細(xì)胞狀態(tài)產(chǎn)品

關(guān)鍵詞：細(xì)胞狀態(tài)，增殖，凋亡，CCK8技術(shù)類(lèi)文章飛躍的載體鐵死亡Ferroptosis）——細(xì)胞狀態(tài)新模式程序性細(xì)胞死亡研究層出不窮，本期小編要與大家分享的是細(xì)胞狀態(tài)研究的另一熱點(diǎn)專(zhuān)題——鐵死亡(Ferroptosis）,從過(guò)去幾年國(guó)家自然科學(xué)基金中標(biāo)的項(xiàng)目我們發(fā)現(xiàn)，從2013年申請(qǐng)第一項(xiàng)關(guān)于“鐵死亡”的項(xiàng)目，2017年增加到16項(xiàng)，到2019年增至76項(xiàng)，累計(jì)資助經(jīng)費(fèi)6008.2萬(wàn)，都說(shuō)明了鐵死亡研究不斷受到科學(xué)家的重視，成為細(xì)胞死亡研究新的“寵兒”。說(shuō)到鐵死亡，小伙伴們就會(huì)有很多疑惑了：鐵死亡是不是與鐵離子有關(guān)系呢？它的原理是什么呢？它與細(xì)胞凋亡、壞死的區(qū)別是什么呢？我們應(yīng)該從哪些方面來(lái)研究它呢？從發(fā)生機(jī)制上講鐵死亡主要是在二價(jià)鐵離子或酯氧合酶的作用下，催化細(xì)胞膜上高表達(dá)的不飽和脂肪酸，發(fā)生脂質(zhì)體過(guò)氧化，從而誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，還表現(xiàn)在抗氧化體系谷胱甘肽GSH和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4-GPX4的表達(dá)量降低。圖片來(lái)自網(wǎng)絡(luò)鐵死亡主要有以下幾個(gè)特點(diǎn)：一、細(xì)胞形態(tài)方面：鐵死亡會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞線粒體變小，膜密度增高，嵴減少、消失，外膜破碎。細(xì)胞核中形態(tài)變化不明顯。超微形態(tài)學(xué)特征顯示細(xì)胞膜斷裂和出泡，線粒體變小、膜密度增高、線粒體脊減少或消失、線粒體外膜斷裂，細(xì)胞核大小正常、但缺乏染色質(zhì)凝聚。電鏡下表現(xiàn)為細(xì)胞內(nèi)線粒體變小及雙層膜密度增高。細(xì)胞成分方面：鐵死亡表現(xiàn)為脂質(zhì)過(guò)氧化增高，ROS升高。也有一些特征基因發(fā)生變化。（1）生物學(xué)特征為鐵和活性氧（ROS）聚集，激活絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase，MAPK）系統(tǒng)，通過(guò)降低胱氨酸的攝取、耗竭谷胱甘肽，抑制ystemXc-和增加還原型酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶，釋放花生四烯酸等介質(zhì)。（2）免疫學(xué)特征為損傷相關(guān)分子模式（damage-associatedmolecularpatternsmolecules，DAMPs）釋放前炎癥介質(zhì)（如高遷移率族蛋白B1等）。（3）基因水平上主要受核糖體蛋白L8（ribosomalproteinL8，RPL8），鐵反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（ironresponseelementbindingprotein2，IREB2），ATP合成酶F0復(fù)合體亞基C3（ATPsynthaseF0complexsubunitC3，ATP5G3），三四肽重復(fù)結(jié)構(gòu)域35（tetratricopeptiderepeatdomain35，TTC35），檸檬酸合成酶（citratesynthase，CS），酰基輔酶A合成酶家族成員2（acyl-CoAsynthetasefamilymember2，ACSF2）以及受代謝、儲(chǔ)存基因TFRC、ISCU、FTH1、FTL、SLC11A2的調(diào)節(jié)?，F(xiàn)在比較認(rèn)可的鐵死亡的檢測(cè)方法如下所示1、新陳代謝（1）細(xì)胞活性：CCK-8；（2）細(xì)胞內(nèi)鐵水平：可以使用PGSK探針檢測(cè)，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)或共聚焦顯微鏡監(jiān)測(cè)活細(xì)胞內(nèi)鐵含量的細(xì)胞膜透性染料，結(jié)果表明，在鐵死亡的細(xì)胞中，PGSK的綠色熒光會(huì)減弱；（3）活性氧的水平：通過(guò)C11-BODIPY探針檢測(cè)，在鐵死亡細(xì)胞中，探針會(huì)由紅色轉(zhuǎn)化為綠色；（4）QPCR/WesternBlot：檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)與鐵死亡相關(guān)的因子的變化，例如COX-2,ACSL4,PTGS2,NOX1,GPX4和FTH1等，其中COX-2,ACSL4,PTGS2和NOX1在鐵死亡細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)；GPX4和FTH1在鐵死亡細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)。2、形態(tài)觀察（1）透射電鏡直接對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察：細(xì)胞發(fā)生鐵死亡時(shí)線粒體變小以及線粒體膜密度較大；（2）線粒體膜電位檢測(cè)：通過(guò)流式細(xì)胞儀收集TMRE陽(yáng)性細(xì)胞的比例；（3）線粒體形態(tài)觀察：向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染LifeAct-GFP熒光蛋白，一定時(shí)間后通過(guò)有絲分裂追蹤器觀察線粒體的形態(tài)。相關(guān)產(chǎn)品詳情產(chǎn)品名稱(chēng)貨號(hào)規(guī)格價(jià)格（元）SuperKine?超敏型細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑（CCK-8）BMU106-CN200T/1000T/10000T98/298/2398細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)試劑盒（CCK-8法）KTA10201000T/10000T498/2998一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（綠色熒光）KTA201050T/100T1898/3198一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（紅色熒光）KTA201150T/100T1898/3198AnnexinV-AbFluor?488/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒KTA000250T/100T498/598AnnexinV-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒KTA000520T/50T/100T198/398/498線粒體膜電位分析試劑盒（JC-1法）KTA400120T/100T/500T416/998/3616Caspase-1活性分析試劑盒（比色法）KTA302020T/50T/100T739/1269/2316CheKine?活性氧（ROS）含量檢測(cè)試劑盒（熒光法）KTB191050T/100T358/639CheKine?還原型谷胱甘肽（GSH）檢測(cè)試劑盒（微量法）KTB160048T/96T278/339以上鐵死亡相關(guān)研究試劑盒均具有試劑齊全，操作簡(jiǎn)便，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠的特點(diǎn)，符合科研工作者的實(shí)驗(yàn)需求。歡迎廣大“蝌蚪”多多關(guān)注Abbkine公眾號(hào)，還會(huì)有更多科研驚喜等著大家喲。同時(shí)，Abbkine的技術(shù)專(zhuān)家為了給廣大讀者提供學(xué)習(xí)生物知識(shí)的平臺(tái)，經(jīng)過(guò)不懈努力，將多種高端生物實(shí)驗(yàn)的干貨整理出來(lái)，后期陸續(xù)在微信公眾號(hào)中刊登，請(qǐng)廣大熱愛(ài)科學(xué)的讀者持續(xù)關(guān)注Abbkine公眾號(hào)。Abbkine專(zhuān)注于蛋白學(xué)和細(xì)胞學(xué)領(lǐng)域，致力于創(chuàng)新和研發(fā)各類(lèi)抗體、蛋白質(zhì)、分析試劑與試劑盒，以期成為生命科學(xué)研究發(fā)展、藥物研發(fā)等領(lǐng)域的關(guān)鍵推動(dòng)者。我們?yōu)槟峁┑鞍缀兔庖哐芯坑脩糇钕矏?ài)的產(chǎn)品，從免疫學(xué)基礎(chǔ)產(chǎn)品，如蛋白提取定量，到免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的內(nèi)參標(biāo)簽抗體、一抗及二抗等；細(xì)胞研究用戶最喜愛(ài)的產(chǎn)品，從用于檢測(cè)細(xì)胞狀態(tài)的染料及試劑盒，細(xì)胞器提取試劑盒，細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)染色示蹤及細(xì)胞