2025年上外版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷_第1頁(yè)
2025年上外版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷_第2頁(yè)
2025年上外版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷_第3頁(yè)
2025年上外版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷_第4頁(yè)
2025年上外版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷_第5頁(yè)
已閱讀5頁(yè),還剩29頁(yè)未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè),總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè),總=sectionpages11頁(yè)2025年上外版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷545考試試卷考試范圍:全部知識(shí)點(diǎn);考試時(shí)間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級(jí):______考號(hào):______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題,共18分)1、以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)的表述中正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,含15%CO2的恒溫培養(yǎng)箱的作用是調(diào)控pH和溫度B.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中加入誘導(dǎo)因素也不會(huì)出現(xiàn)組織分化現(xiàn)象C.目前使用或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以?xún)?nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,首先要用胃蛋白酶處理部分組織以使細(xì)胞分散獲得單個(gè)細(xì)胞2、腐乳是我國(guó)民間的傳統(tǒng)發(fā)酵食品,營(yíng)養(yǎng)豐富,味道鮮美。下列有關(guān)敘述正確的是()A.有多種微生物參與,發(fā)酵過(guò)程需要隔絕氧氣B.鹵湯中酒的含量一般控制在21%左右,加酒過(guò)少,酶會(huì)變性失活C.現(xiàn)代腐乳生產(chǎn)需要在嚴(yán)格無(wú)菌條件下,避免其他菌種污染,影響產(chǎn)品質(zhì)量D.腐乳裝瓶時(shí),動(dòng)作要慢且小心,整齊擺好豆腐、加入鹵湯后密封3、幽門(mén)螺桿菌是急慢性胃炎和胃潰瘍的主要致病菌,它能將尿素分解成氨氣等物質(zhì)。若從攜帶者胃黏膜樣本中分離幽門(mén)螺桿菌,相關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟和方法不合理的是()A.配置培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以尿素為唯一碳源B.可利用酚紅指示劑鑒定幽門(mén)螺桿菌的菌落C.應(yīng)設(shè)置未接種的培養(yǎng)基,做為對(duì)照組D.采用稀釋涂布平板法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),其結(jié)果可能會(huì)偏小4、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUCMSCs)廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和骨骼肌、皮膚創(chuàng)面的再生和修復(fù)。科研人員采用不同濃度血清培養(yǎng)hUCMSCs,48h后收集各組上清液,培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞(HCEcs)過(guò)程及結(jié)果如下表。下列敘述錯(cuò)誤的是()。實(shí)驗(yàn)步驟A組B組C組D組配制不同濃度的血清1%3%5%10%培養(yǎng)hUCMSCs細(xì)胞48h后,取上清液進(jìn)行進(jìn)行進(jìn)行進(jìn)行用上清液培養(yǎng)HCEcs進(jìn)行進(jìn)行進(jìn)行進(jìn)行24h后測(cè)吸光度(數(shù)值越大代表活細(xì)胞數(shù)目越多)0.670.680.520.48

A.本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄颗囵B(yǎng)HCEcs的最適血清濃度B.用胰蛋白酶處理使HCEcs分散以檢測(cè)吸光度C.血清濃度較低時(shí)有利于獲得更多的HCEcsD.人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞可能是一種全能干細(xì)胞5、下列哪項(xiàng)是對(duì)待生物技術(shù)的理性態(tài)度()A.轉(zhuǎn)基因技術(shù)是按照人們的意愿對(duì)生物進(jìn)行的設(shè)計(jì),不存在負(fù)面影響B(tài).轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物對(duì)于解決糧食、能源等問(wèn)題起了積極作用,同時(shí)也存在一定風(fēng)險(xiǎn)C.克隆技術(shù)如果被不合理利用將給社會(huì)造成災(zāi)難,應(yīng)禁止任何克隆研究D.轉(zhuǎn)基因技術(shù)如果被恐怖分子利用將可能導(dǎo)致人類(lèi)滅絕,應(yīng)停止轉(zhuǎn)基因研究6、紫杉醇是存在于紅豆杉屬植物體內(nèi)的一種次生代謝物,具有高抗癌活性,下圖是利用植物細(xì)胞工程技術(shù)獲得紫杉醇的工廠化途徑。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

A.③過(guò)程細(xì)胞進(jìn)行的是有絲分裂B.紫杉醇不是紅豆杉生長(zhǎng)和生存所必需的代謝物C.①、③過(guò)程所用的培養(yǎng)基物理性質(zhì)不同D.可將高產(chǎn)細(xì)胞群直接置于低滲溶液中,使其漲破后提取紫杉醇7、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用的敘述,不正確的是()A.可以將抗病蟲(chóng)害、抗除草劑等基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物使其具有相應(yīng)的抗性B.可以使用DNA重組技術(shù),使微生物生產(chǎn)稀缺的藥物,如免疫球蛋白等C.可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)使奶牛變成生物反應(yīng)器,使它們的奶中富含某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、珍貴藥材或人類(lèi)所需要的蛋白質(zhì)D.將不同生物的DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)移和重組,會(huì)創(chuàng)造出新物種8、科學(xué)家利用病毒介導(dǎo)的方法將細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中起重要作用的轉(zhuǎn)錄因子(如基因Oct3/4和基因Sox2等)導(dǎo)入已分化的體細(xì)胞中,使其重新編程得到了一種類(lèi)似于胚胎干細(xì)胞的新型細(xì)胞——誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS)。研究發(fā)現(xiàn),iPS可在適當(dāng)誘導(dǎo)條件下定向分化成各種類(lèi)型的細(xì)胞,也可以發(fā)育成具有繁殖能力的個(gè)體。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.iPS可誘導(dǎo)發(fā)育成個(gè)體,體現(xiàn)了動(dòng)物的體細(xì)胞具有全能性B.iPS定向誘導(dǎo)獲得的皮膚可避免免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生C.已分化的體細(xì)胞與iPS的遺傳物質(zhì)存在某些差異D.iPS與胚胎干細(xì)胞一樣可作為治療某些疾病的潛在來(lái)源9、新冠病毒是一種單鏈RNA病毒,用“熒光RT-PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測(cè),方法是取檢測(cè)者的mRNA逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增,用熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA.在檢測(cè)過(guò)程中,得到一條熒光強(qiáng)度的變化曲線(xiàn),如圖所示(根據(jù)超過(guò)閾值時(shí)Cyle的次數(shù)確定是否是新冠確診病例)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()

A.“熒光RT-PCR技術(shù)”中遵循的堿基配對(duì)原則與轉(zhuǎn)錄過(guò)程不完全一致B.若a點(diǎn)左移,則說(shuō)明檢測(cè)樣本中的新冠病毒含量較高C.“平臺(tái)期”出現(xiàn)是受限于熒光探針、引物、及原料的數(shù)量D.樣本經(jīng)“熒光RT-PCR技術(shù)”擴(kuò)增后,只要超過(guò)閾值即為新冠確診病例評(píng)卷人得分二、多選題(共8題,共16分)10、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問(wèn)題的觀點(diǎn),不正確的是()A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別,設(shè)計(jì)試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題C.通過(guò)基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業(yè)D.大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交11、下表有關(guān)基因表達(dá)的選項(xiàng)中;能夠表達(dá)的有()

?;虮磉_(dá)的細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物A細(xì)菌抗蟲(chóng)蛋白基因抗蟲(chóng)棉葉肉細(xì)胞細(xì)菌抗蟲(chóng)蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮膚細(xì)胞人酪氨酸酶C動(dòng)物胰島素基因大腸桿菌工程菌細(xì)胞動(dòng)物胰島素D兔血紅蛋白基因兔成熟紅細(xì)胞兔血紅蛋白A.AB.BC.CD.D12、基因敲除技術(shù)針對(duì)某個(gè)序列已知但功能未知的序列,通過(guò)改變生物的遺傳基因,令特定的基因功能喪失作用,從而使部分功能被屏蔽,并可進(jìn)一步對(duì)生物體造成影響,進(jìn)而推測(cè)出該基因的生物學(xué)功能。研究人員將某實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的第5號(hào)染色體上的一段DNA敲除,結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液甘油三酯極高,具有動(dòng)脈硬化的傾向,并可以遺傳給后代。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)B.動(dòng)脈硬化的產(chǎn)生與遺傳物質(zhì)發(fā)生基因重組有關(guān)C.控制甘油三酯合成的基因就位于第5號(hào)染色體上D.利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能13、在單克隆抗體的制備過(guò)程中,雜交瘤細(xì)胞(即瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞)的篩選是必不可少的步驟。篩選雜交瘤細(xì)胞所用的HAT培養(yǎng)基成分和細(xì)胞增殖時(shí)所需的核苷酸的兩條形成途徑(D途徑,S途徑)如下表所示。已知融合所用的瘤細(xì)胞是經(jīng)毒性培養(yǎng)基選出的中間合成途徑缺失株,即只有起始合成途徑,效應(yīng)B細(xì)胞有兩條核苷酸合成途徑。若僅考慮細(xì)胞的兩兩融合,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()。HAT培養(yǎng)基成分水,糖類(lèi)、無(wú)機(jī)鹽、次黃嘌呤、氨基糖呤(葉酸拮抗劑),胸腺嘧啶脫氧核苷等起始合成途徑(D途徑)由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸,葉酸作為重要的輔酶參與這一過(guò)程中間合成途徑(S建徑)利用次黃嘌呤一鳥(niǎo)嘌呤磷酸核苷轉(zhuǎn)移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相應(yīng)的核苷酸

A.HAT培養(yǎng)基中瘤細(xì)胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.雜交瘤細(xì)胞能被篩選的原因?yàn)榧染邆湓鲋衬芰?,又可進(jìn)行S途徑C.篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞分泌的均為同一種特異性抗體D.在放入HAT培養(yǎng)基之前的融合細(xì)胞的培養(yǎng)液中,有D途徑的細(xì)胞有3種14、為了獲得抗蚜蟲(chóng)棉花新品種,研究人員將雪花蓮凝集素基因(GNA)和尾穗莧凝集素基因(ACA)與載體(pBI121)結(jié)合,然后導(dǎo)入棉花細(xì)胞(如下圖所示)。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南喾氖牵ǎ?/p>

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ兩種酶處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確C.將棉花細(xì)胞接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細(xì)胞D.用PCR技術(shù)可檢測(cè)GNA和ACA基因是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中15、下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的說(shuō)法中,錯(cuò)誤的是()A.果酒的制作離不開(kāi)酵母菌,酵母菌屬于兼性厭氧生物,在有氧條件下大量繁殖B.制作果醋需要醋酸菌,它是一種嚴(yán)格厭氧的微生物,可將葡萄中的糖分解為乙酸C.多種微生物參與了腐乳的制作,如酵母菌、毛霉、曲霉等D.制作泡菜利用的乳酸菌是一種厭氧微生物,可以通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸和二氧化碳16、下圖為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖,其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞,所含有的染色體組分別是AA和BB。據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是()

A.圖中①過(guò)程通常用纖維素酶和果膠酶處理,目的是獲得原生質(zhì)層B.過(guò)程②中關(guān)鍵環(huán)節(jié)是原生質(zhì)體的融合,可用滅活的病毒誘導(dǎo)C.經(jīng)過(guò)②和③過(guò)程形成的c細(xì)胞的染色體組不一定為AABBD.該技術(shù)流程的目的是獲得雜種植株,優(yōu)點(diǎn)是打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種17、2019年,中國(guó)科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù),用基因敲除的猴的體細(xì)胞通過(guò)克隆技術(shù)培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.克隆猴基因組成差異小,可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運(yùn)用該基因編輯技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人的研究評(píng)卷人得分三、填空題(共7題,共14分)18、在____________的溫度范圍內(nèi),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解體,雙鏈分開(kāi),這過(guò)程成為_(kāi)_________。19、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的____________條件下,將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免__________________的污染,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。20、對(duì)于DNA的粗提取而言,就是利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在__________方面的差異,提取DNA,去除雜質(zhì)。(人教P54)21、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

組織培養(yǎng)技術(shù)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外,還廣泛應(yīng)用于另一個(gè)重要的領(lǐng)域,即______。22、應(yīng)用:______(微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子)、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。23、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖:可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒:采用______組織培養(yǎng)來(lái)除去病毒(因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒______)

人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn):完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性,______;方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸。

人工種子的結(jié)構(gòu)包括:______、_____和______。24、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似,只是前者熱穩(wěn)定性較差,進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共36分)25、如圖為果酒與果醋發(fā)酵裝置示意圖;請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)釀造葡萄酒時(shí);在葡萄榨汁前,葡萄要先進(jìn)行________再除去枝梗,可以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。

(2)將發(fā)酵裝置放在18~25℃環(huán)境中,每天擰開(kāi)氣閥b多次;排出發(fā)酵過(guò)程產(chǎn)生的大量________。裝置中d處設(shè)計(jì)成彎曲形狀的目的是____________________________________________。

(3)10天之后;利用酸性條件下的________對(duì)從出料口c取樣的物質(zhì)進(jìn)行檢驗(yàn),若樣液變?yōu)開(kāi)_______色,說(shuō)明產(chǎn)生了酒精。

(4)產(chǎn)生酒精后,若在發(fā)酵液中加入醋酸菌,然后將裝置放在________環(huán)境中,適時(shí)打開(kāi)______向發(fā)酵液中充氣,原因是______________________________________________。26、如圖是從土壤中篩選纖維素分解菌的流程圖;回答下列問(wèn)題:

(1)土壤取樣時(shí),一般選擇__________________豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是________________________。

(2)若測(cè)得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51,通過(guò)計(jì)算得知每毫升樣品中有5.1×107個(gè)纖維素分解菌,則該稀釋液的稀釋倍數(shù)為_(kāi)________。

(3)鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入CR染料,它可以與纖維素形成_________色復(fù)合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落(如圖),則降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落__________。

27、被稱(chēng)為“水中小白鼠”的斑馬魚(yú)是一種體長(zhǎng)4厘米左右的熱帶淡水魚(yú);與人類(lèi)基因同源性高達(dá)87%,并有相似的器官;生理功能和信號(hào)通路。由于發(fā)育周期短、費(fèi)用低、體外受精、透明等優(yōu)點(diǎn),斑馬魚(yú)現(xiàn)在越來(lái)越廣泛地應(yīng)用于毒性檢測(cè)、疾病模型創(chuàng)制、藥物篩選等領(lǐng)域中。

研究人員欲通過(guò)使胰島素基因表達(dá)受阻從而構(gòu)建糖尿病模型斑馬魚(yú)。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑;通過(guò)將其注入斑馬魚(yú)受精卵可阻礙相關(guān)基因的表達(dá)。針對(duì)其作用原理,現(xiàn)有兩種假說(shuō):

假說(shuō)1:?jiǎn)徇戳x寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對(duì)應(yīng)序列不能被剪切。

假說(shuō)2:?jiǎn)徇戳x寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對(duì)應(yīng)序列同時(shí)被剪切。

為了驗(yàn)證上述假說(shuō);研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):

(1)從受精卵發(fā)育了3天的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的細(xì)胞中提取總RNA,再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。若假說(shuō)1成立,選擇上圖所示引物2和引物3進(jìn)行PCR后的結(jié)果為_(kāi)_____(填字母)。A.實(shí)驗(yàn)組有雜交帶B.實(shí)驗(yàn)組無(wú)雜交帶C.對(duì)照組有雜交帶D.對(duì)照組無(wú)雜交帶(2)若要證明假說(shuō)2成立,進(jìn)行PCR時(shí),需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚(yú)胚胎干細(xì)胞用于藥物篩選,可加入__________________,用于分散斑馬魚(yú)囊胚中的__________________。再取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行______培養(yǎng),然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為_(kāi)_____細(xì)胞,以提高斑馬魚(yú)胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。28、霍山石斛多糖具有顯著的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。為探究引起該免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是大分子霍山石斛多糖還是多糖小分子片段;某科研小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):將霍山石斛的某種多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)制作成抗原;并生產(chǎn)出單克隆抗體,利用該抗體探究霍山石斛多糖引起的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)。制備單克隆抗體的流程如圖所示。請(qǐng)回答:

(1)圖中細(xì)胞a是免疫后小鼠體內(nèi)的___________,通常情況下該細(xì)胞不能進(jìn)行增殖,原因是___________。

(2)與植物原生質(zhì)體融合相比,①過(guò)程特有的誘導(dǎo)因素是___________。若只存在細(xì)胞的兩兩融合,融合體系中除未融合的細(xì)胞外,還可能有__________和__________。篩選時(shí),需用特定的____________培養(yǎng)基才能把實(shí)驗(yàn)所需細(xì)胞選擇出來(lái)。

(3)在篩選過(guò)程中需進(jìn)行__________和__________,以便獲得足夠數(shù)量的能分泌特異性抗體的細(xì)胞,還需用___________作為檢測(cè)特異性抗體的物質(zhì)。

(4)將篩選出的細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi),可從小鼠____________中提取單克隆抗體。

(5)研究發(fā)現(xiàn),霍山石斛多糖可降解產(chǎn)生小分子片段,這些片段不能與獲得的單克隆抗體結(jié)合。科研小組用霍山石斛多糖給小鼠灌胃后,取出小腸、肝、脾、腎和肺進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)除腸腔外其他組織均未檢測(cè)到霍山石斛多糖。該實(shí)驗(yàn)____________(填“能”或“不能”)說(shuō)明引起免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的是大分子霍山石斛多糖,理由是___________。評(píng)卷人得分五、綜合題(共3題,共27分)29、“試管嬰兒”是通過(guò)將不孕夫婦的精子和卵細(xì)胞取出在試管中完成受精;并在試管中培養(yǎng)使其發(fā)育到一定時(shí)期,再將胚胎移入女性子宮內(nèi)發(fā)育成的胎兒?!霸嚬軏雰杭夹g(shù)”不僅使一部分不能生育的男女重新獲得了生育的機(jī)會(huì),也為人類(lèi)的優(yōu)生優(yōu)育開(kāi)辟了新的途徑。

(1)在體外受精時(shí),精子首先要進(jìn)行___________處理,卵細(xì)胞則要培養(yǎng)到___________(時(shí)期)才能與精子結(jié)合。

(2)“試管嬰兒”的形成用到的生物技術(shù)有___________(填序號(hào))。

①早期胚胎培養(yǎng)②體外受精③胚胎移植④核移植。

(3)采用胚胎分割技術(shù),能得到“同卵雙胞胎”。這種技術(shù)一般采用發(fā)育良好、形態(tài)正常的___________胚。對(duì)胚胎進(jìn)行分割時(shí),要特別注意將___________均等分割;否則會(huì)影響分割后的胚胎恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

(4)現(xiàn)在大多數(shù)人反對(duì)設(shè)計(jì)嬰兒性別。其原因是可能破壞人類(lèi)正常的___________;違反倫理道德。

(5)早期胚胎中的___________細(xì)胞,不僅可以應(yīng)用于哺乳動(dòng)物胚胎性別鑒定,還可應(yīng)用于治療人類(lèi)的某些疾病,如老年癡呆癥、糖尿病等;體外誘導(dǎo)分化培育出人造組織器官用于___________、研究體外細(xì)胞分化等領(lǐng)域。30、將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中;可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉,其過(guò)程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1).與棉花細(xì)胞核基因相比較,Bt蛋白基因在結(jié)構(gòu)上不具有________序列。

(2).通常情況下,獲得的目的基因需要進(jìn)行擴(kuò)增,最簡(jiǎn)便的方法是________技術(shù),利用該技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其前提是要有________;以便根據(jù)這一序列合成引物。

(3).為了使擴(kuò)增的DNA片段更方便與Ti質(zhì)粒連接,需在兩條引物上設(shè)計(jì)并加入不同的限制性酶切位點(diǎn),主要目的是________。

(4).過(guò)程②中,應(yīng)優(yōu)先選用棉花受傷的葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng),選用這種葉片的理由是________。

(5).蛋白質(zhì)工程是二代基因工程,它的基本途徑是:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→________→________→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。31、為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)____。

(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如圖所示。細(xì)胞干重在12d后下降的原因有______;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是_______、___________。

(3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)___________處理,會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和__酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后,觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,合理的解釋是____、____。

(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù),其原理與酵母細(xì)胞固定化類(lèi)似。下列說(shuō)法正確的有____(填序號(hào))。

①選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋②必須在光照條件下培養(yǎng)。

③培養(yǎng)過(guò)程中需通空氣④固定化后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢參考答案一、選擇題(共9題,共18分)1、C【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,需要適宜的溫度和一定的其他環(huán)境,所以含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱用來(lái)調(diào)控pH值和溫度;動(dòng)物組織培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)組織分化;原代培養(yǎng)的細(xì)胞因最接近于體內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)特性;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH是7.2-7.4;該pH下胃蛋白酶會(huì)失活,所以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)用胰蛋白酶處理部分組織使細(xì)胞分散獲得單個(gè)細(xì)胞。

【詳解】

A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,需要適宜的溫度和一定的其他環(huán)境,所以含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱用來(lái)調(diào)控pH值和溫度;A錯(cuò)誤;

B;植物組織培養(yǎng)過(guò)程中加入誘導(dǎo)因素會(huì)出現(xiàn)組織分化;B錯(cuò)誤;

C;使用或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以?xún)?nèi);以保持細(xì)胞正常的二倍體核型,C正確;

D;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH是7.2-7.4;該pH下胃蛋白酶會(huì)失活,所以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)用胰蛋白酶處理部分組織使細(xì)胞分散獲得單個(gè)細(xì)胞,D錯(cuò)誤。

故選C。2、C【分析】多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵;起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物能將蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸,將脂肪水解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A;腐乳制作需要多種微生物的參與;需要在有氧條件下進(jìn)行,A錯(cuò)誤;

B;鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右;B錯(cuò)誤;

C;現(xiàn)代腐乳生產(chǎn)需要在嚴(yán)格無(wú)菌條件下;避免其他菌種污染,影響產(chǎn)品質(zhì)量,C正確;

D;腐乳裝瓶時(shí);動(dòng)作要快,D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】3、A【分析】1;鑒定分解尿素的細(xì)菌:細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨;氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌,若指示劑變紅,可確定該種細(xì)菌能夠產(chǎn)生脲酶,并分解尿素。

2;稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后;當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。

【詳解】

A;由于尿素?zé)岱€(wěn)定性低;配置選擇培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)配制培養(yǎng)基并滅菌后,再加入無(wú)菌尿素,A錯(cuò)誤;

B;在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌;若指示劑變紅,可確定該種細(xì)菌能夠產(chǎn)生脲酶,并分解尿素,為幽門(mén)螺桿菌的菌落,B正確;

C;在培養(yǎng)過(guò)程中;可設(shè)置一個(gè)未接種的培養(yǎng)基做為對(duì)照組,證明培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有雜菌污染,C正確;

D;稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低;因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】4、D【分析】【分析】

由表格信息可知;本實(shí)驗(yàn)步驟為:配制不同濃度的血清→培養(yǎng)hUCMSCs細(xì)胞48h后,取上清液→用上清液培養(yǎng)HCEcs→24h后測(cè)吸光度。其中B組(血清濃度為3%)時(shí),HCEcs活細(xì)胞數(shù)目最多。

【詳解】

A;根據(jù)題意可知;雖然培養(yǎng)HCEcs不是直接用血清,但是用的是不同濃度血清培養(yǎng)hUCMSCs細(xì)胞48h后得到的上清液,故也可以說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄颗囵B(yǎng)HCEcs的最適血清濃度,A正確;

B;為檢測(cè)HCEcs吸光度;可利用胰蛋白酶處理使HCEcs分散成單個(gè)細(xì)胞,B正確;

C;由表格數(shù)據(jù)可知;血清濃度較低時(shí),吸光度數(shù)值更大,HCEcs數(shù)目越多,故血清濃度較低時(shí)有利于獲得更多的HCEcs,C正確;

D;根據(jù)題意可知:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUCMSCs)廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和骨骼肌、皮膚創(chuàng)面的再生和修復(fù);故屬于多能干細(xì)胞,D錯(cuò)誤。

故選D。5、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題包括:(1)食物安全:滯后效應(yīng);出現(xiàn)過(guò)敏源、食物的營(yíng)養(yǎng)成分改變等。(2)生物安全:基因擴(kuò)散導(dǎo)致對(duì)生物多樣性的威脅。(3)環(huán)境安全:對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性及環(huán)境的影響。

【詳解】

A;轉(zhuǎn)基因技術(shù)是按照人們的意愿對(duì)生物進(jìn)行設(shè)計(jì)的;但是也存在負(fù)面影響,A錯(cuò)誤;

B;轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物對(duì)于解決糧食、能源等問(wèn)題起了積極作用;同時(shí)也存在著一定風(fēng)險(xiǎn),如可能造成食物的營(yíng)養(yǎng)成分發(fā)生改變等,B正確;

C;克隆技術(shù)如果被不當(dāng)利用將給社會(huì)造成災(zāi)難;應(yīng)禁止生殖性克隆,但是不反對(duì)治療性克隆,如治療性克隆可用于治療白血病等,C錯(cuò)誤;

D;轉(zhuǎn)基因技術(shù)如果被恐怖分子利用將可能導(dǎo)致人類(lèi)滅絕;但不應(yīng)該停止轉(zhuǎn)基因相關(guān)研究,應(yīng)加大監(jiān)督和管理力度,D錯(cuò)誤。

故選B。6、D【分析】【分析】

初生代謝物是維持細(xì)胞生命活動(dòng)所必需基本代謝物。如糖類(lèi);脂質(zhì)、蛋白質(zhì)及核酸等。次生代謝產(chǎn)物是由次生代謝產(chǎn)生的一類(lèi)細(xì)胞生命活動(dòng)或植物生長(zhǎng)發(fā)育正常運(yùn)行的非必需的小分子有機(jī)化合物。

【詳解】

A;③過(guò)程是獲得很多植物細(xì)胞的過(guò)程;細(xì)胞進(jìn)行的是有絲分裂,A正確;

B;紫杉醇屬于次生代謝物;次生代謝物不是生物生長(zhǎng)所必需的,B正確;

C;①過(guò)程獲得愈傷組織所用的是固體培養(yǎng)基;③獲得高產(chǎn)細(xì)胞群所用培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,C正確;

D;植物細(xì)胞有細(xì)胞壁;放到低滲溶液中會(huì)膨脹但不會(huì)漲破,可通過(guò)研磨使其破碎再提取紫杉醇,D錯(cuò)誤。

故選D。7、D【分析】【分析】

植物基因工程的應(yīng)用:(1)抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物;(2)抗病轉(zhuǎn)基因植物;(3)抗逆轉(zhuǎn)基因植物;(4)轉(zhuǎn)基因改良植物品質(zhì).總之基因工程在農(nóng)業(yè)上用于生產(chǎn)高產(chǎn);穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的品種;能產(chǎn)生抗逆性品種.動(dòng)物基因工程的成果:(1)提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速度:外源生長(zhǎng)激素基因;(2)改善畜產(chǎn)品的品質(zhì);(3)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物;(4)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體;(5)基因工程藥物,如人胰島素、細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長(zhǎng)激素、干擾素等.

【詳解】

A;可以將抗病蟲(chóng)害、抗除草劑等基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物使其具有相應(yīng)的抗性;A正確;

B;可以使用DNA重組的微生物;生產(chǎn)稀缺的基因藥物,B正確;

C;可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)使奶牛變成生物反應(yīng)器;使它們的奶中富含某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、珍貴藥材或人類(lèi)所需要的蛋白質(zhì),C正確;

D;將不同生物的DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)移和重組;可以創(chuàng)造出新品種,但不能產(chǎn)生新物種,D錯(cuò)誤。

故選D。8、A【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn):在形態(tài)上;體積較小,細(xì)胞核大,核仁明顯;在功能上,具有發(fā)育的全能性,可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞。另一方面,在體外培養(yǎng)條件下,ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化,可進(jìn)行冷凍保存,也可以進(jìn)行某些遺傳改造。

【詳解】

A;iPS不是體細(xì)胞;因此不能體現(xiàn)動(dòng)物的體細(xì)胞具有全能性,A錯(cuò)誤;

B;由于是自身細(xì)胞;因此機(jī)體對(duì)iPS定向誘導(dǎo)獲得的皮膚不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng),B正確;

C;已分化的體細(xì)胞導(dǎo)入基因Oct3/4和基因Sox2;因此遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,C正確;

D;iPS與胚胎干細(xì)胞都具有定向分化為各種細(xì)胞的能力;因此都可作為治療某些疾病的潛在來(lái)源,D正確。

故選A。9、D【分析】【分析】

根據(jù)題意可知:RT-PCR檢測(cè)的步驟與方法:提取檢測(cè)者的RNA;反轉(zhuǎn)錄成cDNA,體外用帶有熒光標(biāo)記的引物對(duì)cDNA進(jìn)行擴(kuò)增,如果有擴(kuò)增后有熒光信號(hào)證明感染病毒。

【詳解】

A;根據(jù)分析可知:“熒光RT-PCR技術(shù)”中遵循的堿基配對(duì)原則與轉(zhuǎn)錄過(guò)程不完全一致;A正確;

B;若a點(diǎn)左移;說(shuō)明樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少,B正確;

C;根據(jù)曲線(xiàn)圖可知:圖中曲線(xiàn)通過(guò)熒光強(qiáng)度變化反映產(chǎn)物量的變化;因此曲線(xiàn)中“平臺(tái)期”出現(xiàn)的最可能原因是試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,導(dǎo)致超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈不再增加”,C正確;

D;在檢測(cè)過(guò)程中;有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過(guò)閾值時(shí)才確診,D錯(cuò)誤。

故選D。二、多選題(共8題,共16分)10、A:C:D【分析】【分析】

1;設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎;然后從中選擇符合要求的胚胎,再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2;轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題:食物安全(滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變)、生物安全(對(duì)生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。

【詳解】

A;我國(guó)不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別;A錯(cuò)誤;

B;基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題;B正確;

C;通過(guò)基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業(yè);不符合倫理道德,C錯(cuò)誤;

D;大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交;可能造成基因污染,D錯(cuò)誤。

故選ACD。11、A:B:C【分析】【分析】

基因工程的原理是基因重組;把一種生物的基因轉(zhuǎn)入另一種生物后,目的基因可以在受體細(xì)胞中表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)。

【詳解】

A;細(xì)菌抗蟲(chóng)蛋白基因可通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)入棉花體內(nèi);在棉花的葉肉細(xì)胞中表達(dá)產(chǎn)生細(xì)菌抗蟲(chóng)蛋白,使棉花具有抗蟲(chóng)能力,A正確;

B;正常人皮膚細(xì)胞中含有人酪氨酸酶基因;人酪氨酸酶基因能夠表達(dá)產(chǎn)生人酪氨酸酶,B正確;

C;動(dòng)物胰島素基因可通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)移到大腸桿菌體內(nèi);在大腸桿菌工程菌細(xì)胞中合成動(dòng)物胰島素,C正確;

D;兔屬于哺乳動(dòng)物;其成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器,所以不可能表達(dá)出血紅蛋白,D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】12、B:C【分析】【分析】

根據(jù)題意;將某實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的第5號(hào)染色體上的一段DNA敲除,結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液甘油三酯極高,具有動(dòng)脈硬化的傾向,并可以遺傳給后代,說(shuō)明該變異是一種可遺傳的變異。

【詳解】

A;DNA敲除后結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液甘油三酯極高;具有動(dòng)脈硬化的傾向,并可以遺傳給后代,說(shuō)明敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng),A正確;

B;動(dòng)脈硬化的產(chǎn)生與遺傳物質(zhì)發(fā)生可遺傳的變異有關(guān);不能說(shuō)明是基因重組,B錯(cuò)誤;

C;上述信息只能表明敲除的DNA片段與甘油三酯代謝有關(guān);不能表明控制甘油三酯合成的基因就位于第5號(hào)染色體上,C錯(cuò)誤;

D;由題干信息可知;利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能,D正確。

故選BC。13、A:C:D【分析】【分析】

誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合物理方法包括離心;振動(dòng)、電激;化學(xué)方法用聚乙二醇,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合除了以上物理化學(xué)方法可用生物方法,即滅活的病毒。

在HAT培養(yǎng)基中;氨甲蝶呤是葉酸的拮抗劑阻斷DNA合成的主途徑,未融合的瘤細(xì)胞;融合的瘤細(xì)胞--瘤細(xì)胞不能合成次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶,合成DNA的S途徑也不能進(jìn)行,所以最終死亡。

HAT培養(yǎng)基中篩選出的雜交瘤細(xì)胞;經(jīng)選擇性培養(yǎng)在適宜條件下可無(wú)限增值,然后進(jìn)行單克降抗體檢測(cè),篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

A;HAT培養(yǎng)基中含葉酸拮抗劑;其中不能進(jìn)行D途徑,A錯(cuò)誤;

B;雜交瘤細(xì)胞為瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞;既具備增殖能力,又可在HAT培養(yǎng)基中進(jìn)行S途徑,B正確;

C;最終篩選出來(lái)的可能有多種雜交瘤細(xì)胞;分泌的可能不是同一種特異性抗體,還需進(jìn)行進(jìn)一步篩選,C錯(cuò)誤;

D;僅考慮細(xì)胞的兩兩融合;在放入HAT培養(yǎng)基之前的融合細(xì)胞的培養(yǎng)液中,會(huì)有融合的B淋巴細(xì)胞—瘤細(xì)胞、融合的B淋巴細(xì)胞—B淋巴細(xì)胞、融合的瘤細(xì)胞—瘤細(xì)胞、未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的瘤細(xì)胞等多種形式的細(xì)胞,這幾種形式的細(xì)胞均可進(jìn)行D途徑,D錯(cuò)誤。

故選ACD。14、A:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是Ca2+處理法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因;②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA;③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲(chóng)鑒定;抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A;兩個(gè)基因中都有限制酶BsaBⅠ的一個(gè)識(shí)別位點(diǎn);用該限制酶切割后再用DNA連接酶可拼接成GNA-ACA融合基因,A正確;

B;GNA-ACA融合基因的兩端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn);而質(zhì)粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn),但方向不一致,用兩酶切割,正好是反向連接目的基因和運(yùn)載體,B錯(cuò)誤;

C;運(yùn)載體上帶有卡那霉素的抗性基因;沒(méi)有氨芐青霉素的抗性基因,轉(zhuǎn)基因細(xì)胞在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能存活,C錯(cuò)誤;

D;用PCR技術(shù)擴(kuò)增GNA和ACA基因后;再通過(guò)分子雜交或電泳的方式,可檢測(cè)是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中,D正確。

故選AD。15、B:D【分析】【分析】

參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉;酵母、曲霉、毛霉等多種;其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌,常見(jiàn)于土壤、水果、蔬菜、谷物上,具有發(fā)達(dá)的白色菌絲。毛酶等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A;果酒的制作原理是酵母菌的無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精;酵母菌屬于兼性厭氧生物,在有氧條件下大量繁殖,A正確;

B;制作果醋需要醋酸菌;它是一種好氧的微生物,可將葡萄中的糖(或乙醇)分解為乙酸,B錯(cuò)誤;

C;多種微生物參與了腐乳的制作;如酵母菌、毛霉、曲霉等,其中起主要作用的是毛霉,C正確;

D;制作泡菜利用的乳酸菌是一種厭氧微生物;可以通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸,D錯(cuò)誤。

故選BD。16、A:B【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程:

其原理是植物細(xì)胞具有全能性和細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙;培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A;植物細(xì)胞壁主要成分是纖維素和果膠;因此①過(guò)程通常用纖維素酶和果膠酶處理除去細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體,不是原生質(zhì)層,A錯(cuò)誤;

B;過(guò)程②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合;常使用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑,B錯(cuò)誤;

C;經(jīng)過(guò)②和③過(guò)程形成的c細(xì)胞的染色體組不一定為AABB;也有可能為AAAA或BBBB,C正確;

D;兩個(gè)物種具有生殖隔離;不能雜交產(chǎn)生可育后代,通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,D正確。

故選AB。17、B:D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中;使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物。

【詳解】

A;5只克隆疾病猴是由猴的體細(xì)胞通過(guò)克隆技術(shù)(屬于無(wú)性繁殖)獲得的;所以其基因組成差異小,可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾,A正確;

B;經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴;B錯(cuò)誤;

C;克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)藥物;C正確;

D;不能利用該技術(shù)進(jìn)行克隆人的研究;D錯(cuò)誤。

故選BD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共7題,共14分)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80—100℃變性19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】無(wú)菌毛霉其他菌種20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】物理和化學(xué)性21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育(單倍體育種、突變體利用)23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒(méi)有)胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮;胚狀體和人工胚乳。

(2)24、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性,可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸,改善其功能,需要從改造控制該酶合成的基因著手,具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸,提高該酶的熱穩(wěn)定性,從改造控制該酶合成的基因著手,具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、實(shí)驗(yàn)題(共4題,共36分)25、略

【分析】【分析】

1;果酒制作過(guò)程中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作:

(1)材料的選擇與處理:選擇新鮮的葡萄;榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗,除去枝梗。

(2)滅菌:①榨汁機(jī)要清洗干凈;并晾干;②發(fā)酵裝置要清洗干凈,并用70%的酒精消毒。

(3)榨汁:將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁。

(4)發(fā)酵:①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶;要留要大約1/3的空間,并封閉充氣口;②制葡萄酒的過(guò)程中,將溫度嚴(yán)格控制在18℃~25℃,時(shí)間控制在10~12d左右,可通過(guò)出料口對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行,及時(shí)的監(jiān)測(cè)。③制葡萄醋的過(guò)程中,將溫度嚴(yán)格控制在30℃~35℃,時(shí)間控制在前7~8d左右,并注意適時(shí)通過(guò)充氣口充氣。

2;參與果醋制作的微生物是醋酸菌;其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型,果醋制作的原理:當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

(1)釀造葡萄酒時(shí);在葡萄榨汁前,葡萄要先進(jìn)行進(jìn)行沖洗,然后再除去枝梗,可以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。

(2)榨汁機(jī)要清洗干凈,并晾干,發(fā)酵裝置要清洗干凈,并用70%的酒精消毒,再裝入葡萄汁,將發(fā)酵裝置放在18~23℃環(huán)境中,發(fā)酵過(guò)程中由于酵母菌呼吸作用會(huì)產(chǎn)生二氧化碳,因此每天擰開(kāi)氣閥b多次;排出發(fā)酵過(guò)程產(chǎn)生的大量二氧化碳。裝置中d處設(shè)計(jì)成彎曲形狀利用了巴斯德的鵝頸瓶的原理,即為了防止排氣時(shí)空氣中微生物的污染。

(3)酵母菌發(fā)酵的產(chǎn)物中會(huì)產(chǎn)生酒精;利用橙色的重鉻酸鉀可以檢測(cè)酒精的存在,酒精遇到橙色的重鉻酸鉀會(huì)變?yōu)榛揖G色,從而鑒定酒精的存在。

(4)溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件;20℃左右最適合酵母菌繁殖,因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長(zhǎng)溫度為30℃~35℃,因此要將溫度控制在30℃~35℃。醋酸菌是好氧菌,在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵裝置中充氣,需要打開(kāi)a閥通入空氣。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作過(guò)程的知識(shí)點(diǎn),要求學(xué)生掌握果酒的制作的原理、過(guò)程以及發(fā)酵過(guò)程中的注意事項(xiàng)是該題的重點(diǎn),識(shí)記果酒的制作過(guò)程是解決重點(diǎn)的關(guān)鍵。理解并識(shí)記果醋的發(fā)酵過(guò)程和原理是解決第(4)問(wèn)的關(guān)鍵。【解析】沖洗CO2防止排氣時(shí)空氣中微生物的污染重鉻酸鉀灰綠30~35℃氣閥a醋酸菌是好氧細(xì)菌,酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿嵝枰鯕獠拍苓M(jìn)行26、略

【分析】【分析】

1;選擇培養(yǎng)基是指通過(guò)培養(yǎng)混合的微生物;僅得到或篩選出所需要的微生物,其他不需要的種類(lèi)在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

2;分解纖維素的微生物的分離的實(shí)驗(yàn)原理:

(1)土壤中存在著大量纖維素分解酶;包括真菌;細(xì)菌和放線(xiàn)菌等,它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶,可以把纖維素分解為纖維二糖,進(jìn)一步分解為葡萄糖能被微生物利用,故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中,纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng),其他微生物則不能生長(zhǎng)。

(2)在培養(yǎng)基中加入剛果紅;可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被分解后,紅色復(fù)合物不能形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,從而可篩選纖維素分解菌。

3;統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法:

(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法:

①原理:利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板;在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量;

②方法:用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù);

③缺點(diǎn):不能區(qū)分死菌與活菌。

(2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法):

①原理:當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí);培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。

②操作:

a;設(shè)置重復(fù)組;增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。

b;為了保證結(jié)果準(zhǔn)確;一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

③計(jì)算公式:每克樣品中的菌株數(shù)=(c÷V)×M;其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL),M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

(1)土壤取樣時(shí);一般選擇纖維素豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的數(shù)量。

(2)若測(cè)得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51,通過(guò)計(jì)算得知每毫升樣品中有5.1×107個(gè)纖維素分解菌,則由每mL樣品中的菌株數(shù)=(c÷V)×M可得,該稀釋液的稀釋倍數(shù)=5.1×107÷51×0.1=105。

(3)鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入CR染料;它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落,透明圈越大說(shuō)明降解纖維素能力越強(qiáng),所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落1。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合流程圖,考查微生物的分離和培養(yǎng),解題關(guān)鍵是識(shí)記土壤微生物分離的原理及方法;識(shí)記培養(yǎng)基的種類(lèi)及作用,能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。【解析】纖維素增加纖維素分解菌的數(shù)量105紅①27、略

【分析】【分析】

根據(jù)題干信息分析;糖尿病模型斑馬魚(yú)的構(gòu)建的原理是使胰島素基因表達(dá)受阻,而使胰島素基因表達(dá)受阻是通過(guò)給斑馬魚(yú)受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實(shí)線(xiàn)的;嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑,其作用的機(jī)理有兩種假說(shuō):可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對(duì)應(yīng)序列不能被剪切,也可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對(duì)應(yīng)序列同時(shí)被剪切。

(1)

根據(jù)引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置;通過(guò)PCR擴(kuò)增能得到內(nèi)含子2的序列,若假說(shuō)1成立,即嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對(duì)應(yīng)序列不能被剪切,故實(shí)驗(yàn)組中應(yīng)含有內(nèi)含子2的序列,而對(duì)照組的該片段被切除了,因此用引物2和引|物3進(jìn)行PCR反應(yīng),其結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組中有雜交帶,而對(duì)照組中無(wú)雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說(shuō)2成立;即RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對(duì)應(yīng)序列同時(shí)被剪切下去,則可以選擇圖示引物5和引物2;引物5和引物6進(jìn)行PCR,觀察是否有雜交帶出現(xiàn)。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA;而只能從引物3′端延伸DNA鏈,因此DNA復(fù)制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚(yú)囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán);可以獲得分散的斑馬魚(yú)胚胎干細(xì)胞,然后對(duì)其進(jìn)行原代培養(yǎng),接著分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞,以提高斑馬魚(yú)胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因的表達(dá)的相關(guān)知識(shí)點(diǎn),明確基因轉(zhuǎn)錄出來(lái)的mRNA是要經(jīng)過(guò)加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的,并能夠根據(jù)題干提取有效信息進(jìn)行答題?!窘馕觥?1)AD

(2)5、65;2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA;只能從3′端延伸DNA鏈,因此DNA復(fù)制需要引物。(得分點(diǎn):“只能從3′端延伸DNA鏈”)

(4)胰蛋白酶內(nèi)細(xì)胞團(tuán)原代飼養(yǎng)層28、略

【分析】【分析】

1.體液免疫的具體過(guò)程:

(1)感應(yīng)階段:除少數(shù)抗原可以直接刺激B細(xì)胞外;大多數(shù)抗原被吞噬細(xì)胞攝取和處理,并暴露出其抗原決定簇;吞噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞,再由T細(xì)胞呈遞給B細(xì)胞;

(2)反應(yīng)階段:B細(xì)胞接受抗原刺激后;開(kāi)始進(jìn)行一系列的增殖;分化,形成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞;

(3)效應(yīng)階段:漿細(xì)胞分泌抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合;發(fā)揮免疫效應(yīng)。

2.單克隆抗體的制備:

(1)細(xì)胞來(lái)源:B淋巴細(xì)胞:能產(chǎn)生特異性抗體;在體外不能無(wú)限繁殖;骨髓瘤細(xì)胞:不產(chǎn)生專(zhuān)一性抗體,體外能無(wú)限繁殖。

(2)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量增殖;又能產(chǎn)生特異性抗體。

(3)兩次次篩選:①篩選得到雜交瘤細(xì)胞(去掉未雜交細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞);②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。

(4)兩次抗體檢測(cè):專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性。

(5)提取單克隆抗體:從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。

(6)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng);靈敏度高;并可能大量制備。

【詳解】

(1)圖為單克隆抗體的制備的流程;圖中細(xì)胞a是免疫后小鼠體內(nèi)的B細(xì)胞(或漿細(xì)胞),該細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,不能進(jìn)行分裂。

(2)與植物原生質(zhì)體融合相比;動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒。若只存在細(xì)胞的兩兩融合,融合體系中除未融合的細(xì)胞外,還有兩兩融合的細(xì)胞,由于細(xì)胞的融合是隨機(jī)的,兩兩融合的細(xì)胞包括雜交瘤細(xì)胞和同種細(xì)胞融合成的細(xì)胞。篩選時(shí),需用特定的選擇性培養(yǎng)基才能從中篩選出雜交瘤細(xì)胞。

(3)要想獲得足夠數(shù)量的能分泌特異性抗體的細(xì)胞;在篩選過(guò)程中需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),該過(guò)程是將霍山石斛的某種多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)制作成抗原;并生產(chǎn)出單克隆抗體,因此還需用(霍山石斛)多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)物作為檢測(cè)特異性抗體的物質(zhì)。

(4)若將篩選出的細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi);則可從小鼠腹水中提取單克隆抗體。

(5)科研小組用霍山石斛多糖給小鼠灌胃后;取出小腸;肝、脾、腎和肺進(jìn)行抗原-抗體雜交實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)除腸腔外其他組織均未檢測(cè)到霍山石斛多糖?;羯绞嗵强山到猱a(chǎn)生小分子片段,該實(shí)驗(yàn)不能證明具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是多糖還是降解后的小分子片段,因此該實(shí)驗(yàn)不能說(shuō)明引起免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的是大分子霍山石斛多糖。

【點(diǎn)睛】

本題考查免疫調(diào)節(jié)、單克隆抗體的制備等知識(shí),意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力以及獲取信息、分析問(wèn)題的能力?!窘馕觥緽細(xì)胞(或漿細(xì)胞)該細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,不能進(jìn)行分裂滅活的病毒雜交瘤細(xì)胞同種細(xì)胞融合成的細(xì)胞選擇性克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)(霍山石斛)多糖與牛血清蛋白偶聯(lián)物腹水不能霍山石斛多糖在腸腔中被降解,產(chǎn)生的多糖小分子片段可能具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)(或該實(shí)驗(yàn)不能證明具有免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的物質(zhì)是多糖還是降解后的小分子片段)五、綜合題(共3題,共27分)29、略

【分析】【分析】

1;精子

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論