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蘇教版高中生物選擇性必修3全冊教學(xué)課件第一節(jié)發(fā)酵工程的培養(yǎng)基第一章發(fā)酵工程生長的菌落我們?nèi)绾斡梦⑸飦碇谱鞒鲞@樣美麗的藝術(shù)作品呢?菌落單個(gè)微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度后形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。觀察各種微生物形成的菌落幾種菌落及其形態(tài)123培養(yǎng)基都包括哪些成分?培養(yǎng)基都有哪些類型?它們的主要區(qū)別在哪里?說一說

培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)主要是指為人工培養(yǎng)微生物等而制備的,適合微生物等生長、繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。1.培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì)最基本的物質(zhì)(1)水(2)碳源(3)氮源(4)無機(jī)鹽以及生長因子、氧氣、二氧化碳、滲透壓、PH等的特殊要求

★碳源★

凡能提供碳元素的物質(zhì)可作為碳源的物質(zhì)有:無機(jī)碳源:、、有機(jī)碳源:蛋白質(zhì)脂肪酸碳酸鹽碳酸氫鹽糖類(主要)葡萄糖乳糖二氧化碳不同微生物所利用的碳源不同異養(yǎng)型微生物的碳源為自養(yǎng)型微生物的碳源為含碳有機(jī)物(有機(jī)碳)含碳無機(jī)物(無機(jī)碳)作用:構(gòu)成微生物體的重要成分,也是微生物生命活動的能源物質(zhì)?!锏础?/p>

凡能提供氮元素的物質(zhì)可作為氮源的物質(zhì)有:無機(jī)氮源:、、、有機(jī)氮源:蛋白胨牛肉膏尿素固氮微生物所利用的氮源是氮?dú)獍睔庀跛猁}氨鹽氮?dú)庾饔茫簶?gòu)成微生物細(xì)胞中蛋白質(zhì)、核酸的主要元素。★生長因子★細(xì)菌生長必需,而自身不能合成的微量有機(jī)物如:維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等作用:合成酶和核酸★水★

在生物體內(nèi)含量很高的無機(jī)物作用:不僅是優(yōu)良的溶劑,而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定★無機(jī)鹽★為微生物提供除碳、氮外的各種重要元素作用:細(xì)胞的組成成分、生理調(diào)節(jié)物質(zhì)、某些化學(xué)自養(yǎng)菌的能源、酶的激活劑指出下列培養(yǎng)基配方中的碳源、氮源分別什么?2.培養(yǎng)基的類型和用途(1)按化學(xué)成分來分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。(2)按物理性質(zhì)來分:培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等,而液體培養(yǎng)基一般用于工業(yè)生產(chǎn)。(3)按用途來分,可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基和特殊培養(yǎng)基(4)按功能(特殊用途)來分,可分為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基。按化學(xué)成分來分天然培養(yǎng)基有血清、血漿、和組織提取液(如雞胚和牛胚浸液)。優(yōu)點(diǎn):取材便利、營養(yǎng)豐富、配制簡便、培養(yǎng)效果好缺點(diǎn):來源受限、營養(yǎng)成分復(fù)雜難以控制、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性差,影響對某些實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物的提取和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析天然培養(yǎng)基:適用于工業(yè)化生產(chǎn)按化學(xué)成分來分根據(jù)細(xì)胞生存所需物質(zhì)的種類和數(shù)量,用人工方法模擬合成的。合成培養(yǎng)基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。優(yōu)點(diǎn):化學(xué)成分和含量明確、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性好缺點(diǎn):

成本較高、配制過程繁瑣、缺少某些成分,不能完全滿足體外細(xì)胞生長需要。合成培養(yǎng)基:用于研究和育種液體培養(yǎng)基:表面生長均勻混濁生長沉淀生長按物理狀態(tài)來分增菌、工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基:菌落,菌苔按物理狀態(tài)來分純化(分離)鑒定活菌計(jì)數(shù)保藏菌種半固體培養(yǎng)基:無動力有動力(彌散)觀察細(xì)菌的運(yùn)動、厭氧菌的分離和菌種鑒定、保存按物理狀態(tài)來分瓊脂選擇培養(yǎng)基加入10%的酚溶液:抑制細(xì)菌和霉菌的生長,分離放線菌加入亞硫酸鉍:分離出傷寒沙門氏菌加入青霉素、四環(huán)素的培養(yǎng)基:分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基:分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基:分離自養(yǎng)型微生物按功能來分鑒別培養(yǎng)基1可溶性淀粉培養(yǎng)基一些微生物可以產(chǎn)生胞外淀粉酶,將樣品微生物培養(yǎng)在添加可溶性淀粉的培養(yǎng)基中,如果其菌落周圍形成淀粉水解圈,可用來鑒定產(chǎn)淀粉酶的菌株。按功能來分鑒別培養(yǎng)基2溴甲基紫培養(yǎng)基一些微生物可以產(chǎn)生乳酸、醋酸或丙酸等代謝產(chǎn)物,與溴甲基紫發(fā)生顏色反應(yīng)由紫色轉(zhuǎn)為黃色。常用溴甲基紫培養(yǎng)基鑒別產(chǎn)酸微生物。鑒別培養(yǎng)基3伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落,并帶有金屬光澤。常用的伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基,可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細(xì)菌。鑒別培養(yǎng)基4尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細(xì)菌后,細(xì)菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨,氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),使PH升高,從而使酚紅指示劑變紅。以鑒定這種細(xì)菌能否分解尿素。剛果紅是一種染料,能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后,剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。鑒別培養(yǎng)基5剛果紅纖維素培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入有利于某些微生物生長和繁殖所需的特殊物質(zhì),如血液、血清、酵母浸膏、動植物組織液。一般適用于培養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)微生物。從某種意義上來說,加富培養(yǎng)基類似于選擇培養(yǎng)基:加富培養(yǎng)基是增加所需分離的微生物的數(shù)量;選擇培養(yǎng)基是抑制不需要的微生物生長和繁殖。血清中含有:①多種蛋白質(zhì)(白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等)②多種金屬離子;③激素;④促貼附物質(zhì),如纖粘蛋白、冷析球蛋白、膠原等。⑤各種生長因子⑥轉(zhuǎn)移蛋白⑦不明成分人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存,要想使細(xì)胞生長和繁殖,還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基(如血清)。3.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方細(xì)菌喜葷,真菌喜素大腸桿菌配方酵母提取物:0.25g蛋白胨:0.5gNacl:0.5g瓊脂:1g水:50ml酵母菌、霉菌常用培養(yǎng)基麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基☆依據(jù)微生物的生長需要確定培養(yǎng)基的成分和含量1.關(guān)于配制培養(yǎng)基的有關(guān)敘述中,正確的是(

)A.制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂B.一般常用的是固體培養(yǎng)基C.氮源主要是為微生物提供能量D.牛肉膏只為微生物提供氮元素B隨堂練習(xí)2.下表為某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的是(

)成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mLA.從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,從用途看該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B.該培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C.該培養(yǎng)基缺少提供生長因子的物質(zhì)D.該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后就可以接種使用B1.培養(yǎng)基配制原則①目的要明確:根據(jù)培養(yǎng)的微生物種類、培養(yǎng)的目的等確定培養(yǎng)基的類型和配制量。②營養(yǎng)要協(xié)調(diào):培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。例如:碳氮比4∶1時(shí),谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產(chǎn)生谷氨酸少;碳氮比為3∶1時(shí),菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。③pH要適宜:細(xì)菌培養(yǎng)基pH中性或偏堿性,霉菌培養(yǎng)基呈酸性。配制馬鈴薯葡糖糖瓊脂培養(yǎng)基2.配置培養(yǎng)基的步驟:1.配制培養(yǎng)基2.調(diào)節(jié)pH3.分裝4.包扎5.滅菌6.擱置斜面7.無菌檢查培養(yǎng)基成分?培養(yǎng)基組分含量馬鈴薯塊200g葡萄糖20g瓊脂20gH2O1000mL1.配制培養(yǎng)基為什么將培養(yǎng)基PH調(diào)至5.5呢?因?yàn)榻湍妇L的最適pH為5.52.調(diào)節(jié)pH3.分裝精心制作

必出良品樣,也可能因討厭一位老師而討厭學(xué)習(xí)。一個(gè)被學(xué)生喜歡的老師,其教育效果總是超出一般教師。無論中學(xué)生還是小學(xué)生,他們對自己喜歡的老師都會有一些普遍認(rèn)同的標(biāo)準(zhǔn),諸如尊重和理解學(xué)生,寬容、不傷害學(xué)生自尊心,平等待人、說話辦事公道、有耐心、不輕易發(fā)脾氣等。教師要放下架子,把學(xué)生放在心上。“蹲下身子和學(xué)生說話,走下講臺給學(xué)生講課”;關(guān)心學(xué)生情感體驗(yàn),讓學(xué)生感受到被關(guān)懷的溫暖;自覺接受學(xué)生的評價(jià),努力做學(xué)生喜歡的老師。教師要學(xué)會寬容,寬容學(xué)生的錯(cuò)誤和過失,寬容學(xué)生一時(shí)沒有取得很大的進(jìn)步。蘇霍姆林斯基說過:有時(shí)寬容引起的道德震動,比懲罰更強(qiáng)烈。每當(dāng)想起葉圣陶先生的話:你這糊涂的先生,在你教鞭下有瓦特,在你的冷眼里有牛頓,在你的譏笑里有愛迪生。身為教師,就更加感受到自己職責(zé)的神圣和一言一行的重要。善待每一個(gè)學(xué)生,做學(xué)生喜歡的老師,師生雙方才會有愉快的情感體驗(yàn)。一個(gè)教師,只有當(dāng)他受到學(xué)生喜愛時(shí),才能真正實(shí)現(xiàn)自己的最大價(jià)值。義務(wù)教育課程方案和課程標(biāo)準(zhǔn)(2022年版)簡介新課標(biāo)的全名叫做《義務(wù)教育課程方案和課程標(biāo)準(zhǔn)(2022年版)》,文件包括義務(wù)教育課程方案和16個(gè)課程標(biāo)準(zhǔn)(2022年版),不僅有語文數(shù)學(xué)等主要科目,連勞動、道德這些,也有非常詳細(xì)的課程標(biāo)準(zhǔn)?,F(xiàn)行義務(wù)教育課程標(biāo)準(zhǔn),是2011年制定的,離現(xiàn)在已經(jīng)十多年了;而課程方案最早,要追溯到2001年,已經(jīng)二十多年沒更新過了,很多內(nèi)容,確實(shí)需要根據(jù)現(xiàn)實(shí)情況更新。所以這次新標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施,首先是對老課標(biāo)的一次升級完善。另外,在雙減的大背景下頒布,也能體現(xiàn)出,國家對未來教育改革方向的規(guī)劃。課程方案課程標(biāo)準(zhǔn)是啥?課程方案是對某一學(xué)科課程的總體設(shè)計(jì),或者說,是對教學(xué)過程的計(jì)劃安排。簡單說,每個(gè)年級上什么課,每周上幾節(jié),老師上課怎么講,課程方案就是依據(jù)。課程標(biāo)準(zhǔn)是規(guī)定某一學(xué)科的課程性質(zhì)、課程目標(biāo)、內(nèi)容目標(biāo)、實(shí)施建議的教學(xué)指導(dǎo)性文件,也就是說,它規(guī)定了,老師上課都要講什么內(nèi)容。課程方案和課程標(biāo)準(zhǔn),就像是一面旗幟,學(xué)校里所有具體的課程設(shè)計(jì),都要朝它無限靠近。所以,這份文件的出臺,其實(shí)給學(xué)校教育定了一個(gè)總基調(diào),決定了我們孩子成長的走向。各門課程基于培養(yǎng)目標(biāo),將黨的教育方針具體化細(xì)化為學(xué)生核心素養(yǎng)發(fā)展要求,明確本課程應(yīng)著力培養(yǎng)的正確價(jià)值觀、必備品格和關(guān)鍵能力。進(jìn)一步優(yōu)化了課程設(shè)置,九年一體化設(shè)計(jì),注重幼小銜接、小學(xué)初中銜接,獨(dú)立設(shè)置勞動課程。與時(shí)俱進(jìn),更新課程內(nèi)容,改進(jìn)課程內(nèi)容組織與呈現(xiàn)形式,注重學(xué)科內(nèi)知識關(guān)聯(lián)、學(xué)科間關(guān)聯(lián)。結(jié)合課程內(nèi)容,依據(jù)核心素養(yǎng)發(fā)展水平,提出學(xué)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),引導(dǎo)和幫助教師把握教學(xué)深度與廣度。通過增加學(xué)業(yè)要求、教學(xué)提示、評價(jià)案例等,增強(qiáng)了指導(dǎo)性。教育部將組織宣傳解讀、培訓(xùn)等工作,指導(dǎo)地方和學(xué)校細(xì)化課程實(shí)施要求,部署教材修訂工作,啟動一批課程改革項(xiàng)目,推動新修訂的義務(wù)教育課程有效落實(shí)。

本教學(xué)課件是采用MicrosoftPowerPoint軟件平臺精心設(shè)計(jì)與開發(fā)的,可在Windows操作系統(tǒng)環(huán)境下流暢運(yùn)行。作為一款現(xiàn)代化的多媒體教學(xué)輔助工具,本課件充分整合了多種媒體元素,包括文字、符號、圖形、圖像、動畫及聲音等,形成了一個(gè)內(nèi)容豐富、形式多樣的數(shù)字化教學(xué)資源。部分內(nèi)容取材于網(wǎng)絡(luò),如有侵權(quán),請聯(lián)系刪除!4.包扎滅菌條件?100kpa121℃20~30min5.滅菌同學(xué)們,通過這節(jié)課的學(xué)習(xí),你有什么收獲呢?謝謝大家愛心.誠心.細(xì)心.耐心,讓家長放心.孩子安心。第二節(jié)發(fā)酵工程的無菌技術(shù)第一章發(fā)酵工程

19世紀(jì)中期以前,人們普遍相信生命現(xiàn)象是自然發(fā)生的。19世紀(jì)60年代,法國科學(xué)家巴斯德通過實(shí)驗(yàn)證明了微生物不是自然發(fā)生的。煮沸肉湯,殺滅其中的細(xì)菌肉湯仍澄清,沒有細(xì)菌繁殖打斷瓶頸肉湯變混濁,細(xì)菌在肉湯中繁殖巴斯德的成功取決于他重視實(shí)驗(yàn)的無菌操作。分析上述事實(shí),他的無菌操作體現(xiàn)在哪些方面?通過高溫加熱曲頸瓶中的肉湯,又通過開口的曲頸和外界相通。這樣既能殺死瓶內(nèi)的各種微生物,又能阻隔外界微生物進(jìn)入燒瓶。

日常生活中,我們會用碘伏消毒液擦拭受傷破損的皮膚,從而殺滅傷口部位的部分微生物。那么,在發(fā)酵工程實(shí)踐中無菌操作是如何開展的呢?一、發(fā)酵工程的滅菌方法閱讀課本第14~15頁發(fā)酵工程的滅菌方法的內(nèi)容,思考:什么是無菌技術(shù)?無菌技術(shù)的核心是什么?常用的滅菌方法有什么?學(xué)生活動在操作過程中,保持的________________無菌狀態(tài)并不被微生物污染的技術(shù),其核心是______。1.無菌技術(shù)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是發(fā)酵工程的基礎(chǔ),因此,無菌技術(shù)是發(fā)酵工程的重要技術(shù)之一。物品與操作區(qū)域滅菌(1)對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。(2)用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在超凈工作臺并在酒精燈火焰附近進(jìn)行。(4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。拓展1無菌技術(shù)的主要內(nèi)容(1)化學(xué)試劑滅菌法2.常用方法方法效果范圍利用化學(xué)試劑如甲醛、氯、高錳酸鉀等滅菌劑。破壞微生物的蛋白質(zhì)或細(xì)胞結(jié)構(gòu)。一般不用于培養(yǎng)基的滅菌。(2)射線滅菌法方法效果范圍利用紫外線、X射線、γ

射線等產(chǎn)生的高能粒子進(jìn)行滅菌。破壞微生物的蛋白質(zhì)或細(xì)胞結(jié)構(gòu)。一般用于表面和空氣的滅菌。(3)干熱滅菌法干熱空氣滅菌法火焰灼燒法方法對象物品放入干熱滅菌箱,140~160℃,2~3h。直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒。耐高溫、需要保持干燥的物品(如培養(yǎng)皿、接種針和移液管)的滅菌接種工具、金屬器具、試管口或瓶口等。(4)濕熱滅菌法培養(yǎng)基等。溫度為121℃、氣壓約100kPa的條件下維持15~20min。蒸汽穿透力大,在相同溫度下濕熱滅菌比干熱滅菌更有效。方法對象優(yōu)點(diǎn)(5)過濾除菌法大量地制備無菌空氣,用于好氧微生物的發(fā)酵。利用過濾除菌法處理料液,以獲得無菌產(chǎn)品。通過過濾阻留微生物從而達(dá)到除菌目的。方法對象項(xiàng)目消毒滅菌條件使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法使用強(qiáng)烈的理化因素原理殺死物體表面或內(nèi)部一部分的微生物(不包括芽孢和孢子)殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子適用范圍實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣物和手微生物的培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基等常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線消毒法和使用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒等干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法和灼燒滅菌法等消毒和滅菌的區(qū)別常用的消毒方法煮沸消毒法:在100℃煮沸5~6min,可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢。這是日常生活經(jīng)常用到的消毒方法。巴氏消毒法:在62~65℃消毒30min或80~90℃處理30s~1min,適用于不耐高溫的液體,例如牛奶,可殺死牛奶中的絕大多數(shù)微生物,且不破壞牛奶的營養(yǎng)成分。化學(xué)藥物消毒:如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等。紫外線消毒:接種室、接種箱或超凈工作臺在使用前,可以用紫外線照射30min,以殺死物體表面或空氣中的微生物。在照射前,適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可以加強(qiáng)消毒效果。什么是芽孢和孢子呢?芽孢:有些細(xì)菌在一定的條件下,細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如,有的細(xì)菌的芽孢,煮沸3h以上才死亡。芽孢又小又輕,可以隨風(fēng)飄散,當(dāng)環(huán)境適宜時(shí)可以萌發(fā)形成一個(gè)細(xì)菌。

孢子:細(xì)菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖作用的無性生殖細(xì)胞。能直接發(fā)育成新個(gè)體。拓展2在具體的研究或生產(chǎn)實(shí)踐中,上述幾種方法有時(shí)可以結(jié)合使用,滅菌效果會更為顯著。滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提。在科學(xué)研究或生產(chǎn)實(shí)踐中,滅菌需要采用相應(yīng)的滅菌設(shè)備。發(fā)酵工程中常用的滅菌設(shè)備有哪些呢?二、發(fā)酵工程的滅菌設(shè)備閱讀課本第15~17頁發(fā)酵工程的滅菌設(shè)備的內(nèi)容,思考:常用的發(fā)酵設(shè)備有哪些?這些常用發(fā)酵設(shè)備的原理和作用是什么?說出高壓蒸汽滅菌鍋的使用步驟。學(xué)生活動空的玻璃器皿(如培養(yǎng)皿、離心管、移液管)、金屬用具(如鑷子、手術(shù)刀)和其他耐高溫的物品(如菌種保藏采用的沙土管、石蠟油、碳酸鈣)使滅菌器皿保持干燥。帶有膠皮或塑料的物品、液體及固體培養(yǎng)基一般不能采用電熱鼓風(fēng)干燥箱干熱滅菌。對象優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)1.電熱鼓風(fēng)干燥箱菌體蛋白的凝固溫度與含水量密切相關(guān),細(xì)菌芽孢含水量低,蛋白質(zhì)凝固溫度較高。采用電熱鼓風(fēng)干燥箱干熱滅菌時(shí),一般以能否殺死細(xì)菌的芽孢作為徹底滅菌的標(biāo)準(zhǔn)。滅菌原理注意事項(xiàng):不得將易腐、易燃、易爆物品放入箱內(nèi)干燥滅菌;干燥箱在工作時(shí),必須將風(fēng)機(jī)開關(guān)打開,否則會導(dǎo)致電機(jī)或傳感器燒壞;箱內(nèi)應(yīng)經(jīng)常保持清潔,長期不用應(yīng)套好防塵罩,放置在干燥的室內(nèi)等。1.電熱鼓風(fēng)干燥箱一種高壓蒸汽滅菌鍋的結(jié)構(gòu)示意圖在一個(gè)密閉的鍋內(nèi),水的沸點(diǎn)隨蒸汽壓力的增高而上升,加壓的同時(shí)提高蒸汽的溫度,使鍋內(nèi)的待滅菌物品在一定壓力和溫度等條件下,殺死其中所有微生物的營養(yǎng)體及其芽孢。滅菌原理手動式高壓蒸汽滅菌鍋;全自動高壓蒸汽滅菌鍋。培養(yǎng)基等。種類對象2.高壓蒸汽滅菌鍋操作人員必須在現(xiàn)場規(guī)范操作,嚴(yán)格控制熱源維持滅菌時(shí)的壓力。鍋內(nèi)壓力過高,不僅培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分會被破壞,而且高壓鍋超過耐壓范圍后可能會發(fā)生爆炸,造成傷人事故等。使用高壓蒸汽滅菌鍋有什么注意事項(xiàng)?加水裝鍋加熱排空冷空氣保溫保壓出鍋在外層鍋內(nèi)加入適量的水,水量達(dá)到水位標(biāo)記線即可將待滅菌物品放在滅菌桶中接通電源,打開開關(guān),開始加熱打開排氣閥,排出鍋內(nèi)殘留的冷空氣。當(dāng)壓力表指針回降到“0”時(shí),關(guān)閉氣閥,繼續(xù)加熱。鍋內(nèi)壓力升至約103kPa、溫度達(dá)到121℃時(shí)控制熱源,保持壓力,維持15~20min后,再關(guān)閉電源。當(dāng)壓力表指針降至“0”點(diǎn),待溫度下降后,打開排氣閥,旋開固定螺栓,開蓋,取出滅菌物品高壓蒸汽滅菌鍋的使用步驟:加水裝鍋加熱排空冷空氣保溫保壓出鍋滅菌完畢取出物品后,將鍋內(nèi)余水倒出,保持滅菌鍋內(nèi)壁及內(nèi)膽干燥,并蓋好鍋蓋。高壓蒸汽滅菌開始之前,為什么要將鍋內(nèi)的冷空氣排盡?滅菌完畢后,為什么要待壓力降到“0”時(shí)才能打開排氣閥?在同一溫度下,濕熱的滅菌能力比熱大,在使用高壓蒸汽滅菌滅菌時(shí),滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排出是否完全極為重要,因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒魵獾呐蛎泬?,所以,?dāng)水蒸氣中含有空氣時(shí),在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。

如果在壓力未降到“0”時(shí)打開排氣閥,會導(dǎo)致鍋內(nèi)壓力突然下降,使器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾培養(yǎng)基而發(fā)生污染。思考討論3.空氣除菌設(shè)備3.空氣除菌設(shè)備(1)進(jìn)行空氣除菌的原因是什么?許多微生物產(chǎn)品是通過培養(yǎng)好氧微生物獲得的。通常在空氣中含有灰塵顆粒和各種雜菌,在陰雨天氣或環(huán)境污染比較嚴(yán)重的情況下,空氣中會懸浮大量的微生物。這些微生物一旦進(jìn)入營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中,會很快繁殖,影響發(fā)酵過程。3.空氣除菌設(shè)備(2)作用機(jī)理讓含菌空氣通過____________________,以阻截空氣中所含微生物。空氣除菌設(shè)備不是滅菌,而是濾除了空氣中的各種雜菌。無菌干燥的過濾介質(zhì)(3)作用通過過濾除菌處理的空氣可達(dá)到___________的程度,并有足夠的壓力和適宜的溫度,以滿足___________________的需要。幾乎無菌好氧微生物純培養(yǎng)

小結(jié)1.下列哪項(xiàng)不屬于無菌技術(shù)?()A.將培養(yǎng)皿、接種工具和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌B.實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行C.避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸D.操作者的衣著和手用純凈水洗干凈D2.采用干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌等幾種方法,可分別殺死哪些部位的雜菌(

)A.接種環(huán)、移液管、培養(yǎng)基B.移液管、接種環(huán)、培養(yǎng)基C.培養(yǎng)基、移液管、接種環(huán)D.培養(yǎng)皿、移液管、培養(yǎng)基B3.下列關(guān)于高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法中,錯(cuò)誤的是(

)A.使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),需等鍋內(nèi)的冷空氣排盡后再關(guān)閉排氣閥B.培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法處理C.滅菌結(jié)束后,需迅速將排氣閥打開,等壓力表降為“0”時(shí)再取出培養(yǎng)基D.滅菌前一般需要將錐形瓶的棉塞用牛皮紙或報(bào)紙包扎好C發(fā)酵工程的滅菌方法有哪些?會用到哪些滅菌設(shè)備呢?借助發(fā)酵設(shè)備,使用一定的滅菌方法可以對發(fā)酵過程中使用到的培養(yǎng)皿等實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行進(jìn)行滅菌。發(fā)酵工程有哪些常用的無菌操作器具呢?化學(xué)試劑滅菌法;射線滅菌法;干熱滅菌法(電熱鼓風(fēng)干燥箱);濕熱滅菌法(高壓蒸汽滅菌鍋);過濾除菌法(空氣除菌設(shè)備)。一、發(fā)酵工程的無菌操作器具閱讀課本第18~19頁發(fā)酵工程的無菌操作器具的內(nèi)容,思考:常用的無菌操作器具有哪些?如何使用移液管量取一定體積的溶液?學(xué)生活動1.接種器具在無菌條件下將微生物接入培養(yǎng)基的操作過程稱為_____。在這一操作過程中,常用的接種器具包括__________________________等。接種玻璃涂布器、接種針、接種環(huán)2.轉(zhuǎn)移器具(1)作用用來準(zhǔn)確移取一定體積的溶液或分裝化學(xué)試劑的量器,一般用于轉(zhuǎn)移部分液體培養(yǎng)物、________________或分裝化學(xué)試劑。系列稀釋微生物(2)常用規(guī)格常用的移液管有1mL、5mL、10mL和25mL等規(guī)格。2.轉(zhuǎn)移器具移液管的使用(3)使用步驟取管吸液放出溶液以拇指及中指捏住管頸標(biāo)線以上的地方移液管插入待取溶液液面下約1cm出口尖端接觸接收溶液的器壁;將容器微傾斜,使移液管直立;放松食指,使溶液自由地順壁流下;待溶液停止流出后將移液管移出。(4)微量移液器當(dāng)取液量很少時(shí)(如0.1mL),常采用微量取液器。微量取液器可分為固定容量的和可調(diào)容量的兩種。3.超凈工作臺原理注意事項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)利用工作臺內(nèi)紫外線燈的殺菌作用,并通過空氣過濾器過濾確保工作臺內(nèi)空氣的無菌、無污染。超凈工作臺開機(jī)殺菌30min后,需先關(guān)掉紫外線燈,約10min后方可使用超凈工作臺。操作方便。在各種無菌操作和發(fā)酵工程產(chǎn)品的工廠化生產(chǎn)中,超凈工作臺是理想的無菌操作設(shè)備一種經(jīng)過空氣凈化而形成高潔凈操作環(huán)境的設(shè)備。二、微生物接種和傳代的無菌技術(shù)閱讀課本第19頁微生物接種和傳代的無菌技術(shù)的內(nèi)容,思考:(1)菌種是什么?(2)菌種保存的生理狀態(tài)是怎樣的?(3)菌種保存的條件和方法是什么?學(xué)生活動1.菌種保存和傳代的原理(1)菌種菌種是食用菌、工業(yè)菌、農(nóng)用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料,是從事發(fā)酵工程實(shí)踐及微生物學(xué)等學(xué)科研究的基本材料和重要資源。(2)微生物保存的生理狀態(tài)在人工創(chuàng)造的條件下,降低細(xì)胞的代謝水平,使細(xì)胞基本處于休眠狀態(tài),即微生物的生長繁殖受到抑制但又不至于死亡。(4)菌種保存的方法厭氧微生物接觸氧氣會受到抑制、損傷甚至死亡,常采用__________。

_________是常用的菌種傳代和低溫下保存菌種的方法。穿刺接種斜面接種(3)菌種保存的條件:____________________。低溫、干燥、真空將培養(yǎng)好的裝有新鮮菌種的試管用牛皮紙包扎好,置于4℃左右的冰箱中保藏,以減緩培養(yǎng)基的水分蒸發(fā),延長保存時(shí)間(4)菌種保存的方法挑選典型菌落接種到斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)冰箱保藏2~3個(gè)月重新接種

(1)傳代培養(yǎng)保藏法:包括斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)等,培養(yǎng)后于4~6℃冰箱內(nèi)保存。

(2)液體石蠟覆蓋保藏法:在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏時(shí)間。

(3)載體保藏法:將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法。

(4)甘油管藏法:利用微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理達(dá)到保藏目的。

(5)冷凍干燥保藏法:先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分。拓展1菌種保存的常見方法閱讀課本第20頁的內(nèi)容,初步認(rèn)識斜面接種和培養(yǎng)酵母菌的操作過程。學(xué)生活動準(zhǔn)備接種接種環(huán)滅菌試管口滅菌挑取少量菌體劃線接種培養(yǎng)酵母菌2.斜面接種和培養(yǎng)酵母菌①點(diǎn)燃酒精燈,取兩支盛有培養(yǎng)基的試管,其中一支內(nèi)有菌種,另一支為無菌的斜面培養(yǎng)基。(1)準(zhǔn)備接種②用一只手的拇指和其他四指夾住試管,使管口齊平,管內(nèi)培養(yǎng)基斜面向上。將接種環(huán)的環(huán)端和接種時(shí)可能進(jìn)入試管的部分放在酒精燈火焰上,來回灼燒多次,徹底滅菌。(2)接種環(huán)滅菌在火焰附近用握有接種環(huán)的手的小拇指、無名指、中指和掌心拔去兩支試管上的試管塞,迅速將試管口通過火焰2~3次,以殺滅試管口上的微生物。(3)試管口滅菌將滅過菌的接種環(huán)伸入菌種管,先將環(huán)部接觸培養(yǎng)基斜面頂端或其他無菌體的培養(yǎng)基部位使其冷卻,再輕輕挑取少許菌體。(4)挑取少許菌體在抽出接種環(huán)時(shí),注意其帶菌部位不要觸及管壁或通過火焰。注意:迅速將上述帶菌的接種環(huán)伸入待接種的試管中,在培養(yǎng)基斜面上由底部向上輕輕劃“Z”型折線,將菌種接種到培養(yǎng)基上。(5)劃線接種劃線時(shí)注意不要將培養(yǎng)基的表面劃破。注意:(6)培養(yǎng)將試管口與試管塞分別通過火焰2~3次,迅速塞緊試管。多次灼燒接種環(huán)確保無菌,冷卻后,放回原處。將接種過菌種的試管放在恒溫箱中(溫度調(diào)至28℃)培養(yǎng)24h。根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作流程進(jìn)行酵母菌的斜面接種和培養(yǎng)。在此過程中注意不到燙傷、劃傷。學(xué)生活動1.培養(yǎng)24h后,能觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是什么?如何將酵母菌培養(yǎng)在平板培養(yǎng)基上?能觀察到“Z”型折線分布的酵母菌菌落。

將無菌種的斜面培養(yǎng)基改為平板培養(yǎng)基,通過平板劃線法或稀釋涂布平板法可將酵母菌培養(yǎng)在平板培養(yǎng)基上。結(jié)果分析與評價(jià)2.在上述接種和培養(yǎng)過程中,我們注意到了哪些滅菌操作注意事項(xiàng)?

在酒精燈附近操作;灼燒接種環(huán),在火焰旁冷卻;將試管口通過火焰;接種完成后,再次灼燒接種環(huán)。

小結(jié)1.(多選)下列關(guān)于發(fā)酵工程中使用的無菌操作器具,敘述錯(cuò)誤的是()A.接種針常用于斜面接種或在平板培養(yǎng)基上劃線接種B.超凈工作臺是一種經(jīng)過空氣凈化而形成高潔凈操作環(huán)境的設(shè)備C.將移液管插入待取溶液液面下時(shí),伸越多取液越方便D.玻璃涂布器一般用于平板稀釋涂布接種AC2.為了保持菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保存,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時(shí)保存的方法B.甘油管藏法保存菌種時(shí)使用的甘油需滅菌C.臨時(shí)保藏菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D.對于需要長期保存的菌種,可以采用低溫-4℃保藏的方法D3.將酵母菌菌種從菌種試管接種到另一支試管的操作,下列說法有誤的一項(xiàng)是()A.整個(gè)接種過程都要在酒精燈的火焰附近進(jìn)行B.接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒之后即可伸入菌種試管挑取少許菌種C.菌種試管口和待接種的試管口接種前后都要通過酒精燈火焰2~3次D.帶菌的接種環(huán)應(yīng)在培養(yǎng)基斜面上由底部向上輕輕劃“Z”型折線B酵母菌是單細(xì)胞真菌,可以進(jìn)行出芽生殖,也可以進(jìn)行孢子生殖。其培養(yǎng)的最適pH為4.5~5.0,最適生長溫度一般為28℃~30℃,可以用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),也可以用固體培養(yǎng)基培養(yǎng),但要獲得純化的酵母菌菌落,則需通過固體培養(yǎng)基培養(yǎng)。思考:如何獲得純化的酵母菌菌落?平板劃線法一、平板劃線法閱讀課本第21頁的內(nèi)容,理解平板劃線法的概念和原理,并初步認(rèn)識平板劃線法的操作方法。學(xué)生活動把含有多種微生物的雜菌樣品,通過在特定的瓊脂平板表面劃線稀釋,從而獲得_________的方法。

將微生物樣品在瓊脂平板表面多次做___________的稀釋劃線,經(jīng)過這樣的操作可得到________________________。經(jīng)過平板培養(yǎng)后,會形成部分__________________________的純種菌落。1.概念單個(gè)菌落“由點(diǎn)到線”較多獨(dú)立分布的單個(gè)微生物由單個(gè)微生物生長、繁殖而成2.原理平板劃線法分離和培養(yǎng)酵母菌在一個(gè)倒有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿的皿底外側(cè)面中央用記號筆畫一直線,再在此線中間處畫一垂直線,將培養(yǎng)皿分成三個(gè)區(qū)域:第1區(qū)域、第2區(qū)域、第3區(qū)域,分別標(biāo)上“1”“2”“3”字樣。123接種劃線時(shí),將帶有酵母菌樣品的接種環(huán),在培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)基的第1區(qū)域劃線,然后再從第1區(qū)域劃到第2區(qū)域,從第2區(qū)域劃到第3區(qū)域(在第2次、第3次劃線前,接種環(huán)需過火滅菌)。在固體培養(yǎng)基表面完成多次“由點(diǎn)到線”的逐步稀釋。劃完線后蓋上皿蓋,倒置培養(yǎng)。接種和劃線操作需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。通過培養(yǎng)可以得到由單個(gè)酵母菌增殖而形成的菌落。灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作,作第三、四、五次劃線。注意不要將最后一次的劃線和第一次的劃線相連。(1)五區(qū)劃線法(2)幾種劃線方法示意圖拓展平板劃線的其他方法二、通過平板劃線法獲得純化的酵母菌菌落嘗試通過平板劃線法獲得純化的酵母菌菌落。(一)目的要求(二)實(shí)驗(yàn)原理

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基能滿足酵母菌生長、繁殖的營養(yǎng)需要,利用前面實(shí)驗(yàn)中配制的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基制作平板。

平板劃線法是實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行微生物分離和純化的常用方法之一。在制作好的酵母菌培養(yǎng)基平板上,采用無菌操作技術(shù)及平板劃線法能夠獲得純化的酵母菌菌落。酵母菌樣本(菌種);接種環(huán)、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋;馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。(三)實(shí)驗(yàn)器材和試劑(四)實(shí)驗(yàn)步驟1.培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿滅菌使用哪種滅菌方法和設(shè)備進(jìn)行滅菌?用牛皮紙包扎已配制的培養(yǎng)基已包裝的培養(yǎng)皿高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌法將滅好菌的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿取出,置于操作臺上,待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí),在酒精燈火焰附近倒平板。2.倒平板①拔出錐形瓶的棉塞。②將瓶口迅速通過火焰。③將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,將培養(yǎng)基(10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,立即蓋上皿蓋。④等培養(yǎng)基冷卻凝固后,將培養(yǎng)皿倒過來放置。操作將滅好菌的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿取出,置于操作臺上,待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板操作。圖1打開瓶塞圖2灼燒瓶口滅菌圖3倒培養(yǎng)基等平板冷卻凝固后,將平板倒置(皿蓋在下,皿底在上)備用。在酒精燈火焰旁一只手拿著裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,另一只手拔出瓶塞(圖1),使瓶口迅速通過火焰2~3次(圖2),并轉(zhuǎn)動瓶口,確保瓶口被滅菌。再取無菌培養(yǎng)皿,在火焰旁用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(稍大于錐形瓶瓶口),將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中(圖3)。

注意事項(xiàng)倒平板的注意事項(xiàng)待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板操作。要使錐形瓶的瓶口通過酒精燈火焰,通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。倒平板時(shí),要用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,不要完全打開,以免雜菌污染培養(yǎng)基。整個(gè)操作過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,避免雜菌污染。1.倒平板時(shí),為什么在酒精燈火焰旁操作?酒精燈火焰旁是無菌區(qū)域,可以避免周圍環(huán)境中的微生物的污染。2.倒平板時(shí)為什么要使錐形瓶的瓶口通過火焰?通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后為何要倒置?防止皿蓋上的冷凝水珠落入培養(yǎng)基,避免培養(yǎng)基中的水分過快蒸發(fā)。易錯(cuò)辨析平板劃線法操作的注意事項(xiàng)劃線用力要大小適當(dāng),防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌,劃線操作結(jié)束后仍需灼燒接種環(huán)。灼燒接種環(huán)之后,要等其冷卻后才能挑取菌體,以免溫度太高殺死菌種。三區(qū)劃線示意圖培養(yǎng)獲得的酵母菌菌落在做第二次以及其后的劃線操作時(shí),總是從上一次劃線的末端開始劃線,使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的菌落。多次劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。接種和劃線操作需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。在平板上劃線,然后置于28℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。3.劃線和培養(yǎng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作流程進(jìn)行倒平板和劃線。在此過程中注意不到燙傷、劃傷,操作要規(guī)范。學(xué)生活動每次劃線前后灼燒接種環(huán)的目的是什么?灼燒時(shí)間目的第一次劃線前每次劃線前劃線結(jié)束后殺死接種環(huán)上可能存在的微生物,防止外來微生物干擾殺死上一次劃線結(jié)束后接種環(huán)殘留的菌種,使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘存的菌種,避免菌種污染環(huán)境和感染操作者1.在接種酵母菌的培養(yǎng)基上,你是否觀察到了單菌落?如果你觀察到了不同形態(tài)的菌落,可能是哪些原因引起的?如果觀察到單菌落,培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小等基本一致,說明接種成功。若培養(yǎng)基出現(xiàn)了其他菌落,說明接種過程中,無菌操作還未達(dá)到要求,可能是菌種不純、培養(yǎng)基滅菌不徹底或?qū)嶒?yàn)過程中被雜菌污染。(五)結(jié)果分析與評價(jià)2.若培養(yǎng)基出現(xiàn)了其他菌落,如何檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染?將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng),若出現(xiàn)了菌落,說明培養(yǎng)基被雜菌污染。倒平板時(shí)都有哪些操作是為了避免雜菌污染?1.錐形瓶的瓶口通過火焰;2.在酒精燈附近操作;3.培養(yǎng)皿只露出一個(gè)小縫;4.平板冷凝后倒置。學(xué)生活動平板劃線的過程中有哪些操作是為了避免雜菌污染?1.灼燒接種環(huán),在火焰旁冷卻;2.將試管口通過火焰;3.在火焰附近將培養(yǎng)皿開一條縫;4.每次接種完灼燒接種環(huán)。接種環(huán)滅菌第1區(qū)劃線接種環(huán)滅菌第2區(qū)劃線接種環(huán)滅菌第3區(qū)劃線接種環(huán)滅菌思考平板劃線的基本操作和注意事項(xiàng)。學(xué)生活動1.下列關(guān)于微生物的實(shí)驗(yàn)操作的敘述,正確的是(

)A.配制細(xì)菌培養(yǎng)基過程中,需要在倒平板時(shí)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pHB.配制固體培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂,其作用是為微生物生長提供碳源C.平板劃線法接種時(shí),每次劃線之前都需要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用完的培養(yǎng)基可以直接丟棄C2.(多選)微生物接種的方法很多,平板劃線法是常用的一種。如圖是平板劃線示意圖,劃線的順序?yàn)棰佗冖邰?。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

A.劃線操作時(shí),將蘸有菌種的接種環(huán)插入培養(yǎng)基B.平板劃線后培養(yǎng)微生物時(shí)要倒置培養(yǎng)C.可以將第④區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連D.在第②~④區(qū)域中劃線前都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌AC3.有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是(

)A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落造成污染C.倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿的蓋拿開,以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿D.檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)C同學(xué)們,通過這節(jié)課的學(xué)習(xí),你有什么收獲呢?謝謝大家愛心.誠心.細(xì)心.耐心,讓家長放心.孩子安心。第三節(jié)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和產(chǎn)品第一章發(fā)酵工程使用一定濃度的食鹽溶液腌漬各種鮮嫩的蔬菜,再經(jīng)自然發(fā)酵而成的腌制品就是我們熟知的泡菜。泡菜的制作真這么簡單嗎?大家想通過自己制作泡菜來認(rèn)識傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和產(chǎn)品嗎?泡菜的制作流程選擇原料修整、洗滌、晾曬、切分成條狀或片狀稱取食鹽配制鹽水泡菜鹽水加入調(diào)味料,裝壇發(fā)酵成品一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的本質(zhì)是微生物的天然發(fā)酵絕大多數(shù)情況下,微生物是各種個(gè)體微小、肉眼不易看見、結(jié)構(gòu)相對簡單的生物的總稱。1.微生物是微小生物的總稱思考:許多人認(rèn)為,所有的微生物都是肉眼看不見的生物。你能通過實(shí)例質(zhì)疑這樣的觀點(diǎn)嗎?新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)3D示意圖幽門螺桿菌酵母菌霉菌蘑菇1.微生物是微小生物的總稱微生物細(xì)胞型微生物非細(xì)胞型微生物:原核微生物(細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、衣原體、支原體等)真核微生物(酵母菌、霉菌、大型真菌等)病毒(DNA病毒、RNA病毒等)2.我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)源遠(yuǎn)流長幾千年前,古人就已經(jīng)發(fā)明了制曲釀酒的技術(shù)。我們的祖先很早就已經(jīng)掌握了制醋和制醬的方法。在農(nóng)業(yè)上,我們的祖先也掌握了制作堆肥和廄肥的技術(shù)。由于古人沒有認(rèn)識到微生物與發(fā)酵的確切關(guān)系,所以傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)基本都是發(fā)酵經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)。二、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的食品傳統(tǒng)發(fā)酵是利用天然微生物的代謝活動制造或生產(chǎn)某些產(chǎn)品的過程。1.果酒的制作

釀葡萄酒果酒是以各種果汁為原料,通過微生物發(fā)酵而制成的含有酒精的飲料,包括葡萄酒、蘋果酒和梨酒等。葡萄酒是以葡萄為原料釀造而成的,其酒精含量約為10%~12%。由于釀造工藝的不同,葡萄酒又可分為紅葡萄酒(葡萄汁和葡萄皮渣混合釀造)和白葡萄酒(僅用葡萄汁釀造)。果酒的制作

酶酶果酒的制作

有氧條件下,酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖:C6H12O6+6O2+6H2O→

6CO2+6H2O+能量酶無氧條件下,酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精:C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量

酶精心制作

必出良品樣,也可能因討厭一位老師而討厭學(xué)習(xí)。一個(gè)被學(xué)生喜歡的老師,其教育效果總是超出一般教師。無論中學(xué)生還是小學(xué)生,他們對自己喜歡的老師都會有一些普遍認(rèn)同的標(biāo)準(zhǔn),諸如尊重和理解學(xué)生,寬容、不傷害學(xué)生自尊心,平等待人、說話辦事公道、有耐心、不輕易發(fā)脾氣等。教師要放下架子,把學(xué)生放在心上?!岸紫律碜雍蛯W(xué)生說話,走下講臺給學(xué)生講課”;關(guān)心學(xué)生情感體驗(yàn),讓學(xué)生感受到被關(guān)懷的溫暖;自覺接受學(xué)生的評價(jià),努力做學(xué)生喜歡的老師。教師要學(xué)會寬容,寬容學(xué)生的錯(cuò)誤和過失,寬容學(xué)生一時(shí)沒有取得很大的進(jìn)步。蘇霍姆林斯基說過:有時(shí)寬容引起的道德震動,比懲罰更強(qiáng)烈。每當(dāng)想起葉圣陶先生的話:你這糊涂的先生,在你教鞭下有瓦特,在你的冷眼里有牛頓,在你的譏笑里有愛迪生。身為教師,就更加感受到自己職責(zé)的神圣和一言一行的重要。善待每一個(gè)學(xué)生,做學(xué)生喜歡的老師,師生雙方才會有愉快的情感體驗(yàn)。一個(gè)教師,只有當(dāng)他受到學(xué)生喜愛時(shí),才能真正實(shí)現(xiàn)自己的最大價(jià)值。義務(wù)教育課程方案和課程標(biāo)準(zhǔn)(2022年版)簡介新課標(biāo)的全名叫做《義務(wù)教育課程方案和課程標(biāo)準(zhǔn)(2022年版)》,文件包括義務(wù)教育課程方案和16個(gè)課程標(biāo)準(zhǔn)(2022年版),不僅有語文數(shù)學(xué)等主要科目,連勞動、道德這些,也有非常詳細(xì)的課程標(biāo)準(zhǔn)?,F(xiàn)行義務(wù)教育課程標(biāo)準(zhǔn),是2011年制定的,離現(xiàn)在已經(jīng)十多年了;而課程方案最早,要追溯到2001年,已經(jīng)二十多年沒更新過了,很多內(nèi)容,確實(shí)需要根據(jù)現(xiàn)實(shí)情況更新。所以這次新標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施,首先是對老課標(biāo)的一次升級完善。另外,在雙減的大背景下頒布,也能體現(xiàn)出,國家對未來教育改革方向的規(guī)劃。課程方案課程標(biāo)準(zhǔn)是啥?課程方案是對某一學(xué)科課程的總體設(shè)計(jì),或者說,是對教學(xué)過程的計(jì)劃安排。簡單說,每個(gè)年級上什么課,每周上幾節(jié),老師上課怎么講,課程方案就是依據(jù)。課程標(biāo)準(zhǔn)是規(guī)定某一學(xué)科的課程性質(zhì)、課程目標(biāo)、內(nèi)容目標(biāo)、實(shí)施建議的教學(xué)指導(dǎo)性文件,也就是說,它規(guī)定了,老師上課都要講什么內(nèi)容。課程方案和課程標(biāo)準(zhǔn),就像是一面旗幟,學(xué)校里所有具體的課程設(shè)計(jì),都要朝它無限靠近。所以,這份文件的出臺,其實(shí)給學(xué)校教育定了一個(gè)總基調(diào),決定了我們孩子成長的走向。各門課程基于培養(yǎng)目標(biāo),將黨的教育方針具體化細(xì)化為學(xué)生核心素養(yǎng)發(fā)展要求,明確本課程應(yīng)著力培養(yǎng)的正確價(jià)值觀、必備品格和關(guān)鍵能力。進(jìn)一步優(yōu)化了課程設(shè)置,九年一體化設(shè)計(jì),注重幼小銜接、小學(xué)初中銜接,獨(dú)立設(shè)置勞動課程。與時(shí)俱進(jìn),更新課程內(nèi)容,改進(jìn)課程內(nèi)容組織與呈現(xiàn)形式,注重學(xué)科內(nèi)知識關(guān)聯(lián)、學(xué)科間關(guān)聯(lián)。結(jié)合課程內(nèi)容,依據(jù)核心素養(yǎng)發(fā)展水平,提出學(xué)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),引導(dǎo)和幫助教師把握教學(xué)深度與廣度。通過增加學(xué)業(yè)要求、教學(xué)提示、評價(jià)案例等,增強(qiáng)了指導(dǎo)性。教育部將組織宣傳解讀、培訓(xùn)等工作,指導(dǎo)地方和學(xué)校細(xì)化課程實(shí)施要求,部署教材修訂工作,啟動一批課程改革項(xiàng)目,推動新修訂的義務(wù)教育課程有效落實(shí)。

本教學(xué)課件是采用MicrosoftPowerPoint軟件平臺精心設(shè)計(jì)與開發(fā)的,可在Windows操作系統(tǒng)環(huán)境下流暢運(yùn)行。作為一款現(xiàn)代化的多媒體教學(xué)輔助工具,本課件充分整合了多種媒體元素,包括文字、符號、圖形、圖像、動畫及聲音等,形成了一個(gè)內(nèi)容豐富、形式多樣的數(shù)字化教學(xué)資源。部分內(nèi)容取材于網(wǎng)絡(luò),如有侵權(quán),請聯(lián)系刪除!

果酒的制作

在葡萄酒等果酒的生產(chǎn)中,還廣泛使用果膠酶(用以破壞細(xì)胞壁)等酶制劑。果膠酶的應(yīng)用有利于葡萄汁的榨取,還能使酒變得清澈透明。思考:根據(jù)植物細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和組成成分的知識,你能分析使用果膠酶可以使酒變清澈的原因嗎?果酒的制作過程清洗清洗葡萄時(shí),連果柄一起在清水中輕輕漂洗,避免損傷葡萄果皮榨汁把沖洗后瀝干的葡萄切成小塊或連皮榨成葡萄汁裝瓶將葡萄汁移入有蓋的、潔凈的大廣口瓶中,發(fā)酵液總量不要超過廣口瓶體積的2/3,蓋上瓶蓋發(fā)酵溫度控制在18~25℃,每隔一段時(shí)間輕輕旋松瓶蓋放氣葡萄皮的色素進(jìn)入葡萄汁時(shí),溶液呈現(xiàn)深紅,大約10~12d完成制作2.果醋的制作

果醋的釀制是利用醋酸菌的發(fā)酵進(jìn)行的。醋酸菌是好氧細(xì)菌,因此可以取適量葡萄酒并加入新鮮葡萄汁在氧氣充足的條件下制作果醋。醋酸菌是生產(chǎn)果醋的主要發(fā)酵菌。在果酒基礎(chǔ)上的果醋發(fā)酵,是一個(gè)有氧發(fā)酵的過程,在充分供氧的條件下,醋酸菌能將酒精氧化為醋酸。

C2H5OH+O2→

CH3COOH+H2O+能量

酶水果的發(fā)酵加工———制作果酒和果醋(一)制作葡萄酒閱讀教材30頁果酒制作內(nèi)容,思考:(1)在酵母菌的自然發(fā)酵過程中,起發(fā)酵作用的酵母菌的來源?(2)為什么發(fā)酵液總量不要超過廣口瓶體積的2/3?葡萄皮表面的野生型酵母菌。先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,快速繁殖,耗盡O2后再進(jìn)行酒精發(fā)酵,防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液的溢出。水果的發(fā)酵加工———制作果酒和果醋(一)制作葡萄酒閱讀教材30頁果酒制作內(nèi)容,思考:(3)在釀制葡萄酒的過程中,為什么每隔一段時(shí)間就要旋松瓶蓋放氣呢?(4)如何鑒定是否有酒精產(chǎn)生?放出酵母菌細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的二氧化碳。使用酸性重鉻酸鉀檢測,觀察是否變?yōu)榛揖G色。閱讀教材30頁果醋制作內(nèi)容,思考:(1)制作葡萄醋時(shí)加入適量新鮮葡萄汁的原因是什么?(2)如何鑒定是否有醋酸產(chǎn)生?(3)葡萄酒和葡萄醋的制作原理有哪些異同點(diǎn)?水果的發(fā)酵加工———制作果酒和果醋(一)制作葡萄醋新鮮葡萄汁含有醋酸菌。聞味、顯微鏡下觀察醋酸菌等。果酒和果醋制作過程比較比較項(xiàng)目制作果酒制作果醋菌種酵母菌醋酸菌發(fā)酵原理操作選擇新鮮材料清洗,制成果汁,裝瓶發(fā)酵,發(fā)酵液總量不超過廣口瓶體積的2/3。先制作果酒,再用果酒制作果醋。條件溫度一般是18℃~25℃;前期有氧,后期無氧;時(shí)間約10~12d。溫度為30℃~35℃;始終有充足的氧氣;時(shí)間約7~8d。

圖中①為

:用來充入氧氣(無菌空氣)。②為排氣口:在酒精發(fā)酵時(shí)排出的是酒精發(fā)酵產(chǎn)生的

,在醋酸發(fā)酵時(shí)排出的是_________________________________;長而彎曲的膠管的作用是_______________________。③為出料口:便于取樣檢測,及時(shí)監(jiān)測發(fā)酵進(jìn)行的情況。充氣口CO2剩余的空氣和醋酸菌代謝產(chǎn)生的CO2防止空氣中微生物的進(jìn)入思考:某同學(xué)設(shè)計(jì)了一種簡易的發(fā)酵裝置,如下圖所示。果酒和果醋制作成功的關(guān)鍵點(diǎn)項(xiàng)目說明材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄,榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗,除去枝梗,以防葡萄汁流失及污染。防止發(fā)酵液被污染①榨汁機(jī)和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈,且發(fā)酵瓶要進(jìn)行消毒;②清洗葡萄時(shí)要先清洗后除枝梗;③發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管而不能用直管。歸納總結(jié)項(xiàng)目說明發(fā)酵條件的控制①葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留約1/3的空間,目的是先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,快速繁殖,耗盡O2后再進(jìn)行酒精發(fā)酵,防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液的溢出;②嚴(yán)格控制溫度:18~25℃利于酒精發(fā)酵;30~35℃利于醋酸發(fā)酵;③充氣:酒精發(fā)酵為無氧發(fā)酵,需封閉充氣口;醋酸發(fā)酵為有氧發(fā)酵,需經(jīng)充氣口充氣。3.酸奶的制作

發(fā)酵過程中產(chǎn)生乳酸的細(xì)菌稱為乳酸菌。酸奶一般是以牛奶為原料、乳酸菌參與發(fā)酵制作而成的奶制品。思考:你知道酸奶和乳酸菌飲料的區(qū)別嗎?酸奶既保留了牛奶的主要營養(yǎng)成分,又因?yàn)楹写罅康娜樗峋行碌纳碜饔谩C刻鞌z入適量的酸奶,可以抑制有害菌在腸道中的生長繁殖,從而改善腸道環(huán)境,維持腸道微生物的相對平衡。(三)制作酸奶閱讀教材31頁酸奶制作內(nèi)容,思考:(1)酸奶的制作原理?

以牛奶為主要原料,接入一定量的菌種或市售酸奶(其中含有乳酸菌)。隨著乳酸菌在牛奶中生長繁殖,牛奶中的乳糖變?yōu)槿樗幔橐旱膒H隨之下降,乳酪蛋白發(fā)生凝集,牛奶成為酸奶。(三)制作酸奶閱讀教材31頁酸奶制作內(nèi)容,思考:(2)酸奶制作時(shí),涉及哪些無菌技術(shù)?(3)為什么分裝后,牛奶要基本裝滿容器,使容器上部留出的空隙盡可能?。磕唐康热萜鞯臏缇?,牛奶的消毒。乳酸菌是厭氧菌。酸奶的制作過程滅菌將奶瓶等器皿放在不銹鋼鍋中,用沸水煮15min。消毒將牛奶倒入滅菌后的奶瓶中,倒入量不要超過奶瓶容積的2/3,再將牛奶加熱至90℃,保溫5min,或?qū)⑴D讨糜?0℃恒溫水浴箱中15min。接種加熱滅菌后,待原料奶的溫度下降到43℃~45℃時(shí),向原料奶中加入市售酸奶,接種量為原料奶量的5%~10%,用玻璃棒攪拌均勻。分裝如需制備更小容量的酸奶,可先將牛奶分裝至容積適當(dāng)?shù)娜萜髦校龠M(jìn)行發(fā)酵。這樣制成的酸奶可以呈凝乳狀態(tài)。發(fā)酵將分裝好的牛奶置于恒溫箱中進(jìn)行發(fā)酵;溫度:40℃~43℃,培養(yǎng)3~4h,或30℃培養(yǎng)18~20h。冷卻發(fā)酵結(jié)束時(shí),將酸奶取出,迅速將其冷卻到10℃以下,使酸奶中的乳酸菌停止代謝,以防止酸度過高而影響口感。傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中三種常用菌種的比較項(xiàng)目酵母菌醋酸菌乳酸菌生物學(xué)分類真核生物原核生物原核生物代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型發(fā)酵條件前期需氧,后期不需氧一直需氧無氧溫度18~25℃30~35℃室溫生產(chǎn)應(yīng)用釀酒、發(fā)面釀醋制作酸奶、泡菜1.某同學(xué)在線提交了在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋的實(shí)驗(yàn)報(bào)告,他的做法錯(cuò)誤的是() A.選擇新鮮的葡萄略加沖洗,除去枝梗后榨汁 B.將玻璃瓶用酒精消毒后,裝滿葡萄汁 C.酒精發(fā)酵期間,根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放氣 D.酒精發(fā)酵后去除瓶蓋,蓋一層紗布,再進(jìn)行醋酸發(fā)酵課堂檢測B2.(多選)如圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是(

)A.改變通入氣體種類,可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響B(tài).果酒發(fā)酵中期通入氮?dú)猓湍妇鷮挠醒鹾粑D(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸C.果醋的發(fā)酵周期與實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度密切相關(guān)D.氣體入口與氣體出口可以交換使用ABCBD3.(多選)下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述,正確的是(

)A.利用乳酸菌制作酸奶過程中,先通氣培養(yǎng),后密封發(fā)酵B.家庭制作果酒、果醋通常都不是純種發(fā)酵C.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低,果酒制作過程中情況相反D.醋酸菌在缺乏糖源時(shí),可以將酒精轉(zhuǎn)化為乙醛,再將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸4.下列關(guān)于果酒和果醋制作過程的敘述,錯(cuò)誤的是(

)A.在變酸果酒表面所觀察到的菌膜可能是醋酸菌B.制作果酒和果醋時(shí)都應(yīng)用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精對發(fā)酵瓶消毒C.果酒和果醋的發(fā)酵菌種不同,但代謝類型相同D.果酒和果醋的制作可用同一裝置,但需控制不同發(fā)酵條件C5.許多食品的生產(chǎn)需要借助微生物發(fā)酵過程,下列敘述正確的是(

)A.利用乳酸菌可將含較多抗生素的牛奶制作成含有抗生素的酸奶B.在糖源充足時(shí),醋酸菌可以利用乙醇在厭氧條件下生產(chǎn)醋酸C.酸奶制作時(shí)要保證有氧條件D.控制好溫度、pH既有利于目的菌繁殖也可抑制雜菌生長D6.下面是古代家庭釀酒的具體操作過程:先將米煮熟,待冷卻至30℃時(shí),加少許水和一定量的酒釀(做實(shí)驗(yàn)時(shí)用酵母菌菌種),與米飯混勻后置于一瓷壇內(nèi),并在米飯中間挖一個(gè)洞,加蓋后置于適當(dāng)?shù)牡胤奖兀?8℃),一段時(shí)間后即成?,F(xiàn)請你從以下幾個(gè)方面對其發(fā)酵過程做一個(gè)簡單的分析。

(1)先將米煮熟的目的是_____________,在米飯中間挖一個(gè)洞的目的是增加______的含量,保證酵母菌在一開始時(shí)就進(jìn)行__________,從而有利于酵母菌數(shù)量的增加。殺滅其他雜菌氧氣有氧呼吸(2)在家庭釀酒過程中有酒精產(chǎn)生,可用_________來檢驗(yàn),在酸性條件下,其與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)_____色。(3)寫出酵母菌無氧呼吸的反應(yīng)式:___________________________________。(4)在具體操作過程中,要根據(jù)米的多少加適量的酒釀,如把握不住,寧多而不能少,如果加少了將產(chǎn)生什么后果?為什么?重鉻酸鉀灰綠不能得到酒精。菌種太少,難以造成無氧環(huán)境,其他微生物會大量繁殖,造成米飯腐敗

C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量

酶________________________________________________________________________________。豆制品的發(fā)酵加工——制作腐乳(一)參與腐乳制作的微生物主要毛霉青霉酵母曲霉課外拓展分類:代謝類型:生殖(主要方式):分布:絲狀真菌(具發(fā)達(dá)的白色菌絲)關(guān)于毛霉孢子生殖異養(yǎng)需氧型常見于土壤、水果、蔬菜、谷物上接種孢子制作好腐乳坯后,噴灑毛霉孢子懸液,使每塊腐乳坯沾上毛霉孢子懸液。培養(yǎng)與晾花(1)培養(yǎng)溫度:15-18℃(2)晾花:培養(yǎng)44h~48h后,取出籠格,使熱量和水分散失,腐乳坯迅速冷卻(3)晾花目的:增強(qiáng)酶和霉味的作用壓壇與裝壇(1)操作過程:分開菌絲→涂抹成皮衣→裝壇→撒鹽→壓坯(2)食鹽的作用:析出水分(3)食鹽的加入方法:擺滿一層后稍稍壓平撒一層鹽,使含鹽量平均約為16%(二)工業(yè)生產(chǎn)腐乳的過程注意點(diǎn):防止雜菌污染1.長毛時(shí)的溫度2.加鹽腌制、鹵湯中的酒精、辛香料3.裝瓶過程中操作要迅速小心4.對用具的消毒滅菌5.裝瓶后用膠帶密封6.密封時(shí)用酒精燈消滅瓶口雜菌同學(xué)們,通過這節(jié)課的學(xué)習(xí),你有什么收獲呢?謝謝大家愛心.誠心.細(xì)心.耐心,讓家長放心.孩子安心。第四節(jié)發(fā)酵工程及其應(yīng)用第一章發(fā)酵工程事實(shí):1.大腸桿菌是原核生物,細(xì)胞擬核內(nèi)有一個(gè)環(huán)狀的雙鏈DNA分子。細(xì)胞分裂前,DNA分子會進(jìn)行復(fù)制。分裂時(shí)一般是以簡單的二分裂方式進(jìn)行無性繁殖的。2.在適宜條件下,大腸桿菌分裂一次僅需要20~30min。3.實(shí)際上,大腸桿菌在生長和繁殖過程中,會消耗大量的營養(yǎng)物質(zhì),環(huán)境pH也會發(fā)生改變。思考:1.計(jì)算:人的腸道環(huán)境非常適合大腸桿菌的生長和繁殖。利用計(jì)算器計(jì)算一個(gè)大腸桿菌在人的腸道中24h后,理論上能達(dá)到的數(shù)量。2.推理:大腸桿菌是一類細(xì)菌?;谌粘I钪卸喾N細(xì)菌影響我們生活的實(shí)例(如肉湯腐敗),推理細(xì)菌除了繁殖快之外,可能還會具有的特征。微生物還有哪些特定功能呢?這些特定功能又是如何被發(fā)酵工程所利用的呢?4722×1021一、發(fā)酵工程利用了微生物的特定功能閱讀教材35頁,歸納微生物的特定功能和特點(diǎn),并舉例說明這些特定功能和特點(diǎn)在發(fā)酵工程中的用處。微生物具有生長旺盛、繁殖快的特定功能。在發(fā)酵工程液體培養(yǎng)中,接種后細(xì)菌細(xì)胞數(shù)量會呈幾何級數(shù)增長。微生物吸收多、轉(zhuǎn)化快的特定功能為發(fā)酵工程產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物提供了保障。微生物具有適應(yīng)性強(qiáng)、易變異的特定功能。這為通過育種大幅度地提高菌種的生產(chǎn)性能提供了保障。微生物還具有種類多、分布廣的特點(diǎn)。微生物種類繁多不僅體現(xiàn)在物種的種類上,還體現(xiàn)在微生物的生理代謝類型上??筛鶕?jù)需要在發(fā)酵工程中將這些特定功能加以利用。二、發(fā)酵工程的一般過程采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段,利用微生物或動植物細(xì)胞的特定功能,在人工控制的環(huán)境下生產(chǎn)滿足人類需求的特定產(chǎn)品等的工程技術(shù)。發(fā)酵工程不再是一種僅僅利用微生物代謝活動進(jìn)行生產(chǎn)的簡單工藝,而是一個(gè)綜合了微生物學(xué)、化學(xué)工程、基因工程、細(xì)胞工程、機(jī)械工程和計(jì)算機(jī)軟硬件工程的多學(xué)科綜合工程。發(fā)酵工程

發(fā)酵工程一般包括發(fā)酵原料的預(yù)處理、發(fā)酵培養(yǎng)基的配制、菌種選育和擴(kuò)大培養(yǎng)、發(fā)酵生產(chǎn)和產(chǎn)物的分離與提純等主要步驟。1.發(fā)酵原料的預(yù)處理

對原料進(jìn)行粉碎、蒸煮,水解成葡萄糖等供微生物利用。

2.發(fā)酵培養(yǎng)基的配制添加水、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì),調(diào)節(jié)碳氮比和pH等。

3.菌種選育和擴(kuò)大培養(yǎng)

選育優(yōu)良的菌種是發(fā)酵工程的首要條件。自然選育誘變育種基因工程育種在菌種的篩選過程中,一般都要研究其最適發(fā)酵條件。這樣,發(fā)酵工程可根據(jù)目標(biāo)菌種的新陳代謝特性,選擇不同的方式進(jìn)行發(fā)酵,確定大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)過程中的控制條件。3.菌種選育和擴(kuò)大培養(yǎng)

將菌種擴(kuò)大培養(yǎng)才能滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要。在大規(guī)模的發(fā)酵生產(chǎn)中,需要將選育出的優(yōu)良菌種經(jīng)過多次擴(kuò)大培養(yǎng),讓它們達(dá)到一定數(shù)量再進(jìn)行接種,這樣可以縮短菌種在發(fā)酵罐中發(fā)酵的時(shí)間。種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)4.發(fā)酵生產(chǎn)

發(fā)酵罐工業(yè)上用來進(jìn)行微生物發(fā)酵的裝置,通過控制發(fā)酵罐中的相關(guān)條件,為微生物提供一個(gè)最有利于產(chǎn)物合成及積累的培養(yǎng)環(huán)境。4.發(fā)酵生產(chǎn)

(1)要對設(shè)備和培養(yǎng)基嚴(yán)格滅菌;(2)發(fā)酵過程中需要隨時(shí)取樣,檢測培養(yǎng)液中的細(xì)菌數(shù)目、產(chǎn)物濃度等,以了解發(fā)酵進(jìn)程;(3)要及時(shí)添加必需的培養(yǎng)基組分,以滿足菌種的營養(yǎng)需求;(4)要嚴(yán)格控制溫度、pH、溶氧等環(huán)境因素。發(fā)酵條件5.產(chǎn)物的分離和提純

發(fā)酵產(chǎn)品包括微生物的代謝產(chǎn)物或菌體。通過過濾發(fā)酵液,離心去除固體雜質(zhì),采用蒸餾法等進(jìn)一步純化目標(biāo)產(chǎn)品。發(fā)酵工程的基本過程總結(jié)原料預(yù)培養(yǎng)培養(yǎng)基配制滅菌無菌空氣的制備菌種的選育和擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵生產(chǎn)產(chǎn)品的分離和提純

現(xiàn)在,發(fā)酵工程已經(jīng)發(fā)展到可以利用計(jì)算機(jī)對發(fā)酵過程進(jìn)行自動調(diào)節(jié)控制的階段。氧含量的調(diào)節(jié):通過通氣量和攪拌的速度來實(shí)現(xiàn)。溫度的調(diào)節(jié):通過發(fā)酵罐夾層或蛇形管中的冷卻水的熱交換作用來實(shí)現(xiàn)。pH的調(diào)節(jié):通過在培養(yǎng)基中添加酸或堿等來實(shí)現(xiàn)。根據(jù)發(fā)酵過程的操作方式不同,可將工業(yè)發(fā)酵分為分批發(fā)酵和連續(xù)發(fā)酵等。(1)分批發(fā)酵:一次投料、一次接種、一次收獲的間歇發(fā)酵方式。6.發(fā)酵工程的種類

分析:嘗試推測單細(xì)胞微生物生長曲線形成的原因。

設(shè)計(jì):嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)利用青霉生產(chǎn)青霉素的分批發(fā)酵生產(chǎn)流程(用簡圖表示)。學(xué)生活動延滯期:細(xì)菌等微生物在剛接種到一個(gè)新的環(huán)境之后,需要經(jīng)歷一個(gè)短暫的適應(yīng)時(shí)期。延滯期內(nèi)微生物一般不增殖。對數(shù)期:此時(shí)細(xì)胞分裂增殖旺盛,活微生物數(shù)量增長速率最高。隨著生長速率和數(shù)量的增加,微生物濃度呈幾何級數(shù)增長。由于此時(shí)微生物的代謝活性高、生命力強(qiáng),在生產(chǎn)上常作為“種子”,是科學(xué)研究中理想的實(shí)驗(yàn)材料。穩(wěn)定期:微生物的生長速率維持相對穩(wěn)定,此時(shí)如能及時(shí)補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)或分離代謝產(chǎn)物,改善培養(yǎng)條件,可延長穩(wěn)定期。衰亡期:隨著培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的消耗,代謝產(chǎn)物的積累和pH等環(huán)境條件的變化,微生物生長受到影響,生長速率降低,死亡速率逐步增加,活的微生物量逐步減少,此時(shí)微生物代謝活性降低,呈現(xiàn)衰老和自溶現(xiàn)象。分析:嘗試推測單細(xì)胞微生物生長曲線形成的原因。設(shè)計(jì):嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)利用青霉生產(chǎn)青霉素的分批發(fā)酵生產(chǎn)流程。從自然界分離青霉菌種基因工程誘變育種生產(chǎn)用菌種擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵罐培養(yǎng)基配制青霉素原料接種滅菌

(2)連續(xù)發(fā)酵:

在一個(gè)培養(yǎng)基可流動的裝置(如發(fā)酵罐)中,以一定的速率不斷地放出老的培養(yǎng)基和代謝產(chǎn)物,同時(shí)不斷添加新的培養(yǎng)基和調(diào)節(jié)相關(guān)發(fā)酵條件(如pH),使發(fā)酵過程保持相對穩(wěn)定。簡化了發(fā)酵罐的多次滅菌、清洗、出料等步驟,縮短了發(fā)酵周期,提高了設(shè)備的利用率和單位時(shí)間產(chǎn)量等。方式單罐連續(xù)發(fā)酵和多罐連續(xù)發(fā)酵等方式。優(yōu)點(diǎn)三、發(fā)酵工程應(yīng)用廣泛產(chǎn)品類型主要產(chǎn)物微生物菌體細(xì)胞酵母菌、食用菌、微生物農(nóng)藥微生物酶類各種酶、酶制劑和各種曲類微生物代謝產(chǎn)物初級代謝產(chǎn)物,如氨基酸、有機(jī)酸、有機(jī)溶劑、核苷酸、蛋白質(zhì)、核酸和維生素;次級代謝產(chǎn)物,如抗生素、生物堿和植物激素類似物發(fā)酵工程產(chǎn)品的主要類型產(chǎn)品類型主要產(chǎn)物微生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物利用微生物代謝過程中的某種酶或酶系,將一種化合物轉(zhuǎn)化成含有特殊功能基團(tuán)的產(chǎn)物。例如,將甘油轉(zhuǎn)化為二羥基丙酮,將葡萄糖轉(zhuǎn)化為葡萄糖酸,將甾體轉(zhuǎn)化成甾體激素工程菌發(fā)酵產(chǎn)物通過基因工程和細(xì)胞工程創(chuàng)造出許多具有特殊功能的“工程菌”,用發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)更多更好的產(chǎn)品,發(fā)揮更大的經(jīng)濟(jì)效益動植物細(xì)胞的產(chǎn)物通過大規(guī)模培養(yǎng)木瓜細(xì)胞,生產(chǎn)木瓜蛋白酶;利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)天然食用色素等自主閱讀教材40~41頁發(fā)酵工程的應(yīng)用領(lǐng)域。小組討論以小組為單位,討論發(fā)酵工程在某一應(yīng)用領(lǐng)域(醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)、其他領(lǐng)域)有哪些具體的應(yīng)用實(shí)例。小組匯報(bào)每一小組派代表匯報(bào)討論成果,其他小組認(rèn)真聆聽并點(diǎn)評。課后拓展通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館,搜集有關(guān)計(jì)算機(jī)在生物發(fā)酵工程方面應(yīng)用的資料。有興趣的話,可以整理歸納相關(guān)研究現(xiàn)狀和預(yù)期進(jìn)展的資料,與班上其他有興趣的同學(xué)交流。調(diào)查發(fā)酵工程在生活中的應(yīng)用實(shí)例在食品工業(yè)上的應(yīng)用抗生素、多種氨基酸、激素和免疫調(diào)節(jié)劑等。在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用其他方面的應(yīng)用生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品。例如:醬油、各種酒類等。生產(chǎn)各種各樣的食品添加劑。例如:檸檬酸、谷氨酸等。生產(chǎn)微生物肥。例如:根瘤菌肥、固氮菌肥等。生產(chǎn)微生物農(nóng)藥。例如:蘇云金桿菌、白僵菌、井岡霉素。生產(chǎn)微生物飼料。例如:單細(xì)胞蛋白。利用纖維肥料發(fā)酵生產(chǎn)酒精、乙烯等能源物質(zhì)。對極端微生物的利用。例如:利用嗜熱菌、嗜鹽菌生產(chǎn)洗滌劑。例如:生長激素、乙型肝炎疫苗等。生產(chǎn)酶制劑。例如:α-淀粉酶、β-淀粉酶等。在醫(yī)藥工業(yè)上的應(yīng)用發(fā)酵工程的應(yīng)用總結(jié)核心問題:什么是發(fā)酵工程?發(fā)酵工程的一般過程?發(fā)酵工程有哪些應(yīng)用?1.某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進(jìn)行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究,下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.夏季生產(chǎn)果酒時(shí),常需對罐體進(jìn)行降溫處理B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì),故發(fā)酵過程中空氣的進(jìn)氣量不宜太大C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時(shí)終止發(fā)酵課堂檢測B2.下列生活用品的生產(chǎn),與發(fā)酵工程無直接關(guān)系的是(

A.沼氣

B.天然氣

C.味精

D.啤酒3.發(fā)酵工程是重要的生物工程技術(shù),可以為人類提供多樣的生物產(chǎn)品。發(fā)酵主要利用的是哪類生物的細(xì)胞(

)A.動物 B.植物

C.細(xì)菌 D.微生物BD4.菌種的選育是發(fā)酵工程的重要環(huán)節(jié)。菌種是指(

)A.一種細(xì)菌或真菌的種子

B.微生物的一個(gè)分類單位C.發(fā)酵過程中產(chǎn)生的微生物

D.用于獲得微生物培養(yǎng)物的微生物D5.黑曲霉發(fā)酵可以產(chǎn)生木聚糖酶,該酶可以將木聚糖(植物細(xì)胞壁的主要成分之一)降解為木糖。木聚糖酶是一種很有應(yīng)用價(jià)值的發(fā)酵產(chǎn)品,如圖表示生產(chǎn)該酶的連續(xù)發(fā)酵裝置。

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