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知識(shí)清單35動(dòng)物細(xì)胞工程考點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:①營(yíng)養(yǎng)條件:細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基,也稱(chēng)為培養(yǎng)液。通常需要加入血清等一些天然成分。②無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),必須保證環(huán)境是無(wú)菌、無(wú)毒的,即需要對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作。培養(yǎng)液還需要定期更換,以便清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。③溫度、pH和滲透壓④氣體環(huán)境:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將它們置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程①原理:細(xì)胞增殖②過(guò)程:2.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用(1)干細(xì)胞:動(dòng)物和人體內(nèi)保留的具有分裂和分化能力的細(xì)胞。干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中,包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。(2)干細(xì)胞的種類(lèi)和用途種類(lèi)胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來(lái)源早期胚胎骨髓、臍帶血和外周血體細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞等)特點(diǎn)能分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類(lèi)型的細(xì)胞,并進(jìn)一步形成機(jī)體的組織和器官甚至個(gè)體分化成特定的細(xì)胞或組織能誘導(dǎo)分化成類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞應(yīng)用分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元和造血干細(xì)胞等造血干細(xì)胞用于治療白血??;神經(jīng)干細(xì)胞用于治療帕金森病、阿爾茨海默病等治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血、阿爾茨海默病、心血管疾病等注意說(shuō)明:胰蛋白酶第一次使用的目的是使組織細(xì)胞分散開(kāi),第二次使用的目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái),分裝后繼續(xù)培養(yǎng)??键c(diǎn)2動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù):是使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱(chēng)為雜交細(xì)胞。細(xì)胞融合的實(shí)質(zhì)是核融合。(1)原理:動(dòng)物細(xì)胞融合的基本原理為細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(2)誘導(dǎo)融合的方法①化學(xué)方法:PEG融合法。②物理方法:電融合法。③生物方法:滅活病毒誘導(dǎo)法。(2)過(guò)程:具有不同遺傳信息的兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞雜交。(3)結(jié)果:形成單核雜交細(xì)胞,具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息,可表現(xiàn)出兩個(gè)或多個(gè)親本的特點(diǎn)。(4)意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。這一技術(shù)成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。如利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù),為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。2.單克隆抗體的制備及其應(yīng)用(1)制備原理①B淋巴細(xì)胞的特點(diǎn):每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體,B淋巴細(xì)胞在體外不能無(wú)限增殖。②骨髓瘤細(xì)胞的特點(diǎn):在體外能大量增殖,但不能產(chǎn)生抗體。③雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到的雜交瘤細(xì)胞,既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體。(2)制備過(guò)程①制備產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞:用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫處理,并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞。②培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞。③將小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與從脾中得到的B淋巴細(xì)胞融合。④用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選:在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)。⑤克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè):對(duì)上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。⑥將抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。⑦提取單克隆抗體:從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單克隆抗體。(3)比較制備單克隆抗體過(guò)程中的兩次篩選項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞,另外還有未融合的細(xì)胞從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞有很多種,形成的雜交瘤細(xì)胞也有很多種篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng),在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。(5)單克隆抗體的應(yīng)用:作為診斷試劑;用于治療疾病和運(yùn)載藥物。注意說(shuō)明:在小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)與在體外培養(yǎng)相比,優(yōu)點(diǎn)是不需要特定的培養(yǎng)基,不需要嚴(yán)格控制環(huán)境條件。考點(diǎn)3動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)及克隆動(dòng)物的概念:將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體的技術(shù),稱(chēng)為動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物。(1)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的原理:動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性,而不是動(dòng)物細(xì)胞的全能性。(2)體細(xì)胞核移植的過(guò)程①選用卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞是因?yàn)槁涯讣?xì)胞體積大,易操作,含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)。②目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作去核法。③動(dòng)物細(xì)胞核移植過(guò)程中,只有動(dòng)物的細(xì)胞核是不行的,必須提供促進(jìn)細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件,除此之外,還要保證細(xì)胞的完整性。(3)克隆動(dòng)物的遺傳特點(diǎn):克隆動(dòng)物的親本有三個(gè),即體細(xì)胞核供體、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體和代孕母體。2.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景體細(xì)胞核移植技術(shù)在畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及其他領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景(1)在畜牧生產(chǎn)中:利用體細(xì)胞核移植技術(shù),可以加速家畜遺傳改良進(jìn)程、促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育(2)在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域:①通過(guò)建立轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞系,再利用體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可以作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)許多珍貴的醫(yī)用蛋白:②在治療人類(lèi)疾病時(shí),轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織或器官可以作為異種移植的供體:③以患者作為供體培育的人核移植胚胎干細(xì)胞,經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)分化能形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織或器官,將它們移植給患者時(shí)可以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。(3)在科研領(lǐng)域:①研究克隆動(dòng)物可使人類(lèi)更深人地了解胚胎發(fā)育及衰老過(guò)程:②克隆一批遺傳背景相同的動(dòng)物,可以通過(guò)它們之間的對(duì)比來(lái)分析致病基因:③克隆特定疾病模型的動(dòng)物,還能為研究該疾病的致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助。(4)在保護(hù)瀕危物種方面:該技術(shù)有望增加瀕危物種的存活數(shù)量。3.體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題(1)成功率非常低,各個(gè)技術(shù)環(huán)節(jié)也有待進(jìn)一步改進(jìn);(2)核移植的理論研究較為滯后,需要與發(fā)育生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)和分子遺傳學(xué)等學(xué)科更深層次的理論研究相結(jié)合;(3)一些研究者指出,絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題,許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷,如體型過(guò)大、異常肥胖、發(fā)育困難、臟器缺陷和免疫失調(diào)等。教材拾遺:目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線(xiàn)短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒(méi)有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性。易錯(cuò)點(diǎn)1歸納比較植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基類(lèi)型固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、促生長(zhǎng)因子、動(dòng)物血清等取材植物幼嫩部位或花藥等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織關(guān)鍵環(huán)節(jié)細(xì)胞的脫分化和再分化細(xì)胞增殖和癌變結(jié)果新的組織或植株個(gè)體,可以體現(xiàn)全能性新的細(xì)胞系或細(xì)胞株,不形成個(gè)體,不體現(xiàn)全能性應(yīng)用①植株快速繁殖②脫毒植株的培育③制備人工種子④生產(chǎn)藥物、殺蟲(chóng)劑等⑤轉(zhuǎn)基因植物的培育①蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)②皮膚移植材料的培育③檢測(cè)有毒物質(zhì)④生理、病理、藥理學(xué)研究相同點(diǎn)①兩技術(shù)手段培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞都進(jìn)行有絲分裂,都是無(wú)性繁殖,都可稱(chēng)克隆,都不涉及減數(shù)分裂②均為無(wú)菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件易錯(cuò)點(diǎn)2關(guān)于單克隆抗體制備過(guò)程的幾點(diǎn)解釋(1)免疫處理:對(duì)于提供B淋巴細(xì)胞的小鼠,必須先向其體內(nèi)注射特定的抗原,然后從小鼠的脾內(nèi)獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)在細(xì)胞融合過(guò)程中,產(chǎn)生的兩兩融合細(xì)胞一般有3種,即融合的具有同種核的細(xì)胞(瘤+瘤、B+B)和融合的雜種細(xì)胞(瘤+B),只有融合的雜種細(xì)胞才是需要的目標(biāo)細(xì)胞,故需要篩選。(3)在小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)與在體外培養(yǎng)相比,優(yōu)點(diǎn)是不需要特定的培養(yǎng)基,不需要嚴(yán)格控制環(huán)境條件。易錯(cuò)點(diǎn)3動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)核移植中供體動(dòng)物、提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物、代孕動(dòng)物和克隆動(dòng)物之間的關(guān)系:克隆動(dòng)物絕大部分性狀與供體動(dòng)物相同,少數(shù)性狀(由線(xiàn)粒體DNA控制的性狀)與提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物相同,與代孕動(dòng)物的性狀無(wú)遺傳關(guān)系。(2)核移植產(chǎn)生的克隆動(dòng)物與提供細(xì)胞核的親本可能不同的3個(gè)原因:①克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)源于另一個(gè)親本,與植物組織培養(yǎng)不同(來(lái)自一個(gè)親本),即克隆動(dòng)物遺傳物質(zhì)來(lái)自?xún)蓚€(gè)親本。②在發(fā)育過(guò)程中可能發(fā)生基因突變、染色體變異導(dǎo)致性狀改變。③外界環(huán)境條件的影響引起不可遺傳的變異。(3)細(xì)胞核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞并發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體,體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性。(4)克隆屬于無(wú)性繁殖,產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。1.(2024·浙江·高考真題)某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)至接觸抑制時(shí),需分裝培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是(
)A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖C.③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度D.整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌、無(wú)毒條件下進(jìn)行[答案]B.[解析]A、①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離,A正確;B、②加培養(yǎng)液,多次加培養(yǎng)液先洗去殘留的消化酶,然后終止消化液的消化作用,并對(duì)細(xì)胞加以稀釋?zhuān)珺錯(cuò)誤;C、③分裝時(shí)需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度,因?yàn)槿裘芏冗^(guò)大細(xì)胞直接仍存在接觸抑制,C正確;D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境,因此整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌、無(wú)毒條件下進(jìn)行,D正確。故選B。知識(shí)鏈接:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。2.(2024·吉林·高考真題)從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng),在傳代后的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)細(xì)胞數(shù)目,結(jié)果如圖。下列敘述正確的是(
)A.傳代培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)皿需密封防止污染B.選取①的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比②更合理C.直接用離心法收集細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)D.細(xì)胞增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期可能與細(xì)胞密度過(guò)大有關(guān)[答案]D.[解析]A、傳代培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)器皿容許內(nèi)部氣體和培養(yǎng)箱中的氣體進(jìn)行交換,A錯(cuò)誤;B、選?、诘募?xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比①更合理,②時(shí)細(xì)胞增長(zhǎng)開(kāi)始變得緩慢,B錯(cuò)誤;C、對(duì)于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí),先需要用胰蛋白酶等處理,使之分散為單個(gè)細(xì)胞,然后再用離心法收集,C錯(cuò)誤;D、細(xì)胞增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期可能與細(xì)胞密度過(guò)大、細(xì)胞間產(chǎn)生接觸抑制有關(guān),D正確。故選D。知識(shí)鏈接:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件:(1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素;③定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。(2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。(3)溫度和PH:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。(4)氣體環(huán)境:95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的PH)。3.(2024·海南·高考真題)海南龍血樹(shù)具有藥用和觀賞價(jià)值,可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生愈傷組織,進(jìn)而獲得該種植株。動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)可將骨髓瘤細(xì)胞和產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,進(jìn)而制備單克隆抗體。下列有關(guān)這兩種技術(shù)的敘述,正確的是(
)A.利用的原理均是細(xì)胞的全能性B.使用的培養(yǎng)基均需添加葡萄糖和血清C.培養(yǎng)時(shí)的溫度和pH均相同D.產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞或雜交瘤細(xì)胞均具有增殖能力[答案]D.[解析]A、利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得海南龍血樹(shù),利用的原理是細(xì)胞的全能性;制備單克隆抗體使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù),這兩種技術(shù)利用的原理分別是細(xì)胞的增殖和細(xì)胞膜的流動(dòng)性,A錯(cuò)誤;B、利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得海南龍血樹(shù),使用的培養(yǎng)基中添加的是蔗糖,不需添加葡萄糖和血清,B錯(cuò)誤;C、由于植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)所需的適宜溫度和pH存在差異,所以培養(yǎng)時(shí)的溫度和pH均不相同,C錯(cuò)誤;D、愈傷組織是外植體(離體的植物器官、組織或細(xì)胞)經(jīng)脫分化形成的,雜交瘤細(xì)胞是由骨髓瘤細(xì)胞和產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞融合后形成的,因此產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞或雜交瘤細(xì)胞均具有增殖能力,D正確。故選D。知識(shí)鏈接:動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)是使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱(chēng)為雜交細(xì)胞。細(xì)胞融合的實(shí)質(zhì)是核融合。動(dòng)物細(xì)胞融合的基本原理為細(xì)胞膜的流動(dòng)性。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù),為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。4.(2024·福建·高考真題)我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研制出全球首個(gè)以尿液中的抗原為靶標(biāo)的戊肝診斷試劑盒,該成果屬于單克隆抗體在臨床上的應(yīng)用。下列敘述錯(cuò)誤的是(
)A.該試劑盒的研制過(guò)程應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)B.該試劑盒的檢測(cè)原理為抗原抗體的特異性結(jié)合C.該試劑盒檢測(cè)前的采樣不會(huì)對(duì)受檢者造成創(chuàng)傷D.該試劑盒還可用于其他類(lèi)型病毒性肝炎的檢測(cè)[答案]D.[解析]A、依據(jù)題干信息,戊肝診斷試劑盒屬于單克隆抗體的研究成果,單克隆抗體制備過(guò)程需要已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合,所以動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù),A正確;B、該試劑盒的檢測(cè)原理為抗原抗體的特異性結(jié)合,B正確;C、依據(jù)題干信息,該試劑盒以尿液中的抗原為靶標(biāo),所以該試劑盒檢測(cè)前的采樣不會(huì)對(duì)受檢者造成創(chuàng)傷,C正確;D、抗體具有特異性,所以戊肝診斷試劑盒只能用于丙肝的檢測(cè),不能用于其他類(lèi)型病毒性肝炎的檢測(cè),D錯(cuò)誤。故選D。知識(shí)鏈接:?jiǎn)慰寺】贵w的制備利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合等技術(shù)。5.(2024·重慶·高考真題)自然條件下,甲、乙兩種魚(yú)均通過(guò)體外受精繁殖后代,甲屬于國(guó)家保護(hù)的稀有物種,乙的種群數(shù)量多且繁殖速度較甲快。我國(guó)科學(xué)家通過(guò)下圖所示流程進(jìn)行相關(guān)研究,以期用于瀕危魚(yú)類(lèi)的保護(hù)。下列敘述正確的是(
)A.誘導(dǎo)后的iPGCs具有胚胎干細(xì)胞的特性B.移植的iPGCs最終產(chǎn)生的配子具有相同的遺傳信息C.該實(shí)驗(yàn)中,子一代的遺傳物質(zhì)來(lái)源于物種甲D.通過(guò)該實(shí)驗(yàn)可以獲得甲的克隆[答案]C.[解析]A、胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,iPGCs是誘導(dǎo)型原始生殖細(xì)胞,具有成為卵原細(xì)胞或精原細(xì)胞的潛能,誘導(dǎo)后的iPGCs不具有胚胎干細(xì)胞的特性,A錯(cuò)誤;B、移植的iPGCs分化形成卵原細(xì)胞或精原細(xì)胞后,通過(guò)減數(shù)分裂形成配子,在減數(shù)分裂過(guò)程中基因會(huì)發(fā)生重組,最終產(chǎn)生的配子的遺傳信息不一定相同,B錯(cuò)誤;C、由圖可知,將物種甲的囊胚期的iPGCs移植到阻止PGCs形成的乙魚(yú)的胚胎中,培育出的乙魚(yú)的生殖腺中的細(xì)胞由甲魚(yú)的iPGCs增值分化而來(lái),該乙魚(yú)再與物種甲雜交,配子均是由物種甲的生殖腺細(xì)胞產(chǎn)生,故子一代的遺傳物質(zhì)來(lái)源于物種甲,C正確;D、克隆屬于無(wú)性繁殖,該實(shí)驗(yàn)過(guò)程中涉及到有性生殖,D錯(cuò)誤。故選C。知識(shí)鏈接:胚胎移植的基本程序主要包括:①對(duì)供、受體的選擇和處理。②配種或人工授精。③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。④對(duì)胚胎進(jìn)行移植。⑤移植后的檢查。6.[多選](2024·江蘇·高考真題)從牛卵巢采集卵母細(xì)胞進(jìn)行體外成熟培養(yǎng),探究高溫對(duì)卵母細(xì)胞成熟的影響,結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的有(
)A.選取發(fā)育狀態(tài)一致的卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)B.體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí)通常加入濕熱滅菌后的血清C.對(duì)采集的卵母細(xì)胞傳代培養(yǎng)以產(chǎn)生大量卵細(xì)胞D.體外培養(yǎng)時(shí)高溫提高了卵母細(xì)胞發(fā)育的成熟率[答案]BCD.[解析]A、選取發(fā)育狀態(tài)一致的卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),這樣可以排除其他因素的干擾,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果是由溫度這一變量引起的,A正確;B、體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí)通常加入血清,但是動(dòng)物血清并不能進(jìn)行濕熱滅菌,否則會(huì)使其中部分有效成分失活,B錯(cuò)誤;C、卵母細(xì)胞不能進(jìn)行傳代培養(yǎng),因?yàn)槁涯讣?xì)胞是生殖細(xì)胞,不具有連續(xù)分裂的能力,C錯(cuò)誤;D、由圖可知,高溫降低了卵母細(xì)胞發(fā)育的成熟率,而不是提高,D錯(cuò)誤。故選BCD。知識(shí)鏈接:在探究高溫對(duì)卵母細(xì)胞成熟的影響實(shí)驗(yàn)中,需要控制變量,選取發(fā)育狀態(tài)一致的卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。血清可以為卵母細(xì)胞的培養(yǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
7.(2024·江西·高考真題)某病毒顆粒表面有一特征性的大分子結(jié)構(gòu)蛋白S(含有多個(gè)不同的抗原決定基,每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體)。為了建立一種靈敏、高效檢測(cè)S蛋白的方法,研究人員采用雜交瘤技術(shù)制備了抗-S單克隆抗體(如圖)。下列說(shuō)法正確的是(
)A.利用膠原蛋白酶處理,可分散貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞B.制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B是相同的單克隆抗體C.用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng),但不能凍存D.單克隆抗體A和單克隆抗體B都能夠特異性識(shí)別S蛋白[答案]AD.[解析]A、膠原蛋白酶可以催化分解細(xì)胞外的膠原蛋白,因此利用膠原蛋白酶處理,可分散貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞,A正確;B、由于蛋白S含有多個(gè)不同的抗原決定基,每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,單克隆抗體A和單克隆抗體B來(lái)自不同的雜交瘤細(xì)胞,因此制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B不是相同的單克隆抗體,B錯(cuò)誤;C、用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng),也可以冷凍保存,C錯(cuò)誤;D、單克隆抗體A和單克隆抗體B都來(lái)自篩選出的雜交瘤細(xì)胞,因此都能夠特異性識(shí)別S蛋白上的抗原決定簇,D正確。故選AD。知識(shí)鏈接:?jiǎn)慰寺】贵w的制備:用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫,并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞,將多種B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,利用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選:在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)。對(duì)上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。將抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單克隆抗體。8.(2024·廣東·高考真題)某些腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1與細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)表面的PD-1結(jié)合能抑制CTL的免疫活性,導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸。免疫檢查點(diǎn)療法使用單克隆抗體阻斷PD-Ll和PD-1的結(jié)合,可恢復(fù)CTL的活性,用于腫瘤治療。為進(jìn)一步提高療效,研究者以黑色素瘤模型小鼠為材料,開(kāi)展該療法與化療的聯(lián)合治療研究。部分結(jié)果見(jiàn)圖?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)據(jù)圖分
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