顯微鏡的構造和使用

顯微鏡的構造和使用胡克所用顯微鏡光學顯微鏡電子顯微鏡觀察工具發(fā)展史細胞發(fā)現史

一、目的要求

1、了解顯微鏡的構造

2、初步掌握顯微鏡的使用方法及其維護

二、顯微鏡的構造

一般光學顯微鏡的構造包括兩大部分，即保證成象的光學系統(tǒng)和用以裝置光學系統(tǒng)的機械部分。

1、機械部分

（1）鏡座：是顯微鏡的底座，支持整個鏡體，使顯微鏡放置穩(wěn)固。

（2）鏡柱：鏡座上面直立的短柱，支持鏡體上部的各部分。

（3）鏡臂：彎曲如臂，下連鏡柱，上連鏡筒，這取放鏡體時手握的部位。鏡臂的下端與鏡柱連接處有一活動關節(jié)，可使鏡體在一定范圍內后傾，便于觀察。

（4）鏡筒：為顯微鏡上部圓形中空的長筒，其上端放置目鏡，下端與物鏡轉換器相連，并使目鏡和物鏡的配合保持一定的距離，其作用是保護成象的光路與亮度。

（5）物鏡轉換器：接于鏡筒下端的圓盤，可自由轉動，盤上有3-4個螺旋圓孔，為安裝物鏡的部位，當旋動轉換器時，物鏡即可固定在使用的位置上，保證物鏡與目鏡的光線合軸。

（6）載物臺：為放置玻片標本的平臺，中央有一圓孔，以通過光線。兩旁裝有壓片夾或移動器，可固定玻片標本和移動玻片。

（7）調焦裝置：為了得到清晰的物像，必須調節(jié)物鏡與標本之間的距離，使它與物鏡的工作距離相等。這種操作叫調焦。在鏡臂兩側有粗、細調焦螺旋各一對，旋轉時可使鏡筒上升或下降。大的一對是粗調焦螺旋，調動鏡筒升降距離大，旋轉一周可使鏡筒移動2毫米左右。小的一對是細焦螺旋，調動鏡筒的升降距離很小，旋轉一周可使鏡筒移動約0.1毫米。在用低倍物鏡觀察時，使用粗調焦螺旋；用高倍物鏡觀察時，用細調焦螺旋。

（8）聚光器調節(jié)螺旋：在鏡柱的左側或右側，旋轉它時使聚光器上下移動，以調節(jié)光線。

2、光學部分

由成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成，成像系統(tǒng)包括物鏡和目鏡，照明系統(tǒng)包括反光鏡和聚光器。

（1）物鏡：這是決定顯微鏡質量的最主要部件，安裝在鏡筒下端的物鏡轉換器上，一般有三個放大倍數不同的物鏡，即低倍（10×）、高倍（40×）、油鏡（100×）。使用油鏡時，必須在蓋玻片上和聚光器上滴加一滴香柏油（鏡油），然后才能使用。

（2）目鏡：安裝在鏡筒上端，它的作用是將物鏡所成的像進一步放大，使之便于觀察。其上刻有5×、10×、16×等，表示不同放大倍數，可根據當時需要選擇使用。目鏡內的光欄上可裝一段頭發(fā)，在視野中則為一黑線，叫指針，可以用它指示要觀察的部分。

（3）反光鏡（反射鏡）：是個圓形的兩面鏡。一面是平面鏡，能反光；另一面是凹面鏡，兼有反光和匯集光線的作用，可選擇使用，反光鏡具有能轉動的關節(jié)，可作各種方向的翻轉，面向光源，能將光線反射在聚光器上。

（4）聚光器（或鏡）：裝在載物臺下，由聚光鏡（幾個凸透鏡）和虹彩光圈（可變光欄）等組成。它可將平行的光線匯集成束，集中在一點，以增強被檢物件。聚光器可以上下調節(jié)，如用高倍鏡時，視野范圍小，則需上升聚光器，用低倍物鏡時，視野范圍大，可下降聚光器。

（5）虹彩光圈：裝在聚光器內，位于載物臺下方，撥動操縱桿，可使光圈擴大或縮小，借以調節(jié)通光量。

(穩(wěn)定鏡身)(支持鏡柱以上的部件)(握鏡的部位)(使物像清晰)(使物像更清晰)(用眼觀察的鏡頭)(接近物體的鏡頭)(調節(jié)光線強弱)(放置玻片標本)(使光線經過通光孔反射上來)(安裝物鏡)(連接目鏡和物鏡)(固定標本)二、使用顯微鏡的步驟是：

（看書本P55）安放對光調焦觀察放片使用顯微鏡的主要步驟和方法

1、取鏡和放置：

按固定編號從柜中提取顯微鏡木箱，用鑰匙打開箱門，從中取出顯微鏡，取鏡時應右手握住鏡臂，左手平托鏡座，保持鏡體直立，不可歪斜。放置桌面時，動作要輕。一般就放在座位左側，距桌邊緣約5-6厘米的地方，以便觀察和防止掉落。特別要禁止用單手提著顯微鏡走，防止目鏡從鏡筒中滑出。

2、對光：

一般情況下可用由窗口進入室內的散射光（應避用直射陽光），或用日光燈作光源。對光時，先把低倍物鏡轉到中央，對準載物臺上的通光孔，然后用左眼從目鏡下注視（左眼不要緊閉）同時，用手轉動反光鏡，使鏡面向著光源。一般用平面鏡即可，光弱時可用凹面鏡，當光線從反光鏡面向上反射入鏡筒時，在鏡筒內就可以看一個圓形的、明亮的視野，此時再利用聚光鏡或虹彩光圈調節(jié)光的強度，使視野內的內線既均勻、明亮、又不刺眼。在對光的過程中，要體會反光鏡、聚光鏡和虹彩光圈在調節(jié)光線中的不同作用。

3、低倍鏡的使用

觀察任何標本，都必須先用低倍鏡，因為低倍鏡的視野范圍大，容易發(fā)現目標和確定觀察的部位。

（1）放置切片：升高鏡筒，把玻片標本放在載物臺中央，使材料正對通光孔的中心，然后用壓片夾壓住載玻片的兩端。

（2）調整焦點：兩眼從側面注視物鏡，并慢慢按順時針方向轉動粗調焦螺旋，使鏡筒徐徐下必至物鏡玻片約5毫米處，接著用左眼注視鏡筒內，同是按反時針方向，向右、向內轉動粗調焦螺旋使鏡筒緩慢上升，直到看見清晰的物像為止（注意不可在調焦點時邊觀察邊下必鏡筒，否則會使物鏡和玻片觸碰，壓碎破片，損壞物鏡）。如一次調節(jié)看不到物像，應重新檢查材料是否在光軸線上，重新移正材料，再重復上述操作過程直至物像出現和清晰為止。

為了使物像更加清晰，此時可使用細調焦螺旋，輕微轉動到使物像最清楚時為止，但切忌連續(xù)轉動多圈，以免損傷儀器的精確度。當細調焦螺旋向上或向下轉不動時，就是轉到了極限，千萬不能再硬擰，而應重新調粗調焦螺旋，把物鏡與標本的距離稍稍拉開后，再反擰細焦螺旋，約10圈左右（因一般可動范圍為20圈）。

（3）低倍物鏡的觀察：

焦點調好后，可根據需要，移動玻片，把要觀察的部分移到最有利的位置上。找到物像后還可根據材料的厚薄、顏色、成像的反差強弱等是否合適再進行調節(jié)，如果太亮，可降低聚光器或縮小虹彩光圈，反之則升高聚光器或開大光圈。

4、高倍物鏡的使用

在觀察較小的物體或細微結構時使用。

（1）選好目標：由于高倍鏡只能把低倍鏡視野中心的一小部分加以放大。因此，使用高倍鏡前，應先在低倍鏡中選好之合軸，即使其與鏡筒成一直線（因高倍鏡的工作距離很短，操作時要十分仔細，以防鏡頭碰擊玻片）。

（2）調下焦點，在正常情況下，當高倍物鏡轉正之后，在視野中即可見到模糊的物像，只要略微調動焦螺旋，就可獲得最清晰的物像。

初用一臺顯微鏡時，必須注意它的高、低倍物鏡

是否能如上述情況那樣很好的配合？如果高倍物鏡離蓋玻片較遠看不到物像時，則需重新調整焦點；此時眼睛應從側面注視物鏡，

并小心地轉動粗調焦螺旋使鏡筒慢慢地下必到高倍鏡頭幾乎要與切片接觸時為止（注意切勿使鏡頭緊壓玻片，以錫損壞鏡頭和壓碎玻片標本）。然后再由目鏡向下觀察，同時向內，向右轉動粗調焦螺旋，稍微升高鏡筒至看見物像后，換細調焦螺旋，使物像看得更加清晰為止。

（3）在換用高倍鏡觀察時，視野變小變暗，所以要重新調節(jié)視野的亮度，此時或升高聚光器或放大虹彩光圈。

=x接目鏡的放大率接物鏡的放大率微鏡的放大率

顯顯微鏡最高和最低的放大率是多少？最高

:___________x__________=__________最低:___________x__________=__________15X60X900X10X4X40X一）取鏡安放：二）對光三）放置標本：五）善后整理1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座；2、輕拿輕放，并略偏左；3、裝好目鏡和物鏡。1、扭動轉換器，使鏡頭（低倍鏡）、鏡筒和通光孔成一直線；2、根據光線強弱，調節(jié)反光鏡和遮光器（光圈）四）調焦觀察玻片標本放置要正對通光孔的中央，用壓片夾固定1、將顯微鏡外表擦拭干凈2、轉動轉換器，把兩物鏡偏到旁邊，并下調鏡筒至最低，送回鏡箱。調焦、調整玻片（重點注意事項）5、顯微鏡使用后的整理

觀察完畢，應將鏡頭轉為低倍鏡，再水平取下切片，取下時要注意勿使切片觸及鏡頭，切片取下后，再轉動物鏡轉換器，使物鏡鏡頭與通光孔錯開，再下降鏡筒，使兩個物鏡位于載物臺上通光孔的兩側，并將反光鏡還原成與桌面垂直，擦凈鏡體，仍用右手握住鏡臂，左手平托顯微鏡，送回鏡箱中。

三、使用顯微鏡時的注意事項

1、顯微鏡是精密儀器，使用時一定要嚴格地按規(guī)程進行操作。同時，顯微鏡的幾個主要部件都是配套的，并已編號，不能互換，特別注意不要斢錯鏡頭。

2、要注意保持顯微鏡清潔，特別是光學部分，如有灰塵，要用擦鏡紙輕輕擦去。若使用過油鏡頭，需用二甲苯擦拭干凈鏡頭與聚光器上的油。

3、用顯微鏡觀察時，切忌睜一眼閉一眼，要左眼窺鏡，右眼作圖