到免疫學實驗的內參標簽抗體、一抗及二抗等；細胞研究用戶最喜愛的產(chǎn)品，從用于檢測細胞狀態(tài)的染料及試劑盒，細胞器提取試劑盒，細胞亞結構染色示蹤及細胞