出口果蔬中毒死蜱 免疫層析電化學(xué)檢測技術(shù)

1出口果蔬中毒死蜱免疫層析電化學(xué)檢測技術(shù)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了蔬菜、水果中毒死蜱農(nóng)藥的免疫層析電化學(xué)檢測技術(shù)的原理、試劑與材料、儀器與設(shè)備、試樣制備、測定、結(jié)果計(jì)算與表述、重復(fù)性和檢測限與特異性。本標(biāo)準(zhǔn)適用于蘋果、菠蘿、菠菜、馬鈴薯等果蔬中毒死蜱農(nóng)藥的在線篩查和快速監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法NY/T789-2004農(nóng)藥殘留分析樣本的采樣方法3原理利用免疫測定中競爭法檢測原理，通過在檢測區(qū)包被一定量的包被抗原，質(zhì)控區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體，待辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體與樣品及檢測區(qū)的物質(zhì)之間競爭反應(yīng)后，將檢測區(qū)與質(zhì)控區(qū)切下，置于鄰苯二胺反應(yīng)池中，反應(yīng)液進(jìn)行電化學(xué)檢測。4試劑與材料除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純；實(shí)驗(yàn)室用水符合GB/T6682中規(guī)定的二級水。4.1辣根過氧化物酶4.2鄰苯二胺5儀器與設(shè)備實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器、設(shè)備、材料及下列各項(xiàng)。5.1免疫層析試劑：陽性參考品、陰性參考品、甲醇、樣品處理液、檢測液和檢測試紙條，檢測試紙條使用鋁箔袋密封包裝。5.2天平：百分之一電子天平5.3濾紙：雙圈定性濾紙5.4電化學(xué)工作站25.5一次性平面印刷碳電極，以Ag/AgCl為參比電極。6試樣制備稱取1.0g±0.1g大米樣品，粉碎后，加入1.0mL甲醇，靜置15min。加入5.0mL樣品處理液，充分混勻后，用濾紙過濾，用樣品處理液沖洗濾紙中的樣品，濾液和沖洗液全部轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶，用樣品處理液定容制成提取液，最后用檢測液將提取液稀釋8倍成待測液。7測定取出檢測試紙條。將試紙條浸入待測液中，待測液在層析作用下向檢測試紙條的尾端側(cè)向流動，8min后待競爭反應(yīng)完成，將質(zhì)控區(qū)和檢測區(qū)切下，置于鄰苯二胺反應(yīng)池中，5min后進(jìn)行電化學(xué)檢測。同時對試劑盒內(nèi)的陽性參考品、陰性參考品和檢測液（空白）進(jìn)行同樣操作，以協(xié)助結(jié)果判斷。8結(jié)果計(jì)算與表述試樣中毒死蜱含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)X計(jì)，單位為微克每千克(μg/kg），按式（1）計(jì)算：式中：Pi：檢測溶液中毒死蜱組分的電化學(xué)信號值；Vi：試樣制備中待測液體積，單位為毫升（mL）；Ci：毒死蜱陽性標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度，單位為納克每毫升（ng/mLVs：標(biāo)準(zhǔn)溶液的檢測體積（mL）;Ps：毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液電化學(xué)信號值（系列濃度M：試樣質(zhì)量，單位為克（g）。測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后一位。9重復(fù)性在重復(fù)實(shí)驗(yàn)條件下，獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值不大于其算術(shù)平均值的15%。10檢測限與特異性毒死蜱的檢