《微生物資源庫建設(shè)與管理規(guī)范》

ICS07.080

CCSC04

DB4403

深圳市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB4403/TXXX—XXXX

代替SZDB/Z243—2017

微生物資源庫建設(shè)與管理規(guī)范

StandardsforConstructionandManagementofMicrobialRepository

（送審稿）

在提交反饋意見時(shí)，請將您知道的相關(guān)專利連同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

深圳市市場監(jiān)督管理局??發(fā)布

DB4403/TXXX—XXXX

微生物資源庫建設(shè)與管理規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了微生物資源庫建設(shè)的場地與設(shè)施、機(jī)構(gòu)設(shè)置、培訓(xùn)、質(zhì)量管理、安全管理與操作規(guī)范

的要求。

本文件適用于深圳市微生物資源庫建設(shè)與管理工作的開展。

注：本文件適用于三類微生物和四類微生物，不適用于一類微生物和二類微生物。根據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布

的最新版人間傳染的病原微生物名錄劃分微生物類別。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB2894安全標(biāo)志及其使用導(dǎo)則

GB/T4857.5包裝運(yùn)輸包裝件跌落試驗(yàn)方法

GB/T5458液氮生物容器

GB13690化學(xué)品分類和危險(xiǎn)性公示通則

GB/T15170包裝容器工業(yè)用薄鋼板圓罐

GB15258化學(xué)品安全標(biāo)簽編寫規(guī)定

GB/T18883室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求

GB/T37864生物樣本庫質(zhì)量和能力通用要求

GB50140建筑滅火器配置設(shè)計(jì)規(guī)范

MH/T1019民用航空危險(xiǎn)品運(yùn)輸文件

AQ3013危險(xiǎn)化學(xué)品從業(yè)單位安全標(biāo)準(zhǔn)化通用規(guī)范

ISO21710:2020生物技術(shù)微生物資源中心數(shù)據(jù)管理和數(shù)據(jù)發(fā)布規(guī)范（Biotechnology—

Specificationondatamanagementandpublicationinmicrobialresourcecenters）

CNAS—CL05實(shí)驗(yàn)室生物安全認(rèn)可準(zhǔn)則

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

微生物microorganism

微觀生命體。

注：如病毒、所有原核生物（古細(xì)菌和細(xì)菌）和幾種真核生物、真菌，包括酵母、藻類、原生生物。

[來源：GB/T37864—2019,3.31]

1

DB4403/TXXX—XXXX

微生物資源microbialresources

指有一定科學(xué)意義、具有實(shí)際或潛在實(shí)用價(jià)值的微生物（3.1）及其相關(guān)的樣本及信息數(shù)據(jù)；包括

可培養(yǎng)微生物資源和非可培養(yǎng)微生物資源。

微生物資源庫microbialrepository

開展微生物資源保藏的合法實(shí)體或其部分。

可培養(yǎng)微生物culturablemicroorganism

可以得到純培養(yǎng)物（3.8）的微生物（3.1）。

非可培養(yǎng)微生物non-culturablemicroorganism

不可以得到純培養(yǎng)物（3.8）的微生物（3.1）。

注：如在混合菌群、環(huán)境樣本中存在，但用目前的方法不能得到純培養(yǎng)物的微生物。

菌（毒）種保藏culturepreservation

將微生物菌（毒）種用各種適宜方法妥善保藏，避免死亡、污染，保持其原有性狀基本穩(wěn)定。

[來源：SN/T2660—2010，定義3.1，有修改]

純度檢測puritytesting

指通過適當(dāng)?shù)姆椒z測菌（毒）種是否為純培養(yǎng)物（3.8）。

純培養(yǎng)物pureculture

由單個(gè)細(xì)胞的后代組成的培養(yǎng)物，即單細(xì)胞培養(yǎng)物或無性繁殖系。通常是由挑取單個(gè)菌落或利用單

細(xì)胞分離技術(shù)，移種繁殖獲得。

復(fù)核check

對保藏的各類微生物菌（毒）種，在接收和保藏過程中，為保證菌（毒）種質(zhì)量而對鑒定結(jié)果進(jìn)行

的核查；包括對菌（毒）種活性、純度、穩(wěn)定性等的檢測，以及采用最新分類學(xué)觀點(diǎn)對分類地位發(fā)生變

化的菌（毒）種的重新鑒定。

4微生物資源庫場地與設(shè)施

規(guī)劃

4.1.1微生物資源庫的建設(shè)符合本文件是遵循《中華人民共和國生物安全法》和《中華人民共和國人

類遺傳資源管理?xiàng)l例》等相關(guān)法律法規(guī)的方法之一。

4.1.2微生物資源庫的建設(shè)應(yīng)符合GB19489的規(guī)定。

4.1.3應(yīng)設(shè)置4℃冷藏、-20℃冷凍儲(chǔ)存、-80℃超低溫儲(chǔ)存和液氮冷凍儲(chǔ)存四種方式儲(chǔ)存微生物資源。

場地、設(shè)施與設(shè)備

4.2.1實(shí)驗(yàn)區(qū)域

2

DB4403/TXXX—XXXX

實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)包括樣品處理區(qū)、分子實(shí)驗(yàn)區(qū)、鑒定區(qū)、樣品信息整理區(qū)、樣品制備區(qū)、保存區(qū)和銷毀

區(qū)共七個(gè)區(qū)域，其中樣品處理區(qū)和分子實(shí)驗(yàn)區(qū)應(yīng)設(shè)置兩個(gè)樣品暫存區(qū)，分別用于儲(chǔ)存未處理樣品和已處

理樣品。每個(gè)區(qū)域應(yīng)標(biāo)識(shí)潔凈和風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，不應(yīng)進(jìn)行交叉

實(shí)驗(yàn)操作，以防污染。

4.2.2空調(diào)與通風(fēng)系統(tǒng)

通風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)使室內(nèi)空氣質(zhì)量符合GB/T18883的規(guī)定，應(yīng)確保氣流由“清潔”空間向“污染”空間流

動(dòng)，并最大限度減少室內(nèi)回流與渦流。培養(yǎng)室通風(fēng)量可根據(jù)各房間容積適當(dāng)設(shè)置濾菌通風(fēng)口，保證與外

界通氣良好。

空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)有足夠的溫度和濕度控制能力，微生物資源庫的外圍環(huán)境溫度應(yīng)不超過22℃。

液氮罐和干冰使用區(qū)域可安裝氣體監(jiān)控裝置和排氣系統(tǒng)，以保證足夠的氧氣水平。

4.2.3污染物的處理

實(shí)驗(yàn)室的銷毀區(qū)內(nèi)應(yīng)安裝高壓滅菌設(shè)備。微生物實(shí)驗(yàn)室垃圾應(yīng)根據(jù)國家或地方相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)

等進(jìn)行分類和處理。感染性廢棄物應(yīng)先清除污染（如滅菌），再分類裝袋，及時(shí)送交有資質(zhì)的單位處理。

重復(fù)使用的染菌器材應(yīng)經(jīng)過滅菌、清洗、再滅菌、烘干等處理后，才可再次使用。

不能高壓滅菌的污染物，應(yīng)使用其他可靠的消毒方法進(jìn)行消毒，如紫外線消毒燈、消毒噴霧器等。

4.2.4照明系統(tǒng)

冷凍樣本存儲(chǔ)區(qū)及其附近應(yīng)使用熒光燈或其他不發(fā)熱光源。應(yīng)配備應(yīng)急照明裝置。

4.2.5備用電源

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)，供電系統(tǒng)應(yīng)與備用電源系統(tǒng)，如備用電池或備用發(fā)電機(jī)相連。備用電

源系統(tǒng)應(yīng)可以支持微生物資源庫運(yùn)行48h以上。

4.2.6安全設(shè)施

安全設(shè)施應(yīng)包括門禁系統(tǒng)、監(jiān)控系統(tǒng)、消防設(shè)施、備份系統(tǒng)等。

4.2.7人員

應(yīng)根據(jù)微生物菌（毒）株樣本及實(shí)驗(yàn)操作的需要，配備總負(fù)責(zé)人、樣本檢測人員、制備保藏人員、

樣本信息整理人員及負(fù)責(zé)法律、財(cái)務(wù)、行政和培訓(xùn)等其它事務(wù)的工作人員。各部門人員應(yīng)當(dāng)滿足相應(yīng)崗

位的要求，特定崗位應(yīng)經(jīng)過相應(yīng)的技術(shù)培訓(xùn)。

5微生物資源庫機(jī)構(gòu)設(shè)置

科學(xué)及倫理審查委員會(huì)

科學(xué)及倫理審查委員會(huì)應(yīng)由微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的專家組成，至少3人，負(fù)責(zé)對微生物菌（毒）株

樣本采集和使用的方案進(jìn)行科學(xué)性及倫理審查。

生物安全評審委員會(huì)

生物安全評審委員會(huì)應(yīng)由微生物學(xué)專家、醫(yī)務(wù)人員、技術(shù)人員、實(shí)驗(yàn)室管理人員等各方面的專家或

工作人員組成，至少5人，負(fù)責(zé)微生物資源庫的生物安全政策和安全操作規(guī)范的制定。

3

DB4403/TXXX—XXXX

管理機(jī)構(gòu)

管理機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)微生物資源庫建設(shè)的規(guī)劃、組織協(xié)調(diào)、運(yùn)營，對微生物資源庫的工作有最終的審核批

準(zhǔn)權(quán)。

執(zhí)行機(jī)構(gòu)

執(zhí)行機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)微生物資源庫日常工作的執(zhí)行與落實(shí)，包括微生物菌（毒）株樣本的采集和鑒定、處

理、運(yùn)輸、儲(chǔ)存、出入庫管理、質(zhì)量管理、安全管理以及日常行政、財(cái)務(wù)工作。

6培訓(xùn)

培訓(xùn)內(nèi)容

微生物資源庫工作人員應(yīng)接受至少每年1次的培訓(xùn)且考核合格方能上崗。對于未能及時(shí)參加全員培

訓(xùn)的新上崗、轉(zhuǎn)崗的員工應(yīng)進(jìn)行生物安全相關(guān)知識(shí)、生物安全手冊等培訓(xùn)，明確所從事工作的生物安全

風(fēng)險(xiǎn)。培訓(xùn)內(nèi)容包括：

a)實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn)：生物安全相關(guān)法律法規(guī)、本實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊、生物安全操作規(guī)范和生

物安全管理制度學(xué)習(xí)，個(gè)人防護(hù)用品和消防設(shè)備正確使用學(xué)習(xí)，應(yīng)急預(yù)案演練；

b)實(shí)驗(yàn)操作培訓(xùn)：實(shí)驗(yàn)室相關(guān)儀器設(shè)備使用；

c)實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn)：菌（毒）株及樣本的收集、運(yùn)輸、保藏、使用、銷毀、實(shí)驗(yàn)室的消毒與滅菌、

感染性廢物的處置、急救等。

針對不同工作崗位，在全員培訓(xùn)的基礎(chǔ)上，應(yīng)組織開展專項(xiàng)生物安全培訓(xùn)。對于進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的外單

位人員，應(yīng)評估其進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室期間從事工作的生物安全風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)行必要的生物安全培訓(xùn)，且其進(jìn)入實(shí)驗(yàn)

室期間所有工作均應(yīng)在本實(shí)驗(yàn)室人員的指導(dǎo)下進(jìn)行。

歸檔及考核

微生物資源庫應(yīng)對培訓(xùn)效果進(jìn)行評估，對培訓(xùn)人員進(jìn)行相應(yīng)的考核，考核可通過筆試、答辯和實(shí)際

操作等方式進(jìn)行。應(yīng)建立并保存工作人員的培訓(xùn)、考核檔案，檔案應(yīng)記錄其接受的所有培訓(xùn)及考核成績。

7質(zhì)量管理

質(zhì)量要求

微生物資源庫的實(shí)驗(yàn)室檢測、校準(zhǔn)、標(biāo)準(zhǔn)方法、非標(biāo)準(zhǔn)方法和實(shí)驗(yàn)室的開發(fā)等質(zhì)量管理，宜進(jìn)行

ISO/ICE17025認(rèn)證。微生物資源庫應(yīng)制定質(zhì)量手冊，規(guī)范微生物資源庫工作人員及微生物資源庫運(yùn)營

相關(guān)人員的職責(zé)和標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

驗(yàn)證

微生物資源庫標(biāo)準(zhǔn)操作程序中所涉及的樣本處理方法、樣本質(zhì)控方法，可由微生物資源庫技術(shù)人員

進(jìn)行驗(yàn)證。

審查

4

DB4403/TXXX—XXXX

應(yīng)安排具有內(nèi)審資格證書的審查員定期對微生物資源庫的標(biāo)準(zhǔn)操作程序的執(zhí)行情況、庫存系統(tǒng)、監(jiān)

管和安全等問題進(jìn)行審查。審查員應(yīng)熟悉但不直接參與被審查的工作，且不受微生物資源庫總負(fù)責(zé)人（主

管）的直接領(lǐng)導(dǎo)。

8安全管理

生物安全

8.1.1微生物資源庫菌（毒）株樣本采集和使用符合本文件是遵循《中華人民共和國生物安全法》等

相關(guān)法律法規(guī)的方法之一。

8.1.2如涉及生物安全問題，微生物資源庫在開展菌（毒）株樣本采集和使用工作前應(yīng)通過微生物資

源庫的生物安全評審委員會(huì)的評審，并遵循CNAS—CL05《實(shí)驗(yàn)室生物安全認(rèn)可準(zhǔn)則》的規(guī)定。

化學(xué)安全

微生物資源庫中化學(xué)藥品的使用應(yīng)遵守GB13690中的規(guī)定；在使用到有毒有害物質(zhì)的工作區(qū)域，應(yīng)

遵守AQ3013的規(guī)定。

8.2.1干冰安全

干冰使用區(qū)和存儲(chǔ)區(qū)應(yīng)確保良好的通風(fēng)條件，并安裝氧氣與二氧化碳檢測裝置。

8.2.2液氮安全

液氮儲(chǔ)存裝置應(yīng)符合GB/T5458的要求。應(yīng)記錄每天的液氮用量與剩余量。處理和使用液氮時(shí)應(yīng)佩

戴合適的手套、面罩和防護(hù)服。

設(shè)施安全

微生物資源庫應(yīng)根據(jù)工作范圍配備滿足其功能所需的全部設(shè)備，應(yīng)制定設(shè)備清單并定期更新。設(shè)備

應(yīng)由經(jīng)過授權(quán)的人員操作。應(yīng)為設(shè)備制定預(yù)防性維護(hù)和維修措施，應(yīng)根據(jù)制造商建議的間隔時(shí)間，定期

進(jìn)行設(shè)備系統(tǒng)維護(hù)工作，制定有序的設(shè)備更換計(jì)劃。

消防安全

微生物資源庫防火系統(tǒng)應(yīng)符合GB19489中消防安全的規(guī)定。微生物資源庫滅火器的配置應(yīng)符合GB

50140的規(guī)定。

安全標(biāo)志

微生物資源庫中相關(guān)安全標(biāo)志的設(shè)計(jì)和編寫應(yīng)符合GB15258及GB2894的規(guī)定。

應(yīng)急預(yù)案

8.6.1生物安全事故應(yīng)急措施

符合本文件是遵循《國家突發(fā)公共衛(wèi)生事件相關(guān)信息報(bào)告工作規(guī)范（試行）》等相關(guān)法律法

規(guī)的方法之一。

微生物資源庫負(fù)責(zé)人接到安全事故報(bào)告后，應(yīng)立即組織人員對事故進(jìn)行確認(rèn)，并對事故的性

質(zhì)及擴(kuò)散范圍進(jìn)行充分評估。應(yīng)對相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查，對密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察并留取血清或者

5

DB4403/TXXX—XXXX

相關(guān)標(biāo)本。應(yīng)立即封閉微生物實(shí)驗(yàn)室及封存標(biāo)本，防止微生物擴(kuò)散，對造成污染的工作環(huán)境及污染物進(jìn)

行消毒，并配合衛(wèi)生防疫等部門的調(diào)查。

8.6.2化學(xué)污染應(yīng)急措施

應(yīng)立即用流動(dòng)清水沖洗被污染部位，到相關(guān)醫(yī)療機(jī)構(gòu)就診，由醫(yī)療機(jī)構(gòu)根據(jù)造成污染的化學(xué)物質(zhì)的

不同性質(zhì)用藥。

應(yīng)在事件發(fā)生12h內(nèi)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào)，若事件超出可控范圍或出現(xiàn)人員傷亡，應(yīng)立即向上級(jí)有

關(guān)部門匯報(bào)。

8.6.3意外創(chuàng)傷應(yīng)急措施

被污染的針頭、玻璃碎片或其他銳刺傷后，應(yīng)立即用力捏住受傷部位，向離心方向擠出傷口的血液，

不應(yīng)來回?cái)D壓，同時(shí)應(yīng)用流動(dòng)水沖洗傷口，再用75%酒精消毒傷口，并用防水敷料覆蓋，及時(shí)到相關(guān)醫(yī)

療機(jī)構(gòu)就診處理。

應(yīng)在意外受傷12h內(nèi)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào)，若事件超出可控范圍或出現(xiàn)人員傷亡，應(yīng)立即向上級(jí)有

關(guān)部門匯報(bào)。

8.6.4消防應(yīng)急措施

微生物資源庫每年應(yīng)至少組織一次實(shí)驗(yàn)室全員消防演練，全部人員應(yīng)學(xué)會(huì)使用便攜式滅火器，并知

曉不同火情采用不同滅火器。所有工作人員應(yīng)學(xué)會(huì)如何發(fā)布火警警報(bào)，遇到失火時(shí)應(yīng)做到：

a)撥打報(bào)警電話“119”，發(fā)出火警警報(bào)以求得幫助；

b)使用便攜式滅火器進(jìn)行滅火；

c)如果不能撲滅火情，把所有通向火場的門關(guān)緊，并用濕毛巾堵住下面的門縫，以阻止火情的

蔓延；

d)將房間里的所有人員撤出，撤離時(shí)，關(guān)閉所有門窗。

9操作規(guī)范

總則

微生物資源庫實(shí)驗(yàn)室的生物防護(hù)水平應(yīng)與保藏的微生物資源危害程度相適應(yīng)。

微生物資源庫的操作應(yīng)符合GB/T37864的要求。

微生物資源庫整體的操作流程應(yīng)遵循附錄A。

樣本采集

9.2.1采集人員

采集人員應(yīng)接受專業(yè)培訓(xùn)，對采集目標(biāo)進(jìn)行全面的風(fēng)險(xiǎn)評估。應(yīng)了解采集目標(biāo)的分類學(xué)知識(shí)和環(huán)境

特征，對于有毒性、可能致病性的樣本采集應(yīng)做好防護(hù)措施，并接受有關(guān)致病因子的免疫接種。

9.2.2采集方式

可培養(yǎng)微生物資源收集的實(shí)物應(yīng)為純培養(yǎng)物。可通過自行采集分離、交換、購買、接受委托保藏、

接受贈(zèng)送等方式進(jìn)行收集。自行采集分離應(yīng)按附錄B填寫采集環(huán)境描述表。

非可培養(yǎng)微生物資源收集的實(shí)物應(yīng)為混合的菌群/群落樣本。宜通過自行采集的方式收集。采集時(shí)

應(yīng)按附錄B填寫采集環(huán)境描述表。

6

DB4403/TXXX—XXXX

包裝

微生物資源應(yīng)根據(jù)不同的安全等級(jí)進(jìn)行包裝。應(yīng)選用三層容器：內(nèi)層容器、中層容器以及外包裝，

包裝要求：

a）內(nèi)層容器：防水、防泄露、密閉性能良好，外面包裹足夠多的吸水材料，以便在發(fā)生泄露事故

時(shí)能夠快速吸收所含的微生物；

b）中層容器：堅(jiān)固、防水、防泄露，該層包裝具體要求應(yīng)符合GB/T15170；

c）外包裝：應(yīng)堅(jiān)固耐壓，外部應(yīng)有標(biāo)記和描述承運(yùn)者、護(hù)送者、接受者和微生物的標(biāo)簽；

d）有低溫運(yùn)輸要求的樣本，冷凍劑應(yīng)置于中層和外包裝間，若使用濕冰，應(yīng)對內(nèi)層包裝進(jìn)行防水

檢驗(yàn)，步驟可采用GB/T7350的A類3級(jí)包裝進(jìn)行。航空運(yùn)輸?shù)臉悠钒b應(yīng)符合MH/T1019的規(guī)定；

e）包裝好后要進(jìn)行包裝效果檢驗(yàn)，應(yīng)采取GB/T4857.5所規(guī)定的方法進(jìn)行；

f）包裝內(nèi)含物應(yīng)按附錄C填寫微生物包裝內(nèi)容物詳細(xì)清單。

運(yùn)輸

微生物資源運(yùn)輸?shù)某羞\(yùn)者應(yīng)具備相應(yīng)的運(yùn)輸資質(zhì)。采用干冰或濕冰保溫的凍干微生物樣品，運(yùn)輸時(shí)

間應(yīng)在72h內(nèi)；采用液氮、干冰或濕冰保溫未凍干的微生物樣品，運(yùn)輸時(shí)間應(yīng)盡可能縮短，不應(yīng)超過96h。

開啟

包裝開啟應(yīng)在相應(yīng)的生物安全水平實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，并遵循以下準(zhǔn)則：

a)穿防護(hù)服、帶上手套等防護(hù)用具，每一層包裝打開前應(yīng)先仔細(xì)檢查外觀，觀察有無滲漏、破

損等異?，F(xiàn)象；

b)外包裝和第二層包裝同時(shí)有滲漏、破損等異常情況，并且安瓿瓶等微生物容器已經(jīng)破損，應(yīng)

立刻通知發(fā)放單位，同時(shí)對包裝、運(yùn)輸工具等微生物污染物進(jìn)行消毒；

c)外包裝有滲漏等異常情況，但安瓿等微生物容器無破損；或安瓿等微生物容器已經(jīng)破損，但

外包裝無破損、滲漏情況，則無需追溯破損地點(diǎn)，可按照生物安全操作原則，對微生物污染

物進(jìn)行消毒；

d)檢查內(nèi)容物與內(nèi)容物清單所列的項(xiàng)目是否相符，如不符，應(yīng)詢問發(fā)送方。樣本接收后應(yīng)及時(shí)

將信息反饋給樣本發(fā)送方。

菌（毒）種的純度檢測

對于新入庫的純培養(yǎng)微生物，應(yīng)參照相應(yīng)的純度檢測技術(shù)規(guī)程，如《微生物菌種資源收集、整理、

保藏技術(shù)規(guī)程匯編》，進(jìn)行純度檢測。古菌、細(xì)菌、放線菌、酵母菌、絲狀真菌等應(yīng)根據(jù)菌落形態(tài)、細(xì)

胞形態(tài)、芽孢形狀、孢子絲及孢囊、繁殖方式等進(jìn)行純度檢測。病毒應(yīng)采用純度檢查、支原體檢查、外

源病毒檢查、病毒種子外源因子檢查等方法進(jìn)行純度檢測。

菌（毒）種的復(fù)核

純培養(yǎng)微生物資源應(yīng)參照相應(yīng)的菌（毒）種資源復(fù)核技術(shù)規(guī)程，如《微生物菌種資源收集、整理、

保藏技術(shù)規(guī)程匯編》，進(jìn)行復(fù)核。應(yīng)按照附錄D填寫菌（毒）株復(fù)核信息。應(yīng)根據(jù)不同的菌（毒）種復(fù)

核鑒定其形態(tài)學(xué)特征、生理生化特征、繁殖特征等。復(fù)核信息應(yīng)包括復(fù)核菌（毒）株的基本信息、存活

性檢測和純度檢測，可包括序列測定。當(dāng)需要復(fù)核的菌（毒）種缺少序列測定數(shù)據(jù)時(shí)，應(yīng)將16SrDNA

序列測定作為復(fù)核鑒定的內(nèi)容之一。

非可培養(yǎng)微生物資源的復(fù)核可參考GB/T40226，對樣本進(jìn)行多樣性和豐度的檢測。

樣本編碼

7

DB4403/TXXX—XXXX

樣本的編碼應(yīng)遵循唯一性的原則。在滿足原則的基礎(chǔ)上，應(yīng)精簡，長度保持統(tǒng)一。

純培養(yǎng)微生物的標(biāo)簽編碼應(yīng)體系化并按附錄E規(guī)定的編碼規(guī)則進(jìn)行編碼。對未被分類和鑒定的微生

物種類應(yīng)先鑒定，完成鑒定后再進(jìn)行編碼和保藏。使用打印標(biāo)簽時(shí)應(yīng)確保標(biāo)簽?zāi)茉诟鞣N儲(chǔ)存環(huán)境下正常

使用，特別是在干冰和液氮環(huán)境。

污染的廢棄物處理

污染性廢棄物應(yīng)劃分為尖銳器具廢棄物和一般性廢棄物，根據(jù)種類不同，應(yīng)將其放在不同的垃圾容

器中，垃圾容器應(yīng)防滲漏，容納尖銳器具的容器應(yīng)能防穿刺。應(yīng)根據(jù)微生物種類及廢棄物種類，選擇高

壓、干烤、焚燒等不同的處理方法。廢棄物的處置應(yīng)參照GB19489廢物處置的規(guī)定執(zhí)行。

保藏

9.10.1菌（毒）種保藏

不同生物安全級(jí)別微生物菌種操作，應(yīng)在相應(yīng)的生物安全防護(hù)條件下進(jìn)行，如參照《不同生

物安全級(jí)別微生物菌種操作規(guī)程（試行）》進(jìn)行微生物菌種操作。

針對保藏菌（毒）株，可參照附錄F確定適宜的保藏方法。同一菌（毒）株應(yīng)選用兩種或兩

種以上方法進(jìn)行保藏。

只能采用一種保藏方法的菌（毒）株應(yīng)備份并存放于兩個(gè)以上的保藏設(shè)備中。

菌（毒）種保藏方法應(yīng)參照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

應(yīng)按照附錄G詳細(xì)填寫菌（毒）種保藏登記表，并錄入數(shù)據(jù)庫。

菌（毒）株的入庫和出庫應(yīng)記錄入檔，并實(shí)行雙人負(fù)責(zé)制管理。

重要菌（毒）株應(yīng)異地保存?zhèn)浞荨?/p>

菌（毒）種保藏設(shè)施應(yīng)確保正常運(yùn)行且有備用電源，并設(shè)專人負(fù)責(zé)管理，定期檢修維護(hù)。

應(yīng)保證菌（毒）種保藏的安全性，確保不對周圍環(huán)境造成污染和危害。

9.10.2定期復(fù)核及轉(zhuǎn)管

應(yīng)定期對保藏的菌（毒）種進(jìn)行檢查復(fù)核及轉(zhuǎn)管，檢查菌（毒）種保藏效果，發(fā)現(xiàn)有污染或退化跡

象時(shí)，應(yīng)及時(shí)分離純化、復(fù)壯，每次檢查應(yīng)有詳細(xì)記錄。檢測、復(fù)核、轉(zhuǎn)管情況應(yīng)填寫相關(guān)表格并錄入

菌（毒）種信息數(shù)據(jù)庫。

10樣品管理

菌（毒）種應(yīng)有專人負(fù)責(zé)管理，菌（毒）種不得隨意帶出實(shí)驗(yàn)室。外單位索取、購買菌（毒）種時(shí)

應(yīng)有登記，并包裝嚴(yán)密。應(yīng)參照ISO21710:2020的規(guī)定進(jìn)行菌（毒）種信息的整理及錄入。應(yīng)建立菌（毒）

種保存、管理和使用的程序化管理制度。存入微生物資源庫的菌（毒）種或菌（毒）種的傳代使用應(yīng)詳

細(xì)做好以下記錄：

a）菌（毒）種分離樣品的來源、采集時(shí)間、地點(diǎn)、人員和處理方法等；

b）菌（毒）種的來源、接收、傳代、分離、復(fù)壯、使用和鑒定等，包括菌（毒）種傳代或使用時(shí)

間、傳代或使用人員、名稱、菌號(hào)、代數(shù)或保存形式、分離復(fù)壯方式、使用內(nèi)容、鑒定情況等。

8

DB4403/TXXX—XXXX

附錄A

（規(guī)范性）

微生物資源庫整體的操作流程

圖A.1給出了微生物資源庫整體的操作流程。

采集人員

樣本采集

采集方式

包裝和運(yùn)輸

非可培養(yǎng)物可培養(yǎng)物

基本信息

多樣性/豐度檢測純度檢測

存活性檢測

復(fù)核

純度/多樣性檢測

樣本編碼

復(fù)核鑒定

保藏

樣本管理

圖A.1微生物資源庫整體的操作流程

9

DB4403/TXXX—XXXX

附錄B

（規(guī)范性）

微生物資源采集環(huán)境描述表

表B.1給出了微生物資源采集環(huán)境描述信息單的格式。

表B.1微生物資源采集環(huán)境表

填表日期：年月日

采集基本信息描述

采集人采集人所在單位

采集樣品編號(hào)采集時(shí)間

采集時(shí)季節(jié)及氣候特征

采集地、環(huán)境信息描述

采集地所在國家/地區(qū)采集地點(diǎn)名稱

采集地坐標(biāo)經(jīng)度：緯度：海拔：m

采集地環(huán)境類型（可列出數(shù)據(jù)）

分離源信息描述

土壤類型植被pH值

污泥污泥沉積類型pH值

水源水域性質(zhì)水的深度水溫

水的pH水中采集樣品的類型

空氣采樣場所溫度高度

生物體動(dòng)、植物名稱部位、組織名稱、采集樣本狀態(tài)

人的部位名稱和采集樣本狀態(tài)

發(fā)酵物名稱原料構(gòu)成成熟狀態(tài)

溫度發(fā)酵方式

宿主學(xué)名俗名

寄生部位傳播媒介

傳播途徑寄住類型

10

DB4403/TXXX—XXXX

附錄C

（規(guī)范性）

微生物包裝內(nèi)容物詳細(xì)清單

表C.1給出了微生物包裝內(nèi)容物詳細(xì)清單的格式。

表C.1微生物包裝內(nèi)容物詳細(xì)清單

接收者姓名性別身份證

單位單位地址

運(yùn)輸區(qū)間車次/航班

聯(lián)系方式緊急聯(lián)系人緊急聯(lián)系方式

微生物名稱數(shù)量致病對象生物危害程度備注

微

生

物

清

單

名稱數(shù)量性質(zhì)備注

其

他

物

品

清

單

備注

11

DB4403/TXXX—XXXX

附錄D

（規(guī)范性）

菌（毒）株復(fù)核信息登記表

表D.1給出了菌（毒）株復(fù)核信息登記表的格式。

表D.1菌（毒）株復(fù)核信息登記表

菌（毒）株信息

菌（毒）株保藏編號(hào)菌（毒）株名稱

保藏方式復(fù)核日期

復(fù)核內(nèi)容及結(jié)果

□顯微形態(tài)觀察□菌落形態(tài)特征

□培養(yǎng)特征□體細(xì)胞的構(gòu)造

□古菌□子囊菌

□16SrDNA□無性繁殖特征

□其他□有性生殖特征

□顯微形態(tài)觀察□培養(yǎng)特征

□培養(yǎng)特征□體細(xì)胞的構(gòu)造

□細(xì)菌□擔(dān)子菌

□細(xì)胞化學(xué)組分分析□成熟子實(shí)體的形態(tài)特征

□16SrDNA□有性生殖體形態(tài)特征

□顯微形態(tài)觀察

□培養(yǎng)特征□菌落形態(tài)特征

□酵母□生理生化特征□無性型真菌□菌體形態(tài)特征

□26SrDNAD1/D2□無性繁殖體形態(tài)特征

□ITS

□培養(yǎng)特征

□顯微形態(tài)觀察□體細(xì)胞的構(gòu)造

□絲狀真菌□卵菌

□培養(yǎng)特征□無性繁殖體形態(tài)特征

□有性生殖體形態(tài)特征

□培養(yǎng)特征

□營養(yǎng)體細(xì)胞的構(gòu)造

□接合菌□其他菌（毒）種

□無性繁殖特征

□有性繁殖特征

復(fù)核結(jié)論

備注

復(fù)核人姓名中心負(fù)責(zé)人簽字

12

DB4403/TXXX—XXXX

附錄E

（規(guī)范性）

微生物資源樣品編碼規(guī)則

表E.1給出了微生物資源樣品的編碼規(guī)則。

此編碼規(guī)則適用于已知的菌（毒）種鑒定明確的微生物。

具體編碼信息可參考國家微生物資源平臺(tái)編寫的《微生物資源分類編碼體系》。

微生物資源可培養(yǎng)單菌的最新分類可參考原核生物標(biāo)準(zhǔn)命名列表LPSN（ListofProkaryoticNames

withStandinginNomenclature），網(wǎng)址為/。

表E.1微生物資源樣品編碼規(guī)則

大類小類科屬種菌（毒）株致病性日期分管號(hào)

001

按統(tǒng)一編碼按統(tǒng)一編碼按統(tǒng)一編碼按統(tǒng)一編碼拉丁文名D-有致病性

年月日002

2位數(shù)字2位數(shù)字2位數(shù)字3位數(shù)字小寫前3個(gè)字母N-無致病性

003

示例：131122101-colDH5α-N20140127-001

13代表：細(xì)菌；

11代表：變形菌；

22代表：腸桿菌科；

101代表：埃希氏菌屬；

col代表：大腸桿菌種（coli）；

DH5α代表：DH5α菌株；

N代表：無致病性（NoDanger）；

20140127代表：保藏時(shí)間是2014年1月27日；

001代表：第一管樣本。

即131122101-colDH5α-N20140127-001代表：2014年1月27日保藏的第一管無致病性大腸桿菌DH5α菌株。

13

DB4403/TXXX—XXXX

附錄F

（資料性）

各類菌（毒）種適用的保藏方法

表F.1給出了各類菌（毒）種適用的保藏方法。

表F.1各類菌（毒）種適用的保藏方法

保藏方法適用菌（毒）種保藏溫度保藏周期

定期移植保藏法大多數(shù)細(xì)菌和真菌。4℃～6℃3個(gè)月～6個(gè)月

不能分解液體石蠟的酵母菌、某些細(xì)菌（如芽孢桿菌屬，

液體石蠟保藏法4℃～15℃2年～10年

醋酸桿菌屬等）和某些絲狀真菌（如青霉屬，曲霉屬等）。

產(chǎn)孢類放線菌、芽孢桿菌、曲霉屬、青霉屬以及少數(shù)酵

沙土管保藏法母如隱球酵母和紅酵母等。不適用于病原性真菌的保4℃～15℃2年～10年

藏，特別是不適于以菌絲發(fā)育為主的真菌的保藏。

大多數(shù)細(xì)菌、放線菌、病毒、噬菌體、立克次體、霉菌

冷凍干燥保藏技術(shù)和酵母等的保藏，但不適于霉菌的菌絲型、菇類、藻類冰箱或室溫暗處10年左右

和原蟲等。

液氮超低溫保藏技術(shù)各類微生物。液氮10年以上

大多數(shù)的細(xì)菌、真菌、放線菌，也適用于支原體、衣原

低溫保藏技術(shù)-20℃～-80℃2年～5年

體、氫細(xì)菌、噬菌體以及難于形成孢子的霉菌。

大型真菌菌種保藏技術(shù)大型真菌。液氮10年以上

木腐菌菌種保藏（飼木法）木腐菌。4℃3年以上

14

DB4403/TXXX—XXXX

附錄G

（規(guī)范性）

菌（毒）種保藏登記表

表G.1給出了菌（毒）種保藏登記表的格式。

表G.1菌（毒）種保藏登記表

資源庫編號(hào)收到日期編號(hào)日期

保藏位置檔案編號(hào)

中文名屬名種名加詞

其它保藏中心編號(hào)（如果該菌（毒）株被其它保藏中心保存）：

委托保藏人對該菌（毒）株指定的編號(hào)：

該菌（毒）株是否模式菌（毒）株：□是□不是

該菌（毒）株是否新分類單元：□是□不是

原產(chǎn)國（未注明原產(chǎn)國的菌（毒）種，將不被接受。如果該微生物菌（毒）株的原產(chǎn)國不是中國，請?zhí)峁┰敿?xì)的MTA

資料以及引進(jìn)國家和引進(jìn)時(shí)間）：

菌（毒）株轉(zhuǎn)移歷史（如果該菌（毒）株非委托保藏人自行分離，請指明自何處獲得）：

微生物資源庫←委托保藏人←←。

采集方式：□自行分離□交換□購買□委托保藏□接受贈(zèng)送

樣品采集地點(diǎn)采集日期

采集地生境

海拔經(jīng)度緯度

分離源分離日期

分離人鑒定人鑒定日期

生物危害等級(jí)：□一類□二類□三類□四類□不清楚

寄主名稱

致病對象：□人□動(dòng)物□人畜共患□植物□微生物□不致病□不清楚

致病名稱傳播途徑

需氧性：□好氧□微好氧□兼性厭氧□嚴(yán)格厭氧□其它特殊培養(yǎng)條件：

建議培養(yǎng)條件：最適培養(yǎng)溫度：℃；建議培養(yǎng)時(shí)間：天

培養(yǎng)基（成分）：

分類學(xué)性狀（形態(tài)、生理生化、血清學(xué)、（G+C）mol%，細(xì)胞壁組分、Genbankaccessionnumber等）：

15

DB4403/T