2025年人教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷158考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、草莓皺縮病毒（SCV）感染草莓時(shí)，會(huì)使其葉片扭曲皺縮，植株矮化，導(dǎo)致減產(chǎn)。為了能快速有效檢測出該病毒，研究人員利用SCV的病毒粒子免疫健康小鼠，制備相應(yīng)的單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.從免疫小鼠體內(nèi)分離獲得的B細(xì)胞可無限增殖B.在獲得能分泌相應(yīng)抗體的雜交瘤細(xì)胞的過程中，需要進(jìn)行兩次篩選C.用單克隆抗體檢測草莓是否感染SCV是利用了抗原—抗體雜交的原理D.在制備單克隆抗體的過程中，用到了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)2、若轉(zhuǎn)基因技術(shù)被濫用，可能被恐怖組織用于恐怖行為。下列不屬于恐怖行為的是（）A.把蠟狀桿菌通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造成像炭疽桿菌一樣的致病菌B.把炭疽桿菌基因通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)重組到人體內(nèi)，使人具有免疫力C.把流感病毒基因改造，只會(huì)使具有某種易感基因的人群感染，而其他人卻不易感染D.將生物毒素分子的基因與流感病毒的基因拼接在一起3、胚胎干細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的全能性，下列有關(guān)胚胎干細(xì)胞的敘述錯(cuò)誤的是（）A.胚胎干細(xì)胞可以由早期胚胎或原始性腺中分離獲得B.在形態(tài)上具有體積大、細(xì)胞核小、核仁明顯的特點(diǎn)C.ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，能夠維持不分化的狀態(tài)D.分化誘導(dǎo)因子可誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型細(xì)胞分化4、下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述；正確的是（）A.用蒸餾水使家兔的紅細(xì)胞漲破，可獲取富含DNA的濾液B.植物材料需先放入清水中吸水漲破后，再加入適量的研磨液進(jìn)行充分研磨C.DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2mol/L的NaCl溶液D.鑒定DNA時(shí)，應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中并進(jìn)行沸水浴5、制作果酒、果醋和泡菜三個(gè)實(shí)驗(yàn)的共同點(diǎn)是（）A.菌種均為異養(yǎng)原核生物B.將原料滅菌后再發(fā)酵C.菌種的蛋白質(zhì)合成都在自身的核糖體上進(jìn)行D.菌種的代謝終產(chǎn)物都是CO2和H2O6、PCR技術(shù)是在DNA聚合酶作用下，在體外進(jìn)行DNA大量擴(kuò)增的一種分子生物技術(shù)。下列敘述正確的是（）A.雙鏈DNA在高溫下氫鍵和磷酸二酯鍵斷裂形成2條DNA單鏈B.溫度降低后，單鏈DNA和引物結(jié)合的部分堿基序列相同C.以2條DNA單鏈為模板，以4種NTP為原料，經(jīng)耐高溫酶在高溫下合成2個(gè)新的DNAD.設(shè)置PCR儀的溫度進(jìn)行反應(yīng)可重復(fù)循環(huán)多次，DNA呈指數(shù)式擴(kuò)增7、甲型流感病毒的抗原性與感染性與其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相關(guān)，現(xiàn)利用基因工程的方法生產(chǎn)相關(guān)疫苗。圖甲為構(gòu)建R蛋白基因表達(dá)載體的過程，圖乙為重組質(zhì)粒被相關(guān)酶切后的電泳結(jié)果。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.電泳技術(shù)可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定B.圖甲過程中至少需要應(yīng)用到逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA連接酶C.通過PCR技術(shù)從1個(gè)cDNA分子中特異性擴(kuò)增出R蛋白基因，要得到24個(gè)不含黏性末端的R蛋白基因至少需要5次循環(huán)D.構(gòu)建好的重組質(zhì)粒長度共2000bp，據(jù)圖乙可推測BamHⅠ在重組質(zhì)粒上有3個(gè)酶切位點(diǎn)8、下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述，正確的是（）A.PCR反應(yīng)體系中需要添加耐高溫的解旋酶和DNA聚合酶B.PCR過程中在引物的3'端添加脫氧核苷酸實(shí)現(xiàn)子鏈延伸C.利用PCR對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)需要基因序列全部已知D.在設(shè)計(jì)兩種引物時(shí)，需要讓引物和引物之間的堿基序列互補(bǔ)評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、大多數(shù)哺乳動(dòng)物的早期胚胎具有調(diào)節(jié)發(fā)育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以發(fā)育成一個(gè)完整的胎兒，調(diào)節(jié)能力隨著發(fā)育進(jìn)程逐漸減弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分離的卵裂球仍具有調(diào)整發(fā)育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而發(fā)育至囊胚。下列說法正確的是（）A.桑椹胚的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能B.桑椹胚不同部位的細(xì)胞致密化程度不同C.胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇D.胚胎發(fā)育到原腸胚階段，可將其取出向受體移植10、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)；并以此環(huán)為模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法正確的是（）

A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對，可確定T-DNA的插入位置11、研究人員從土壤中篩選得到酵母菌纖維素酶高產(chǎn)菌株；并對其降解纖維素的條件進(jìn)行了研究。據(jù)圖分析正確的是（）

A.篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右C.該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃D.利用該高產(chǎn)菌株降解纖維素時(shí)需嚴(yán)格保持厭氧環(huán)境12、我國首例綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬的培育過程如圖所示，其中字母代表結(jié)構(gòu)或生物，數(shù)字代表過程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.為了①和②的順利完成，需要用滅活的病毒對細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)B.將C的細(xì)胞核去掉，實(shí)質(zhì)上是去除紡錘體—染色體復(fù)合物C.為避免將E植入F時(shí)產(chǎn)生排斥反應(yīng)，移植前應(yīng)給F注射免疫抑制劑D.移入F的桑葚胚要經(jīng)歷囊胚、原腸胚等階段才能形成豬的幼體13、科學(xué)家在蛙的核移植實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，腸上皮核移植實(shí)驗(yàn)中有1％～2％能形成蝌蚪，囊胚核移植實(shí)驗(yàn)中有50％能形成蝌蚪或成蛙。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.核移植得到的重組細(xì)胞須立即移植到蛙體內(nèi)B.由于科技的進(jìn)步，用猴進(jìn)行體細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)的成功率與用蛙的相當(dāng)C.該實(shí)驗(yàn)說明胚胎細(xì)胞分化程度較低，全能性的表達(dá)更容易D.核移植得到的克隆蛙的遺傳性狀與供核蛙的完全相同14、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥溃徊襟E③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)15、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。16、禁止生物武器公約。

（1）1972年4月10日，蘇聯(lián)、美國、英國分別在其首都簽署了《禁止試制、生產(chǎn)和儲(chǔ)存并銷毀細(xì)菌（生物）和毒劑武器公約》（簡稱_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我國也加入了這一公約。

（2）我國在任何情況下_____、_____、_____生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。17、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。18、醋酸菌是一種____________細(xì)菌。醋酸生成反應(yīng)式是_____________________。19、將DNA粗提取液在____________℃的恒溫水浴箱中保溫10—15分鐘。20、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。21、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()22、第四步：_____23、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____評卷人得分四、判斷題(共4題，共16分)24、植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性。()A.正確B.錯(cuò)誤25、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性。（選擇性必修3P52）()A.正確B.錯(cuò)誤26、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。()A.正確B.錯(cuò)誤27、生殖性克隆是指通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)28、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚；與人類基因同源性高達(dá)87%，并有相似的器官；生理功能和信號通路。由于發(fā)育周期短、費(fèi)用低、體外受精、透明等優(yōu)點(diǎn)，斑馬魚現(xiàn)在越來越廣泛地應(yīng)用于毒性檢測、疾病模型創(chuàng)制、藥物篩選等領(lǐng)域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達(dá)受阻從而構(gòu)建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑；通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關(guān)基因的表達(dá)。針對其作用原理，現(xiàn)有兩種假說：

假說1：嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切。

假說2：嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時(shí)被剪切。

為了驗(yàn)證上述假說；研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：

(1)從受精卵發(fā)育了3天的實(shí)驗(yàn)組和對照組的細(xì)胞中提取總RNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。若假說1成立，選擇上圖所示引物2和引物3進(jìn)行PCR后的結(jié)果為______（填字母）。A．實(shí)驗(yàn)組有雜交帶B．實(shí)驗(yàn)組無雜交帶C．對照組有雜交帶D．對照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立，進(jìn)行PCR時(shí)，需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細(xì)胞用于藥物篩選，可加入__________________，用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行______培養(yǎng)，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為______細(xì)胞，以提高斑馬魚胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。29、蘋果樹腐爛病是由黑腐皮殼菌引起的；是限制蘋果產(chǎn)量的重要因素之一。生產(chǎn)上主要以化學(xué)藥劑防治該病。為開發(fā)生物防治途徑，科研人員擬從土壤中分離篩選出能抑制黑腐皮殼菌生長的枯草芽孢桿菌，實(shí)驗(yàn)流程圖如圖1：

（1）①中木糖和硝酸鉀的作用分別是______________。

（2）②→③中梯度稀釋的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培養(yǎng)基中水分過快蒸發(fā)之外，還有______________。

（4）現(xiàn)有經(jīng)純化后獲得的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系，為探究哪個(gè)品系對黑腐皮殼菌的抑制效果更好，科研人員在如圖2平板中的A處接種黑腐皮殼菌，在距離A處等距離的B1～B4處分別接種等量的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系，在適宜條件下培養(yǎng)3﹣5天后，通過觀察_________________________篩選出抑菌更好的枯草芽孢桿菌菌株。

圖2

（5）在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土樣中活菌的數(shù)目時(shí)，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在______________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法所得結(jié)果往往比實(shí)際細(xì)菌的數(shù)目要少，原因是__________________________________。30、兩只克隆小猴“中中”和“華華”是世界首例非人靈長類動(dòng)物的體細(xì)胞克隆猴；這是我國的研究成果。一年后5只世界首例生物節(jié)律紊亂的體細(xì)胞克隆猴誕生。下圖為培育克隆猴的流程，回答下列問題：

(1)在“中中”“華華”之前，科學(xué)家已培育了胚胎細(xì)胞克隆猴，胚胎細(xì)胞核移植難度明顯低于體細(xì)胞核移植的原因是_____。

(2)科學(xué)家首先將采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)至____期，然后去核，這里的“去核”實(shí)際上是指去除____。核移植過程中用滅活的仙臺(tái)病毒進(jìn)行了短暫處理，其目的是_____。形成的重構(gòu)胚具有_____的能力。體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，需提供適宜的營養(yǎng)及環(huán)境條件，推測環(huán)境條件包括_____（答出2點(diǎn)）。

(3)我國科研團(tuán)隊(duì)采集一只睡眠紊亂最明顯的BMAL1基因敲除的獼猴的體細(xì)胞，通過核移植技術(shù)獲得了5只克隆猴，理論上這5只克隆猴之間的細(xì)胞核基因型_____（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。為驗(yàn)證上述5只基因敲除獼猴存在晝夜節(jié)律紊亂問題，科學(xué)家用檢測設(shè)備監(jiān)測實(shí)驗(yàn)猴，通過行為學(xué)分析檢測其是否明顯表現(xiàn)出睡眠紊亂的癥狀，對照組的設(shè)置應(yīng)為_____。在研究人類疾病致病機(jī)制、研發(fā)人類新藥時(shí)，選用“模型猴”更優(yōu)于“模型鼠”的原因是_____。31、我國有近一億公頃的鹽堿地，大部分植物無法在此生存，而耐鹽植物藜麥卻能生長。通過研究藜麥葉片結(jié)構(gòu)后發(fā)現(xiàn)，其表皮有許多鹽泡細(xì)胞，該細(xì)胞體積是普通表皮細(xì)胞的100倍以上，里面沒有葉綠體，Na+和Cl-在鹽泡細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)如下圖所示。請回答問題。

（1）據(jù)圖推測，藜麥的耐鹽作用機(jī)制是通過_________的方式，將Na+和Cl-運(yùn)送到表皮鹽泡細(xì)胞的________（細(xì)胞器）中儲(chǔ)存起來；從而避免高鹽對其他細(xì)胞的影響。

（2）下表為藜麥鹽泡細(xì)胞和其他幾種普通植物的葉肉細(xì)胞膜中部分蛋白的相對表達(dá)量。其中______（填下列選項(xiàng)字母）更可能是藜麥，理由是_______________________。

。

ABCDNa+載體蛋白812511Cl-載體蛋白2646葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白38286668（3）藜麥根系從土壤中吸收鹽分是主動(dòng)運(yùn)輸還是被動(dòng)運(yùn)輸？有同學(xué)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了探究。

①實(shí)驗(yàn)步驟：

a．取甲、乙兩組生長發(fā)育基本相同的藜麥幼苗植株，放入適宜濃度的含有Na+、Cl-的溶液中。

b．甲組給予正常的細(xì)胞呼吸條件，乙組加入______________。

c．一段時(shí)間后測定兩組植株根系對Na+、Cl-的吸收速率。

②預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論：若乙組_______________；說明藜麥從土壤中吸收鹽分的方式是主動(dòng)運(yùn)輸。

（4）研究人員嘗試將藜麥中的耐鹽基因轉(zhuǎn)移到其他植物體內(nèi)，從而培育新型耐鹽植物。若要從分子水平上檢測耐鹽基因是否成功轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，請寫出兩種常用的檢測方法_________、___________。從經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)價(jià)值角度考慮，培育耐鹽植物的主要意義是_______________（寫出兩條）。評卷人得分六、綜合題(共4題，共20分)32、下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請回答有關(guān)問題：。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素蒸餾水1．4g2．1g0．2g10．0g1．0g定容至1000ml

(1).該培養(yǎng)基只允許分解尿素的細(xì)菌生長，這種培養(yǎng)基稱為_____培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基會(huì)抑制其它種類微生物生長，其原因是該培養(yǎng)基_____。

(2).若要通過統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是_____，接種時(shí)應(yīng)采用_____法，該方法接種培養(yǎng)后的菌落，不可能是下圖中的_____（單選）。

(3).從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對其作進(jìn)一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入_____指示劑，培養(yǎng)該菌后，如果指示劑變_____，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。33、甜瓣子是豆瓣醬的重要成分之一；其生產(chǎn)工藝如下圖所示：

回答下面相關(guān)問題：

(1)制曲過程中，加入的蠶豆主要為米曲霉的生長提供___________營養(yǎng)物質(zhì)。加入的蠶豆需經(jīng)沸水漂燙約4min，過濾、冷卻后使用，沸水漂燙和冷卻的目的分別是___________。

(2)制曲時(shí)將米曲霉與蠶豆瓣混合相當(dāng)于微生物培養(yǎng)的___________技術(shù)，主要目的是使米曲霉充分生長繁殖，并大量產(chǎn)生和積蓄所需要的酶。在統(tǒng)計(jì)米曲霉的數(shù)量以了解制曲進(jìn)程時(shí)，可在顯微鏡下用___________直接計(jì)數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用___________法進(jìn)行計(jì)數(shù)。在制曲容器內(nèi)，上層的米曲霉數(shù)量比底層的多，說明米曲霉的代謝類型是___________。

(3)待米曲霉達(dá)到一定數(shù)量后，向豆瓣曲中加入一定量鹽水，開始制作醬醅，鹽水的作用主要是___________（答出1點(diǎn)即可）。

(4)將醬醅轉(zhuǎn)入發(fā)酵池進(jìn)行發(fā)酵，該過程米曲霉可將蠶豆中的葡萄糖代謝為丙酮酸，在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供___________和___________；大量分泌的蛋白酶可將蠶豆中的蛋白質(zhì)分解成___________，這些因素都影響著甜瓣子的品質(zhì)，從而形成獨(dú)特的色香味和風(fēng)味。34、分別以某種植物的綠色葉片和莖尖為材料；利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速大量繁殖該植物?；卮鹣铝杏嘘P(guān)植物細(xì)胞工程的問題：

(1)以該植物的綠色葉片和莖尖作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，上述技術(shù)依據(jù)的原理是_____。綠色葉片和莖尖相比，利用_____進(jìn)行組織培養(yǎng)更容易獲得試管苗，原因是_____。

(2)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中需加入一定量的蔗糖，加入蔗糖的作用是_____。培養(yǎng)基中除需要加入各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入一定量的_____。

(3)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化；并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。

①過程①所需的酶是_____。過程②后，在顯微鏡下觀察到雜種細(xì)胞成功融合的標(biāo)志是_____。

②若要從雜種植株中篩選出具有高抗性的植株，需要對雜種植株進(jìn)行_____接種實(shí)驗(yàn)。35、新冠病毒外殼中的5蛋白具有很強(qiáng)的抗原性；S蛋白與人細(xì)胞膜上ACE2受體結(jié)合后入侵人體細(xì)胞，導(dǎo)致人體患肺炎，抗體可阻斷病毒的黏附或入侵。2021年12月8日，我國首個(gè)抗新冠病毒特效藥——安巴韋單抗/羅米司韋單抗聯(lián)合療法特效藥獲得中國藥監(jiān)局的上市批準(zhǔn)，這標(biāo)志著中國擁有的首個(gè)全自主研發(fā)并證明有效的抗新冠病毒抗體特效藥正式問世。回答下列問題：

(1)制備抗S蛋白單克隆抗體時(shí)，分多次間隔給小鼠注射S蛋白，能獲得大量產(chǎn)生_________的B淋巴細(xì)胞。誘導(dǎo)小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合時(shí)，采用的誘導(dǎo)方法具體有_________（2點(diǎn)）。

(2)為選出能產(chǎn)生專一抗體的細(xì)胞，要從特定培養(yǎng)基上篩選出雜交瘤細(xì)胞，然后稀釋滴入多孔培養(yǎng)板中，使多孔培養(yǎng)板每孔中_________，然后篩選出抗體檢測呈_________（填“陽性”或“陰性”）的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；該克隆化培養(yǎng)細(xì)胞具有_________的特點(diǎn)（2點(diǎn)）。

(3)用抗S蛋白的單克隆抗體生產(chǎn)的新冠病毒抗原試紙能準(zhǔn)確診斷出某人是否感染原因是抗S蛋白的單克隆抗體_________。

(4)鼠源單克隆抗體進(jìn)入人體后，會(huì)使人體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，導(dǎo)致該抗體失效。目前有多種技術(shù)可以解決抗體失效問題，如從雜交瘤細(xì)胞中提取編碼鼠源單克隆抗體的_________（填“5區(qū)”或“6區(qū)”，抗體的結(jié)構(gòu)如下圖所示）序列的基因，與從人體中獲得的編碼抗體_________（填“5區(qū)”或“6區(qū)”）的基因進(jìn)行拼接，然后導(dǎo)入骨髓瘤細(xì)胞中，進(jìn)行培養(yǎng)獲得新的抗體。

參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、A【分析】【分析】

單克隆抗體的制備：

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；從小鼠體內(nèi)中分離獲得的已免疫的B細(xì)胞；能產(chǎn)生抗體，但不能增殖，A錯(cuò)誤；

B；將已免疫的小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞的過程中至少要進(jìn)行兩次篩選，一次是通過選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，另一次是通過專一抗體檢測篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C；單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)特異性強(qiáng)；靈敏度高，可大量制備，單克隆抗體檢測草莓是否感染SCV，利用了抗原-抗體雜交的原理，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)；動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途是制備單克隆抗體，D正確。

故選A。2、B【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

A；經(jīng)過基因重組獲得的致病菌屬于生物武器的一種；A錯(cuò)誤；

B；炭疽桿菌是一種讓感染者死亡率極高的致病菌；使人具有該病菌的免疫力不是轉(zhuǎn)基因技術(shù)的濫用，不屬于恐怖行為，B正確；

C；把流感病毒基因改造；只會(huì)使具有某種易感基因的人群感染，屬于恐怖組織的行為，C錯(cuò)誤；

D；將生物毒素分子的基因與流感病毒的基因拼接在一起；導(dǎo)致毒素隨著流感傳播，屬于恐怖組織的行為，D錯(cuò)誤。

故選B。3、B【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞：（1）來源：哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來。（2）特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

A；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來；A正確；

B；胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積??；細(xì)胞核大，核仁明顯的特點(diǎn)，B錯(cuò)誤；

C；在飼養(yǎng)層細(xì)胞上；胚胎干細(xì)胞可維持不分化狀態(tài)，C正確；

D；在ES細(xì)胞培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子牛黃酸或丁酰環(huán)腺苷酸等物質(zhì)時(shí)；就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】4、C【分析】【分析】

1；DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。

2；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)；但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對DNA沒有影響。

3；DNA的鑒定：在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；兔屬于哺乳動(dòng)物；哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核，細(xì)胞內(nèi)不含DNA，不能用于DNA的粗提取，A錯(cuò)誤；

B；植物材料需先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜；B錯(cuò)誤；

C；DNA不溶于95%的冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液；而溶于2mol/L的NaCl溶液，C正確；

D；將絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺試劑；沸水浴冷卻后呈藍(lán)色，D錯(cuò)誤。

故選C。5、C【分析】【分析】

制作果酒的菌種是酵母菌；制備果醋的菌種是醋酸菌，制備泡菜的菌種是醋酸菌；制備過程需要注意防止雜菌污染。

【詳解】

A；對于生物類型來說；酵母菌屬于真核生物，醋酸桿菌和乳酸菌屬于原核生物，對于代謝類型來說，酵母菌代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧，醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧菌，乳酸菌屬于異養(yǎng)厭氧細(xì)菌，A錯(cuò)誤；

B；滅菌應(yīng)是殺滅物體上所有的微生物；包括芽孢和孢子，在果酒、果醋和泡菜制作時(shí)對原料只進(jìn)行了清洗和消毒，沒有進(jìn)行滅菌，B錯(cuò)誤；

C；不論是原核生物還是真核生物；都含有核糖體，故菌種的蛋白質(zhì)合成都在自身的核糖體上進(jìn)行，C正確；

D；乳酸菌代謝產(chǎn)物是乳酸；D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】6、D【分析】【分析】

采用PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))擴(kuò)增樣品DNA的過程；第一步是是高溫變性(解旋)的過程，該過程中鍵斷裂，DNA分子解旋為單鏈：第二步是低溫復(fù)性的過程，該過程中一對因?yàn)榕c模板結(jié)合形成局部雙鏈結(jié)構(gòu)：第三步是中溫伸(復(fù)制)的過程。

【詳解】

A；雙鏈DNA在高溫下解旋即使得DNA雙鏈打開；破壞的是堿基對之間的氫鍵，磷酸二酯鍵沒有斷裂，A錯(cuò)誤；

B；當(dāng)溫度降低時(shí)；引物與模板末端結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成2個(gè)DNA分子，此過程以4種氧核苷酸為原料，遵循堿基互補(bǔ)配對原則，單鏈DNA和引物結(jié)合的部分堿基序列互補(bǔ)，B錯(cuò)誤；

C；以2條DNA單鏈為模板；以4種NTP為原料，溫度下降到50℃左右，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合合成2個(gè)新的DNA，C錯(cuò)誤；

D、PCR的反應(yīng)步驟為目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在熱穩(wěn)定DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸，如此重復(fù)循環(huán)，因而每一次循環(huán)后目的基因的量可以增加一倍，即呈指數(shù)形式擴(kuò)增(約為2n，其中n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)；D正確。

故選D。7、C【分析】【分析】

1；圖甲中①是逆轉(zhuǎn)錄過程；②是經(jīng)過復(fù)制形成雙鏈cDNA，③是將R蛋白基因和質(zhì)粒結(jié)合形成基因表達(dá)載體，圖乙是用限制酶切割后形成的電泳圖。

2；PCR原理：在高溫作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。

3；PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

A；不同生物的DNA切割后長度不同；切割后再進(jìn)行電泳，可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定，A正確；

B；圖甲獲得重組質(zhì)粒過程；需要逆轉(zhuǎn)錄、形成雙鏈cDNA分子以及R蛋白基因與質(zhì)粒的重組，所以至少需要應(yīng)用到逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA連接酶，B正確；

C；通過PCR技術(shù)將cDNA分子擴(kuò)增成雙鏈DNA后；若要從中特異性擴(kuò)增出完整的R蛋白基因，循環(huán)3次可獲得2個(gè)不含黏性末端的R蛋白基因，循環(huán)4次可獲得8個(gè)不含黏性末端的R蛋白基因，循環(huán)5次可獲得22個(gè)不含黏性末端的R蛋白基因，C錯(cuò)誤；

D、用HindIII將質(zhì)粒2000bp切割后形成了200bp、400bp和1400bp共3個(gè)片段，說明HindIII在重組質(zhì)粒上有2個(gè)酶切位點(diǎn)，而用HindIII和BamHI將質(zhì)粒切割后形成了200bp、420bp、560bp的片段；2000=420×2+560+200×3，所以一共形成了6個(gè)片段，因此共有5個(gè)酶切位點(diǎn)，因此BamHI在重組質(zhì)粒上有5-2=3個(gè)酶切位點(diǎn)，D正確。

故選C。8、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；PCR反應(yīng)體系中需要添加耐高溫DNA聚合酶；不需要解旋酶，A錯(cuò)誤；

B；脫氧核苷酸鏈?zhǔn)怯蟹较虻?；一端?'端，另一端為3'端，合成子鏈時(shí)，引物的小段核苷酸鏈先與模板鏈配對結(jié)合，然后在引物的3'端進(jìn)行子鏈延伸，B正確；

C；利用PCR對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)只需要知道目的基因兩端的序列即可；C錯(cuò)誤；

D；在設(shè)計(jì)兩種引物時(shí)；兩個(gè)引物之間的堿基序列不能配對，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共6題，共12分)9、A:C【分析】【分析】

當(dāng)胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí)；胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑椹，叫做桑椹胚；實(shí)驗(yàn)證實(shí)，這一階段前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞，這些細(xì)胞都是由受精卵經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生的。

【詳解】

A；桑椹胚前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬于全能細(xì)胞，A正確；

B；囊胚期細(xì)胞可分化內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層兩部分；不同部位的細(xì)胞致密化程度有差異，桑椹胚不同部位的細(xì)胞致密化程度相同，B錯(cuò)誤；

C；胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)，胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇，C正確；

D；胚胎移植一般選擇桑椹胚或囊胚期進(jìn)行；D錯(cuò)誤。

故選AC。10、A:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理；A正確；

B；進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯(cuò)誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列，C錯(cuò)誤；

D；通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】11、A:B【分析】【分析】

分解纖維素微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；A正確；

B；由pH與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)pH為9時(shí)，纖維素酶的活性最高，故在探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右，B正確；

C；由溫度與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)溫度為35℃時(shí)纖維素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的溫度實(shí)驗(yàn)組，故無法判斷該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃，C錯(cuò)誤；

D；酵母菌是兼性厭氧微生物；在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要給酵母菌提高有氧環(huán)境，以保證酵母菌的數(shù)量，D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】12、A:C【分析】【分析】

分析圖解，可以看出綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬涉及了多項(xiàng)生物工程技術(shù)。圖中B表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；然后將目的基因?qū)胴i胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞的細(xì)胞核與豬的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞。重組細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成轉(zhuǎn)基因克隆豬。由此可見，該過程中利用基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；①是將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；直接采用顯微注射法，無需對受體細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，②過程通常是將細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中，然后利用電融合法使D構(gòu)建成功，A錯(cuò)誤；

B；C是處于MⅡ期的卵母細(xì)胞；這個(gè)時(shí)期的“核”實(shí)際上是紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；

C；受體對移入的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此無需給F注射免疫抑制劑，C錯(cuò)誤；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要經(jīng)歷囊胚、原腸胚階段的發(fā)育才能成為豬的幼體，D正確。

故選AC。13、A:B:D【分析】【分析】

1.細(xì)胞核移植技術(shù)；是指將一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核移植至去核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。

2.高度分化的植物細(xì)胞具有全能性；已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。

【詳解】

A；蛙是體外受精；生殖發(fā)育過程都是在體外完成的，所以實(shí)驗(yàn)中用到核移植技術(shù)得到的重組細(xì)胞，不用移植到蛙體內(nèi)，A錯(cuò)誤；

B；蛙是體外受精；生殖發(fā)育過程都是在體外完成的，猴子是體內(nèi)受精、體內(nèi)發(fā)育的，用猴進(jìn)行體細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)的成功率與用蛙無可比性，B錯(cuò)誤；

C；題意顯示；腸上皮核移植實(shí)驗(yàn)中有1%～2%能形成蝌蚪，囊胚核移植實(shí)驗(yàn)中有50%能形成蝌蚪或成蛙，該實(shí)驗(yàn)說明胚胎細(xì)胞分化程度較低，全能性的表達(dá)更容易，C正確；

D；蛙的性狀有些是核基因控制；有些是質(zhì)基因控制，核移植得到的克隆蛙的遺傳性狀與供核蛙的不完全相同，D錯(cuò)誤。

故選ABD。14、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應(yīng)取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或稀釋涂布平板法來計(jì)數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯(cuò)誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)是不添加氮源，利用的是空氣中的氮?dú)猓珼正確。

故選ACD。三、填空題(共9題，共18分)15、略

【解析】①.接種②.平板劃線法③.稀釋涂布平板法16、略

【分析】【詳解】

為最大程度的保障人類權(quán)益；簽署了禁止生物武器公約：

（1）《禁止試制；生產(chǎn)和儲(chǔ)存并銷毀細(xì)菌（生物）和毒劑武器公約》；簡稱《禁止生物武器公約》。

（2）我國對于生物武器的態(tài)度是在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散?！窘馕觥竣?《禁止生物武器公約》②.不發(fā)展③.不生產(chǎn)④.不儲(chǔ)存17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個(gè)核苷酸兩個(gè)DNA片段18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】60—7520、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)21、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說法錯(cuò)誤?！窘馕觥垮e(cuò)誤22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的檢測和鑒定23、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥四、判斷題(共4題，共16分)24、B【分析】【詳解】

植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)，最終獲得了完整的植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，而植物細(xì)胞培養(yǎng)的目的使獲得大量的植物細(xì)胞，從而獲得次生代謝物，利用的原理是細(xì)胞增殖，故錯(cuò)誤。25、B【分析】【詳解】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到了限制，故錯(cuò)誤。26、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。27、A【分析】【詳解】

生殖性克隆，即通常所說的克隆人，通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體，即通常所說的克隆人，該說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)28、略

【分析】【分析】

根據(jù)題干信息分析；糖尿病模型斑馬魚的構(gòu)建的原理是使胰島素基因表達(dá)受阻，而使胰島素基因表達(dá)受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實(shí)線的；嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，其作用的機(jī)理有兩種假說：可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切，也可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時(shí)被剪切。

(1)

根據(jù)引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置；通過PCR擴(kuò)增能得到內(nèi)含子2的序列，若假說1成立，即嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切，故實(shí)驗(yàn)組中應(yīng)含有內(nèi)含子2的序列，而對照組的該片段被切除了，因此用引物2和引|物3進(jìn)行PCR反應(yīng)，其結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組中有雜交帶，而對照組中無雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說2成立；即RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時(shí)被剪切下去，則可以選擇圖示引物5和引物2；引物5和引物6進(jìn)行PCR，觀察是否有雜交帶出現(xiàn)。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA；而只能從引物3′端延伸DNA鏈，因此DNA復(fù)制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；可以獲得分散的斑馬魚胚胎干細(xì)胞，然后對其進(jìn)行原代培養(yǎng)，接著分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞，以提高斑馬魚胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因的表達(dá)的相關(guān)知識點(diǎn)，明確基因轉(zhuǎn)錄出來的mRNA是要經(jīng)過加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的，并能夠根據(jù)題干提取有效信息進(jìn)行答題。【解析】(1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA；只能從3′端延伸DNA鏈，因此DNA復(fù)制需要引物。（得分點(diǎn)：“只能從3′端延伸DNA鏈”）

(4)胰蛋白酶內(nèi)細(xì)胞團(tuán)原代飼養(yǎng)層29、略

【分析】【分析】

微生物的分離：①利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質(zhì)的“嗜好”；專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質(zhì)，使該微生物大量增殖。這些物質(zhì)主要是一些特殊的碳源；氮源，如纖維素可用來富集纖維素分解微生物，尿素可用來富集尿素分解微生物。②利用該分離對象對某種抑制物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物質(zhì)，經(jīng)培養(yǎng)后，由于原來占優(yōu)勢的它種微生物的生長受到抑制，而分離對象卻可趁機(jī)大量增殖，使之在數(shù)量上占優(yōu)勢。如篩選酵母菌和霉菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素，因青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的細(xì)胞壁的合成，從而抑制兩類微生物的生長，而酵母菌和霉菌正常生長增殖。

【詳解】

（1）微生物的生長需要碳源；氮源、水和無機(jī)鹽；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸鉀中含有N元素，可以提供氮源和無機(jī)鹽。

（2）分離篩選枯草芽孢桿菌需要得到單菌落；②→③中梯度稀釋的目的是將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在固體培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培養(yǎng)基中水分過快蒸發(fā)之外；還可以防止冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。

（4）分析題意可知，A處接種黑腐皮殼菌，在距離A處等距離的B1~B4處分別接種等量的4個(gè)枯草芽孢桿菌品系；在適宜條件下培養(yǎng)3－5天，由于枯草芽孢桿菌能抑制黑腐皮殼菌生長，通過觀測黑腐皮殼菌菌落的形狀（黑腐皮殼菌菌落邊緣與4個(gè)枯草芽孢桿菌菌落的距離），就能篩選出抑菌更好的枯草芽孢桿菌菌株。

（5）在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土樣中活菌的數(shù)目時(shí)；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故該方法所得結(jié)果往往比實(shí)際細(xì)菌的數(shù)目要少。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和計(jì)數(shù)的相關(guān)知識，意在考查考生利用所學(xué)知識解決實(shí)際問題的能力，難度中等?！窘馕觥刻峁┨荚?，提供氮源和無機(jī)鹽將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在固體培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落防止冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染觀測黑腐皮殼菌菌落的形狀（黑腐皮殼菌菌落邊緣與4個(gè)枯草芽孢桿菌菌落的距離）30～300當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落30、略

【分析】【分析】

1；克隆動(dòng)物概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

2；原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。

3；動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。原因：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低；恢復(fù)其全能性相對容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。

【詳解】

（1）體細(xì)胞分化程度高；表現(xiàn)全能性困難，而胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性容易，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。

（2）去核前應(yīng)保證采集的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂II中期；去核是指去除紡錘體—染色體復(fù)合物；核移植前需用滅活的仙臺(tái)病毒對體細(xì)胞進(jìn)行短暫處理，在此過程中，滅活的仙臺(tái)病毒的作用是誘導(dǎo)體細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合。目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)普遍使用的去核方法是顯微操作法，核移植的具體操作是將體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞，從而得到重構(gòu)胚，使其具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力；體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入動(dòng)物血清等一些天然成分，并將其置于含有95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)基，并創(chuàng)造無菌；無毒環(huán)境。胚胎移植前還需對代孕母猴進(jìn)行同期發(fā)情處理，這樣可以使移植的胚胎獲得相同的生理環(huán)境，以保證胚胎能夠繼續(xù)發(fā)育。

（3）通過核移植技術(shù)獲得了5只克隆猴，理論上這5只克隆猴之間的細(xì)胞核基因型相同，細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞；為了驗(yàn)證這5只基因敲除獼猴是否存在晝夜節(jié)律紊亂問題，該實(shí)驗(yàn)的自變量是BMAL1基因是否敲除，因變量是是否出現(xiàn)睡眠紊亂癥狀。所以對照組的設(shè)置應(yīng)為與克隆獼猴生理狀態(tài)相同的正常的獼猴個(gè)體(或不存在BMAL1缺失）。在研究人類疾病致病機(jī)制、研發(fā)人類新藥時(shí)，因?yàn)楹锱c人的親緣關(guān)系更近，故選用“模型猴”更優(yōu)于“模型鼠”?！窘馕觥?1)胚胎細(xì)胞分化程度低；表現(xiàn)全能性相對容易。

(2)MⅡ紡錘體-染色體復(fù)合物誘導(dǎo)細(xì)胞融合發(fā)育成完整個(gè)體無菌；無毒的環(huán)境；溫度、pH、滲透壓，氣體環(huán)境。

(3)相同與克隆猴生理狀態(tài)相同的正常個(gè)體（或不存在BMAL基因缺失個(gè)體）猴與人的親緣關(guān)系更近31、略

【分析】【分析】

物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞桨ㄗ杂蓴U(kuò)散；協(xié)助擴(kuò)散、主動(dòng)運(yùn)輸；自由擴(kuò)散不需要載體和能量；協(xié)助擴(kuò)散需要載體，但不需要能量；主動(dòng)運(yùn)輸需要載體，也需要能量；自由擴(kuò)散和協(xié)助擴(kuò)散是由高濃度向低濃度運(yùn)輸，是被動(dòng)運(yùn)輸。

【詳解】

（1）由圖中信息可知Na+和Cl-的運(yùn)輸需要借助載體蛋白；同時(shí)逆濃度梯度運(yùn)輸，為主動(dòng)運(yùn)輸。鈉離子和氯離子進(jìn)入表皮細(xì)胞后儲(chǔ)存在液泡中，從而避免高鹽對其它細(xì)胞的影響。

（2）由題干信息可知鹽泡表皮細(xì)胞吸收鈉離子和氯離子；同時(shí)細(xì)胞內(nèi)無葉綠體，則細(xì)胞膜表面鈉離子和離子載體蛋白含里較多，由于細(xì)胞不能產(chǎn)生有機(jī)物供能，故所需能量只能通過其他細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)的葡萄糖分解提供，故葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白含量也較多(細(xì)胞內(nèi)無葉綠體，營養(yǎng)依靠外部細(xì)胞），所以D更可能是藜麥的鹽泡細(xì)胞。

（3）①主動(dòng)運(yùn)輸和被動(dòng)運(yùn)輸?shù)膮^(qū)別在于是否需要ATP；故ATP為自變量（細(xì)胞呼吸條件），所以甲組應(yīng)給予正常呼吸條件，乙組應(yīng)完全抑制其細(xì)胞呼吸；

②一段時(shí)間后觀察兩組植株對鈉離子和氯離子的吸收速率；若乙組植株根系對鈉離子；氯離子的吸收速率明顯小于甲組吸收速率或基本不吸收，則說明其吸收鹽分的方式為主動(dòng)運(yùn)輸。

（4）可用DNA分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞；如可用耐鹽基因制作成的探針進(jìn)行DNA分子雜交（或用該探針進(jìn)行RNA分子雜交），或用基因測序法進(jìn)行檢測。通過大面積種植多種耐鹽植物，可提高土地利用率；減緩?fù)寥利}堿化程度；改善鹽堿地的生態(tài)環(huán)境、減少溫室氣體的釋放、提高生物多樣性。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查物質(zhì)運(yùn)輸?shù)姆绞?，意在考查考生對各種運(yùn)輸方式的區(qū)分和實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)分析能力。【解析】主動(dòng)運(yùn)輸液泡D三種載體蛋白的含量均相對較高。鹽泡細(xì)胞從表皮細(xì)胞通過主動(dòng)運(yùn)輸吸收大量Na+、Cl-，需要較多兩種離子的載體蛋白。鹽泡細(xì)胞中沒有葉綠體，不能生產(chǎn)有機(jī)物供能，細(xì)胞所需能量只能通過其他細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)的葡萄糖分解提供，因此葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白需要量也較高細(xì)胞呼吸抑制劑（或阻斷ATP產(chǎn)生的物質(zhì)）吸收速率明顯小于甲組吸收速率或基本不吸收用耐鹽基因制作成的探針進(jìn)行DNA分子雜交（或用該探針進(jìn)行RNA分子雜交）基因測序、PCR等通過大面積種植多種耐鹽植物，提高土地利用率；減緩?fù)寥利}堿化程度、改善鹽堿地的生態(tài)環(huán)境、減少溫室氣體的釋放、提高生物多樣性。六、綜合題(共4題，共20分)32、略

【分析】【分析】

測定微生物數(shù)量的常用方法：

（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。

①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。

②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法/稀釋涂布平板法）

①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

②操作：設(shè)置重復(fù)組；增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性，同時(shí)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。【小問1】

分析培養(yǎng)基配方可知；該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，只允許分解尿素的細(xì)菌生長，會(huì)抑制不能分解尿素的其它種類微生物生長，因此這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基?！拘?】

上述培養(yǎng)基中缺少凝固劑；為液體培養(yǎng)基，若要通過統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，應(yīng)使用固體培養(yǎng)基，因此在上述培養(yǎng)基中還需要添加瓊脂。常用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。從圖中信息可知，A；B、C圖采用的是稀釋涂布平板法，D圖采用的是平板劃線法，ABC錯(cuò)誤，D正確。

故選D?！拘?】

對分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定；在以尿素為唯一氮