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專題九生物技術(shù)實(shí)踐第18講微生物的應(yīng)用和
生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用-3-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練命題點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1.基本技術(shù)(1)制備培養(yǎng)基:計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。(2)無(wú)菌技術(shù):主要指消毒和滅菌。①消毒方法:常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。②常用滅菌方法:灼燒滅菌——接種環(huán)、接種針等金屬器具;干熱滅菌——主要針對(duì)玻璃器皿等;高壓蒸汽滅菌——主要針對(duì)培養(yǎng)基等。(3)倒平板操作:待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí),在酒精燈火焰附近倒平板。-4-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練(4)平板劃線操作:通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。(5)稀釋涂布平板法:先將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后涂布平板,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散到培養(yǎng)基的表面,從而在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。如下圖所示:-5-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練2.微生物的分離與計(jì)數(shù)
-6-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練-7-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練-8-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練思維拓展(1)平板劃線法適用于微生物的純化,但不能用于微生物的計(jì)數(shù)。(2)土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)”是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來(lái)確定。-9-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練運(yùn)用不同培養(yǎng)基的原理解答有關(guān)微生物分離和鑒定的題(2017全國(guó)Ⅰ理綜)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用?;卮鹣铝袉?wèn)題。(1)有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌則不能,原因是前者能產(chǎn)生
。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,原因是
。但可用葡萄糖作為碳源,進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是
(答出兩點(diǎn)即可)。
-10-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌,在配制培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)選擇
(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是
。
(3)用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有
(答出兩點(diǎn)即可)。
-11-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練答案
(1)脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量,為其他有機(jī)物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng),作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定解析
(1)有些細(xì)菌能分解尿素是因?yàn)槠淠墚a(chǎn)生分解尿素的酶,即脲酶。能分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物。葡萄糖既能作為能源,為細(xì)胞的代謝提供能量,也能作為碳源,為其他有機(jī)物的合成提供原料。(2)利用尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基可篩選分解尿素的細(xì)菌。其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用。(3)培養(yǎng)基中的KH2PO4和Na2HPO4既可為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng),又可作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定。-12-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練方法規(guī)律選擇培養(yǎng)基及鑒別培養(yǎng)基的運(yùn)用技巧(1)分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)中先用選擇培養(yǎng)基,再用鑒別培養(yǎng)基。該實(shí)驗(yàn)中使用的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,以纖維素作為唯一碳源,以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長(zhǎng),而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長(zhǎng);利用液體培養(yǎng)基能使?fàn)I養(yǎng)成分被充分利用,以增加纖維素分解菌的濃度。
(2)鑒別培養(yǎng)基含瓊脂,為固體培養(yǎng)基,因?yàn)橐谂囵B(yǎng)基上形成肉眼可見(jiàn)的菌落。剛果紅染色法就是應(yīng)用的此培養(yǎng)基。-13-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練(2017江蘇)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對(duì)環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有
。
(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸
,以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過(guò)于密集,應(yīng)進(jìn)一步
,以便于菌落計(jì)數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時(shí)除了需要水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還必須添加
。
-14-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練(3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中
(填圖中序號(hào))區(qū)域更易獲得單菌落。
(4)采用比色測(cè)定法(使用苯酚顯色劑)檢測(cè)降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng),下表中1~5號(hào)比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為
。如果廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋
(填序號(hào):①5
②10
③20)倍后,再進(jìn)行比色。
-15-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練答案
(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)③
(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8
③解析
(1)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)一般都包括H2O、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源,蛋白胨和苯酚中含有C元素,可作為碳源。(2)要富集該菌,應(yīng)提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量。若菌落過(guò)于密集,說(shuō)明稀釋倍數(shù)不夠,應(yīng)進(jìn)一步稀釋,然后再涂布平板。制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入凝固劑瓊脂。(3)用平板劃線法接種菌體,隨劃線次數(shù)的增加,菌體數(shù)量逐漸減少,故③區(qū)域更易獲得單菌落。-16-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練(4)題中已給出6號(hào)比色管中的苯酚濃度為1
mg/L,根據(jù)濃度梯度的設(shè)計(jì)原則和空白對(duì)照原則,1~5號(hào)比色管中的苯酚濃度應(yīng)依次為0
mg/L、0.2
mg/L、0.4
mg/L、0.6
mg/L、0.8
mg/L。廢水中苯酚的濃度為50
mg/L,降解后約有21%的苯酚殘留,則降解后廢水中苯酚的濃度為50×21%=10.5(mg/L),因?yàn)楸壬苤斜椒拥臐舛确秶鸀?~1
mg/L,若將降解后的廢水稀釋5倍或10倍,則稀釋后廢水中苯酚的濃度均大于1
mg/L,若稀釋20倍,則稀釋后廢水中苯酚的濃度為0.525
mg/L,介于0~1
mg/L之間,故需將降解后的廢水稀釋20倍后再進(jìn)行比色。-17-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練命題點(diǎn)二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.制作果酒、果醋、腐乳、泡菜所需菌種的比較-18-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練2.果酒、果醋、腐乳及泡菜的制作原理及過(guò)程
-19-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練-20-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練掌握微生物發(fā)酵原理,解答有關(guān)果醋、果酒、腐乳、泡菜制作的題微生物在人們的生活生產(chǎn)中無(wú)處不在,為人們生活增添了諸多樂(lè)趣。(1)很多家庭都會(huì)釀酒,請(qǐng)完成下列相關(guān)問(wèn)題。①釀酒時(shí)先將米煮熟的目的是
。
②冷卻到30℃后才能加酒藥的原因是
。
③如果時(shí)常開(kāi)壇蓋舀酒,不久酒就會(huì)變酸,其原因是
。
-21-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練(2)中國(guó)的臭豆腐馳名中外,歷史悠久。臭豆腐外觀青色,“聞著臭,吃著香”。在臭豆腐的制備過(guò)程中,常用的微生物主要是
,在此過(guò)程中,豆腐相當(dāng)于微生物生長(zhǎng)的
。
(3)在腌制泡菜的過(guò)程中,起主要作用的微生物是
,用水封壇的作用是
;欲檢測(cè)泡菜在腌制過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量,使用檢測(cè)試劑后顏色的變化是
。
答案:
(1)殺滅其他雜菌,使淀粉發(fā)生一定程度的水解太高的溫度會(huì)抑制甚至殺死酵母菌醋酸菌在有氧條件下,將酒精氧化為醋酸(2)毛霉培養(yǎng)基(3)乳酸菌制造缺氧環(huán)境出現(xiàn)玫瑰紅色-22-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練方法規(guī)律微生物發(fā)酵過(guò)程中的滅菌措施應(yīng)該從原料、裝置和實(shí)驗(yàn)過(guò)程三個(gè)層次進(jìn)行無(wú)菌操作。(1)果酒與果醋制作中原料的消毒①榨汁前葡萄應(yīng)先沖洗再去枝梗,因?yàn)槿粝热ス?則會(huì)使一些微生物侵入果實(shí)內(nèi)部,影響果酒的制作;②體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌效果最強(qiáng),若酒精濃度過(guò)低,則殺菌效果差,而濃度過(guò)高,又會(huì)使菌體表面蛋白質(zhì)凝固形成一層保護(hù)膜,乙醇分子不能滲入其中,從而使殺菌效果受到影響。(2)腐乳制作過(guò)程中的殺菌消毒①制作腐乳的玻璃瓶洗刷干凈后用沸水消毒;②酒、鹽、香辛料都有殺菌作用;③接種、封瓶時(shí)都要進(jìn)行無(wú)菌操作。-23-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練1.(2016全國(guó)Ⅲ理綜)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)分離純化乳酸菌時(shí),首先需要用
對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋,進(jìn)行梯度稀釋的理由是
。
(2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有
和
。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出
的菌落作為候選菌。
(3)乳酸菌在-20℃長(zhǎng)期保存時(shí),菌液中常需要加入一定量的
(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。
-24-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練答案:
(1)無(wú)菌水泡菜濾液中菌的濃度高,直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)具有透明圈(3)甘油解析:
(1)分離純化乳酸菌時(shí),首先需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋,原因是在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的乳酸菌被分散,培養(yǎng)后能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。(2)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有鑒別乳酸菌和中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸;乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣,故分離純化時(shí)應(yīng)挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌。(3)乳酸菌在-20
℃長(zhǎng)期保存時(shí),菌液中常需要加入一定量的甘油。-25-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練2.蘋(píng)果除鮮食外,還可深加工為果酒、果醋、果汁、果醬等,使產(chǎn)品附加值成倍提高。下圖是某廠進(jìn)行蘋(píng)果酒和蘋(píng)果醋生產(chǎn)的基本工藝流程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。-26-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練(1)蘋(píng)果的出汁率是果酒、果醋產(chǎn)量的保證。在制備蘋(píng)果酒的過(guò)程中,為了提高蘋(píng)果的出汁率,在壓榨前可加入一定濃度的
酶和果膠酶,理由是這兩種酶能
,從而提高蘋(píng)果的出汁率。
(2)發(fā)酵一定時(shí)間后,觀察到甲罐內(nèi)液面不再有
,說(shuō)明發(fā)酵基本完畢。
(3)在制備蘋(píng)果醋的過(guò)程中,乙罐內(nèi)先填充經(jīng)滅菌處理后的木材刨花,然后加入含
菌的培養(yǎng)液,使該菌附著在刨花上,再讓甲罐中發(fā)酵完畢的蘋(píng)果酒流入乙罐,并在A處通入
。蘋(píng)果醋發(fā)酵時(shí)控制的適宜溫度一般比制蘋(píng)果酒時(shí)的適宜溫度
(填“高”“相等”或“低”)。
-27-命題點(diǎn)一命題點(diǎn)二整合提升題型突破題組訓(xùn)練答案:
(1)纖維素能破除果肉細(xì)胞壁(促進(jìn)細(xì)胞壁中纖維素和果膠的水解)
(2)氣泡冒出(3)醋酸無(wú)菌空氣高-28-失分誤區(qū)對(duì)選擇培養(yǎng)基的選擇方法辨析不清防范策略(1)在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)。例如,加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌;加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在主要營(yíng)養(yǎng)成分完整的基礎(chǔ)上加入。(2)改變培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分。例如,缺乏氮源時(shí)可以分離出固氮微生物;石油作為唯一碳源時(shí),可以分離出能消除石油污染的微生物。(3)改變微生物的培養(yǎng)
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