干貨 如何誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化

干貨如何誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化關(guān)鍵詞：巨噬細(xì)胞極化，M1極化，M2極化，細(xì)胞因子，IL-4,IFN-γ巨噬細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)非常重要的一類免疫細(xì)胞，也一直是科研工作者們的研究熱點(diǎn)，尤其是巨噬細(xì)胞的極化，本期我們將重點(diǎn)講述如何誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化。當(dāng)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)遭到破壞時(shí)，巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬、釋放炎癥因子等作用清除外源微生物，以恢復(fù)機(jī)體動(dòng)態(tài)平衡，這個(gè)過(guò)程稱為活化。伴隨著活化，在細(xì)胞因子的作用下，巨噬細(xì)胞改變其表型，以增強(qiáng)應(yīng)對(duì)微環(huán)境變化的能力，該過(guò)程為巨噬細(xì)胞的極化。極化使得巨噬細(xì)胞向不同的方向分化，呈現(xiàn)出不同的表型，發(fā)揮不同的功能。目前巨噬細(xì)胞的極化包括兩個(gè)極端，即經(jīng)典活化的M1型巨噬細(xì)胞和替代性活化的M2型巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞的極化對(duì)防御病原體、調(diào)節(jié)炎癥、修復(fù)組織和維持體內(nèi)平衡的穩(wěn)定有著十分重要的作用。誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M1型極化所需誘導(dǎo)因子：IFN-γ、LPS、GM-CSF等誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化所需誘導(dǎo)因子：IL-4、IL-13、IL-10、M-CSF、TGF-β等以人外周血向巨噬細(xì)胞的極化為例單核細(xì)胞樣本準(zhǔn)備從外周血中分離PBMCs，可使用人淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)行此步；從PBMCs中分離單核細(xì)胞，可使用CD14單核細(xì)胞磁珠分選試劑盒進(jìn)行此步。獲得成熟巨噬細(xì)胞調(diào)整單核細(xì)胞濃度為1-2×10^6/ml（可參考文獻(xiàn)），在RPMI1640培養(yǎng)基（含20%FBS）中添加M-CSF（100ng/ml）誘導(dǎo)單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞的成熟。7天左右分化成熟為巨噬細(xì)胞（貼壁），可選擇CD68+表達(dá)作為鑒定巨噬細(xì)胞成熟的標(biāo)志蛋白。圖1.誘導(dǎo)單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞的成熟誘導(dǎo)向不同方向的極化將成熟的巨噬細(xì)胞消化下來(lái)，重新鋪板，誘導(dǎo)48h實(shí)現(xiàn)向M1、M2的極化：M1極化因子：LPS（100ng/ml）+IFN-γ（20ng/ml）M2極化因子：IL-4或IL-10或IL-13（20ng/ml）圖2.誘導(dǎo)成熟巨噬細(xì)胞向M1、M2的極化極化的鑒定刺激48小時(shí)后，用流式的方法檢測(cè)極化后M1、M2標(biāo)志蛋白的表達(dá)。M1巨噬細(xì)胞上調(diào)表達(dá)CD86、MHCⅡ、CD80、CD274等，M2巨噬細(xì)胞上調(diào)表達(dá)CD206、CD163等。參考文獻(xiàn)Blood.2013Dec12;122(25):4054-67.doi:10.1182/blood-2013-05-501494.Epub2013Oct30產(chǎn)品推薦產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格PRP1137MouseIL-4protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1055HumanIL-10protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1051HumanIL-13protein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1050HumanIFN-γprotein20μg/100μg/500μg/1mgPRP1936HumanM-CSFProtein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1016HumanGM-CSFprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1136MouseM-CSFprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1048HumanTGF-βprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1151RecombinantGM-CSF，Mouse，AF5μg/20μg/100μg/1mgPRP3001Ulp1(SUMOProtease/Ulp1peptidase)500U/1000U/5000UPRP3002TerminalDeoxynucleotidylTransferase(TdT)40μg/100μgPRP3003HumanAnnexinV/ANXA5protein100μg/1mg/10mgPRP3004Luciferasefirefly5mg/25mgPRP1068HumanFGF-2（154aa）protein20μg/100μg/500μg/1mgPRP1138MouseIFN-γ20μg/100μg/500μg/1mgPRP1085HumanIL-4Protein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1049HumanEGFprotein100μg/500μg/1mg/10mgPRP1158MouseIL-1betaProtein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1114MouseRANKLprotein2μg/10μg/100μg/1mgPRP1171Mouse/RatTGFbeta1,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1113MouseTNF-αprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1087HumanIL-6Protein,Histag(Animal-Free)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1060RecombinantIL-1beta，Human，AF5μg/20μg/100μg/1mgPRP1056HuamnRANKLprotein5μg/20μg/100μg/1mgPRP1054HumanVEGF165protein5μg/20μg/100μg/1mg歡迎廣大“蝌蚪”們多多關(guān)注Abbkine公眾號(hào)，還會(huì)有更多科研驚喜等著大家喲。同時(shí)，Abbkine的技術(shù)專家為了給廣大讀者提供學(xué)習(xí)生物知識(shí)的平臺(tái)，經(jīng)過(guò)不懈努力，將多種高端生物實(shí)驗(yàn)的干