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細胞工程第一節(jié)細胞工程一、植物細胞工程的基本技術(shù)1.細胞工程概念:細胞工程是指應(yīng)用細胞生物學、分子生物學和發(fā)育生物學等多學科的原理和方法,通過細胞器、細胞或組織水平上的操作,有目的地獲得特定的細胞、組織、器官、個體或其產(chǎn)品的一門綜合性生物工程。(P31)①原理方法:__________、___________和__________;②操作水平:__________、_____或__________;③目的:得特定的_____、_____、_____、個體或__________;④分類:____________________、____________________。(一)植物細胞的全能性1.概念:細胞經(jīng)分裂和分化后,仍然具有_______________或_______________的潛能。(P34)2.是否表現(xiàn)出全能性的兩種判斷標準:(1)________________________________________。(2)________________________________________。3.判斷以下例子是否表現(xiàn)出了細胞的全能性(1)利用菊花莖段培養(yǎng)獲得試管苗_____。(2)芽原基的細胞發(fā)育為芽,葉原基的細胞發(fā)育為葉_____。(3)受精卵發(fā)育成個體_____。(4)蜜蜂的孤雌生殖中,卵細胞直接發(fā)育成雄蜂_____。(5)造血干細胞可分化形成多種血細胞_____。(6)通過花藥離體培養(yǎng),獲得單倍體幼苗_____。(7)胚胎干細胞可分化發(fā)育成為各種組織器官的細胞_____。(8)種子發(fā)育成完整植株_____。4.細胞具有全能性的原因(物質(zhì)基礎(chǔ)):_____________________________________________________________________________________________________。5.生物體生長發(fā)育過程中細胞不表現(xiàn)全能性的原因(不離體的細胞無法表現(xiàn)出全能性的原因):______________________________________________________________________________________________________________________。(P34)6.是不是所有的活細胞都具有全能性?__________________________________________________________________。7.細胞具有的全能性一定能表現(xiàn)出來嗎?_____________________________________________。8.比較一般情況下下列細胞全能性的大?。ㄌ?lt;/>)(1)受精卵_____生殖細胞_____體細胞(2)分化程度低的細胞_____分化程度高的細胞、(3)分裂能力強的細胞_____分裂能力弱的細胞(4)植物細胞_____動物細胞(5)幼嫩的細胞_____衰老的細胞(二)植物組織培養(yǎng)技術(shù)1.植物組織培養(yǎng)概念:將_____的植物器官、組織或細胞等,培養(yǎng)在__________上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其形成__________的技術(shù)。(P35)2.離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細胞被稱為__________。(P35)3.植物組織培養(yǎng)的原理:____________________。植物組織培養(yǎng)的生殖方式:__________。植物組織培養(yǎng)的分裂方式:__________。菊花植物組織培養(yǎng)1.菊花植物組織培養(yǎng)的原理(1)植物細胞一般具有__________;(P35)(2)脫分化:在一定的_____和_____等條件的誘導(dǎo)下,讓_____分化的細胞經(jīng)過誘導(dǎo)后,失去其特有的_____和_____,轉(zhuǎn)變成_____分化細胞的過程。結(jié)果:_____。*愈傷組織的特點:_______________。(P35)一般不需要光照。此過程中涉及的生命活動只有__________(有絲分裂),沒有__________。(3)再分化:脫分化產(chǎn)生的__________,在一定的培養(yǎng)條件下,再分化出_______________,進而形成完整的小植株。(P35)需要給予適當時間和強度的光照,誘導(dǎo)葉綠素的合成,使試管苗能夠進行光合作用。此過程中涉及的生命活動既有__________(有絲分裂),又有__________。再分化實質(zhì):____________________。(4)激素的作用:植物激素中__________和_______________是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。它們的_____、_____等都會影響植物細胞的發(fā)育方向;生長素用量與細胞分裂素用來的比值結(jié)果比值高比值低比值適中2.選材:_______________________________________________________。原因:_______________________________________________________。3.若培養(yǎng)物取自植物的幼莖、葉片等含有葉綠體的部位,愈傷組織中是否會含有葉綠體?為什么?_______________________________________________________________________________________________________________________________。4.植物組織培養(yǎng)中細胞表現(xiàn)出全能性的條件(1)____________________。(2)___________________。(3)_______________。(4)__________________________________。(5)_________________________。5.為什么一定要離體才能表現(xiàn)出全能性?_____________________________________________________________________________________________________________________________。6.如何控制嚴格的無菌條件?(1)用______________________對手、超凈工作臺、外植體進行消毒,對外植體處理還需要質(zhì)量分數(shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液,清洗外植體需要使用__________。(2)對培養(yǎng)基和器械進行_____;(3)接種操作必須在_______________進行。7.適宜的培養(yǎng)條件包括那些?①_____________________________________________。②_____________________________________________。8.一定的營養(yǎng)條件如何保證?____________________________________________________________________。9.培養(yǎng)基組成(1)_______________(水和無機鹽),(2)_______________(蔗糖、氨基酸、維生素),(3)特定濃度和比例的_____(主要是生長素和細胞分裂素)。蔗糖的作用:___________________________________。培養(yǎng)基滅菌方法為:________________________________________。10.操作流程(1)外植體的消毒:將_____沖洗后的外植體用_____消毒30s,用_____清洗2~3次后,再用_______________處理30min,用_____清洗2~3次。(P36)若想縮短次氯酸鈉溶液處理時間應(yīng)___________________________________。(2)外植體的分割:用無菌濾紙吸去表面的水分,用解剖刀將外植體切成0.5~1cm長的小段。(P36)大小應(yīng)_____。(3)接種:在__________旁,并且實驗中使用的培養(yǎng)基和所有的器械及每次使用后的器械都要_____,將外植體的__________插入_______________的培養(yǎng)基中。用封口膜或瓶蓋封蓋瓶口,并在培養(yǎng)瓶上做好標記。(P36)接種時注意外植體的方向,__________。(4)培養(yǎng):將接種了外植體的錐形瓶或植物組織培養(yǎng)瓶置于18~22℃的_____中培養(yǎng)。定期觀察和記錄__________的生長情況。(P37)誘導(dǎo)愈傷組織期間一般__________光照,在后續(xù)的培養(yǎng)過程中,每日需要給予_______________的光照。(5)轉(zhuǎn)移培養(yǎng)(再分化過程):培養(yǎng)15-20d后,將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到__________的培養(yǎng)基上。長出_____后,再將其轉(zhuǎn)接到__________的培養(yǎng)基上,進一步誘導(dǎo)形成試管苗。(P37)(6)移栽:試管苗不可以直接移栽入土,需先打開封口膜或瓶蓋,讓試管苗在培養(yǎng)箱內(nèi)生長幾日,將試管苗移植到消過毒的_______________上,壯苗后再移栽入土。(P37)11.為什么整個過程要保證無菌操作?____________________________________________________________________。12.整個過程中使用的培養(yǎng)基中是一成不變的嗎?__________。____________________________________________________________________。13.以上培養(yǎng)基中,生長素/細胞分裂素的比值大小是如何變化的?__________________________________________________。14.接種后,外植體被污染的可能原因:(1)___________________________________。(2)________________________________________。(3)_____________________________________________。15.若想探究生長素與細胞分裂素的使用比例對植物組織培養(yǎng)的影響,則應(yīng)如何設(shè)計對照實驗?______________________________。_________________________________________________________________;_________________________________________________________________;_________________________________________________________________。(三)植物體細胞雜交技術(shù)1.用傳統(tǒng)的有性雜交方法能得到雜種后代嗎?為什么?_______________________________________________________。2.植物體細胞雜交的概念:將__________的植物體細胞,在一定條件下融合成__________,并把雜種細胞培育成__________的技術(shù)。(P38)3.植物體細胞雜交的主要步驟:_______________和_______________。(P38)(1)在進行體細胞雜交之前,必須先去除細胞壁:用____________________去除植物細胞壁,獲得原生質(zhì)體。(P37)去壁原因:__________________________________________________。(P36)(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法(P37)①物理法:__________法、__________法等。②化學法:_______________融合法、____________________融合法等。(3)細胞融合完成的標志*:____________________。植物體細胞雜交完成的標志:_________________________。(4)再生出細胞壁的相關(guān)的細胞器:_________________________。(5)驗證再生出新壁的實驗:___________________________________。4.纖維素酶和果膠酶的酶溶液中一般加入一定濃度的無機鹽離子和甘露醇,試分析原因?___________________________________________________________________。5.植物體細胞雜交的原理:________________________________________。6.植物體細胞雜交的生殖方式:__________。7.植物體細胞雜交的分裂方式:__________。8.植物體細胞雜交的涉及的可遺傳變異類型:_______________。9.獲得的所有細胞一定是需要的雜交細胞嗎?________________________________________________________________________________。10.植物體細胞雜交的意義:打破__________,實現(xiàn)_____雜交育種,培育植物新品種等方面展示出獨特的優(yōu)勢。(P38)11.雜種植株包含兩個物種的全部遺傳物質(zhì),各種基因都包含在內(nèi),卻未按照人們的要求表現(xiàn)出親本所有的性狀,例如“番茄-馬鈴薯”并沒有地上結(jié)番茄,地下長馬鈴薯,這是為什么?(P36)_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。植物細胞工程的應(yīng)用1.植物細胞工程的應(yīng)用包括____________________、_______________________、___________________________________。(P39--P41)(一)植物繁殖的新途徑1.植物繁殖的新途徑包括__________(也叫__________)和_____________。(P39)2.快速繁殖(1)快速繁殖概念:用于快速繁殖優(yōu)良品種的_______________技術(shù)。(P39)(2)優(yōu)點:____________________________________________________________;________________________________________;可實現(xiàn)工廠化生產(chǎn)。(P39)注意:扦插、壓條、嫁接等__________微型繁殖技術(shù)。2.作物脫毒(1)適用范圍:_____________________________________________。(2)進行作物脫毒的原因:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(P40)(3)外植體選材部位:________________________________________。(P40)(4)選分生區(qū)的原因:________________________________________。(P40)(5)優(yōu)點:__________________________________________________。(P40)(6)作物脫毒具體操作過程:____________________________________________________________________________________________________。(P40)(7)脫毒苗是否不會再感染病毒?______________________________。(P40)(8)實例:目前采用__________培養(yǎng)技術(shù)來脫去病毒,在__________、草莓、甘蔗、菠蘿、香蕉等主要經(jīng)濟作物上已獲得成功。(P40)(二)作物新品種的培育1.作物新品種的培育包括_______________和_______________。(P40--P41)2.單倍體育種(1)過程:____________________離體培養(yǎng)(花藥取自二倍體植株)→單倍體植株eq\o(→,\s\up9(染色體加倍))純合子植株。當年就能培育出遺傳性狀相對穩(wěn)定的_____二倍體植株。(P40)(2)優(yōu)點①后代是純合子,能穩(wěn)定遺傳。②極大地縮短了_______________,節(jié)約了大量的人力和物力。=3\*GB3③大多數(shù)單倍體植株可作為進行體細胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料。(P40)(3)為什么大多數(shù)單倍體植株可作為進行體細胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料?___________________________________________________________________________________________________________________。(P40)2.突變體的利用(1)過程:(2)誘變處理對象:一般為__________。(3)產(chǎn)生原因:在植物的組織培養(yǎng)過程中,易受__________和__________(如射線、__________等)的影響而__________。(P41)(4)原理:__________和__________________________
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