2025年浙教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷287考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因Pin-Ⅱ?qū)霔顦浼毎?，培育成了抗蟲楊樹。下圖表示含目的基因的DNA分子和農(nóng)桿菌質(zhì)粒，圖中Apr表示氨芐青霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因；箭頭表示識別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點。下列敘述不正確的是（）

A.目的基因插入到質(zhì)粒的T-DNA上，才能整合到受體細胞染色體中B.為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRI和PstIC.成功導入重組質(zhì)粒的細胞會表現(xiàn)為不抗氨芐青霉素、抗新霉素D.可用DNA分子雜交或抗原-抗體雜交技術檢測目的基因是否表達2、培養(yǎng)人細胞與小鼠細胞的融合細胞發(fā)現(xiàn)，細胞會隨機丟失來自人細胞的染色體，在僅含有人的1號染色體的融合細胞中，合成出人的尿苷單磷酸激酶。下列有關敘述中，不合理的是A.與人或小鼠細胞相比，融合細胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變B.研究方法中需要選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)基和細胞融合誘導技術C.在融合細胞中，人的1號染色體DNA與小鼠DNA發(fā)生了重組D.這種研究可能發(fā)現(xiàn)人的某一特定基因與特定染色體的關系3、新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結合；侵入人體，引起肺炎。單克隆抗體可阻斷病毒對細胞的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。圖為篩選；制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。下列相關敘述，不正確的是（）

A.給圖中小鼠注射S蛋白，一段時間后從小鼠的脾臟中提取B細胞，與骨髓瘤細胞融合B.經(jīng)HAT培養(yǎng)篩選出來的雜交瘤細胞在體外擴大培養(yǎng)，便可大量生產(chǎn)出抗S蛋白單克隆抗體C.單克隆抗體可以制成診斷盒，用于疾病的診斷D.與血清抗體相比，該方法制備的單克隆抗體靈敏度更高4、下圖表示利用乳腺生物反應器生產(chǎn)人抗凝血酶Ⅲ的過程，①②③為相關操作步驟，下列敘述錯誤的是（）

A.①需要將人抗凝血酶Ⅲ基因與乳腺蛋白基因的啟動子等重組在一起B(yǎng).早期胚胎與代孕羊子宮建立的生理和組織聯(lián)系不影響移入胚胎的遺傳特性C.在③前最好取處于囊胚期的滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定D.通過該操作步驟得到的轉(zhuǎn)基因羊只有乳腺細胞含有人抗凝血酶Ⅲ基因5、人的血清白蛋白（HAS）在臨床上需求量很大，通常從血液中提取，成本較高。如果將人的血清白蛋白基因?qū)肽膛＜毎?，利用奶牛乳汁來生產(chǎn)血清白蛋白，能夠極大地降低成本，且安全高效。下圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)HAS的過程圖，下列敘述錯誤的是（）

A.①進入③之前，必須構建基因表達載體，⑥進入⑦之前，必須取滋養(yǎng)層做性別鑒定B.在⑥階段移植的胚胎為桑葚胚或囊胚C.該過程綜合利用了核移植、動物細胞培養(yǎng)和胚胎移植等工程技術D.血清蛋白基因只在牛的乳腺細胞中表達與特定的啟動子有關6、大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會纏繞在細胞壁碎片上，靜置一段時間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結果如圖所示。下列關于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述不正確的是（）

A.提取DNA時可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B.將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進行鑒定C.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理D.根據(jù)電泳結果，質(zhì)粒上一定沒有限制酶I和II的切割位點，而有限制酶III的切割位點7、實踐表明，普通的單克隆抗體易被人體的免疫系統(tǒng)識別為異源蛋白而被清除。為解決這一問題，科研工作者對人源性單克隆抗體進行了研究，具體的操作過程如下：先用人的抗體基因取代小鼠的抗體基因，獲得轉(zhuǎn)基因小鼠；然后從接受抗原刺激的轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)獲取B淋巴細胞，使這些B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)過篩選之后獲得雜交瘤細胞用于單克隆抗體的制備。以下敘述錯誤的是（）A.獲取轉(zhuǎn)基因小鼠時，常用顯微注射法將目的基因?qū)胄∈笫芫袯.B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合時，可以利用滅活的病毒進行誘導C.對融合后獲得的雜交瘤細胞進行培養(yǎng)即可獲得大量的單克隆抗體D.人源性單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、抗原性低等特點8、為探究抗生素對細菌的選擇作用，將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養(yǎng)基上（如下圖），一段時間后測量并記錄抑菌圈的直徑。從抑菌圈邊緣的菌落上挑取細菌擴大培養(yǎng)，重復實驗2~5次。下列敘述不正確的是（）

A.接種時，將高濃度菌液涂布在平板培養(yǎng)基上B.①處濾紙片上不含抗生素，起對照作用C.重復2~5次實驗后，抑菌圈的直徑會變大D.抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細菌抗藥性較強9、科學家將相關基因?qū)塍w細胞，使其成為誘導多能干細胞（iPSC）。將iPSC與心肌細胞融合，獲得雜交細胞（Hybridcell）。一定條件下分別誘導iPSC和雜交細胞向心肌細胞分化，統(tǒng)計其分化率，結果如圖。相關說法不正確的是（）

A.向心肌細胞分化是基因選擇性表達的結果B.誘導多能干細胞和雜交細胞都具有分化能力C.誘導20d后iPSC和雜交細胞都不再分化D.臨床使用前需評估兩種細胞致癌的風險評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)10、大多數(shù)哺乳動物的早期胚胎具有調(diào)節(jié)發(fā)育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以發(fā)育成一個完整的胎兒，調(diào)節(jié)能力隨著發(fā)育進程逐漸減弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分離的卵裂球仍具有調(diào)整發(fā)育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而發(fā)育至囊胚。下列說法正確的是（）A.桑椹胚的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能B.桑椹胚不同部位的細胞致密化程度不同C.胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇D.胚胎發(fā)育到原腸胚階段，可將其取出向受體移植11、2022年6月10日；世界首例體細胞克隆北極狼在北京呱呱墜地。克隆北極狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園引進的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬?？寺∵^程如圖所示，下列有關敘述正確的是（）

A.體細胞核移植技術比胚胎干細胞核移植技術更易成功B.用電刺激、Ca2+載體等方法激活重構胚，促進其分裂發(fā)育C.圖中細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組D.體細胞核移植技術有望用于增加瀕危動物的種群數(shù)量12、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項正確的是（）

A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種13、下列關于限制酶和DNA連接酶的理解，錯誤的是（）A.限制酶能在特定部位的兩個核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可以恢復DNA分子中的氫鍵，將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來C.在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶D.限制酶廣泛存在于動植物體內(nèi)，微生物內(nèi)很少分布14、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設計品種乙組織培養(yǎng)實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設為M。下列有關敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導形成愈傷組織α1b1II誘導形成幼芽α2b2Ⅲ誘導生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）16、本課題對能分解尿素的細菌進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對分離的菌種作進一步的鑒定，還需要借助生物化學的方法。在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基______________來判斷該化學反應是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。17、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。18、去除DNA中的雜質(zhì)，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反應10—15分鐘，嫩肉粉中的________________能夠分解_______________。19、我國中科院神經(jīng)科學研究所團隊率先攻克了體細胞克隆靈長類動物這一世界難題?他們首次成功培育出體細胞克隆猴，分別叫中中和華華（下圖）?猴子與人類同屬靈長類，此前克隆靈長類動物在技術上存在著不可逾越的障礙?克隆猴的誕生打破了這個障礙，也再次引起人們對于克隆人的擔憂和猜測?

從1997年宣布克隆羊多莉（上圖）的出生，到2018年克隆猴中中?華華的誕生，這期間一些科學家試圖克隆人?舉例說出克隆人面臨哪些倫理問題?_____評卷人得分四、綜合題(共4題，共8分)20、圖1是某基因工程中構建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr)和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請回答下列問題：

（1）EcoRV酶切位點為EcoRV酶切出來的線性載體P1為___________末端。

（2）用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段；其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個堿基為___________的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在__________酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。

（3）為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落；采用含有不同抗生素的平板進行篩選，得到A；B、C三類菌落，其生長情況如下表（“+”代表生長，“﹣”代表不生長）。根據(jù)表中結果判斷，應選擇的菌落是__________（填表中字母）類，另外兩類菌落質(zhì)粒導入情況分別是_____、________________。

（4）為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設計引物進行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應位置，PCR鑒定時應選擇的一對引物是__________。某學生嘗試用圖中另外一對引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp片段，原因是_______________。21、乳酸菌中的谷氨酸脫羧酶（GAD）能消耗H+將谷氨酸轉(zhuǎn)化為y-氨基丁酸（GABA）；GABA在制藥；食品等方面具有較大應用。研究人員從泡菜樣品中篩選高產(chǎn)GABA的乳酸菌株，并優(yōu)化其發(fā)酵條件。回答下列問題：

（1）已知MRS固體培養(yǎng)基因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌所產(chǎn)的酸可與碳酸鈣發(fā)生反應，從而在培養(yǎng)基上形成____________。從功能上判斷，MRS培養(yǎng)基可作為乳酸菌的___________培養(yǎng)基。

（2）利用MRS培養(yǎng)基分離純化乳酸菌時，首先需用_________對泡菜濾液進行梯度稀釋，然后再結合其他方法篩選出具高產(chǎn)GABA特性的乳酸菌。進行梯度稀釋的目的是__________________。

（3）研究人員對高產(chǎn)菌株產(chǎn)GABA的發(fā)酵時間和溫度分別進行了研究；結果顯示，發(fā)酵時間在48～60h范圍內(nèi)，GABA的相對產(chǎn)量較高；發(fā)酵溫度在35～39℃范圍內(nèi)，GABA的相對產(chǎn)量較高。研究人員認為，要進一步提高GABA相對產(chǎn)量，以達到最佳生產(chǎn)效果，還需同時對發(fā)酵時間和發(fā)酵溫度進行優(yōu)化。請為該優(yōu)化實驗設計一個實驗結果記錄表。

______22、下圖為雞血細胞中DNA的粗提取和鑒定實驗過程中的部分操作示意圖；請據(jù)圖分析，回答下列問題：

（1）上述圖示中，該實驗的正確操作順序是__________________（用序號與箭頭表示）。

（2）在提取過程中使用不同濃度的NaCl溶液的目的是______________。

（3）步驟①的目的是____________，其依據(jù)原理是__________________。

（4）實驗室還可以利用香蕉等植物樣品提取DNA，利用植物組織提取DNA時，須先破碎細胞，破碎細朐時需添加食鹽和_____________進行研磨，添加后者的目的是_____________。

（5）由于雞血較難找到，某學生試圖用豬血代替，結果沒有成功，其原因最可能是________________。23、現(xiàn)代人追求高效率；高品質(zhì)的健康生活；因此市場上果汁飲料、果酒、果醋越來越受到人們的青睞。請回答：

(1)在果酒釀造過程中，發(fā)酵罐先____________，促進酵母菌大量繁殖，然后密閉，有利于獲得更多的酒精產(chǎn)物。若產(chǎn)物中生成了酒精，使用酸性重鉻酸鉀試劑檢驗呈現(xiàn)____________色。

(2)在果酒釀造過程中，如果果汁滅菌不嚴格，含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為酸并說明理由？_____________________。

(3)當缺少糖源時仍可進行醋酸發(fā)酵，其反應式為_______________。

(4)為了進一步提高果酒的品質(zhì)，我們在利用發(fā)酵工程生產(chǎn)果酒時要向發(fā)酵罐內(nèi)接種優(yōu)良品種的酵母菌，某生物興趣小組在用平板劃線法分離優(yōu)良品種的酵母菌時，進行了如圖操作：其中較明顯的一處錯誤是不要____________，在第二次劃線前灼燒接種環(huán)，目的是_________。

參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【分析】

1；基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；分析圖示可知；為保證目的基因的完整性，不能選用BamHⅠ酶；為了防止目的基因自身環(huán)化，應選用目的基因兩側的兩種不同的限制酶；重組質(zhì)粒中至少要保留一個抗生素的抗性基因，PstI和TthⅢ1只能選其中一個；綜上所述，可選用EcoRI和PstI或者EcoRI和TthⅢ1，為保留重組質(zhì)粒中的復制原點，最好選用EcoRI和PstI同時切割目的基因和質(zhì)粒。

【詳解】

A；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據(jù)這一特點，將目的基因插入到質(zhì)粒的T-DNA上，才能整合到受體細胞染色體中，A正確；

B；由分析可知；為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRI和PstI同時切割目的基因和質(zhì)粒，B正確；

C；由分析可知；應選用EcoRI和PstI切割質(zhì)粒，氨芐青霉素抗性基因被破壞，故成功導入重組質(zhì)粒的細胞會表現(xiàn)為不抗氨芐青霉素、抗新霉素，C正確；

D；檢測目的基因是否表達應檢測是否成功產(chǎn)生蛋白質(zhì)；可用抗原-抗體雜交技術，D錯誤。

故選D。2、C【分析】【分析】

【詳解】

A；融合細胞細胞會隨機丟失來自人細胞的染色體；這就發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變，A正確；

B；適當?shù)呐囵B(yǎng)基用來選擇融合細胞；常用PEG,滅活病毒和電激來誘導細胞融合，B正確；

C；在僅含有人的l號染色體的融合細胞中；合成出人的尿苷單磷酸激酶，表明人的l號染色體有人的尿苷單磷酸激酶基因，并無證據(jù)說明人的1號染色體DNA與小鼠DNA發(fā)生了重組，C錯；

D；因為融合細胞會隨機丟失來自人細胞的染色體；可以借助此方法來研究某個細胞的特定性狀與特定染色體的關系，D正確。

故選C

【點睛】3、B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備時動物細胞融合技術的應用之一；此過程中需要先注射抗原，使生物體產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，再將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，并篩選出能產(chǎn)生特異性抗體和大量增殖的雜交瘤細胞，最后經(jīng)過體內(nèi)和體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體。單克隆抗體具有特異性強；靈敏度高，并可能大量制備的優(yōu)點。

【詳解】

A；給圖中小鼠注射S蛋白；檢測到小鼠血清出現(xiàn)S蛋白抗體之后，說明小鼠已經(jīng)產(chǎn)生了相應的體液免疫過程，這時從脾臟中獲得相應B淋巴細胞，并誘導其與骨髓瘤細胞融合，A正確；

B；經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細胞經(jīng)克隆化培養(yǎng)后還需進行抗體檢測才能用于單克隆抗體的生產(chǎn)；B錯誤；

C；根據(jù)抗原-抗體特異性結合的原理；將單克隆抗體制成診斷盒，用于疾病的診斷，C正確；

D；一般抗血清中的抗體是一群識別不同抗原部位的抗體混合物；而單克隆抗體識別抗原部位具有專一性，所以單克隆抗體比血清抗體的靈敏度更高，D正確。

故選B。

【點睛】4、D【分析】【分析】

動物乳腺生物反應器是基于轉(zhuǎn)基因技術平臺；使外源基因?qū)雱游锘蚪M中并定位表達于動物乳腺，利用動物乳腺天然；高效合成并分泌蛋白的能力，在動物的乳汁中生產(chǎn)一些具有重要價值產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因動物的總稱。據(jù)圖分析，圖中人抗凝血酶Ⅲ屬于目的基因，過程①表示將目的基因?qū)胧荏w細胞（供體羊的受精卵），常用的方法是顯微注射法；過程②表示早期胚胎培養(yǎng)；過程③表示胚胎移植技術。

【詳解】

A；過程①表示將目的基因?qū)胧荏w細胞（供體羊的受精卵）；因此，需要將人抗凝血酶Ⅲ基因與乳腺蛋白基因的啟動子等重組在一起，A正確；

B；早期胚胎與代孕羊子宮建立的生理和組織聯(lián)系后；受體只是為胚胎的發(fā)育提供相應的環(huán)境和發(fā)育過程所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，對胚胎不會造成影響，B正確；

C；用囊胚期胚胎進行性別鑒定時；可用分割針分割部分滋養(yǎng)層細胞進行性別鑒定，C正確；

D；通過乳腺生物反應器生產(chǎn)得到的轉(zhuǎn)基因羊每個有核細胞都含有人抗凝血酶Ⅲ基因；但只有乳腺細胞表達了人抗凝血酶Ⅲ基因，D錯誤。

故選D。5、A【分析】【分析】

分析題圖：①是目的基因（血清白蛋白基因）；②～③表示采用轉(zhuǎn)基因技術；將目的基因（血清白蛋白基因）導入受體細胞的過程；④是重組細胞；⑤是早期胚胎；⑤～⑥采用了胚胎分割技術，對囊胚進行胚胎分割時，要將內(nèi)細胞團均等分割；⑥～⑦表示胚胎移植過程；⑧是轉(zhuǎn)基因生物（乳腺生物反應器）。

【詳解】

A；在⑤的囊胚階段DNA分析；進行性別鑒定，取樣部位為滋養(yǎng)層細胞，A錯誤；

B；⑥階段移植的胚胎為桑葚胚或囊胚；B正確；

C；以上過程涉及的現(xiàn)代生物學技術中；屬于細胞工程的有核移植技術、動物細胞培養(yǎng)；屬于胚胎工程的是早期胚胎培養(yǎng)、胚胎分割、胚胎移植，C正確；

D；啟動子是RNA聚合酶結合和識別的位點；用于驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄，血清白蛋白基因只在奶牛的乳腺細胞中表達與是否有啟動子有關，故要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細胞中表達，應將其與（牛）乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組，D正確。

故選A。6、D【分析】【分析】

DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA時加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；

B；將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑在沸水條件進行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，B正確；

C；DNA帶負電；電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理，C正確；

D；因為質(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個切割位點，也可能沒有切割位點，D錯誤。

故選D。7、C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；在動物轉(zhuǎn)基因技術中；常采用顯微注射法將目的基因?qū)雱游锏氖芫?，A正確；

B；常用滅活病毒誘導動物細胞融合；其原理是病毒表面的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞相互凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合，B正確；

C；用特定的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)之后；篩選得到的雜交瘤細胞需經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，多次篩選才能獲得分泌單一抗體的雜交瘤細胞，C錯誤；

D；經(jīng)過轉(zhuǎn)基因技術改造小鼠之后；獲得的抗體是由人的抗體基因編碼的，所以稱為人源性單克隆抗體，能夠有效解決鼠源性單克隆抗體被人體識別為異源蛋白的問題，即具有特異性強、靈敏度高、抗原性低等特點，D正確。

故選C。8、C【分析】【分析】

本實驗的思路為：將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養(yǎng)基上；濾紙片周圍會出現(xiàn)抑菌圈，在抑菌圈邊緣生長的細菌可能是耐藥菌；若抗生素對細菌起選擇作用，則隨著培養(yǎng)次數(shù)增多，耐藥菌的比例增大，在連續(xù)培養(yǎng)幾代后，抑菌圈的平均直徑變小。

【詳解】

A；將高濃度菌液涂布在平板培養(yǎng)基上；使平板上長出密集菌落，利于觀察抑菌圈，A正確；

B；①處濾紙片周圍未出現(xiàn)抑菌圈；濾紙片上不含抗生素，起對照作用，B正確；

C；隨重復次數(shù)增加；抗藥菌株的比例增加，抑菌圈的直徑會變小，C錯誤；

D；抑菌圈邊緣的菌落可能是耐藥菌；所以，抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細菌抗藥性較強，D正確。

故選C。9、C【分析】【分析】

1；基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術；是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。2、細胞分化是指同一起源的細胞逐漸產(chǎn)生具有不同形態(tài)結構和功能特征細胞群的過程。細胞分化的實質(zhì)是基因組在時間和空間上的選擇性表達，通過開啟或關閉不同基因的表達，產(chǎn)生最終的特征蛋白。

【詳解】

A；多能干細胞（iPSC）向心肌細胞分化是基因選擇性表達的結果；遺傳物質(zhì)不變，基因進行選擇性表達，從而使細胞的結構、功能、形態(tài)發(fā)生變化，A正確；

B、結合圖示iPSC和Hybridcells的分化率可知；誘導多能干細胞和雜交細胞都具有分化能力，且iPSC的分化率較高，B正確；

C；誘導20d后iPSC和雜交細胞都具有較高的分化率；還可以再分化，C錯誤；

D；iPSC是將相關基因?qū)塍w細胞而獲得；雜交細胞是iPSC與心肌細胞的融合細胞，引入機體都具有一定的風險，臨床使用前需評估兩種細胞致癌的風險，D正確。

故選C。二、多選題(共5題，共10分)10、A:C【分析】【分析】

當胚胎細胞數(shù)目達到32個左右時；胚胎形成致密的細胞團，形似桑椹，叫做桑椹胚；實驗證實，這一階段前的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞，這些細胞都是由受精卵經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生的。

【詳解】

A；桑椹胚前的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬于全能細胞，A正確；

B；囊胚期細胞可分化內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)層兩部分；不同部位的細胞致密化程度有差異，桑椹胚不同部位的細胞致密化程度相同，B錯誤；

C；胚胎分割是指采用機械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術，胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇，C正確；

D；胚胎移植一般選擇桑椹胚或囊胚期進行；D錯誤。

故選AC。11、B:D【分析】【分析】

克隆是指生物體通過體細胞進行的無性繁殖；以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個體。通常是利用生物技術由無性生殖產(chǎn)生與原個體有完全相同基因的個體或種群。

【詳解】

A；體細胞的分化程度比胚胎干細胞的分化程度高；與體細胞核移植技術相比，胚胎干細胞核移植技術更易成功，A錯誤；

B；在體細胞核移植過程中；用物理方法或化學方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白質(zhì)合成酶抑制劑等）激活受體細胞，使其完成細胞分裂和發(fā)育進程，B正確；

C；基因重組發(fā)生在有性生殖的生物進行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過程中(狹義上的基因重組)以及基因工程技術中（包含在廣義的基因重組內(nèi)）；而細胞分裂、分化的過程一般不會發(fā)生基因重組，C錯誤；

D；體細胞核移植技術是無性繁殖；有望用于增加瀕危動物的種群數(shù)量，D正確。

故選BD。12、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無菌平板表面進行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據(jù)I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應為無菌水，B錯誤；

C；由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應呈藍色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，因此周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。13、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。

DNA連接酶是鏈接兩個DNA的片段；形成磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；能在特定部位的兩個核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵，A正確；

B；DNA連接酶可以恢復DNA分子中的磷酸二酯鍵；將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來，B錯誤；

C；DNA聚合酶將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端；形成磷酸二酯鍵，DNA連接酶是鏈接兩個DNA的片段，形成磷酸二酯鍵。在基因工程操作中，不可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶，C錯誤；

D；限制酶主要來源于微生物；D錯誤。

故選BCD。14、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應設為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素；D正確。

故選ABD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強升高pH的變化酚紅指示劑紅17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學合成法18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白質(zhì)19、略

【分析】【詳解】

①克隆人是對人權和人的尊嚴的挑戰(zhàn)：

人不僅是自然人；在生物進化中人自從脫離了動物界，還成為有價值觀念的社會的人，因此人是具有雙重屬性的，是生物；心理和社會的集合體?？寺∪艘簿褪侨斯o性生殖的人，只在遺傳性狀上與原型人一致，而人的心理、行為、社會特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一個喪失自我的人，嚴重違反了人權，危害人類尊嚴；

②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念：

克隆人的出現(xiàn)將徹底攪亂代際關系和家庭倫理定位；克隆人過程中可以出現(xiàn)體細胞核供者；卵細胞供者以及孕育者三位生物學父母，以及撫養(yǎng)者的社會學父母的多種選擇，被克隆者只是生物學上復制，人類世代的傳承也將被打破，家庭倫理關系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社會地位上都不健全的人；

④克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律：

人類所以發(fā)展到如此高的進化文明程度，是由其自然發(fā)展規(guī)律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到無性生殖，這種行為如不加阻止，必將給人類種下無窮的災難?！窘馕觥竣倏寺∪耸菍θ藱嗪腿说淖饑赖奶魬?zhàn)；②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念；③克隆人是制造在心理上和社會地位上都不健全的人；④克隆人違反生物進化的自然發(fā)展規(guī)律等。四、綜合題(共4題，共8分)20、略

【分析】【分析】

基因表達載體的基本結構包括復制原點、目的基因、標記基因、啟動子、終止子等。根據(jù)題干信息和圖形分析，P0是載體質(zhì)粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環(huán)素抗性基因（tetr）都屬于標記基因，可用于檢測目的基因是否導入受體細胞；EcoRV酶為限制酶，其切割質(zhì)粒后會破壞四環(huán)素抗性基因（tetr）。

【詳解】

（1）根據(jù)題意分析；EcoRV酶識別的序列是-GATATC-，并且兩條鏈都在中間的T與A之間進行切割，因此其切出來的線性載體P1為平末端。

（2）依題意并據(jù)圖分析；目的基因兩側為黏性末端，且露出的堿基為A，則在載體P1的兩端需要各加一個含有堿基T的脫氧核苷酸，以便形成具有黏性末端的載體P2，再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質(zhì)粒P3。

（3）根據(jù)以上分析已知；限制酶（EcoRV酶）切割后破壞了四環(huán)素抗性基因，但是沒有破壞氨芐青霉素抗性基因，因此含有重組質(zhì)粒P3的菌落在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中應該不能生長，而在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長，結合表格分析可知，應該選擇B類菌落。根據(jù)表格分析，A類菌落在氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能夠生長，說明其導入的是P0；C類菌落在任何抗生素的培養(yǎng)基中都不能生長，說明其沒有導入任何質(zhì)粒。

（4）據(jù)圖分析，根據(jù)目的基因插入的位置和PCR技術的原理分析，PCR鑒定時應該選擇的一對引物是乙和丙；根據(jù)題意和圖形分析，某同學用圖中的另外一對引物（甲、乙）從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp的片段；說明其目的基因發(fā)生了反向連接。

【點睛】

解答本題的關鍵是識記并理解基因工程的四個基本步驟，尤其是對核心步驟——構建基因表達載體步驟的理解，明確基因表達載體的幾個必須的成分及其作用，進而結合題干要求分析答題?！窘馕觥浚?）平。

（2）胸腺嘧啶（T）DNA連接。

（3）BA類菌落含有P0C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒。

（4）乙丙目的基因反向連接21、略

【分析】

【分析】

微生物常見的接種的方法。

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)，在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）MRS固體培養(yǎng)基因含有碳酸鈣而不透明；乳酸菌所產(chǎn)的酸可與碳酸鈣發(fā)生反應，從而在培養(yǎng)基上形成溶解圈（透明圈），即形成以乳酸菌為中心的透明圈，從功能上判斷，MRS培養(yǎng)基可作為乳酸菌的鑒別培養(yǎng)基。

（2）微生物分離純化培養(yǎng)時；關鍵做到防止雜菌污染，則使用無菌水對樣品濾液進行梯度稀釋。進行梯度稀釋的目的是選擇合適濃度的乳酸菌在培養(yǎng)基上觀察，保證獲得菌落數(shù)在30～300之間；適于計數(shù)的平板。

（3）要優(yōu)化發(fā)酵時間和發(fā)酵溫度從而使GABA相對產(chǎn)量進一步提高；可在發(fā)酵時間在48～60h范圍內(nèi)；發(fā)酵溫度在35～39℃范圍內(nèi)進行等時間、溫度梯度的實驗，根據(jù)表格記錄實驗結果，從而分析比較出最佳的發(fā)酵條件，具體表格如下：

【點睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法，能根據(jù)題干信息推斷篩選高產(chǎn)GABA的乳酸菌株的原理，能設計簡單實驗優(yōu)化其發(fā)酵條件，再結合所學的知識準確答題?！窘馕觥客该魅﹁b別無菌水通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)；以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間；適于計數(shù)的平板不同溫度、不同發(fā)酵時間GABA的相對產(chǎn)量。

。48小時49小時50小時51小時5