2025年牛津譯林版選修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年牛津譯林版選修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列關于動物細胞工程的敘述，正確的是（）A.動物細胞培養(yǎng)所依據(jù)的生物學原理是細胞的分化B.所有動物細胞在培養(yǎng)過程中均會出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象C.用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞D.滅活的病毒可增加細胞膜的流動性因而可用于誘導動物細胞融合2、下圖為轉基因抗凍番茄培育過程的示意圖。（其中ampr為抗氨芐青霉素基因）下列敘述正確的是。

A.可同時選用限制酶PstI、SmaI對含目的基因的DNA進行切割B.過程②中，可直接將過程①得到的產(chǎn)物注入受體細胞C.過程③需要用到纖維素酶和果膠酶，以便獲得并培養(yǎng)活的原生質體D.過程④中，若利用探針在試管苗細胞內檢測到目的基因，則轉基因成功3、用動物細胞工程技術獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是（）A.將特定抗原注入小鼠體內，獲得能產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞B.用纖維素酶和果膠酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞C.用滅活的病毒誘導能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合D.篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體4、下列關于真核細胞的敘述，不正確的是（）A.洋蔥根尖分生區(qū)細胞的整個生命歷程中都有核膜包圍的細胞核B.溶酶體內缺乏某種酶可能會引發(fā)人類疾病C.哺乳動物成熟紅細胞的細胞質基質中有丙酮酸的消耗D.酵母菌細胞核外有能自主復制的環(huán)狀DNA分子5、下列關于細胞工程的敘述，正確的是（）A.培養(yǎng)動物細胞時，向培養(yǎng)箱通入CO2的目的是提供適宜的溫度B.通常選用植物生長點進行組織培養(yǎng)，從而獲得脫毒苗C.對于哺乳動物而言，精子獲能后進入初級卵母細胞即為受精D.外植體經(jīng)消毒后需用清水多次沖洗，防止消毒劑長時間作用外植體而產(chǎn)生毒害6、下列關于哺乳動物受精的有關說法正確的是（）A.防止多精入卵受精的兩道屏障分別是頂體反應和卵細胞膜反應B.受精的實質是雌雄原核的融合，雄原核一般略小于雌原核C.動物排出的卵子成熟程度不同，有的是次級卵母細胞，有的是初級卵母細胞D.精子獲能必須在雌性動物生殖道內進行，在體外不能進行評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)7、下列生物技術的安全性和倫理問題的敘述正確的是（）A.種植轉基因植物有可能因基因擴散而影響野生植物的基因多樣性B.如轉基因植物的外源基因來源于自然界，則不會存在安全性問題C.中國政府禁止生殖性克隆，但不反對治療性克隆D.中國反對生物武器，但在特殊情況下可以生產(chǎn)生物武器8、如圖為細胞融合的示意圖；下列敘述正確的是（）

A.若a細胞和b細胞是植物細胞，需先去分化再誘導融合B.a細胞和b細胞之間的融合需要促融處理后才能實現(xiàn)C.c細胞的形成與a、b細胞膜的流動性都有關D.c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的所有基因9、科研人員將抗癌藥物連接在單抗上制成“生物導彈”用于癌癥治療。“生物導彈”由兩部分組成，一是“瞄準裝置”，二是“殺傷性彈頭”，分析下列有關描述，其中正確的是（）A.“瞄準裝置”由識別腫瘤的單克隆抗體組成B.“彈頭”由化學藥物和毒素等物質構成C.“彈頭”中的藥物有選擇殺傷腫瘤細胞的功能D.“生物導彈”的制備應用了細胞工程10、下圖是利用基因工程技術生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性核酸內切酶。下列有關說法正確的是。

A.構建基因表達載體需要用到EcoRⅠ、PstⅠ兩種限制酶B.若用圖中四種限制酶同時切割質粒，可以產(chǎn)生四個DNA片段C.表達載體中除圖示標注的結構外還應有啟動子和終止子等調控因子D.篩選含重組質粒的受體細胞時應在培養(yǎng)基中加入卡那霉素抗性基因11、下列動物細胞培養(yǎng)過程中屬于原代培養(yǎng)的是（）A.通常將動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)B.從機體取得細胞后立即進行培養(yǎng)的過程C.出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后接下來的細胞培養(yǎng)過程D.哺乳動物細胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長過程12、下列有關小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，錯誤的是（）A.精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲得能量B.分割的胚胎細胞有相同的遺傳物質，發(fā)育成的個體沒有形態(tài)學差異C.胚胎干細胞具有自我更新能力和分化潛能，可以分化形成各種組織D.囊胚期細胞開始分化，其增殖過程中可能會發(fā)生基因突變和染色體變異13、在培育“乳腺生物反應器”的過程中，可能涉及()A.導入外源基因B.誘導細胞融合C.挑選雌性胚胎D.胚胎移植14、下列關于生態(tài)工程的敘述，正確的是（）A.濕地的恢復除利用生物工程手段外，還要依靠自然演替機制恢復其生態(tài)功能B.礦山廢棄地生態(tài)恢復工程的關鍵是植被恢復和土壤微生物群落的重建C.退耕還林還草、植樹造林等是小流域綜合治理生態(tài)工程的主要對策D.我國可以走發(fā)達國家走過的“先污染、后治理”的發(fā)展路徑評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應鑒定胚胎中與___________有關的基因。

（4）進行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內的存活提供了可能。16、基因治療：基因治療是指用正?；騙______或______患者細胞中有缺陷的基因，從而達到治療疾病的目的。17、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應和__________反應。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。18、請寫出基因工程的概念：_________________。請寫出胚胎移植的概念：_____________________。請分別寫出植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的原理_________。19、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應鑒定胚胎中與___________有關的基因。

（4）進行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內的存活提供了可能。評卷人得分四、判斷題(共5題，共15分)20、一般情況下一個卵細胞只能由一個精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯誤21、精子入卵后形成雄原核；同時卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯誤22、受精包括受精前的準備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在子宮內完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯誤23、下圖表示哺乳動物發(fā)育過程的幾個階段；請判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過程中有機物的含量減少。

（_____）（2）A；B時期胚胎中的細胞都是全能細胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時期的胚胎。

（_____）（4）圖示過程細胞通過有絲分裂增殖，遺傳物質可能會發(fā)生改變。A.正確B.錯誤24、在生態(tài)工程建設中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯誤評卷人得分五、非選擇題(共3題，共27分)25、如圖為制備單克隆抗體和多克隆抗體的示意圖；據(jù)圖回答下列問題：

(1)圖中向小鼠注射包含多種抗原決定簇的抗原后；所獲得的免疫抗血清實際上是含有______________(填寫抗體的名稱)的混合物，這種方法制備的多克隆抗體不僅產(chǎn)量低；而且純度低。與多克隆抗體相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點在于它的__________________。

(2)圖中選用B細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞；說明細胞膜具有________，如果僅考慮細胞的兩兩融合，其融合細胞有________種類型。

(3)圖中兩次篩選的目的不同；其中篩選①的目的是篩選出______________，篩選②的目的是篩選出________________________________。篩選時所用的培養(yǎng)基是特定的________培養(yǎng)基。

(4)科學工作者正在研究的治療癌癥使用的“生物導彈”就是________________。用“生物導彈”治療癌癥的方法優(yōu)于化療的原因是____________________________________________。

(5)由圖中可看出，單克隆抗體的制備過程中，運用了動物細胞工程中的________________和________________兩大技術。26、基因治療是指將外源正?；驅氚屑毎灰约m正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療的目的。干擾素基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟淋巴細胞，科研人員利用胚胎干細胞細胞)對干擾素基因缺失的小鼠進行了基因治療。請回答：

(1)為使干擾素基因在小鼠細胞中高效表達；需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達載體的_____________和_____________之間。

(2)將干擾素基因導入ES細胞的方法是_____________；采用_____________可以鑒定目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上，再將能正常表達干擾素的細胞轉入到小鼠體內，這種治療方法稱為____________。

(3)干擾素基因缺失的小鼠易患某種細菌導致的肺炎；引起這種現(xiàn)象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴細胞，降低了小鼠免疫系統(tǒng)的_____________功能。

(4)用于基因治療的基因有三類，一類是把正?；驅胗谢蛉毕莸募毎校员磉_出正常性狀來治療，第二類是反義基因，即通過產(chǎn)生的mRNA分子與病變基因產(chǎn)生的_____________進行互補結合，來阻斷非正常蛋白質的合成；第三類是編碼可以殺死癌細胞的蛋白酶基因。27、回答下列（一）（二）小題：

（一）回答下列有關果膠；果汁和果膠酶等問題。

（1）果膠是植物細胞壁的主要成分；起著將植物細胞_________在一起的作用。制作果汁時可加入果膠酶和____________以分解果膠，提高果汁出汁率和澄清度。

（2）生產(chǎn)果膠酶可從黑曲霉中提?。幌铝羞m于黑曲霉擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基是________(A.蛋白胨和酵母提取物培養(yǎng)基B.尿素固體培養(yǎng)基C.MS培養(yǎng)基D.添加蔗糖的豆芽汁培養(yǎng)基）。由于果膠酶溶于水，不利于重復使用，可通過物理或化學方法將果膠酶固定在某種介質上，使之成為不溶于水而又有_________的制劑。

（3）用果汁制作果酒；以果汁為原料，加入一定比例的蔗糖目的是_________。最后倒入酵母懸液，混勻，加蓋；發(fā)酵開始時，由于微生物的需氧呼吸會使發(fā)酵瓶內出現(xiàn)________，原因是_________________。

（二）回答克隆技術和胚胎工程有關的問題。

（1）將高度分化的離體植物組織進行培養(yǎng)；脫分化形成________，再誘導出________的頂端分生組織，并由此可再生出新的植株。

（2）利用高度分化的動物細胞進行克隆動物；必須利用_____________技術形成重組細胞，這種技術需要借助精密的________和高效率的細胞融合法。

（3）胚胎移植的途徑主要有兩條：一是體外受精產(chǎn)生受精卵；形成受精卵需經(jīng)___________，才能進行胚胎移植；二是體內受精，一定時間后從生殖器官中取出早期胚胎移植到受體相應部位。這兩種途徑對受體動物的要求是________________。

（4）與植物克隆相比動物難以克隆；這是由于在動物發(fā)育過程中，細胞出現(xiàn)了_________。

A.染色體畸變造成遺傳物質的丟失。

B.基因突變產(chǎn)生了等位基因。

C.基因選擇性表達合成了專一蛋白質。

D.減數(shù)分裂過程中同源染色體配對紊亂評卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)28、先導編輯技術是利用經(jīng)過改造的Cas9蛋白；在基因組中的特定位點切斷DNA，隨后逆轉錄酶在RNA鏈的引導下在切斷處進行基因編輯，其能實現(xiàn)更精準地對DNA進行編輯，該過程流程如圖所示。該技術可以實現(xiàn)基因的定點突變和整合，將修飾好的基因導入胚胎干細胞，治療人類某些單基因遺傳病。

（1）基因重組技術工具中的_______酶與先導編輯工具中Cas9蛋白作用相似；但二者的不同之處是前者____________________________________________________________。

（2）下圖為由經(jīng)過修飾的pku基因構建的重組載體，在轉化胚胎干細胞時，只有重組載體中整合區(qū)域正確整合到胚胎干細胞染色體DNA上才表示轉化成功，而重組載體的其他區(qū)域將被靶向分解。在轉化中會出現(xiàn)錯誤整合，整合錯誤才會出現(xiàn)重組載體中的兩個HSV-tk中至少會有一個與neor一起整合到染色體DNA上而不被分解。已知含有標記基因neor的細胞具有G418的抗性。HSV-tkl；HSV-tk2的產(chǎn)物都能把DHPG轉化成有毒物質而使細胞死亡。

①題干中的胚胎干細胞可以來自_____________________________；利用胚胎干細胞為受體細胞是因為其功能上具有________________________。

②胚胎干細胞在體外培養(yǎng)時需要滿足的條件除一定的氣體環(huán)境、充足營養(yǎng)、適宜的溫度和PH外，還應保證____________條件，氣體環(huán)境中的CO2的作用是_____________________。

③轉化后的各類胚胎干細胞要依次在含有G418和____________________的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，在雙重選擇下存活并增值的是正確整合的胚胎干細胞，原因是________________________________________。29、若嬰幼兒生長激素分泌不足會導致侏儒癥；某科學團隊利用多種現(xiàn)代生物技術通過奶牛乳腺生物反應器來生產(chǎn)人的生長激素。請回答下列問題。

（1）鑒別受體細胞中是否含有目的基因，需借助基因表達載體中的____________篩選受體細胞，若要檢測牛奶中是否含有生長激素可通過____________技術檢測。

（2）若將人的生長激素基因導入牛的精子中，通常采用____________法使精子獲能。與發(fā)育到____________期的卵母細胞進行受精作用。在胚胎的培養(yǎng)液中添加一定量的____________；可以防止培養(yǎng)過程中的細菌污染。

（3）當胚胎發(fā)育到囊胚階段，選取囊胚的____________細胞做DNA分析，進行性別鑒定，篩選出____________胚胎。為了提高胚胎的利用率，可將所選胚胎的____________均等分割，再進行胚胎移植。30、非洲豬瘟是由ASFV(一種雙鏈DNA病毒感染家豬和各種野豬引起的一種烈性傳染病；對生豬養(yǎng)殖造成巨大的威脅。某科研組將ASFV外殼蛋白基因導人豬細胞中，利用核移植技術培育基因編輯豬，從而得到自動產(chǎn)生ASFV抗體的個體，其過程如下圖所示。請回答下列問題：

(1)若要獲得大量的ASFV外殼蛋白基因；可利用_______技術在體外擴增該過程中用到的酶是_________。

(2)用________處理A豬；可以收集較多的卵母細胞。進行核移植要選取_____期的卵母細胞。

(3)采集B豬的組織塊；用_______處理獲得單個細胞放入添加了______等天然成分的合成培養(yǎng)基中。

(4)要檢測D豬是否產(chǎn)生了ASFV抗體，可采用的檢測方法是__________。31、M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達；現(xiàn)設計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植；胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術獲得M基因失活的轉基因克隆動物A，流程如圖所示。回答下列問題：

（1）在構建含有片段F的重組質粒過程中，切割質粒DNA的工具酶是________，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的________鍵斷開，重組質粒導入成纖維細胞的過程稱為________。

（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要________________；目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。

（3）與體細胞核移植技術相比，胚胎細胞核移植技術的成功率更高，原因是________________。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為________________________，功能上具有________。

（4）克隆動物A與為其提供核和去核卵母細胞的雙親的性狀不完全相同的原因是_____________________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖；培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的特點是貼壁生長和接觸抑制，誘導細胞融合的方法有三種：生物方法（病毒）；化學方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（離心，震動，電刺激）。某些病毒如：仙臺病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白，可介導病毒同宿主細胞融合，也可介導細胞與細胞的融合，因此可以用紫外線滅活的此類病毒誘導細胞融合，而不是用紫外線誘導細胞融合。

【詳解】

A；動物細胞培養(yǎng)所依據(jù)的生物學原理是細胞增殖；A錯誤；

B；癌細胞在培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象；B錯誤；

C；用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞；其能保持正常的二倍體核型，C正確；

D；滅活的病毒被膜上有融合蛋白而可用于誘導動物細胞融合；D錯誤。

故選C。2、A【分析】【分析】

分析題圖：①表示基因表達載體的構建過程；需要限制酶和DNA連接酶；②表示將目的基因導入受體細胞的過程，常用農桿菌轉化法；③④表示植物組織培養(yǎng)過程。

【詳解】

A；目的基因兩側是限制酶PstⅠ和SmaⅠ的識別序列；且質粒上也含有這兩種限制酶的切割位點，所以可同時選用限制酶PstⅠ、SmaⅠ對含目的基因的DNA進行切割，A正確；

B；將目的基因導入植物細胞時；常用農桿菌轉化法，B錯誤；

C；過程③為植物組織培養(yǎng)；不需要用纖維素酶和果膠酶處理，C錯誤；

D；過程④中；若利用探針在試管苗細胞內檢測到目的基因，不能說明轉基因成功，轉基因成功的標志是形成目的基因的產(chǎn)物，D錯誤。

故選A。

【點睛】

本題結合流程圖，考查基因工程和植物細胞工程的相關知識，意在考查考生的識圖能力和識記能力；能理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系的能力；能運用所學知識解決問題的能力。3、B【分析】【分析】

1；單克隆抗體制備的原理：B淋巴細胞能產(chǎn)生特異性抗體；在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細胞不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖。雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。

2；單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A.制備單克隆抗體首先需要獲得已免疫的B淋巴細胞，因此需將抗原注人小鼠體內，獲得能產(chǎn)生抗體的效應B淋巴細胞，A正確；

B.制備單克隆抗體融合B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞一般使用的是滅活病毒；動物細胞無細胞壁，所以不能使用纖維素酶和果膠酶，B錯誤；

C.動物細胞融合過程中；可以利用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇作誘導劑，C正確；

D.篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體，D正確；

故選B。4、A【分析】【分析】

正常細胞的生命歷程包括細胞分裂；分化、衰老和凋亡。在細胞有絲分裂的過程中；前期核膜消失、核仁解體，末期核膜、核仁又重現(xiàn)。質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于細菌擬核DNA之外并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。在酵母菌的細胞核之外也有質粒。

【詳解】

A；洋蔥根尖分生區(qū)細胞具有分裂能力；在細胞周期中核膜、核仁周期性的消失和重現(xiàn)，所以有的分生區(qū)細胞沒有核膜包被的細胞核，A錯誤；

B；溶酶體內缺乏某種酶可能會引發(fā)人類疾病；如硅肺的形成是由于吞噬細胞中的溶酶體缺乏分解硅塵的酶，而硅塵卻能破壞溶酶體膜，使其中的水解酶釋放出來，破壞細胞結構，使細胞死亡，最終導致肺功能受損，B正確；

C；哺乳動物成熟的紅細胞沒有細胞器；只能進行無氧呼吸，場所是細胞質基質，無氧呼吸第二階段丙酮酸和還原氫生成乳酸，C正確；

D；酵母菌細胞核外的質粒是能自主復制的環(huán)狀DNA分子；D正確。

故選A。5、B【分析】【分析】

1.一定大小的莖尖病毒極少，甚至無病毒，進行組織培養(yǎng)，可獲得無病毒幼苗；動物細胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境需要95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

【詳解】

A、培養(yǎng)動物細胞時，向培養(yǎng)箱通入CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH；A錯誤；

B；因為植物生長點的病毒極少；甚至沒有病毒，所以選用植物生長點離體培養(yǎng)獲得脫毒植株，B正確；

C；對于哺乳動物而言；受精的實質是雌雄原核的融合，受精完成的標志是透明帶和卵細胞膜之間出現(xiàn)兩個極體，C錯誤；

D；外植體經(jīng)消毒后需用無菌水多次沖洗；以防止消毒劑長時間作用外植體而產(chǎn)生毒害，D錯誤。

故選B。6、C【分析】【分析】

受精--受精是精子與卵子結合形成合子（即受精卵）的過程．它包括受精前的準備階段和受精階段。

1；受精前的準備階段（1）準備階段1-精子獲能．剛剛排出的精子；不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生殖道發(fā)生相應的生理變化后，才能獲得受精能力；（2）準備階段2-卵子的準備，動物排出的可能是初級卵母細胞也可能是次級卵母細胞，都要在輸卵管內進一步成熟，達到減數(shù)第二次分裂中期時，才具備與精子受精的能力。

2；受精階段（主要包括：精子穿越放射冠和透明帶；進入卵黃膜，原核形成和配子結合），具體過程為：頂體反應→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應）→卵細胞膜反應（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

【詳解】

A；受精過程中防止多精入卵的兩道屏障分別是透明帶反應和卵細胞膜反應；A錯誤；

B；精子入卵后會形成雄原核；雄原核一般略大于雌原核，B錯誤；

C；動物排出的卵子還不成熟；可能是初級卵母細胞也可能是次級卵母細胞，都要在輸卵管內進一步成熟，達到減數(shù)第二次分裂中期時，才具備與精子受精的能力，C正確；

D；精子在體外也能進行獲能處理；如在專門的受精溶液或獲能培養(yǎng)液中培養(yǎng)，D錯誤。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)7、A:C【分析】【分析】

轉基因技術的安全性問題主要集中在：生物安全；食物安全和環(huán)境安全。

【詳解】

A；種植轉基因植物有可能因基因擴散而導致外源基因進入野生植物中；影響野生植物的基因多樣性，A正確；

B；轉基因植物會存在安全性問題；B錯誤；

C；中國政府禁止生殖性克隆；但不反對治療性克隆，C正確；

D；中國反對生物武器；不生產(chǎn)生物武器，D錯誤。

故選AC。8、B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析，圖示為細胞融合的過程，a細胞與b細胞融合形成融合細胞c，c細胞具有a細胞和b細胞的遺傳物質；融合過程常用聚乙二醇進行誘導，對于動物細胞融合還可以用滅活的病毒進行誘導。

【詳解】

A、若a細胞和b細胞是植物細胞；應該先用酶解法去掉它們的細胞壁再誘導融合，A錯誤；

B；無論是動物細胞還是植物細胞；兩個細胞的融合都需要促融處理后才能實現(xiàn)，B正確；

C；兩個細胞融合成一個細胞；利用了細胞膜的流動性，C正確；

D、c細胞同時具備了a細胞和b細胞中的所有基因；但是基因是選擇性表達的，因此c細胞中基因不一定都能夠表達，D錯誤。

故選BC。

【點睛】

解答本題的關鍵是掌握植物體細胞雜交和動物細胞融合的過程及其原理，梳理兩個過程的相關知識點和細節(jié)，結合選項圖示分析答題。9、A:B:D【分析】【分析】

1；單克隆抗體是由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質單一、特異性強的抗體；

2；生物導彈：單克隆抗體+放射性同位素、化學藥物或細胞毒素（借助單克隆抗體的定位導向作用將藥物定向帶到癌細胞；在原位殺死癌細胞．療效高，副作用小，位置準確）。

【詳解】

A；“瞄準裝置”由識別腫瘤的單克隆抗體組成；A正確；

B；“彈頭”由放射性同位素、化學藥物或毒素等物質構成；B錯誤；

C；“彈頭”中的藥物能殺傷腫瘤細胞；也能殺傷正常細胞，沒有選擇性，C錯誤；

D；“生物導彈”的制備應用了細胞工程；包括動物細胞融合技術、動物細胞培養(yǎng)技術，D正確。

故選AD。

【點睛】

本題以“生物導彈”為素材，考查單克隆抗體的相關知識，要求考生識記單克隆抗體的制備原理及過程，掌握單克隆抗體的特點及相關應用，尤其是掌握“生物導彈”的組成及應用，能結合所學的知識準確判斷各選項。10、A:B:C【分析】【分析】

質粒上和含抗原基因的DNA中含有的限制酶的酶切位點相同。SmaⅠ的識別位點位于抗原基因中；PstⅠ；EcoRⅠ的識別位點分別位于抗原基因的兩端；選擇PstⅠ、EcoRⅠ切割含抗原基因的DNA不會破壞抗原基因的結構。質粒上的卡那霉素抗性基因為標記基因，可供重組DNA的鑒定和選擇。

【詳解】

題圖顯示：抗原基因中存在SmaⅠ的識別位點，使用SmaⅠ切割含抗原基因的DNA會破壞抗原基因的結構，抗原基因的兩端分別含有PstⅠ、EcoRⅠ的識別位點，用PstⅠ、EcoRⅠ切割含抗原基因的DNA，能保持抗原基因結構的完整性，所以構建基因表達載體需要用到EcoRⅠ、PstⅠ兩種限制酶，A正確；質粒是一種很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子，若用圖中四種限制酶同時切割質粒，可以產(chǎn)生四個DNA片段，B正確；表達載體中除圖示標注的結構（目的基因、標記基因）外還應有啟動子和終止子等調控因子，C正確；篩選含重組質粒的受體細胞時應在培養(yǎng)基中加入卡那霉素，D錯誤。11、A:B【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)時；取幼齡動物的組織，剪碎后，用胰蛋白酶處理分散成單個細胞，制成細胞懸浮液，轉入細胞培養(yǎng)液中進行的培養(yǎng)是原代培養(yǎng)；當細胞貼滿瓶壁，在用胰蛋白酶處理分散成單個細胞，制成細胞懸浮液，轉入培養(yǎng)液中進行的是傳代培養(yǎng)。

【詳解】

A；通常將動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)；A正確；

B；從機體取得細胞后立即進行培養(yǎng)過程是原代培養(yǎng)；B正確；

C；出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后；接去下的細胞的培養(yǎng)過程是傳代培養(yǎng)，C錯誤；

D；無論原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)細胞過程；細胞都有在培養(yǎng)基中的懸浮生長過程，D錯誤。

故選AB。12、A:B【分析】【分析】

1；胚胎干細胞（1）哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來。（2）具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內任何一種組織細胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。

2；胚胎分割的特點：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質；胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A、精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能；具有受精“能力”，而不是獲得能量，A錯誤；

B；分割的胚胎細胞有相同的遺傳物質；但個體的性狀還受到環(huán)境的影響，因此發(fā)育成的個體有形態(tài)學差異，B錯誤；

C；胚胎干細胞是從哺乳動物的早期胚胎或原始性腺中獲得的；具有發(fā)育的全能性，具有自我更新能力和分化潛能，可以分化形成各種組織，C正確；

D；囊胚期細胞開始分化；其增殖過程中進行的是有絲分裂，該過程中可能會發(fā)生基因突變和染色體變異，D正確。

故選AB。13、A:C:D【分析】【分析】

【詳解】

由上圖分析可知；在培育“乳腺生物反應器”的過程中，涉及基因工程技術；早期胚胎培養(yǎng)、挑選雌性胚胎、胚胎移植等技術，ACD正確，B錯誤。

故選ACD。14、A:B【分析】【分析】

礦區(qū)廢棄地的生態(tài)恢復工程：

（1）問題：礦區(qū)土體；土壤和植被；乃至整個地區(qū)生態(tài)系統(tǒng)的破壞。

（2）對策：人工制造表土；多層覆蓋、特殊隔離、土壤侵蝕控制、植被恢復工程等；關鍵是植被恢復及其所必需的土壤微生物群落的重建。

（3）案例：赤峰市元寶山礦區(qū)生態(tài)恢復工程。

【詳解】

A；濕地的恢復除利用生物工程手段外；還要依靠自然演替機制恢復其生態(tài)功能，A正確；

B；煤礦廢棄后；恢復生態(tài)環(huán)境的關鍵是植被的恢復及其所必需的土壤微生物群落的重建，B正確；

C；小流域綜合治理生態(tài)工程的措施有保土蓄水、耕作、林草、生物等；層層設防控制土壤侵蝕，C錯誤；

D；我國應該走可持續(xù)發(fā)展的道路；而不能走西方“先污染，后治理”之路，D錯誤。

故選AB。

【點睛】

本題知識點簡單，考查生態(tài)恢復工程、生物多樣性的保護，要求考生識記礦區(qū)廢棄地的生態(tài)恢復工程存在的問題、解決的對策及案例，明確礦山廢棄地生態(tài)修復工程的關鍵是植被的恢復及其所必需的土壤微生物群落的重建。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應為常見或存量大的品種)，如轉基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應鑒定胚胎中與有關的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應。

【點睛】

胚胎移植的實質：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉移。【解析】精子獲能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應。16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補17、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復制；②是減數(shù)分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶，透明帶反應和卵細胞膜反應是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細胞進行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關知識，意在考查學生識記相關細節(jié)和解決問題的能力。【解析】高爾基體輸卵管透明帶反應卵細胞膜反應初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用18、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細胞，原生質體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術；是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術。

3；動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖，其原理是細胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞，原生質體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性。

【點睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動植物細胞培養(yǎng)等相關知識，意在考察考生對知識點的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技術或DNA重組技術②.又稱受精卵移植，是指將雌性動物體內的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動物體內，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術③.植物細胞全能性、細胞增殖19、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應為常見或存量大的品種)，如轉基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應鑒定胚胎中與有關的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應。

【點睛】

胚胎移植的實質：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉移。【解析】精子獲能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應。四、判斷題(共5題，共15分)20、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個卵細胞一般只能同一個精子結合，形成受精卵，這句話是正確的。21、A【分析】【詳解】

受精過程為：頂體反應→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應）→卵細胞膜反應（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。精子入卵后形成雄原核，同時被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說法正確。

故正確。22、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在輸卵管內完成。

故錯誤。23、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內細胞團，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過程中細胞均需要消耗能量；故胚胎中有機物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細胞，故A時期胚胎中的細胞都是全能細胞，囊胚期時細胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細胞不是全能細胞，（2）錯誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時期的胚胎；處于A或B時期的胚胎，（3）錯誤。

（4）圖示過程細胞通過有絲分裂增殖；有絲分裂過程中可能發(fā)生突變，遺傳物質可能會發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。24、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復力穩(wěn)定性是有一定限度的，導致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯誤。五、非選擇題(共3題，共27分)25、略

【分析】試題分析：在制備單克隆抗體時；首先要給小鼠免疫，產(chǎn)生相應的漿細胞，然后將漿細胞與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞。在單克隆抗體的制備過程中，使用了動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合等動物細胞工程技術。

（1）據(jù)圖可知，向小鼠注射包含多種抗原決定簇的抗原后，所獲得的免疫抗血清實際上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物；這種方法制備的多克隆抗體不僅產(chǎn)量低；而且純度低；與多克隆抗體相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高，并能大量制備。

（2）圖中選用B細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞；說明細胞膜具有流動性。如果僅考慮細胞的兩兩融合，其融合細胞有B細胞自身融合；骨髓瘤細胞自身融合、雜交瘤細胞3種類型。（3）圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選①的目的是篩選出雜交瘤細胞，篩選②的目的是篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞。篩選時所用的培養(yǎng)基是特定的選擇性培養(yǎng)基。

（4）科學工作者正在研究的用于治療癌癥的“生物導彈”；注入體內，借助單克隆抗體的導向作用，將抗癌藥物定向帶到癌細胞所在位置，在原位殺死癌細胞。用“生物導彈”治療癌癥和普通化療相比優(yōu)點是不損傷正常細胞，且用藥劑量少。

（5）由圖中可看出；單克隆抗體的制備過程中，運用了動物細胞工程中動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)兩大技術。

【點睛】解答本題的關鍵是了解單克隆抗體制備過程中幾次篩選的目的，明確每一次篩選的目的是不同的。【解析】Ab1、Ab2、Ab3、Ab4特異性強、靈敏度高，并能大量制備流動性3雜交瘤細胞能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞選擇性單克隆抗體上連接抗癌藥物可以原位殺死癌細胞，還不損傷正常細胞，且用藥劑量小，毒副作用小動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)26、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）基因表達載體的組成包括目的基因；標記基因、啟動子、終止子；而來自cDNA文庫的干擾素基因是通過逆轉錄得到的，無啟動子和終止子等，所以應該將其插入在表達載體的啟動子和終止子之間才能構成完整的基因并在受體細胞內表達。

（2）將目的基因（干擾素基因）導入動物細胞（ES細胞）常用顯微注射法；檢測目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上；可以采用DNA分子雜交技術；基因治療包括體外基因治療和體內基因治療，如將能正常表達干擾素的細胞轉入到小鼠體內為體外基因治療。

（3）根據(jù)題意分析；干擾素基因缺失的小鼠體內由于缺少成熟的淋巴細胞，導致小鼠的免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能降低，因此小鼠容易患某種細菌導致的肺炎。

（4）根據(jù)題意分析；第二類是反義基因，其通過轉錄形成mRNA，然后與病變基因轉錄形成的mRNA進行互補配對，進而阻斷病變基因形成的mRNA翻譯出非正常的蛋白質。

【點睛】

解答本題的關鍵是識記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結合所學的知識和題干要求準確分析答題?！窘馕觥繂幼咏K止子顯微注射技術DNA分子雜交體外基因治療防衛(wèi)mRNA27、略

【分析】試題分析：本題綜合考查了有關酶的特性以及胚胎工程的相關問題；意在考查考生能理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系的能力；能運用所學知識與觀點的能力。果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要成分之一。果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細胞壁及胞間層。在果汁生產(chǎn)中應用果膠酶可以提高出汁率和澄清度。胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術。包括體外受精；胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術。經(jīng)過處理后獲的胚胎，還需要移植到雌性動物體內生產(chǎn)后代，以滿足人類的各種需要。解答本題需要學生識記核移植的具體過程，識記體外、體內受精及早期胚胎發(fā)育的具體過程，能結合所學知識準確答題。

（1）果膠物質是植物細胞壁成分之一；存在于相鄰細胞壁間的胞間層中，起著將細胞粘合在一起的作用。制作果汁時可加入果膠酶和果膠甲酯酶以分解果膠，提高果汁出汁率和澄清度。

（2）黑曲霉是異氧需要微生物；擴大培養(yǎng)需要含有有機物的液體培養(yǎng)基，而A；B、C選項所給的培養(yǎng)基都是固體培養(yǎng)基，不適合擴大培養(yǎng)，而D選項所給的添加蔗糖的豆芽汁培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基且含有有機物蔗糖，適合擴大培養(yǎng)黑曲霉，故選：D。由于果膠酶溶于水，不利于重復使用，可通過物理或化學方法將果膠酶固定在某種介質上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。

（3）用果汁制作果酒；以果汁為原料，加入一定比例的蔗糖目的是提高果酒的酒精和糖的含量。最后倒入酵母懸液，混勻，發(fā)酵開始時，由于微生物的需氧呼吸會使發(fā)酵瓶內出現(xiàn)負壓，原因是需氧呼吸消耗氧氣，產(chǎn)生的二氧化碳易溶于水。

（二）（1）組織培養(yǎng)技術是在人為創(chuàng)造的無菌條件下將離體的植物器官（如根；莖、葉、莖段、原生質體）、組織或細胞置于培養(yǎng)基內；并放在適宜的環(huán)境中，進行連續(xù)培養(yǎng)以獲得細胞、組織或個體的技術。其流程是：將高度分化的離體植物組織進行培養(yǎng)，脫分化形成愈傷組織，再誘導出芽和根的頂端分生組織，并由此可再生出新的植株。

（2）動物克隆是一種通過核移植過程進行無性繁殖的技術。不經(jīng)過有性生殖過程；而是通過核移植生產(chǎn)遺傳結構與細胞核供體相同的動物個體的技術。利用高度分化的動物細胞進行克隆動物，必須利用核移植技術形成重組細胞，這種技術需要借助精密的顯微操作儀和高效率的細胞融合法。

（3）胚胎移植的途徑主要有兩條：一是體外受精產(chǎn)生受精卵；形成受精卵需經(jīng)胚胎體外培養(yǎng)，才能進行胚胎移植；二是體內受精，一定時間后從生殖器官中取出早期胚胎移植到受體相應部位。這兩種途徑對受體動物的要求是同期發(fā)情且未配種。

（4）動物難以克隆的原因是由于基因的選擇性表達導致動物的體細胞均已發(fā)生了分化，并合成了專一蛋白質，基因組中基因的活動很不完全，不能像受精卵那樣發(fā)揮細胞的全能性，故選：C?！窘馕觥空澈瞎z甲酯酶D酶活性提高果酒的酒精和糖的含量負壓需氧呼吸消耗氧氣，產(chǎn)生的二氧化碳易溶于水愈傷組織芽和根核移植顯微操作儀胚胎體外培養(yǎng)同期發(fā)情且未配種C六、綜合題(共4題，共16分)28、略

【分析】【分析】

1；根據(jù)題意分析可知；CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術是利用該基因表達系統(tǒng)中的引導RNA能識別并結合特定的DNA序列，從而引導Cas9蛋白結合到相應位置并剪切DNA，最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯。由于其他DNA序列也含有與引導RNA互補配對的序列，造成引導RNA錯誤結合而出現(xiàn)脫靶現(xiàn)象。

2；基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

3；DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。構建重組載體時；首先需用限制性核酸內切酶切割目的基因和運載體，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團），因此獲取的胚胎干細胞應取自囊胚的內細胞團。

【詳解】

（1）基因重組技術工具中的限制酶與先導編輯工具中Cas9蛋白作用相似；但二者的不同之處是前者識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中的特點部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。

（2）①題干中的胚胎干細胞可以來自早期胚胎或原始性腺；利用胚胎干細胞為受體細胞是因為其功能上具有發(fā)育的全能性。

②胚胎干細胞在體外培養(yǎng)時需要滿足的條件除一定的氣體環(huán)境、充足營養(yǎng)、適宜的溫度和pH外，還應保證無菌、無毒環(huán)境條件，氣體環(huán)境中的CO2的作用是維持培養(yǎng)液pH。

③由題意可知，轉化后的各類胚胎干細胞要依次在含有G418和同時含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，在雙重選擇下存活并增值的是正確整合的胚胎干細胞，原因是能在含有G418的培養(yǎng)液存活說明轉化后的胚胎干細胞中含neor，能在同時含G418和DHPG的培養(yǎng)液中存活說明轉化后的胚胎干細胞中含neor且不含HSV-tk。

【點睛】

本題信息量極大，但是設問相對簡單，主要考察了基因工程、細胞工程的相關細節(jié)，第三小問則屬于思維拓展題，區(qū)分度較高。【解析】限制酶（限制性核酸內切酶）識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中的特點部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開早期胚胎或原始性腺發(fā)育的全能性無菌、無毒環(huán)境維持培養(yǎng)液PH同時含有G418和DHPG能在含有G418的培養(yǎng)液存活說明轉化后的胚胎干細胞中含neor，能在同時含G418和DHPG的培養(yǎng)液中存活說明轉化后的胚胎干細胞中含neor且不含HSV-tk29、略

【分析】【分析】

1；基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因。

（1）啟動子在基因的首段；它是RNA聚合酶的結合位點，能控制著轉錄的開始；

（2）終止子在基因的尾端；它控制著轉錄的結束；

（3）標記基因便于目的基因的鑒定和篩選。

2；受精前的準備階段：

（1）準備階段1—精子獲能：剛剛排出的精子；不能立即與卵子受精，必須在雌性動物生