2025年人教新課標(biāo)選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年人教新課標(biāo)選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列有關(guān)生物工程的敘述；不正確的有（）

①基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體。

②利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時(shí)；需要對(duì)離體的莖尖；培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。

③克隆羊的培育涉及細(xì)胞核移植和胚胎移植等技術(shù)。

④PCR技術(shù)需要利用限制性內(nèi)切核酸酶打開(kāi)DNA雙鏈。

⑤利用核移植技術(shù)可以培育試管嬰兒。

⑥牛胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→卵裂→桑葚胚→囊胚→原腸胚A.一項(xiàng)B.兩項(xiàng)C.三項(xiàng)D.四項(xiàng)2、下圖所示是某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.培養(yǎng)至第6d時(shí)，新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)B.培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理C.曲線bc段變化的主要原因是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等D.進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先需要在等滲溶液中用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理新鮮的動(dòng)物組織，但要注意酶溶液的濃度和處理時(shí)間3、LY-CovMab是一款重組全人源單抗，以高親和力特異性結(jié)合冠狀病毒表面刺突蛋白受體結(jié)構(gòu)域能有效阻止冠狀病毒與受體細(xì)胞表面結(jié)合。下列相關(guān)敘述，不正確的是（）A.利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單抗B.抗體是雜交瘤細(xì)胞通過(guò)胞吐方式分泌到細(xì)胞外的C.抗體的產(chǎn)生伴隨著ATP水解D.動(dòng)物細(xì)胞胞吐方式運(yùn)輸?shù)囊欢ㄊ谴蠓肿游镔|(zhì)4、北魏時(shí)期的名著《齊民要術(shù)》中總結(jié)了中國(guó)古代許多釀酒技術(shù)的原理和技術(shù)路線，例如用酒曲釀酒時(shí)不同季節(jié)對(duì)浸曲之水的處理不同，冬天的水可以直接浸曲，春天后則需先將水煮沸后再浸曲；酸漿法處理使釀酒容器中先呈現(xiàn)出酸性環(huán)境后再釀酒：釀酒要先晾堂（在糧食中加入酒曲后鋪撒在地面上）再密封到酒窖中。這些原理和技術(shù)對(duì)現(xiàn)代釀酒技術(shù)的發(fā)展仍然具有重要的指導(dǎo)意義。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.水煮沸后可直接用于浸曲以提高釀酒效率B.酸漿法利用了較低pH適宜酵母菌的生長(zhǎng)而抑制其他雜菌生長(zhǎng)的原理C.晾堂的目的是使酵母菌在O2充足的條件下大量繁殖D.密封可以使酵母菌產(chǎn)生酒精的同時(shí)避免醋酸的產(chǎn)生5、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所棉花分子遺傳改良創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)成功將甜菜紅素在棉花纖維中富集，創(chuàng)制出纖維呈粉紅色的棉花，下圖是利用基因工程培育粉紅色棉花的示意圖，下列有關(guān)該研究說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.通過(guò)基因工程創(chuàng)制出彩色纖維棉可有效減少化學(xué)染料使用量B.過(guò)程①→②完成需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與C.在⑤的植株中檢測(cè)到甜菜紅素合成相關(guān)的基因，就代表粉紅色棉花培育成功D.過(guò)程④→⑤依據(jù)了植物體細(xì)胞全能性的原理6、當(dāng)前生物技術(shù)發(fā)展非常迅猛，很多生物技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)與我們的日常生活密切相關(guān)。下列有關(guān)生物技術(shù)的說(shuō)法或做法不正確的是（）A.消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面B.我國(guó)堅(jiān)決反對(duì)克隆人，不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)C.對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割時(shí)，必須對(duì)整個(gè)胚胎進(jìn)行均等分割D.胚胎工程繁育良種時(shí)，供體和受體母畜都要進(jìn)行同期發(fā)情處理評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵過(guò)程中會(huì)生成大量的谷氨酸，經(jīng)加工后可制成味精。在其發(fā)酵過(guò)程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4：1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3：1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選，也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，有利于獲得更多的優(yōu)質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)品C.由題干信息可推知發(fā)酵過(guò)程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例D.在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵無(wú)需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件8、科研人員利用甲、乙兩種植物的各自優(yōu)勢(shì)，通過(guò)植物細(xì)胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物的過(guò)程中，相關(guān)操作不合理的是（）A.利用胰蛋白酶分別處理甲、乙植物以獲得原生質(zhì)體B.利用電激或滅活的病毒誘導(dǎo)甲、乙原生質(zhì)體的融合C.利用秋水仙素誘導(dǎo)組織培養(yǎng)中愈傷組織細(xì)胞壁再生D.將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株9、下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過(guò)程，在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失，通過(guò)分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?，F(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上D.胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上10、研究人員用無(wú)機(jī)鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關(guān)表述正確的是（）A.培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利B.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤D.相對(duì)于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌11、在中國(guó)的傳說(shuō)中，醋最早是由“酒圣”杜康之子發(fā)明。杜康的兒子墨塔在-．次釀酒時(shí)發(fā)酵過(guò)頭，直至第21天開(kāi)缸時(shí)，發(fā)現(xiàn)酒液已變酸，但香氣撲鼻，且酸甜可口，于是墨塔便把“廿一日”加一“西”字，給這種酸水起名為“醋”。下列敘述正確的是（）A.酒發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量增殖B.酒精是在酵母菌細(xì)胞的線粒體中產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測(cè)C.墨塔釀酒反成醋的原因可能是發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)或發(fā)酵裝置沒(méi)有清洗干凈D.釀酒時(shí)糖類未耗盡，酵母菌的發(fā)酵也會(huì)停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多12、全球首個(gè)鼻噴新冠肺炎疫苗已獲準(zhǔn)臨床試驗(yàn)，該疫苗是在流感病毒載體上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒載體疫苗，模擬呼吸道病毒天然感染途徑，激活局部免疫應(yīng)答和全身性免疫應(yīng)答，從而發(fā)揮保護(hù)作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.疫苗制備過(guò)程中，對(duì)流感病毒進(jìn)行改造利用的原理是基因突變B.從接種方式來(lái)看，該疫苗的優(yōu)點(diǎn)是通過(guò)鼻噴接種，無(wú)針、無(wú)痛C.該疫苗需侵入人體細(xì)胞中經(jīng)基因表達(dá)后才能發(fā)揮作用D.該疫苗可通過(guò)激活淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)13、動(dòng)物基因工程：______。14、去除DNA中的雜質(zhì)，可以在濾液中加入2mol/L濃度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再調(diào)節(jié)NaCL溶液濃度為0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用濃度為2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________15、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。16、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細(xì)胞融合前需用______和______除去細(xì)胞壁17、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對(duì)植物無(wú)害。（選擇性必修3P111）()評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題，共40分)18、目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯(cuò)誤19、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。()A.正確B.錯(cuò)誤20、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。（選擇性必修3P111）()A.正確B.錯(cuò)誤21、我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)22、某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基；成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題。

（1）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是__________，這種培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

（2）“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來(lái)自培養(yǎng)基中的__________。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”呼吸作用的類型是__________。

（3）在上述實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是__________。

（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí)，常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種，此過(guò)程中所用的接種工具是__________，操作時(shí)采用__________滅菌的方法。

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是____________________。

（6）某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用104、105、106倍稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿。從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)是__________，此對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是____________________。23、單克隆抗體在防治H7N9型禽流感上具有顯著療效。下圖是科研人員制備H7N9病毒的單克隆抗體X的過(guò)程?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）上圖中B淋巴細(xì)胞是取自______________的動(dòng)物或人。融合的M細(xì)胞先用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_______________以得到符合要求的N細(xì)胞，N細(xì)胞的名稱是______________。

（2）為了進(jìn)一步研究H7N9病毒的單克隆抗體X（以下簡(jiǎn)稱抗體X）的效果及作用機(jī)制；科學(xué)家開(kāi)展了如下實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)一：在體外將抗體X與HA蛋白（H7N9病毒表面的一種蛋白）混合，檢測(cè)抗體X對(duì)HA蛋白的親和力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。（注：KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；機(jī)體Y為一種已知的H7N9病毒的抗體。）?？贵w種類KD抗體X5．32×10-9M抗體Y1．95×10-9M

實(shí)驗(yàn)二：以一定濃度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分別注射一定劑量的抗體X；Y；14天后測(cè)定小鼠存活情況和體重變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y。

①實(shí)驗(yàn)一結(jié)果表明：對(duì)H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是__________。

②分析實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二的結(jié)果差異，研究人員提出假說(shuō)：抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過(guò)和巨噬細(xì)胞表面的受體相結(jié)合，從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，進(jìn)而清除被病毒感染的靶細(xì)胞。請(qǐng)以巨噬細(xì)胞、感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)液、抗體X、抗體Y和無(wú)關(guān)抗體等為材料，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證上述假說(shuō)。寫出實(shí)驗(yàn)思路__________。24、科研人員進(jìn)行了土壤中某種固氮菌的分離和純化培養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)流程如圖1所示。農(nóng)藥；除草劑的長(zhǎng)期使用，會(huì)使土壤受到嚴(yán)重污染。某科研小組為篩選能分解除草劑草甘膦的微生物，其流程示意圖如圖2所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)圖1中，“？”處是__________，純化培養(yǎng)時(shí)采用的接種方法是_______________，該方法可用于菌落數(shù)的統(tǒng)計(jì)，原因是_________________________。

(2)圖1中純化培養(yǎng)所利用的培養(yǎng)基在營(yíng)養(yǎng)成分和物理性質(zhì)上的特點(diǎn)分別是____________________，圖1和圖2中的兩個(gè)培養(yǎng)基在用途方面的共同點(diǎn)是____________________。

(3)圖2中的接種方法需要連續(xù)劃線，且除第一次劃線外，后面的每一次劃線都要從上一次劃線的末端開(kāi)始，目的是_________________。結(jié)果有的菌落周圍有透明圈而有的沒(méi)有，原因是________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共2題，共8分)25、CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可以按照人們的意愿精準(zhǔn)剪切；改變?nèi)我獍谢虻倪z傳信息；對(duì)該研究有突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家被授予2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。科學(xué)家正設(shè)想利用基因編輯技術(shù)將豬基因組中“敲入”某種調(diào)節(jié)因子，抑制抗原決定基因的表達(dá)，培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的豬器官，解決人類移植器官短缺的難題。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）欲獲得大量的調(diào)節(jié)因子；可以利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。在PCR反應(yīng)體系中需要加入一定的Taq酶和足量的引物（循環(huán)次數(shù)越多，引物加入量越大）等，引物需要足量的原因是_____。

（2）CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)中；SgRNA是根據(jù)靶基因設(shè)計(jì)的引導(dǎo)RNA，準(zhǔn)確引導(dǎo)Cas9切割與SgRNA配對(duì)的靶基因DNA序列，由此可見(jiàn)，Cas9在功能上屬于_____酶，切割的是DNA中的_____鍵。

（3）在相關(guān)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中；為了確認(rèn)豬細(xì)胞中抗原決定基因是否表達(dá)出蛋白質(zhì)，常用的檢測(cè)方法是_____。若檢測(cè)結(jié)果為_(kāi)____，則表明調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用。

（4）將含有調(diào)節(jié)因子的豬細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)；會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁現(xiàn)象。為了使細(xì)胞更好地貼壁生長(zhǎng)，要求培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)表面_____。

（5）為了獲得沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因豬，需要將調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用的豬細(xì)胞的細(xì)胞核移入_____中，用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成_____，再進(jìn)行胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。26、多不飽和脂肪酸（PUFAs）是人體必需脂肪酸；豬肉是我國(guó)最主要的肉類消費(fèi)品，提高其PUFAs含量對(duì)居民健康具有重要意義。為解決豬肉中PUFAs含量不足的問(wèn)題，研究者從線蟲中獲得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育轉(zhuǎn)fat1基因豬，操作過(guò)程如圖1。

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增fat1基因時(shí)，應(yīng)在兩種引物的一端分別加上限制酶_____和_____識(shí)別與切割的序列。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體一般選用兩種限制酶，選擇的原則是_____。

a；目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中有兩種限制酶切割位點(diǎn)。

b；表達(dá)載體內(nèi)；每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)。

c；酶切后；目的基因兩端的黏性末端序列相同。

d；酶切后；載體形成的兩個(gè)黏性末端序列不同。

(2)圖1中的連接產(chǎn)物需先導(dǎo)入大腸菌中的原因是_____；所構(gòu)建的重組基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有_____。

(3)將重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)染豬成纖維細(xì)胞，另設(shè)一組空白對(duì)照。48小時(shí)后于熒光顯微鏡下觀察到_____；說(shuō)明轉(zhuǎn)染成功。然后以轉(zhuǎn)基因細(xì)胞為核供體構(gòu)建克隆胚胎，最終獲得轉(zhuǎn)fat1基因豬。

(4)研究者提取轉(zhuǎn)基因豬的基因組DNA，利用限制酶DraⅢ將其完全酶切并電泳分離。然后用探針通過(guò)_____的方法；檢測(cè)fat1基因是否成功整合在豬基因組DNA中，酶切方式及檢測(cè)結(jié)果如圖2。

①轉(zhuǎn)基因豬1、2、3中分別被轉(zhuǎn)入了_____個(gè)fat1基因。

②請(qǐng)解釋圖2檢測(cè)結(jié)果中4條雜交帶位置不同的原因：_____。

③該實(shí)驗(yàn)_____（填“能”或“不能”）說(shuō)明成功培育轉(zhuǎn)基因豬，理由是_____。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

1；將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體．用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

2；植物組織培養(yǎng)的過(guò)程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）。

3；植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。

4；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

①基因工程的核心步驟是第二步；即構(gòu)建基因表達(dá)載體，①正確；

②利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時(shí)；需要對(duì)離體的莖尖；培養(yǎng)基等進(jìn)行消毒，不能進(jìn)行滅菌，否則會(huì)導(dǎo)致外植體失活，②錯(cuò)誤；

③克隆羊的培育涉及細(xì)胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)；③正確；

④PCR技術(shù)需要利用高溫打開(kāi)DNA雙鏈；④錯(cuò)誤；

⑤利用體外受精；胚胎移植技術(shù)可以培育試管嬰兒；⑤錯(cuò)誤；

⑥牛胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體；⑥正確；

綜上正確的選項(xiàng)有①③⑥；共三項(xiàng)，C正確，ABD錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】2、A【分析】【分析】

分析曲線圖可知，表示某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果．a(chǎn)b段表示活細(xì)胞和死細(xì)胞密度都在增加，bc段表示活細(xì)胞密度減少而死細(xì)胞密度增加；培養(yǎng)第6天時(shí)，活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)。

【詳解】

A；培養(yǎng)第6天時(shí)；活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)，A錯(cuò)誤。

B；培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理；防止對(duì)實(shí)驗(yàn)造成污染，B正確；

C、曲線bc段表示活細(xì)胞密度減少而死細(xì)胞密度增加；產(chǎn)生的主要原因是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等，C正確；

D；進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；首先需要在等滲溶液中用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理新鮮的動(dòng)物組織，但要注意酶溶液的濃度和處理時(shí)間，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備，雜交瘤（hybridoma）抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上；將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。

【詳解】

A；用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)構(gòu)建雜交瘤細(xì)胞；制備單抗，A正確；

B；抗體屬于分泌蛋白；是雜交瘤細(xì)胞通過(guò)胞吐方式分泌到細(xì)胞外的，B正確；

C；抗體的產(chǎn)生；也就是蛋白質(zhì)合成過(guò)程需要消耗能量，由ATP水解提供的，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞胞吐方式運(yùn)輸?shù)牟灰欢ㄊ谴蠓肿游镔|(zhì)；比如氨基酸這種神經(jīng)遞質(zhì)，就是以胞吐方式釋放，但氨基酸不是大分子物質(zhì)，D錯(cuò)誤。

故選D。4、A【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。醋酸菌是種好氧性細(xì)菌，只有當(dāng)氧充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。變酸的酒的表面觀察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。

【詳解】

A；水煮沸后直接用于浸曲；會(huì)使酵母菌失活，A錯(cuò)誤；

B；在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中；酵母菌能大量繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制，B正確；

C、晾堂的目的是使酵母菌在O2充足的條件下大量繁殖；C正確；

D；酒精發(fā)酵實(shí)際上利用酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的過(guò)程；而醋酸菌是需氧菌，無(wú)氧環(huán)境下不能生存，D正確。

故選A。5、C【分析】【分析】

過(guò)程①→②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建；過(guò)程②→③→④為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法），過(guò)程④→⑤為植物組織培養(yǎng)。

【詳解】

A；通過(guò)基因工程將甜菜紅素在棉花纖維中富集；創(chuàng)制出纖維呈粉紅色的棉花，可有效減少化學(xué)染料使用量，A正確；

B；過(guò)程①→②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建；完成該過(guò)程需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與，B正確；

C；在⑤的植株中檢測(cè)到甜菜紅素合成相關(guān)的基因；該基因不一定能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯，故檢測(cè)到甜菜紅素合成相關(guān)的基因粉紅色棉花不一定能培育成功，C錯(cuò)誤；

D；過(guò)程④→⑤為植物組織培養(yǎng)；植物組織培養(yǎng)的原理是植物體細(xì)胞具有全能性，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

生物技術(shù)的安全性主要集中在生物安全；食物安全和環(huán)境安全三個(gè)方面。

【詳解】

A；生物武器威脅巨大；消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面，A正確；

B；我國(guó)對(duì)待克隆人的態(tài)度：堅(jiān)決反對(duì)克隆人；不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，B正確；

C；對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割時(shí)；必須對(duì)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割，C錯(cuò)誤；

D；胚胎工程繁育良種時(shí)；供體和受體母畜都要進(jìn)行同期發(fā)情處理，保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境，D正確；

故選C。二、多選題(共6題，共12分)7、A:C【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過(guò)特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過(guò)程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，為異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選；也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過(guò)程；B錯(cuò)誤；

C；由題意可知“在其發(fā)酵過(guò)程中；發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，說(shuō)明在發(fā)酵過(guò)程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌，在獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物的目的，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌；其發(fā)酵過(guò)程需要適宜的溫度和pH，所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D錯(cuò)誤。

故選AC。8、A:B:C【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程：在融合前需要使用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除植物的細(xì)胞壁；再用化學(xué)法（聚乙二醇）或物理法（振動(dòng)；離心、電刺激）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，需要注意的是誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合時(shí)不用生物方法（滅活的病毒）；細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是融合細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁；獲得融合細(xì)胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株，故植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種。

【詳解】

A；由于植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠；根據(jù)酶的專一性特點(diǎn)，應(yīng)利用纖維素酶和果膠酶處理甲乙植物以獲得原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；

B；滅活的病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法；不能用于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合，B錯(cuò)誤；

C；秋水仙素可以抑制紡錘體的形成從而誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目加倍；不能用于誘導(dǎo)愈傷組織細(xì)胞壁的再生，C錯(cuò)誤；

D；因本操作的目的是培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物；故將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株，屬于個(gè)體生物學(xué)水平的檢測(cè)，D正確。

故選ABC。9、A:C:D【分析】【分析】

分析題干信息：Ⅰ保留X；11號(hào)染色體；Ⅱ保留2、11號(hào)染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號(hào)染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號(hào)染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號(hào)染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號(hào)染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號(hào)染色體上。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中；可以利用滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進(jìn)細(xì)胞融合，A正確；

B；細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號(hào)染色體；故不會(huì)是鼠-鼠融合細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

CD；根據(jù)分析可知；芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上，胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。

故選ACD。10、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無(wú)機(jī)鹽。

【詳解】

A；培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水；將出現(xiàn)失水過(guò)多而死亡的現(xiàn)象，對(duì)生長(zhǎng)不利，A錯(cuò)誤；

B；這種培養(yǎng)基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養(yǎng)基上正常存活，因此是一種選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤，C正確；

D；根據(jù)生物與其生存環(huán)境相適應(yīng)的特點(diǎn)；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。11、A:C:D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；酵母菌是兼性厭氧型微生物；所以發(fā)酵初期通入氧氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量增殖，A正確；

B；酒精是酵母菌無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物；在酵母菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中產(chǎn)生，可以用酸性重鉻酸鉀試劑檢測(cè)酒精的產(chǎn)生，B錯(cuò)誤；

C；酒變酸是醋酸桿菌發(fā)酵的結(jié)果；墨塔釀酒反成醋的原因可能是：發(fā)酵裝置密封不嚴(yán)，發(fā)酵裝置沒(méi)有清洗干凈，導(dǎo)致醋酸菌混入發(fā)酵液中，C正確；

D；在釀酒的過(guò)程中；糖類即使未耗盡，酵母菌的發(fā)酵過(guò)程也會(huì)停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，對(duì)發(fā)酵起抑制作用，導(dǎo)致酵母菌發(fā)酵停止，D正確；

故選ACD。12、B:C:D【分析】【分析】

分析題文描述：題述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重組。疫苗屬于抗原，在抗原的刺激下，機(jī)體可以產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。特異性免疫包括體液免疫與細(xì)胞免疫。

【詳解】

A；該疫苗是在流感病毒載體上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是屬于基因重組，A錯(cuò)誤；

B；鼻噴疫苗都配有鼻噴裝置；以鼻噴接種方式外用，是一種無(wú)針、無(wú)痛的接種方式，B正確；

C；該疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)表達(dá)產(chǎn)生蛋白質(zhì)后，才能發(fā)揮作用，C正確；

D；該疫苗可以侵入到人體細(xì)胞中；使機(jī)體既能產(chǎn)生細(xì)胞免疫，又能產(chǎn)生體液免疫，D正確。

故選BCD。三、填空題(共5題，共10分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不容的雜質(zhì)析出DNA過(guò)濾溶液中的雜質(zhì)DNA15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞膜流動(dòng)性植物細(xì)胞全能性纖維素酶果膠酶17、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說(shuō)法錯(cuò)誤?！窘馕觥垮e(cuò)誤四、判斷題(共4題，共40分)18、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜，所以錯(cuò)誤。19、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第二代基因工程。故該說(shuō)法正確。20、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。故該說(shuō)法正確。21、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。

該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)22、略

【分析】【分析】

微生物的培養(yǎng)；培養(yǎng)基的成分必須含有碳源；氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。獲取純凈微生物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵。實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

【詳解】

（1）本實(shí)驗(yàn)是分離出降解的有機(jī)化合物A的菌種；所以培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機(jī)化合物A的菌種，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）分析培養(yǎng)基的配方可知；該培養(yǎng)基由化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制而成，其他成分中為體現(xiàn)出提供碳源和氮源，因此化合物A為目的菌提供了碳源和氮源；在培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)該振蕩培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的類型是有氧呼吸。

（3）獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是無(wú)菌技術(shù)；防止外來(lái)雜菌入侵。

（4）平板劃線操作的工具是接種環(huán)；對(duì)于接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)該是灼燒滅菌。

（5））實(shí)驗(yàn)結(jié)束后；使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉，以殺死培養(yǎng)基上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

（6）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過(guò)程應(yīng)遵循對(duì)照原則；該實(shí)驗(yàn)還應(yīng)增設(shè)一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對(duì)照，以證明培養(yǎng)基制備是否被雜菌污染，檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌合格。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記無(wú)菌技術(shù)操作方法及接種微生物接種常用的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥亢Y選目的菌選擇化合物A有氧呼吸防止外來(lái)雜菌入侵接種環(huán)灼燒防止造成環(huán)境污染不接種的空白培養(yǎng)基檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌合格23、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：小鼠骨體瘤細(xì)胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合；M表示融合細(xì)胞，N表示篩選出的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）分析題圖：小鼠骨體瘤細(xì)胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，M表示融合細(xì)胞，N表示篩選出的雜交瘤細(xì)胞；B淋巴細(xì)胞是取自感染H7N9病毒的動(dòng)物或人；隨后將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，對(duì)融合后的細(xì)胞用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，挑選出B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞，然后再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，以得到符合要求的N細(xì)胞，N細(xì)胞的名稱是雜交瘤細(xì)胞；

（2）①據(jù)題中圖表分析，KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；抗體Y的KD值小于抗體X的KD值，故對(duì)H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y；

②抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y，但對(duì)H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y，驗(yàn)證抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過(guò)和巨噬細(xì)胞表面的受體相結(jié)合，從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，進(jìn)而清除被病毒感染的靶細(xì)胞，需要進(jìn)行抗體X和抗體Y的對(duì)照實(shí)驗(yàn)，并與無(wú)關(guān)抗體進(jìn)行比較，可以將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A；B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中；并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無(wú)關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時(shí)間后檢測(cè)并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比。

【點(diǎn)睛】

對(duì)單克隆抗體制備流程、抗體效果檢測(cè)原理和實(shí)驗(yàn)?zāi)康募坝闷返姆治?，是解決本題的關(guān)鍵?！窘馕觥竣?感染過(guò)H7N9病毒②.抗體檢測(cè)③.雜交瘤細(xì)胞④.Y⑤.將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A、B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中，并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無(wú)關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時(shí)間后檢測(cè)并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比。24、略

【分析】【分析】

將微生物接種到固體培養(yǎng)基常用稀釋涂布平板法；接種前先要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在一定的稀釋度的菌液里，聚集在一起的微生物能分散成單個(gè)細(xì)胞，在適宜的條件下培養(yǎng)讓菌體進(jìn)行繁殖，能夠在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。稀釋涂布平板操作：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取出時(shí)，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡。②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡冷卻8-10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基上，涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。

【詳解】

（1）圖1中是將土壤懸浮液取1mL；加入9mL無(wú)菌水進(jìn)行稀釋10倍。圖1中微生物接種方式為稀釋涂布平板法。該方法可以用于對(duì)菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，因?yàn)楫?dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面可以獲得由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的單菌落，通過(guò)統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量可以推測(cè)所涂菌液中細(xì)菌的數(shù)量。

（2）土壤中某種固氮菌的分離和純化培養(yǎng)；培養(yǎng)基需要采用固體培養(yǎng)基，才可用于稀釋涂布平板法，且因?yàn)槭欠蛛x固氮菌，所以培養(yǎng)基中不加氮源。圖1和圖2中的兩個(gè)培養(yǎng)基都是用于從多種微生物中分離目的菌種。

（3）圖2中接種方法為平板劃線法，且除第一次劃線外，后面的每一次劃線都要從上一次劃線的末端開(kāi)始，目的是將聚集的菌種逐步稀釋，分散到培養(yǎng)基表面，最終達(dá)到分離的效果。圖2中培養(yǎng)基時(shí)為了篩選出能分解除草劑草甘膦的微生物，所以有的菌落中的細(xì)菌能分解草甘膦，菌落周圍因?yàn)椴莞熟⒈环纸舛霈F(xiàn)透明圈，有的菌落中的細(xì)菌不能分解草甘膦，菌落周圍不能形成透明圈?！窘馕觥?1)無(wú)菌水稀釋涂布平板法當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面可以獲得由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的單菌落，通過(guò)統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量可以推測(cè)所涂菌液中細(xì)菌的數(shù)量。

(2)沒(méi)有氮源；屬于固體培養(yǎng)基從多種微生物中分離出目的菌。

(3)將聚集的菌種逐步稀釋，分散到培養(yǎng)基表面，最終達(dá)到分離的效果有的菌落中的細(xì)菌能分解草甘膦，菌落周圍因?yàn)椴莞熟⒈环纸舛霈F(xiàn)透明圈，有的菌落中的細(xì)菌不能分解草甘膦，菌落周圍不能形成透明圈六、綜合題(共2題，共8分)25、略

【分析】【分析】

1；PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因：

（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制；

（2）過(guò)程：第一步：加熱至90～95℃；DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。

2；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）PCR擴(kuò)增時(shí)需要根據(jù)目的基因的一段核苷酸序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物；每一條子鏈的形成都需要一個(gè)引物，這個(gè)引物就成為子鏈的一部分，不能再重復(fù)利用，因此在PCR反應(yīng)體系中需要加入足量的引物。

（2）根據(jù)題干信息可知；Cas9能切割與SgRNA配對(duì)的特定靶基因DNA序列，Cas9在功能上屬于限制性核酸內(nèi)切酶，切割的是DNA中的磷酸二酯鍵。

（3）檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)；常用原-抗體雜交技術(shù)，若沒(méi)有出現(xiàn)雜交帶，則說(shuō)明抗原決定基因被抑制沒(méi)有表達(dá)，進(jìn)而表明調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用。

（4）為了使細(xì)胞更好地貼壁生長(zhǎng)；在培養(yǎng)時(shí)要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑；無(wú)毒，易于貼附。

（5）為了獲得沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因豬；需要將調(diào)節(jié)因子已經(jīng)發(fā)揮作用的豬細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中，用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程（分裂和分化），再進(jìn)行胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。

【點(diǎn)睛】

本題綜合考查PCR技術(shù)，基因工程和細(xì)胞工程的知識(shí)，考生需要識(shí)記PCR技術(shù)和基因工程的基本操作，意在考查考生運(yùn)用所學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)，結(jié)合所學(xué)知識(shí)解決相關(guān)的生物學(xué)問(wèn)題的能力。【解析】每一條子鏈的形成都需要一個(gè)引物，這個(gè)引物就成為子鏈的一部分，不能再重復(fù)利用限制性核酸內(nèi)切磷酸二酯抗原—抗體雜交沒(méi)有出現(xiàn)雜交帶光滑、無(wú)毒，易于貼附去核卵母細(xì)胞細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程（分裂和分化）26、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和